第1篇：新生儿溶血病血清学检测相关影响因素分析
新生儿溶血病（hemolyticdiseaseofthenewborn，HDN)是由于母婴血型不合，母血中的IgG免疫抗体通过胎盘进入胎儿血循环，发生同种免疫而引起的溶血。临床表现为不同程度的黄疸、贫血、水肿、肝脾肿大，严重者可有核黄疸甚至死亡。以ABO及Rh新生儿溶血病较多见，但在我国以ABO-HDN为主。大多数HDN患儿出生时与正常新生儿相似，皮肤粘膜黄染呈轻中度，贫血不明显，临床症状不典型，干扰患儿及时的诊断与治疗。为能够给临床提供早期诊断依据，现就对125例ABO母婴血型不合的患儿进行新生儿溶血病血清学检测相关影响因素分析报告如下。
1资料与方法
1.1研究对象
秦皇岛市妇幼保健院2012年5~12月新生儿科病区收治并送检的母婴血型不合、进行ABO溶血病血清学检测（三项试验）的新生儿125例，其中A型64人，B型61人，母亲全部为O型，Rh系统母亲和孩子均为阳性，出生时间为0~10天。
1.2检测试剂与仪器OrthoBioVueSystemABO/Rh正反定型血型定型6孔柱试剂卡、OrthoBioVueSys-tem抗IgG血型诊断试剂卡（抗人球蛋白（IgG)检测卡）、OrthoBliss(低离子强度盐溶液）、上海血液生物医药有限责任公司生产的人ABO血型反定型用红细胞试剂；强生AutovueInnova全自动血型及配血分析仪、OrthoBioVueSystem离心机、OrthoBioVueSystem32型孵育器。
1.3检测方法分别取新生儿和母亲静脉血3~5ml，EDTA抗凝，采用微柱凝集技术进行血型测定、HDN三项试验即红细胞直接抗人球蛋白试验、游离抗体试验、抗体释放试验，操作参照《全国临床检验操作规程》〔3〕及试剂厂商提供的说明书操作，同时收集患儿同期血常规及血清胆红素的检测结果。
1.4统计方法计量资料采用相应的t检验，计数资料采用;X2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。
2结果
2.1ABO溶血病的阳性率与日龄的关系母婴血型不合的125例新生儿中，阳性患儿85例，ABO溶血病的阳性率占母婴血型不合的68.0%。ABO溶血病的阳性率与日龄相关性差异有统计学异性（P＜0.01)。
2.2ABO溶血病与血红蛋白的关系85例阳性与40例阴性患儿血红蛋白平均值差异有统计学意义(P＜0.05)。
2.3ABO溶血病与间胆/总胆比值的关系两组病例间胆/总胆比值差异有统计学意义（P＜0.05)。
2.4ABO溶血病与性别的关系ABO溶血病与性别之间差异无统计学意义（P＞0.05)。
2.5ABO溶血病程度与日龄的关系ABO溶血病程度与日龄之间差异无统计学意义（P＞0.05)。
2.6ABO溶血病程度与血红蛋白的关系ABO溶血病程度与血红蛋白之间差异无统计学意义（P＞0.05)。
2.7ABO溶血病程度与胆红素的关系胆红素102mmol/L为该研究诊断新生儿高胆红素血症的最低标准，ABO溶血病程度与胆红素之间差异无统计学意义（P＞0.05)。
3讨论
ABO血型不合新生儿溶血病是早期新生儿高胆红素血症的常见原因之一，由于母体先天或者经后天刺激产生的抗胎儿及新生儿血型抗原的IgG类抗体经过胎盘进入胎儿血液循环中，与胎儿或新生儿红细胞上相应抗原结合并激活单核巨噬细胞系统引起血管外溶血。临床表现为不同程度的黄疸、贫血、水肿、肝脾肿大，严重者可有核黄疸甚至死亡。大多数HDN患儿出生时与正常新生儿相似，皮肤粘膜黄染呈轻中度，贫血不明显，临床症状不典型，干扰患儿及时的诊断与治疗。
该研究对125例ABO母婴血型不合的患儿进行新生儿溶血病血清学检测相关影响因素分析，可以看出ABO溶血病的发病与性别无统计学意义；125例母婴血型不合的病例中，HDN患病人数为85例，阳性率为68.0%，因此新生儿溶血病血清学检测（三项试验）应作为母婴血型不合的新生儿出生后的常规检测。血样的采集时间（检测日龄）与检测的阳性率差异有统计学意义，日龄越小阳性率越高，随着日龄的增长受其他因素影响逐渐增多，使阳性率逐渐下降，但阳性患儿中ABO溶血病的溶血程度与日龄差异无统计学意义；HDN阳性组与阴性组血红蛋白水平差异有统计学意义，HDN患儿存在轻度贫血倾向（156.1±28.1)，但ABO溶血病的溶血程度与血红蛋白的高低无明显差异，溶血程度的加重不会发生明显的进行性贫血，所以不能单独以血红蛋白的指标来判断是否发生HDN。HDN阳性组与阴性组间胆/总胆比值差异有统计学意义，说明溶血病阳性的患儿间胆与总胆比值明显增高，但ABO溶血病的溶血程度与胆红素的高低无明显差异，所以不能单独以胆红素的指标来估计HDN的溶血程度，必须做新生儿溶血病的血清学检测（三项试验）并结合血红蛋白和胆红素的水平来诊断HDN，估计严重程度。该研究者曾做过新生儿溶血病卡式血清学检测分析的统计，新生儿溶血试验（三项试验）是诊断新生儿溶血病的最有力证据，而新生儿红细胞抗体释放试验是诊断新生儿溶血病最敏感的一项试验，以上判断的溶血程度分级也是通过抗体释放试验的结果进行的。
因此，母婴血型不合的患儿生后应该早期进行新生儿溶血病的血清学检测（三项试验），并且依据新生儿溶血病的血清学检测（三项试验）结果结合血红蛋白和胆红素的水平来诊断HDN，并估计其严重程度。
作者：张辉，李志武，王秀明，吴志刚（河北省秦皇岛市妇幼保健院检验科066001）
第2篇：分析新生儿溶血病检测的“三项试验”
新生儿溶血病（hmoyticdiseaseofnavbonHEN)以母婴ABO血型系统不合引起者较多见，Rh及其他血型系统不合引起者较少，但溶血症状较ABO血型不合溶血病严重。ABO新生儿溶血病是一种由于母亲体内存在与胎儿红细胞不配合的血型抗体而引起的同种被动免疫性疾病，是早期新生儿高胆红素血症的常见原因，血型血清学免疫性抗体检测是确诊该病的重要依据。为了解母婴血型不合与新生儿溶血病的关系，我们对476例临床有新生儿高胆红素血症患儿的血标本进行了ABORhf!型鉴定，对母婴ABO血型不合的患儿血标本进行了直接抗人球蛋白试验、抗体游离试验和抗体放散试验，即新生儿溶血病检测的“三项试验”，对检测结果与母婴ABO血型不合新生儿溶血病的关系进行了回顾性分析。
1材料和方法
1.1材料选择
2001—01/2010—06在本院儿科住院，临床有新生儿高胆红素血症的患儿及外院送检的血标本476例，其中男287例（603%)，女189例（397%)年龄12h-7d患儿的ABO血型为A型者241例（506%)为B型者235例(49.4%)。患儿母亲的ABO血型均为O型，患儿及其母亲的RhD血型均为阳性。患儿病程＜24h者165例（347%)＜48h者215例（452%)，＞72h者96例（202%)本组病例均符合新生儿溶血病.新生儿高疸红素血症和新生儿贫血的诊断标准。抗A和抗B血型定型试剂血清.抗D血型定型血清.抗人球蛋白试剂（广谱）单特异性抗Ki单特异性抗C3，抗体筛选细胞及抗体鉴定谱细胞均购自上海市血液生物医药有限责任公司，微柱凝胶抗人球蛋白检测卡.专用离心机及其配套设备等购自达亚美公司，ABO定型试剂红细胞为本室制备，经特异性检测合格后使用。
1.2方法
按要求采集被检者抗凝血标本4-5mL检测患儿及其母亲ABORh血型，测定患儿血清胆红素，并根据母婴ABO血型是否相合，对患儿血标本进行直接抗球蛋白试验.抗体游离试验和抗体放散试验；采用微柱凝胶法对患儿及其母亲血标本进行ABO以外血型不规则抗体筛选及特异性鉴定。母婴ABO血型不合新生儿溶血病的诊断依据直接抗人球蛋白试验.抗体游离试验及抗体放散试验，并结合患儿血清胆红素测定结果进行确诊。对母婴ABO血型不合，出生后临床有溶血症状的患儿及时给予蓝光照射治疗24h输注白蛋白.丙种球蛋白或新鲜冰冻血浆.激素等综合治疗后，新生儿的溶血症状明显减轻，黄疸逐渐消退，经治愈出院。
2结果
2.1ABO血型与新生儿溶血病的关系在476例临床有新生儿高胆红素血症的患儿中，患儿母亲血清中的ABO以外血型不规则抗体筛查试验均为阴性，排除了母婴Rh及其他血型不合引起的新生儿溶血病。在476例临床有新生儿高胆红素血症的患儿中，由母婴ABO血型不合引起的新生儿溶血病283例（59.5%)其中母亲ABO血型为O型，患儿为A型者(即免疫性抗A抗体引起者）136例（48.1%)，母亲为O型，患儿为B型者卿免疫性KG抗B抗体引起者）147例(51.9%)。患儿ABO血型为A型或B型的分布与新生儿溶血病的发病率的关系，经统计学分析无显着性差异（P＞0.05)
2.2新生儿溶血病检测“三项试验”的阳性率在283例母婴ABO血型不合新生儿溶血病患儿中，直接抗人球蛋白试验阳性89例（31.4%)抗体游离试验阳性225例（79.5%)，抗体放散试验阳性283例（10C%)。其中直接抗人球蛋白试验阴性.抗体游离试验阴性而抗体放散试验阳性者46/283例(16.3%)直接抗人球蛋白试验阴性.抗体游离试验和抗体放散试验均为阳性者148/283例（52.3%)直接抗人球蛋白试验阳性.抗体游离试验阴性而抗体放散试验阳性者12/283
3讨论
在临床上有多种原因可引起新生儿溶血病，其中母婴ABORh及其他血型不合是非常重要的原因。ABO新生儿溶血病是由于母婴ABO血型不合，母体受到胎儿红细胞抗原的刺激而发生同种免疫反应，产生对应于胎儿红细胞抗原的IG血型免疫性抗体g血型免疫性抗体通过胎盘到达胎儿体内，在胎儿体内与胎儿红细胞上的对应抗原相结合，在补体的参与下，使胎儿红细胞受损而发生溶血反应，以致出现母婴ABO血型不合新生儿溶血病14。在临床上ABO血型系统不合引起新生儿溶血病的比例要明显高于Rh及其他血型系统不合引起的新生儿溶血病，其中以O型母亲所生A型或B型的婴儿比较多见。在本组283例母婴ABC血型不合新生儿溶血病患儿中，母亲为O型患儿为A型者136例（48.1%)母亲为O型患儿为B型者147例（51.9%)表明患儿ABO血型为A型或B型与新生儿溶血病的发病率无明显差异（P＞0.05)。
直接抗人球蛋白试验、抗体游离试验和抗体放散试验被称为新生儿溶血病检测的“三项试验”是早期进行新生儿溶血病检测和诊断的经典方法和金标准。“三项试验”中任何一项阳性均可确诊新生儿溶血病，而抗体放散试验阳性更具有诊断价值，可直接反映IG型抗A(B)抗体特异性致敏患儿红细胞的状况。其中直接抗人球蛋白试验是用于检测患儿红细胞是否被Ig抗体所致敏，而抗体游离试验和抗体放散试验则是检测IG抗体的存在。诊断AB渐生儿溶血病的最有力证据是患儿红细胞被来自母亲的IG抗八(B航体所致敏151。本组476例临床有高胆红素血症的患儿中，283例是由母婴ABC血型不合引起的新生儿溶血病，在283例ABO血型不合新生儿溶血病患儿的检测试验中，直接抗人球蛋白试验阳性89例（31.4%)抗体游离试验阳性225例(79.5%)抗体放散试验阳性283例（100%)，“三项试验”均为阳性者77例（27.2%)在“三项试验”中，只有抗体放散试验的阳性率达到了100%，单项直接抗人球蛋白试验阴性，只能说明新生儿溶血病患儿的红细胞上虽然结合了其母亲的免疫性IG抗体但由于抗体结合的数量较少而未达到能检测出阳性的浓度，并不表明其红细胞上没有结合Ig抗体只要对患儿红细胞进行抗体放散试验，就可检测出阳性结果。说明在ABC血型不合新生儿溶血病检测的“三项试验”中，以抗体放散试验最为重要，是诊断新生儿溶血病的确诊试验。母婴ABO血型不合引起的新生儿溶血病比较多见，通过直接抗人球蛋白试验、抗体游离试验和抗体放散试验可直接确诊新生儿患病与否，并为制定治疗方案提供依据。早期进行ABO血型不合新生儿溶血病的检测诊断和治疗，可以减少后遗症的发生率，对新生儿溶血病的防治和优生优育均有重要的临床意义。
作者：张勇萍，杨世明，苏小花，王林，李楚（第四军医大学唐都医院输血科，陕西西安710038)
