你算门对了,要知道扇贝很不好卖的。应该从环境马起,从反面鸟她何应对国外对扇贝的环保要求。
1、扇贝的蛋白质含量很高,干贝中高达。研究表明,贝类的必需氨基酸含量丰富且均衡,包括丙氨酸、苏氨酸、赖氨酸、组氨酸、精氨酸等人体内不能合成的氨基酸,并与陆上植物的必需氨基酸存在一定的互补性。 2、其中呈鲜味的谷氨酸含量占,为水产品中含量最高的9。扇贝的脂肪和碳水化合物含量相对较低,干贝中含量分别为和。与其他动物性食品相比,扇贝是一种真正意义上低脂肪的食品。 3、扇贝中n-3系列的多不饱和脂肪酸含量丰富,约占总脂肪酸含量的9%-45%。扇贝中矿物质和微量元素的含量因其品种及养殖海域的不同而有所差别,钙、磷、铁、钾、锰、锌、硒等含量丰富,并且扇贝中锌的含量较多。扇贝的维生素含量与鱼类近似,含有较丰富的维生素A、维生素B族、维生素E等。
扇贝提取物主要提取元素是葡萄糖胺,又称为氨基葡萄糖、氨基糖。存在于微生物、动物来源的多糖和结合多糖中,多见于从蟹虾扇贝的壳体中萃取。主要适用于治疗膝关节退行性关节炎、骨质增生、半月板损伤。氨基葡萄糖,它是人体内合成的物质,是形成软骨细胞的重要营养素,是健康关节软骨的天然组织成份。随着年龄的增长,人体内的氨基葡萄糖的缺乏越来越严重,关节软骨不断退化和磨损。美国、欧洲和日本的大量医学研究表明:氨基葡萄糖可以帮助修复和维护软骨,并能刺激软骨细胞的生长。结合纳世凯尔、的扇贝提取物‘胶囊服用很不错。主要功能:●舒缓因关节炎引起的疼痛、僵硬和肿胀骨质疏松症使软骨耗损,最终导致碎裂剥落,关节少了软骨的缓冲,易产生痛苦的僵硬和发炎。而葡萄糖胺有助于修复受损软骨,刺激新软骨的生成,改善发炎症状,舒缓关节疼痛、僵硬及肿胀。●强化软骨结构,预防关节功能失效随着身体老化,关节组织会严重磨损,葡萄糖胺可以保护并强化软骨结构,预防因关节老化而产生的关节功能失效。●润滑关节及维持关节功能葡萄糖胺可制造蛋白多糖润滑关节,防止骨关节摩擦疼痛,使关节活动自如。
质粒是真核细胞细胞核外或原核生物拟核区外能够进行自主复制的遗传单位,包括真核生物的细胞器(主要指线粒体和叶绿体)中和细菌细胞拟核区以外的环状脱氧核糖核酸(DNA)分子。现在习惯上用来专指细菌(大肠杆菌)、酵母菌和放线菌等生物中细胞核或拟核中的DNA以外的DNA分子。小鼠没有叶绿体,你可以直接参照小鼠线粒体的提取方法进行提取。
不知道楼主你说的对照组,做的是阳性对照,还是阴性对照呢?如果这个不说清楚,是没法回答你的问题。假设,你说的对照是阴性对照的话,首先第一个,1,这个结果就是不对的,对照组出现菌落,说明你的抗生素失效了,实验无效。2.的话说明你的转化没有成功,实验操作跟试剂没问题3.实验成功,可以挑取单克隆摇菌假设你说的对照组做的阳性对照那么1.实验成功,可以进入下一步2.试剂或者操作有问题,导致阳性对照都做不出来3.这个实验结果没法接受,不合常理,重新再转化另外,一般做转化,会正反对照都做,阳性对照+阴性对照。
传统的质粒提取方法前面人已经回答挺全了,现在实验室讲究效率,很多都直接使用试剂盒的,例如BIOG的质粒提取试剂盒,有小量、中量的、高纯的,还有专门去内毒素的等等,可以满足大部分实验需求。
本文主要以OMEGA试剂盒(产品编号#D6950)为例,讲述下提质粒(去内毒素)的注意事项。 DNA在化学性质上是懒惰的,但是在物理结构上是易碎的。因为在化学上其潜在的反应基团隐藏在中央螺旋部位,并经氢键紧密连接,同时碱基外侧受磷酸键和戊糖形成的强大环层的保护,这种保护因内在的碱基堆积力而进一步加强;在物理上,其长而弯曲,侧面不稳定,更容易受到柔和剪切力的破坏。双链DNA在溶液中随机卷曲,并由于碱基之间的堆积作用和DNA骨架上磷酸基团之间的静电排斥力而变得粘稠,所以在移液、震荡或搅拌引起的液流中,在粘滞的盘绕物上产生的拖拉力,很容易切断双链DNA。DNA越长,破坏其所需的力越小,大于150kb的DNA分子在常规分离基因组DNA过程中易于断裂。 一般DNA分离提纯可以简单分为三步: 裂解宿主细胞。如, 离子去污剂,如SDS 从细胞中释放DNA,去除与DNA结合的蛋白质并快速使胞内核酸酶失活。如, 酶水解蛋白和RNA 层析液中吸收、释放DNA 利用乙醇或者异丙醇沉淀DNA去除盐离子。 菌液在高PH条件下,加入强离子去污剂(如,SDS)能够破坏细胞壁,是蛋白质与染色体DNA变形,并将质粒DNA释放到上清液中。但是在实验中关键是动作要快,因为长时间暴露在变形条件下会对闭环DNA造成不可逆性。这种变性的折叠卷曲DNA不容易被限制性内切酶切割,它的琼脂糖电泳速率是线形、超螺旋和环状等天然结构DNA电泳速率的2倍,并且不容易被嵌入染料染色。碱裂法在制备治理过程中常会产生不同数量折叠形式的DNA。上述这种方法适用于15kby以下的质粒,大于15kb的质粒在提取过程中很容易断裂,可用等渗蔗糖溶液裂解细菌,并用溶菌酶和EDTA(乙二胺四乙酸)去除细胞壁,可解决受损。产生的原生质球可通过加入去污剂(如SDS)被裂解。 试剂盒一般采用DNA选择性吸附稳定固相(通常是二氧化硅或者硅酸盐)的特性进行DNA纯化。在高PH、高盐缓冲液中,DNA会吸附到二氧化硅介质上面,在低盐浓度下可被洗脱下来。玻璃表面的阳性粒子随后可以在DNA骨架中磷酸负电基团和硅醇负电基团(Si-OH)之间形成盐桥,结合强度与成桥离子类型有关。一旦DNA与介质结合,他就会与其他的生物多聚物(如RNA和糖)分开。得率由DNA大小决定,片段越小,与二氧化硅结合越紧密,得率越低。 实验开始前,最主要的是细菌培养。试剂说明书建议使用DH5α,DH1,C600,都可以,XL1-Blue虽然长 的很慢但是也可以使用。其次培养基的使用建议采用LB培养基,其他的均不建议。 开始细菌培养前,最好涂板调菌培养,这样可以保持菌的活性,甘油保存的菌可能会产量低或者质粒丢失。 当挑取单菌落后放入37℃,300rpm,培养12~16h。 为了获得最佳质粒产率,起始培养体积应基于培养细菌密度。 建议使用OD600的和之间的细菌提取质粒。 使用富含营养素的介质时,应注意确保细菌密度不超过的OD600,最后菌液OD600为。 在推荐的OD范围之外使用高密度培养可能会超过纯化体系。 注意: 曝气是很重要的,LB培养基的体积应该是容器的1/4 随着培养时间的加长,由于细菌的死亡和裂解,DNA的产量开始下降。
【关键词】 靶向给药;药剂学;药物载体0引言常规剂型的药物经静脉、口服或局部注射后,药物分布于全身,真正到达治疗靶区的药物量仅为给药量的小部分,而大部分药物在非靶区的分布不仅无治疗作用,还会带来毒副作用. 因此,药物新剂型的开发已成为现代药剂学发展的一个方向,其中靶向给药系统(Targeted drug delivery system, TDDS)的研究已经成为药剂学研究热点〔1〕. TDDS指一类能使药物浓集定位于病变组织、器官、细胞或细胞内的新型给药系统. 靶向制剂具有疗效高、药物用量少. 毒副作用小等优点. 理想的TDDS应在靶器官或作用部位释药,同时全身摄取很少,这样,既可提高疗效,又可降低药物的毒副作用. TDDS要求药物能到达靶器官、靶细胞,甚至细胞内的结构,并要求有一定浓度的药物停留相当长的时间,以便发挥药效. 成功的TDDS应具备3个要素:定位蓄积、控制释药、无毒可生物降解. 靶向制剂包括被动靶向制剂、主动靶向制剂和物理化学靶向制剂3大类. 目前,实现靶向给药的主要方法有载体介导、受体介导、前药、化学传递系统等. 现就靶向给药方法研究进展作一介绍.1载体介导的靶向给药常用的靶向给药载体是各种微粒. 微粒给药系统具有被动靶向的性能. 有机药物经微粒化可提高其生物利用度及制剂的均匀性、分散性和吸收性,改变其体内分布. 微粒给药系统包括脂质体(LS),纳米粒(NP)或纳米囊(NC),微球(MS)或微囊(MC),细胞和乳剂等. 微粒靶向于各器官的机制在于网状内皮系统(RES)具有丰富的吞噬细胞,可将一定大小的微粒( μm)作为异物摄取于肝、脾;较大的微粒(7~30 μm)不能滤过毛细血管床,被机械截留于肺部;而小于50 nm的微粒可通过毛细血管末梢进入骨髓.肝癌、肝炎等肝脏疾病是常见病和多发病,但目前药物治疗效果很不理想,其原因除药物本身药理作用尚不够理想外,不能将药物有效地输送至肝脏的病变部位也是一重要原因. 将一些抗肿瘤、抗肝炎药物制备成微粒,给药后可增加药物的肝靶向性. 米托蒽醌白蛋白微球(DHAQ BSA MS)的体内分布研究发现,给药20 min时,DHAQ BSA MS和米托蒽醌(DHAQ)在小鼠体内分布有显著差异,DHAQ BSA MS约有80%的药物集中在肝脏,而以上的DHAQ存在于血液中〔2〕. 张莉等〔3〕考察去甲斑蝥素(NCTD)微乳的形态、粒径分布及生物安全性,研究NCTD微乳及其注射液在小鼠体内的组织分布,结果表明,NCTD微乳较NCTD注射液增强了药物的肝靶向性,降低了肾脏分布,在一定程度上延长药物在小鼠体内的循环时间. 纳米粒和纳米囊肝靶向制剂的研究报道较多,如氟尿嘧啶、阿霉素、羟基喜树碱、狼毒乙素、环孢素等抗癌药物都被制成了纳米靶向制剂〔4〕. 王剑红等〔5〕采用二步法制备米托蒽醌明胶微球,粒径在 μm范围的占总数,体外释药与原药相比延长了4倍. 经小鼠体内分布试验表明具有明显的肺靶向性,靶向效率增加了3~35倍,肺中药代动力学行为可用一室开放模型描述,平均滞留时间延长10 h. 在纳米粒表面上包封亲水性表面活性剂,或通过化学方法连接上聚乙二醇或其衍生物,可以减少与网状内皮细胞膜的亲和性,从而避免网状内皮细胞的吞噬,提高毫微粒对脑组织的靶向性. Gulyaev等〔6〕以生物降解材料聚氰基丙烯酸丁酯为载体,以吐温80为包封材料制备了阿霉素毫微粒,研究结果表明脑中阿霉素浓度是对照组的60倍. 一些易于分解的多肽或不能通过血脑屏障的药物(如达拉根、洛哌丁胺、筒箭毒碱)通过制成包有吐温80的生物降解毫微粒在动物身上已取得一定的靶向治疗效果〔7〕. 研究表明粒径是影响微粒进入骨髓的关键因素,粒径越小越容易进入骨髓. 彭应旭等〔8〕制得不同粒径的柔红霉素聚氰基丙烯酸正丁酯毫微粒,小鼠尾静脉给药,小粒径组(70±24) nm骨髓内柔红霉素浓度是大粒径组(425±75) nm的倍. 骨髓会因肿瘤浸润、化疗药物或严重感染受到抑制. 研究表明,多种生长因子,如人粒细胞集落刺激因子(GCSF),粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GMCSF)可促使骨髓细胞自我更新、分裂增殖,并提高其活性. 利用骨髓靶向载体可提高药物在骨髓内分布,并避免血象中的不良反应. Gibaud等〔9〕以聚氰基丙烯酸异丁酯、异己酯毫微粒为载体携带GCSF,提高了其在骨髓内的分布.基因治疗是一种专一性的靶向治疗. 基因治疗就是利用基因转移技术将外源重组基因或核酸导入人体靶细胞内,以纠正基因缺陷或其表达异常. 纳米颗粒作为基因载体具有一些显著的优点. 纳米颗粒能包裹、浓缩、保护核苷酸,使其免遭核酸酶的降解;比表面积大,具有生物亲和性,易于在其表面耦联特异性的靶向分子,实现基因治疗的特异性;在循环系统中的循环时间较普通颗粒明显延长,在一定时间内不会像普通颗粒那样迅速地被吞噬细胞清除;让核苷酸缓慢释放,有效地延长作用时间,并维持有效的产物浓度,提高转染效率和转染产物的生物利用度;代谢产物少,副作用小,无免疫排斥反应等.2受体介导的靶向给药利用细胞表面的受体设计靶向给药系统是最常见的主动靶向给药系统. 去唾液酸糖蛋白受体(ASGPR)是一种跨膜糖蛋白,它存在于哺乳动物的肝实质细胞上. 其主要功能是去除唾液酸糖蛋白和凋亡细胞、清除脂蛋白. 研究发现,ASGPR能特异性地识别N乙酰氨基半乳糖、半乳糖和乳糖,利用这些特性可以将一些外源的功能性物质经过半乳糖等修饰后,定向地转入到肝细胞中发挥作用. Lee等合成了三分枝N乙酰氨基半乳糖糖簇YEE,它与肝细胞的结合能力为乙酰氨基半乳糖单糖的1万倍. 我们考察了半乳糖苷修饰的十六酸拉米夫定酯固体脂质纳米粒(LAPGSLN)的肝靶向性,其靶向效率为,比未修饰纳米粒的靶向效率高倍〔10〕. 药物通过与大分子载体连接,再对载体进行半乳糖化,可以产生较好的肝靶向效果. 若能使药物直接半乳糖化,则可以简化耦联环节,提高靶向效率. 这一思路对蛋白类药物而言,较易实现. 蛋白质或多肽(分子质量在一定范围)在连接上半乳糖后,都有可能成为受体结合的肝靶向性物质. 小分子物质经类似途径能否靶向于肝,取决于糖和药物密度、分子质量、摄取屏障等多方面因素. 小分子药物共价连接乳糖或半乳糖,初步揭示其靶向性并不好,有关机制和可行性尚待进一步探讨.半乳糖基化壳聚糖(GC)与质粒pEGFPN1混和制备成纳米微囊复合物,体外转染SMMC7721细胞. 将含1 mg质粒的纳米微囊经肝动脉和门静脉注射入犬体内,实验结果表明半乳糖基化壳聚糖在体外有较高的转染率,在犬体内有肝靶向性,可用作肝靶向基因治疗的载体〔11〕. 大多数肿瘤细胞表面的叶酸受体数目和活性明显高于正常细胞. 以叶酸作为导向淋巴系统或肿瘤细胞的放射性核素的载体,同时将叶酸作为靶向肿瘤细胞的抗肿瘤药物的载体已做了广泛的研究〔12〕.表皮生长因子受体(EGFR)是一种跨膜糖蛋白,由原癌基因cerbB1所编码,是erbB受体家族之一,在多种肿瘤中观察到EGFR高水平的表达,如神经胶质细胞瘤、前列腺癌、乳腺癌、胃癌、结直肠癌、卵巢癌和胸腺上皮癌等. 针对富集EGFR的恶性肿瘤,方华圣等〔13〕成功地建立了EGFR富集的恶性肿瘤的靶向基因治疗方法.3抗体介导的靶向给药mAb是药物良好的靶向性载体, 将其通过共价交联或吸附到药物载体(如脂质体、毫微粒、微球、磁性载体等)或药物具有自身抗体(如红细胞)或抗体与细胞毒分子形成结合物,避免其对正常组织毒性,选择性发挥抗肿瘤作用. 徐凤华等〔14〕利用己二酰肼制备腙键连接的聚谷氨酸表阿霉素,然后使其与单抗交联制得偶合物. 偶合物较好地保留了抗体活性,体外细胞毒性较游离药物略有下降,但表现出单抗介导的靶细胞选择性杀伤作用,为其进一步制备细胞靶向的肿瘤化疗药物奠定了基础.用于治疗白血病的CMA676是由一种人源化的mAb hp 与新型的抗肿瘤抗生素calicheamicin的N乙酰γ衍生物偶联而成的〔15〕,当CMA676与CD33抗原相结合,抗原抗体复合物迅速内在化,进入胞内后,calicheamicin衍生物被水解释放,通过序列特异性方式与DNA双螺旋的小沟结合,使脱氧核糖环中的氢原子发生转移,从而使DNA双链断裂,诱导细胞死亡〔16〕. EGFR mAb可直接作用于EGFR的细胞外配体结合区,阻滞配体的结合,如IMCC225, ABXEGFR和EMD55900等,能抑制细胞生长和存活率,诱导细胞凋亡和抑制血管生成,曲妥珠单抗(Trasruzumab)作用于erbB2的细胞外区域,该药已获美国FDA批准用于转移性的乳腺癌的治疗〔17〕. IMCC225具有增强细胞毒性药物和放射治疗效应的作用,IMCC225与拓扑特肯(TPT)的联合用于荷有人类结肠癌移植体的裸鼠,能提高其生存率〔18〕. 由第四军医大学和成都华神集团股份有限公司联合研制的治疗肝癌新药碘〔13lI〕美妥昔单抗注射液,日前获得国家食品药品监督管理局颁发的生产文号,即将上市. 这是全球第一个专门用于治疗原发性肝癌的单抗导向同位素药物.4制成前体药物一些药物与适当的载体反应制备成前体药物,给药后药物就会在特定部位释放,达到靶向给药的目的. 脑是人高级神经活动的指挥中枢,也是神经系统最复杂的部分. 但由于血脑屏障(bloodbrain barrier, BBB)的存在,使得大部分治疗药物不能有效透过BBB. 含OH, NH2, COOH结构的脂溶性差的药物可通过酯化、酰胺化、氨甲基化、醚化、环化等化学反应制成脂溶性大的前体药物,进入CNS后,其亲脂性基团通过生物转化而释放出活性药物. 张志荣等〔19〕合成了3′, 5′二辛酰基氟苷,并制备了其药质体,给小鼠静脉注射后用HPLC法测定药物在体内各组织的分布,结果表明,氟苷酯化后的前体药物的药质体有良好的脑靶向性.结肠内有大量的细菌,能产生许多独特的酶系,许多高分子材料在结肠被这些酶所降解,而这些高分子材料作为药物载体在胃、小肠由于相应酶的缺乏不能被降解,这就保证药物在胃和小肠不释放. 如多糖、果胶、瓜耳胶、偶氮类聚合物和α, β, γ环糊精均可成为结肠给药体系的载体材料. 常利用结肠内厌氧环境,使偶氮键还原的特点制成偶氮前体药物. 柳氮磺胺吡啶是由5氨基水杨酸(5ASA)与磺胺吡啶用偶氮键连接而成. 口服后在结肠释药,发挥5ASA治疗溃疡性结肠炎的作用,减少其胃肠吸收产生的全身不良反应. 5ASA也与非生理活性的高分子聚合物通过偶氮双键制成前体药物〔20〕. 糖皮质激素共价连接于多糖〔21〕,环糊精〔22〕制成的前药,口服后在结肠部位可释放出药物,可用于结肠炎的治疗. 我们〔23,24〕合成了果胶酮洛芬(PTKP)前药,进行了体内外评价. 结果表明,此前药在不同pH环境下结构稳定,只能被结肠果胶酶特异性降解,释放出KP,发挥治疗作用. 也可以利用结肠pH差异和时滞效应设计结肠靶向给药系统〔25〕.5化学传递系统化学传递系统(chemical delivery system, CDS)是一种输送药物透过生理屏障到达靶部位,再经生物转化释放药物的药物传递系统. CDS通常是将含OH, NH2, COOH结构的药物共价连接于二氢吡啶载体(Q),药物(D)与靶向剂二氢吡啶结合为DQ结合物,建立了二氢吡啶―二氢吡啶钅翁盐氧化还原脑内定向转释递药系统. Chen等〔26〕设计了Tyr Lys的脑靶向CDS,并评价它的药效. Lys的C末端接亲脂性胆甾烯酯,N末端通过一种L氨基酸桥接靶向剂1,4二氢葫芦巴碱(含吡啶结构)制成Tyr Lys CDS,全身给药后,通过被动扩散机制透过BBB,且经酶催化1,4二氢葫芦巴碱变为季铵盐型使其存留于脑内. 通过小鼠甩尾间隔期实验证明,Tyr Lys CDS作用时间明显延长. Mahmoud等〔27〕将吸电子羧甲基连接到氮原子构建了一种新的二氢吡啶载体介导的脑定向转释系统(N羧甲基1,4二氢吡啶3,5二酰胺),该载体稳定,具有良好的脑定向转释能力.靶向给药的研究还面临许多实质性的挑战. 提高药物在靶组织的生物利用度;提高TDDS对靶组织、靶细胞作用的特异性;使生物大分子更有效地在作用靶点释放,并进入靶细胞内;体内代谢动力学模型;质量评价项目和标准,体内生理作用等问题都是研究的重点. 随着靶向给药系统研究的深入,新的靶向给药途径、新的载药方法将会不断出现,遇到的问题会逐步解决. 靶向给药的研究不仅具有理论意义,而且会产生明显的经济和社会效益.【参考文献】〔1〕 Theresa MA, Pieter RC. Drug delivery systems: Entering the mainstream 〔J〕. Science, 2004;303(5665):1818-1822.〔2〕 张志荣,钱文. 肝靶向米托蒽醌白蛋白微球的研究〔J〕. 药学学报,1997;32(1): ZR, Qian WJ. Study on mitoxantrone albumin microspheres for liver targeting 〔J〕. Acta Pharm Sin, 1997;32(1):72-78.〔3〕 张莉,向东,洪诤,等. 肝靶向去甲斑蝥素微乳的研究〔J〕. 药学学报,2004;39(8): L, Xiang D, Hong Z, et al. Studies on the liver targeting of norcantharindin microemulsion 〔J〕. Acta Pharm Sin, 2004;39(8):650-655.〔4〕 韩勇,易以木. 纳米粒肝靶向作用机制的研究进展〔J〕. 中国药师,2002;5(12): Y, Yi YM. Studies on the liver targeting mechanism of nanoparticles 〔J〕. Chin Pharm, 2002;5(12):751-752.〔5〕 王剑红,陆彬,胥佩菱,等. 肺靶向米托蒽醌明胶微球的研究〔J〕. 药学学报,1995;30(7): JH, Lu B, Xu PL, et al. Studies on lung targeting gelatin microspheres of mitoxantrone 〔J〕. Acta Pharm Sin, 1995;30(7):549-555.〔6〕 Gulyaev AE, Gelperina SE, Skidan IN, et al. Significant transport of doxorubicin into the brain with polysorbate 8Ocoated nanoparticles 〔J〕. Pharm Res, 1999;16(10):1564-1569.〔7〕 Ramge P, Unger RE, Oltrogge JB, et al. Polysor bate 80coating enhances uptake of polybutylcyanoacrylate(PBCA)nanoparticles by human and bovine primary brain capillary endothelial cells 〔J〕. Eur J Neurosci,2000;12(6):1931-1940.
实习写什么论文?是你的毕业论文吗?华丽的分割线——推荐你结合药店某一类型的药的销售情况和顾客对性价比方面的反应写某一类药的趋势。时下是医疗产业化逐渐成熟的时机,学校哪些老师在行制药不一定在行卖药,你若能把在工作中发现的问题结合到药物研发趋势上去写一篇针对性强的调研文章肯定出彩。
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动物细胞和植物细胞工程制药探讨论文
在日复一日的学习、工作生活中,大家都跟论文打过交道吧,借助论文可以有效训练我们运用理论和技能解决实际问题的的能力。那么你知道一篇好的论文该怎么写吗?下面是我为大家整理的动物细胞和植物细胞工程制药探讨论文,欢迎阅读与收藏。
摘要:
细胞工程是生物制药工业中的关键技术,其在医药领域的应用使得生物制药行业得到了极大的发展,细胞工程制药前景广阔。通过对相关文献和数据的整理和分析,概述了细胞工程制药领域相关技术及其在生物制药工业中应用的意义与展望。
关键词:
细胞工程;生物制药;动物细胞工程;植物细胞工程;转基因;反应器;
1、生物制药及细胞工程概述
生物制药是生物技术的综合利用,从生物体、生物组织、细胞和体液中分离出有效成分,制备用于预防、治疗和诊断的产品[1]。天然的生物材料赋予了生物制药安全性高、副作用小、营养价值较高的特点,这些显着的优势使生物药物越来越受人们的青睐,这也是生物药物市场不断扩大的重要原因之一。
细胞工程是以细胞为研究对象,按照需求利用细胞和分子生物学的理论设计和操作,使细胞在遗传学上的特性发生变化,达到改良或创造新品种的目的,在大规模地培养和繁殖后,最终提取出对人类有利的产品。在工业上,主要包括上游工程(包括细胞培养、遗传操作和保存)和下游工程(包括转化细胞在生物制品生产中的应用)[2]。如今,细胞工程在生物制药工业发挥着不可替代的作用。
2、动物细胞工程制药
、动物细胞工程制药的概述及早期发展
动物细胞工程制药最早能够追溯到20世纪50年代,用动物细胞生产病毒,也就是在生物反应器中培养动物细胞,进行大规模培养后,再接种减毒或灭活的病毒来生产疫苗[3]。常见的动物细胞培养技术流程,一般是先将动物组织分散成单个细胞、细胞群(团)后,接种于培养基中进行原代培养,再经过10~50代的传代培养,就初步得到了需要的细胞系。然而,由于自然界的细胞普遍表达水平低,通过这种方法生产的产品不仅产量低,而且成本高,因此,早期动物细胞培养并没有得到充分的重视。
、杂交瘤技术
杂交瘤技术在20世纪70年代的创建,是动物细胞技术发展新的里程碑。随着杂交瘤技术在工业领域的应用,各种新产物相继出现,在生产用于疾病诊断和治疗的生物制品中具有重要意义[3]。1984年的诺贝尔生理学或医学奖颁给了创立抗原选择抗体学说以及发明单克隆抗体技术的3位科学家。他们提出将能够分泌特异性抗体的B淋巴细胞与能够无限增殖的骨髓瘤细胞融合筛选,形成能产生特定抗体的杂交瘤细胞。这种方法得到的融合细胞可以稳定生产特异性强、效价高的单克隆抗体。
、动物细胞大规模生产技术
动物细胞大规模生产指在人工条件下,在细胞生物反应器内大量培养有用的动物细胞,是生产药品的技术,也是制药业的关键技术。由于动物细胞对外界环境变化高度敏感,细胞培养放大工艺需要从实验室规模逐级放大到生产规模,各个反应器中工艺的差别成为目前放大过程的一大技术挑战[4]。通过动物细胞生产生物制品已成为全球生物产业的主要支柱,目前通过动物细胞培养获得较多的生物制剂是蛋白和抗体。
、动物生物反应器
动物生物反应器可以从转基因动物体内源源不断地获得人类需要的某种蛋白,并进行工业化生产蛋白质。依据产生蛋白部位的不同,可分为多种类型的生物反应器,如血液生物反应器、唾液腺生物反应器等。科学家发现,由于雌性动物的乳腺能够高效表达重组蛋白并进行一定的修饰,乳腺生物反应器成为最被看好的生物反应器发展方向。随着技术的发展,乳腺生物反应器的产物已经扩大到了抗凝血酶、凝血因子、人蛋白,还有各种溶菌酶、超氧化物歧化酶、干扰素等许多具有极高医用价值的酶或细胞因子。作为一种全新的生物生产模式,由于其在生产天然产物时的高产量、低成本的优势[5],乳腺生物反应器在生物医药行业将得到更广泛的应用。
、动物细胞核移植
动物细胞核移植在细胞工程中同样具有良好的前景。将动物的供体细胞核取出,注入另一个去核并且处于减数分裂中期的卵母细胞,改变细胞的遗传特性,以产生新产品,再将其进行体外培养、繁殖、纯化、提取,最终用于疾病治疗。我国对鱼类的核移植研究最早,“中国克隆之父”童第周在20世纪60年代就完成了世界上第一例鱼类细胞核移植。后来,我国学者又尝试在其他多种品系鱼类之间进行核质融合实验,并利用模式动物斑马鱼,揭示鱼类核移植后再程序化的分子机制,取得了巨大的研究成果,推动了鱼类核移植技术及其他相关领域的快速发展[6]。如今,动物细胞工程在生物制药领域意义重大。由于动物细胞结构的复杂性和分工的明确[7],动物细胞工程具有巨大的优势。
3、植物细胞工程制药
、植物细胞工程制药的概述及早期发展
将植物直接入药或者从植物体中提取有效成分是一种生产药物的传统方法。随着技术的成熟,处理和提取过程越来越简便,目前多种中药都是这样生产的。但是,这样的方法只适合容易栽培、繁殖速度快的植物,对于那些生长周期长、提取难度大的植物并不适合,所以受到了诸多限制。比如拥有抗癌成分的红豆杉曾因为人们的大规模砍伐,遭受了毁灭性的破坏[8]。
植物细胞工程制药,是将植物细胞作为基本研究单位,对植物细胞进行一系列操作,改变植物细胞生物特性,最终达到改良或培育新品种的目的[9]。应用植物细胞及组织培养,具有杂质少、提取简单、有效成分含量高和培养周期短的优势。植物细胞工程制药目前主要体现在组织及细胞培养、遗传特性改造以及转基因植物等方面。
、植物细胞工程大规模培养
最早提出应用植物大规模提取天然药物的是20世纪50年代美国的科学家,他们从多升发酵罐中得到了大量药用成分呋喃色酮。我国作为植物药用历史最悠久的国家之一,应用细胞培养技术能够帮助我国传统中药材发挥更大的价值。
丹参是具有活血化瘀、通经止痛功效的一味中药,其中的'主要成分——酚酸类和二萜类,药理作用主要表现在对心血管系统疾病的治疗。目前,由于丹参有效成分含量低、生长缓慢,野生丹参资源遭到大规模破坏,加上各地培育出的品种质量良莠不齐等原因,其在数量以及质量上都难以满足市场的供给需求[10]。经过实验研究发现,用一种10L规模的特殊植物组织反应器培养丹参发根,仅用50天,鲜重增殖倍数高达240倍,各种有效成分含量也得到大幅度提升。这是一种非常适合丹参发根生长及产物积累的方法,而且避免了农药等物质的污染。
、植物转基因技术
转基因植物与转基因动物相比有独特的优势,一方面植物细胞具有全能性,细胞培养条件简单且易于成活;另一方面进入植物体的外源基因,可以在与其他植物杂交的过程中积累有益基因优化表达。利用转基因植物也能生产疫苗,以植物作为生物反应器,将携带抗原基因的载体导入受体细胞,在植物体内表达和修饰这类特定抗原,成为具有免疫活性的蛋白质。香蕉、胡萝卜、土豆等都可以作为受体植物。一些转化编码基因的植物疫苗,如HBsAg、LTB、诺沃克病毒等,已被用于预防和治疗乙型肝炎及细菌性腹泻。在生物和临床试验中,均展示了良好的免疫应答,相较于传统疫苗,具有生产成本低、成功率高、易形成规模化生产等优势。尽管植物转基因疫苗的研究还处于起步阶段,但我国报道的转基因植物生物试验已经取得了一些成果[11],成为我国制药业的重要进步。
、植物生物反应器
植物生物反应器,又名“植物基因药厂”。这种技术拓宽了药用蛋白及疫苗的来源,在降低成本的同时,扩大了生物制药产业规模,并产生了巨大的商业价值。植物生物反应器的研发,对于在全球范围内抢占生物经济制高点有着重要的意义,许多发达国家都已把植物生物反应器的研发列入了国家重点生物技术研究的战略性计划[12]。我国开发植物作为反应器始于20世纪90年代,目前对于植物生物反应器的研发和投入与发达国家还存在一定的差距。在我国“九五”计划对这一项目进行政策扶持后,目前已经取得了大幅度进展[13]。
4、细胞工程制药的意义与展望
研究细胞工程制药的研究进展和前景,对于制药业的发展有重要意义。据统计,世界上50%的医药产品来自细胞工程制药,其中,植物细胞提取物和动物细胞提取物大约各占1/2。细胞工程在生物制药工业中占据重要地位,为新药开发提供了技术操作基础,在治疗免疫性疾病、提升治病疗效、创新医药品等方面都有广泛的应用[8],细胞工程制药的研究在不断取得突破,其影响和前景也日渐得到展现。如今,生物制药与细胞工程已经紧密联系在一起,随着细胞工程技术在生物制药生产中的普遍应用,生物制药行业发展迅速,取得了巨大的经济效益[14]。
伴随着更多新兴技术的出现和更新,在未来细胞工程制药研发过程中,可以充分利用各种技术平台寻找最佳研究方案。与其他相关领域的结合,也将更好地推动我国生物制药领域的发展。近半个世纪以来,细胞工程制药发展迅猛,并且已在医药领域取得了众多的研究成果。所以,在“十四五”规划期间,应更加重视战略性新兴产业,进一步加快和壮大新一代生物技术的发展。
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红球藻提取物来源于雨生红球藻,虎尾兰植物,红球藻提取物它源于一种附着在浅水湾上的红色贝壳上,从这种物质上提取出来一种对于皮肤有好处的雨生红球藻提取物。这种物质它能达到很好的抗氧化效果,避免皮肤被氧化造成的皮肤暗沉,它能够修复受损的皮肤组织,使我们皮肤的细胞更加的健康饱满,所以雨生红球藻提取物,它是一款可以添加在护肤品当中来改善皮肤问题的有效物质,这种物质,它的稳定性相对也是比较好的。红球藻提取物对皮肤的作用以红球藻提取物为成分的护肤品有很多,这主要是源于它对我们皮肤有着突出的作用和效果,首先,它能够改善我们皮肤的暗沉,改善皮肤由于自由基侵害造成的皮肤早衰问题,而且能除自由基,达到明显的抗氧化作用,其次,产品能够淡化皮肤的细纹,使皮肤更加的年轻态,同时它还能够达到的作用,是使我们皮肤组织更加的健康,避免的皮肤出现敏感以及红肿等问题。雨生红球藻提取物是什么,以及雨生红球藻提取物对皮肤的作用,我们已经有了认识,所以想要抵抗自由基侵害皮肤,就可以在选择护肤品的时候,适当的选择,含有雨生红球藻提取物为成分的护肤产品。但初次使用的时候一定要在耳后进行试验。
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温室气体排放过量,导至全球温度升高过度开采破坏生态,导致沙土化土地速度加快
微波辐射在天然药用活性成分提取分离中的应用陈业高, 海丽娜, 毕先钧 - 微波学报, 2003 - ... 页数: 共5页. 页码范围: 85-89页. 关键词: 微波辐射 药用植物 活性成分 应用 微波提取. 学科分类:[工业技术 > 化学工业 > 制药化学工业 > 一般性问题 > 物理化学过程及设备]. 相关文章:植物源抗菌、杀菌活性物质研究进展(综述)Research Progress on Antibiotic Active Materials of Plant添加成功!您可以在“我的服务”中查看您添加的引用通知列表,并且配置获取通知的方式。关闭下载PDF阅读器本文综述了目前具有杀菌、抗菌活性的植物资源及活性物质的提取、分离、鉴定方法,阐述了具有杀菌、抗菌活性的主要成分,并提出了植物源杀菌剂研究与应用的发展方向.作 者: 吴新安 花日茂 岳永德 朱有才作者单位: 吴新安,花日茂,岳永德(安徽农业大学植保系,合肥,230036)朱有才(安徽省农垦集团)刊 名: 安徽农业大学学报 ISTIC PKU英文刊名: JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL UNIVERSITY年,卷(期): 2002 29(3)分类号: 杜鹃花科植物活性成分及作用机制研究进展钟国华, 胡美英 - 武汉植物学研究, 2000 - 万方数据资源系统蕨类植物的活性成分研究进展赵莉, 杨文钰 - 中药材, 2004 - 万方数据资源系统厚朴叶中抑菌活性成分鉴别及其防病效果赵纯森, 黄俊斌 - 华中农业大学学报, 1994 - 南瓜中降血糖活性成分的提取及其功能性质的研究评论推荐下载全文收藏本文张拥军[1] 姚惠源[2] 等[1]中国计量学院生命科学学院,杭州310034 [2]江南大学食品学院,无锡214036《食品与发酵工业》2002年第28卷第6期核心期刊论文速发快发(点击进入)国家级期刊论文快速发表(点击进入)摘 要:为探寻南瓜中对正常及糖尿病模型小鼠血糖有影响的有效成分,本实验采用新的分离工艺从南瓜粉中提取得到南瓜粗多糖(PP),用DEAE分级获得3个组分,收集的主导组分经过Sephadex G-100柱分级,以小白鼠血糖值作为筛选活性成分的指标,收集有活性的细分(PP-CG)经Sephadex G-200证实为单一峰。气相色谱分析其单糖组成为葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖及鼠李糖。高效液相色谱证明其为杂多糖,分子质量为1.16×10^5u。页 数:共4页页码范围:32-35页关 键 词:南瓜 降血糖活性成分 提取 功能性质 南瓜多糖 单糖组成学科分类:[医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药材 > 各类药材 > 植物药] [医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药化学 > 有效成分的分离与提取]植物源抑菌活性成分研究新进展评论推荐在线阅读 下载全文收藏本文吴传万[1] 杜小凤[1] 徐建明[2] 王伟中[1][1]江苏徐淮地区淮阴农科所,江苏淮安223001 [2]江苏省植物生长调节剂工程技术研究中心,江苏淮安223001《西北农业学报》2004年第13卷第3期核心期刊论文速发快发(点击进入)国家级期刊论文快速发表(点击进入)摘 要:评述了近年来源于植物中的具有抑(杀)菌作用的化学成分,其结构类型涉及萜类、生物碱类、黄酮类、苷类、皂甙、醌类、香豆素、木脂素、芪类、胺类、酯类、酚类、醛类、醇类、甾类、有机酸及精油类等化合物,分析了在开发植物源杀菌剂中存在的问题,提出了今后研究工作的方向与侧重点。砂地柏果实中杀虫活性成分研究余向阳, 张兴 - 西北农业大学学报, 1999 - 金花茶抗氧化活性成分提取及其含量测定陈全斌, 湛志华, 义祥辉, 沈钟苏 - 广西热带农业, 2005 - 紫花苜蓿生物活性成分研究进展 [PDF]卢成, 曾昭海, 张涛, 戚志强, 胡跃高 - 盾叶薯蓣灭钉螺活性成分的研究崔天义, 张丽红 - 武汉植物学研究, 1998 - 花椒属植物中生物活性成分研究近况王宇, 王钊 - 中草药, 2002 - [PDF] 枳实活性成分的研究 [PDF]彭国平, 牛贺明, 徐丽华 - 南京中医药大学学报, 2001 - 何首乌毛状根培养及其活性成分的产生王莉, 程克棣 - 生物工程学报, 2002 - [引用] 卫矛科植物化学成分及生物活性研究涂永强, 吴大刚 - 科学通报, 1992 - 苦皮藤假种皮中的杀菌活性成分研究杨征敏, 王明安 - 农药学学报, 2001 - 葡萄籽提取物中原花青素含量不同测定方法比较姚开, 何强, 吕远平, 石碧 - 化学研究与应用, 2002 - 万方数据资源系统瑞香狼毒中杀虫活性成分的提取与初步分离张国洲, 赵善欢 - 青海大学学报: 自然科学版, 2000 - 黄芪活性成分的提取及其对淋巴细胞增殖的影响聂小华, 史宝军, 敖宗华, 尹光耀, 金坚, … - 无锡轻工大学学报: 食品与 …, 2003 - [PDF] 应用分子印迹-固相萃取法提取中药活性成分非瑟酮 [PDF]李礼, 胡树国, 何锡文, 李文友, 陈朗星, … - 高等学校化学 …, 2006 - [PDF] 金银花活性成分, 药理作用及其应用 [PDF]葛冰, 卢向阳, 易克, 田云 - 中国野生植物资源, 2004 - 累死了 够20个了吧
要:纳滤膜是20世纪80年代末期问世的一种新型分离膜。其截留分子量介于反渗透膜和超滤膜之间,分子量约为200~2000,由此推测纳滤膜可能拥有1nm左右的微孔结构,故称之为“纳滤”。纳滤膜大多是复合膜,其表面分离层由聚电解质构成,因而对无机盐具有一定的截留率。膜分离过程中,物质不发生相变,无需加热,不会破坏生物活性,操作简单,因而被越来越广泛地应用于动植物生理活性物质的各种分离、精制和浓缩过程。例如,中草药的化学成分非常复杂,通常含有生物碱、苷类、酮类等有效成分,同时还含有蛋白质、鞣质、树脂、淀粉等一些无效成分。有资料表明,中药有效成分的分子量大多数不超过1000。而无效成分的分子量在5万以上。因此现代膜分离技术正是利用膜孔径大小特征将物质进行分离提纯,它正日益在食品及医药领域受到青睐。
蜂胶就有“天然抗氧化剂”和“紫色黄金”之称!发展前景也非常好啊!“药食同源”的珍品!
维他命A维他命A是健康的黏膜细胞与促进杀菌酵素功能所必需的。β-胡萝卜素与维他命A能破坏致癌物。维他命C除了增加干扰素(interferon)的制造,维他命C是一种强的作用T细胞(T-effector cell)刺激子,且是一种非常强的抗氧化剂。维他命C减少脑部与脊髓内的脂质生产,这个制造过程经常会诱发自由基,带来损害。这些部位可用大量的维他命 C保护,维他命C可通过血液与大脑间的屏障。当一种叫橘皮甘的生物类黄酮(bioflavonoid)也在场时,维他命C是一种更强而有效的自由基清除者。维他命E维他命E是一种预防脂肪及细胞膜变质的强力抗氧化剂,能保护细胞膜。维他命E改良氧的利用及增强免疫反应。新的证实显示维持血液中正常的维他命E浓度需要锌。Gamma–亚麻油酸(γ-Linoleic Acid,GLA)GLA是体内主要的一种T-淋巴球调节者。GLA可以由植物油中的亚麻油酸转变而成,但若缺乏锌、镁、维他命C、B6、B3、A,则此转化作用可能无法进行。氢化植物油、人造奶油、或高脂肪饮食等,也能抑制这个重要的转换。樱草(evening primrose)油、黑醋粟(black currant)种子油、玻璃苣(borage)油均是GLA前身物(pre-formed)的主要来源。L—半胱胺酸(L—Cysteine)制造麸胱甘 月太 (glutathione)需要此含硫胺基酸。它被肝及淋巴球用以解除化学物质与病菌的毒性。半胱胺酸是酒精、香烟、环境污染物的解毒剂,这些物质都会抑制免疫系统。L—麸胱甘 月太(L—Glutathione)此强力抗氧化剂去除体内的自由基,保护身体免受金属、毒品、烟、酒之害。硒(Selenium)身为维他命E的好伙伴,硒对麸胱甘 月太 过氧化?(glutathione peroxidase)这个主要的解毒酵素是必要的(每一个酵素分子含有4个硒原子)。它刺激抗体反应以对抗病菌感染。超氧化物歧化?(Superoxide Dismutase,SOD)SOD是一种酵素。健康的人每天可以制造将近五百万单位的SOD及它的伙伴过氧化氢?(catalase)。SOD使细胞恢复元气并减低细胞的损坏率。它除去最常见的超氧化物(superoxide)。SOD也协助身体利用锌、铜、锰。随著年纪渐增,SOD的浓度会减少,此时自由基的含量增多。SOD延迟老化的潜能,目前正被研究著。药丸或药片式的SOD补充品必须有一层特殊的保护套膜,使SOD能完整无缺地通过胃部到达小肠被吸收。补充品必须能够提供大约五百万或更高单位的日需量。天然的SOD见於大麦草、绿花椰菜、甘蓝菜芽、甘蓝、小麦草、及大部分的绿色植物。<摘自 >据有关资料证实,在人们长期食用的食品中,天然抗氧化剂成分的毒性远远低于人工合成的抗氧化剂。因此,近年来从自然界寻求天然抗氧化剂的研究已引起各国科学家的高度重视。目前,世界各国开发的大量天然抗氧化剂产品,受到人们的普遍欢迎。其主要产品有天然VE、类黑精类、红辣椒提取物、香辛料提取物、糖醇类抗氧化剂等等。天然VE天然VE大量存在于植物油脂中,并且存在状态通常比较稳定。在油脂精制过程中,可回收大量的精制VE混合物。该成分抗氧化性较好,使用安全,在食品保鲜中已得到大量使用类黑精类(melanoidins)它们是氨基化合物和羰基化合物加热后的产物,其抗氧化能力相当于BHA和BHT。红辣椒提取物红辣椒中含有大量的抗氧化物质,是VE和香草酰胺的混合物。如能将其中辣味去掉,则是一种极好的抗氧化剂。香辛料提取物早在20世纪30年代,人们就开始对香辛料的抗氧化作用进行研究。到50年代,科研人员对32种香辛料进行分析,发现其中抗氧化性能最好的是迷迭香和鼠尾草。这类产品多含有黄酮类、类萜、有机酸等多种抗氧化成分,能切断油脂的自动氧化链、螯合金属离子,并起到与有机酸的协同增效作用。法国从迷迭香干叶粉中提取出两种晶体抗氧化物质——鼠尾草酚和迷迭香酚,它们比人工合成的氧化剂BHT和BHA的抗氧化能力强4倍多。茶多酚类即从茶叶中提取的抗氧化物质,含有4种组分:表没有食子儿茶素、表没有食子儿茶素没食子酸酯、表儿茶素没食子酸酯以及儿茶素。它的抗氧化能力比VE、VC、BHT、BHA强几倍,因此日本已开始茶多酚类抗氧化剂的商品化生产。糖醇类糖类从化学结构上可分为单糖类、双糖类、三糖类、四糖类等,但均匀低分子碳水化合物。其中五碳糖和六碳糖单糖促进氧化,双糖略有抗氧化作用,果糖和糖醇则具有较强的抗氧化能力。食品中广泛使用的是山梨糖醇和麦芽糖醇作抗氧化剂。木糖醇也是抗氧化剂,它具有和VE协同增效的作用。氨基酸和二肽类氨基酸如蛋氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸等都能与金属离子螯合,所以它们为良好的辅助抗氧化剂。近年来,食品科学工作者发现,丙氨酸末端为氮的9种二肽比任何一种氨基酸的抗氧化能力都强。其中尤以丙氨酸-组氨酸、丙氨酸-酪氨酸、丙氨酸-色氨酸3种二肽抗氧化能力最强,值得大力开发。 <摘自http:// >