华为平板matepad11使用技巧（华为平板matepad11功能）
与寂寞为伍 • 2022-07-24 18:20:57 • 数码
华为平板matepad11使用技巧（华为平板matepad11功能）
转眼间…又到了“万兽归笼”的日子。作为大学“神兽”的你，除了一身膘肉，有没有打算带点啥回学校呢？
果酱在想…肯定也有不少人想换一台新的学习设备带回学校，比如，笔记本电脑、平板电脑、电纸书啊什么的。今天，果酱就来向广大学生朋友们推荐一款好用的学习工具，一台好看又好用的平板 —— 华为MatePad 11。
华为平板matepad11使用技巧（华为平板matepad11功能）
对于打工人来说，平板可能是“买前生产力，买后爱奇艺”，但于学生而言，作为学习工具、平板可就再合适不过了。屏幕比手机大，携带起来也比电脑更方便，还能用手写笔，不仅是疫情期间上网课，平时记笔记、查资料，也都能派上用场。
华为平板matepad11使用技巧（华为平板matepad11功能）
果酱这次推荐的华为MatePad 11，就很受学生喜欢。外观简洁、颜值非常高，正面是四边等宽、全面屏的设计，也很轻薄，带出去用也不觉得累。
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屏幕是2.5K的，支持 P3 广色域，并且支持120Hz高刷新率，学习完了，晚上躺在床上看看电影、追剧、玩游戏啥的，体验也不错。
最重要的，华为MatePad 11 搭载的是全新的 HarmonyOS 2.0 系统。如果你了解过应该知道，和 iOS、Android 不同，HarmonyOS 能够运行在多种不同类型的设备上，让它们成为一个整体，也就是鸿蒙的超级终端，不同设备之间能够快速连接、无缝协同，既方便又高效。
华为平板matepad11使用技巧（华为平板matepad11功能）
听起来是不是有点儿蒙？咱们接下来重点说的，就是华为MatePad 11 和电脑之间的协同了，话不多说，直接上手试试…
华为平板matepad11使用技巧（华为平板matepad11功能）
现在已经是3月份了，想必有一部分同学已经在准备毕业论文了吧，果酱就以毕业论文为例，给大家演示… 华为MatePad 11 和电脑之间协同之后，都有哪些好玩、又能提升效率的“神操作”！
先说明一下，咱们这次用的电脑，是华为去年9月份发布的 MateBook 14s，这也是果酱自己一直在用的笔记本。
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因为用键盘打字更方便，一般情况下，大家应该都是用笔记本来写论文更多一些。不过，由于时不时地得查看资料，就需要来回切换窗口，看一眼资料、写一会儿论文。
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偶尔看看倒还好，如果频繁切换，其实还是挺麻烦的，尤其是写着写着…写不出来的时候，就更烦躁了。
这时候，咱们就可以把华为MatePad 11 设为华为MateBook 14s 的副屏。操作起来很简单，先在华为MateBook 14s 的「电脑管家」内将两台设备连接，然后选择扩展模式就行了。
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根据自己的习惯，既可以将平板放在电脑左边，也可以是右边或者其他位置。
如果是需要一直来回看的资料，文档打开后，就可以拖拽到平板上来看，一边是毕业论文、一边显示资料，是不是方便多了？
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同时，M-Pencil 手写笔也能派上用场，遇到需要做标记的部分，直接在平板上画出来，比起用鼠标操作…手写笔肯定更好用。
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其实原理并不复杂，华为MatePad 11 和华为MateBook 14s 连接起来后，你可以理解成平板和笔记本这两块屏幕成为了一部分，它们各司其职，双屏学习、效率自然更高。
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除了文字内容，估计不少同学的论文也需要画一些简单的示意图，比如插画、表格之类，用来辅助论文表述。
一般情况下，咱们都会直接用鼠标在绘画软件上操作。但如果你不是特别专业的话，其实难度不小，虽然像华为MateBook 14s 这类笔记本支持触屏，可是画画…效果上还是差点儿意思。
华为平板matepad11使用技巧（华为平板matepad11功能）
至于数位板什么的，价格就有点……没必要！这时候，华为MatePad 11 就是很好的替代啦。
同样，还是先将电脑与平板建立连接，但这次需要把华为MatePad 11 切换成镜像模式，相当于是将电脑画面投屏到平板上，这样就能直接用平板、用 M-Pencil 手写笔来画了。
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因为是镜像，用平板画的同时，电脑端的画面也会实时同步“更新”，得益于鸿蒙的底层优化，延迟控制得相当低。
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一边用平板绘画、一边看电脑的画面，这简直就是一妥妥的专业画板呀…
华为平板matepad11使用技巧（华为平板matepad11功能）
回到宿舍之后，即便不用写论文，一些同学恐怕还是会用平板来看看资料和文章什么的，遇到有用的内容，直接用手写笔写写画画、加个注释记录下来，就像是真的在看纸质书一样，很有感觉。
华为平板matepad11使用技巧（华为平板matepad11功能）
文章看完了、笔记也做完了，想传到电脑上，大多数人的操作，肯定还是用微信、U盘来传。简单倒是简单，但有没有更快捷的方式？毕竟，用U盘传文件步骤多且不说、体积大的文件还得等好久，就……很麻烦了。
这一点，鸿蒙也有“好办法”。华为MateBook 14s 和华为MatePad 11 的连接，除了刚才提到的扩展和镜像两种协同，还有个共享模式；一旦连接切换成共享，那两台设备上的文件就可以随意移动，就像是在一台设备内一样。
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操作也极其方便，一步到位。看到没？轻轻一拖，刚刚的文档就从平板传到笔记本上了，比起传统的文件传输方式，简直不要太方便。
不仅仅是文档，图片、视频、音频类的文件同样支持拖拽，将笔记本上的电影拖拽到华为MatePad 11 上，就可以直接躺在床上看电影了，懒人狂喜。
华为平板matepad11使用技巧（华为平板matepad11功能）
另外，共享模式下，华为MatePad 11 也能使用笔记本的键盘、触摸板或者鼠标，如果你没有买平板专属的键盘，也可以用华为MateBook 14s 的键盘在平板上打字、回复消息啥的，不但好用、还省钱。
华为平板matepad11使用技巧（华为平板matepad11功能）
到这里，你应该能发现… 有了鸿蒙的多设备协同能力，华为MatePad 11 就不再是单纯的平板，而是能和电脑形成了一个整体，它可以是电脑的副屏、也能变身一台好用又高效的手写板，看资料也好、画画也好，都更高效。
华为平板matepad11使用技巧（华为平板matepad11功能）
不知道果酱推荐的这款华为MatePad 11，有没有让你心动呢？希望你有了它之后，不管是现在的学习、还是日后的工作，包括平时的娱乐，都能更方便、没有烦恼。
1、准备阶段：苹果洗净去皮去芯切小块泡淡盐水20分钟后捞起沥干；玻璃瓶洗净烘干待用；
2、研制过程：将苹果块放入锅中，加入细砂糖混合均匀，腌制1小时析出果胶；
3、上火熬制：加入冰糖，中火煮至不断冒泡时转小火，撇去浮沫，不断从锅底均匀搅拌，柠檬切半去籽挤汁加入锅中，熬制粘稠状即可；
4、装瓶保存：趁热将果酱装入玻璃瓶中，密封后倒扣放置即可，随时享用。
当水份越来越少时，更要不停的搅拌，大块的苹果也会跟着越来越软烂、粘稠熬至几乎看不到水份时，锅内不停的咕嘟咕嘟冒着小泡泡时，加入一大勺吉利丁粉拌匀即可
没有面包机的贫民窟女孩——将苹果倒入无水干净的锅中，加入150g左右的冰糖，熬制40——60分钟左右，熬出粘稠质感。
我们将苹果切成小丁，放入一个干净的碗中，用出你的洪荒之力把它们的汁水给挤出来，然后在把苹果丁搅拌均匀，让每一个都均匀的沾上柠檬汁苹果洗干净削皮，有料里机可以切块用料理机打碎，然后上锅熬，可以用冰糖和白糖小火慢熬，有糖桂花可以放点增香。
我是用平时擦土豆丝的东东先把苹果擦成丝，然后用刀切碎，事实上还不够碎，不过最终成果证明不影响口感中火煮至苹果呈透明状，并溢出甜甜的香味时，放入余下的1/2白糖，挤入柠檬汁。将苹果压成泥，煮至果酱有光泽，呈浓稠状时，离火，晾5分钟。苹果和山楂洗干净，去掉里面的核，苹果切成快和山楂一块放到锅里再放适量的水，放到火上煮烂后放点冰糖，放到一个盆里盖好盖子，随时都可以吃。
实际上如今许多 的人都明白该如何去享有自身的日常生活，终究如今早已是二十一世纪了，不论是物质还是精神层面都获得了一定的提升的，许多 的人都很喜欢吃苹果酱，可是却不知道该如何去做，下边我们就一起来了解一下苹果酱做法。
做法：
原材料
苹果200克，白砂糖60克（白砂糖量控制在削皮和芯之后的苹果的三分之一上下），食盐水适当。
作法一伸缩编写本段
1、苹果去皮去芯，对割成八块，浸于食盐水中。
2、放进锅中，撒白砂糖的一半于苹果上，加小量的水，以低火煮，去白沫子。
3、煮至苹果呈半透明，并外溢甜滋滋香气时，拌入剩下的白砂糖，调节清甜味。
4、苹果酱凸显光泽度，呈融合状时，就可以装进用开水消毒杀菌过的广口瓶子中（趁着热装罐）。
作法二
1、将苹果清洗，削皮和芯，切割成一小块或片状，侵泡于盐水中10-15分钟。
2、拿出小火锅，放进不久侵泡好的苹果，撒进一半量的白糖，再倒进少量冷水，用低火煮至苹果酥烂，呈全透明状，正中间别忘记常常拌和一下。冷水能够依据熬煮的状况随时随地加上。
3、苹果煮好后稍微晾凉，放进搅拌器，搅拌成效泥、苹果酱状。
4、再将打好的苹果酱倒回锅中，添加另一半的白糖，再依据状况、口感挤一些柠檬水，再次边煮边拌和。以后放进干净的器皿，放进冷藏室大半天至1天就可以。 小提示
最好是选择稍微嫌酸的苹果作原材料。若苹果没有怪味，可适度添加柠檬水以提升怪味。
以上本文就为大伙儿详解了一下苹果酱做法，坚信大伙儿早已拥有一个较为基本的了解了，因此自身假如要想去制做苹果酱的情况下，就可以试一下那样的方式，毫无疑问要比外边买的干净。
药学毕业论文开题报告篇3
题 目 名 称： 番泻叶对小鼠尿量的影响
研究现状：
一、普鲁兰酶
普鲁兰酶(Pullulanase，EC.3. 2. 1. 41)是一种能够专一性切开支链淀粉分支点中的α-1.6糖苷键，从而剪下整个侧枝，形成直链淀粉的脱支酶。普鲁兰酶还可以分解普鲁兰多糖，普鲁兰酶来源于微生物，R-酶则来源于植物。普鲁兰酶最初是由Bender和Wallenfels于1961年通过产气气杆菌Aerobacter. aerogenes}(典型菌为肺炎克雷伯氏杆Klebsiella.pneumoniae)发酵获得，他们报道了该酶良好的酶学性能。之后，各国的科研人员经过广泛深入研究，从不同的地区、微生物中获得该酶，掀起了开发普鲁兰酶的高潮。
在淀粉加工工业中，α淀粉酶最为常用，它的功能是水解淀粉的α-1,4糖苷键，单独用它时，产物中含有大量分支结构的糊精，其中就含有大量的α-1,6糖苷键。假如不把淀粉的α-1,6糖苷键彻底分解的话，势必会造成很大的浪费。自然界中，存在有能分解淀粉的α-1,6糖苷键的酶，通称为解支酶。如寡α-1,6葡萄糖苷酶( E.C3.2.1.68, Oligo-l,6-glucosidase )，普鲁兰酶(E.C3.2.1.41Pullulanase )，异淀粉酶( E.C3.2.1.68, Isoamylose )，支链淀粉一6-葡聚糖酶( E.C3.2.1.69,Amylopectin-6-gluanohydrase )，其中普鲁兰酶要求的底物分子结构最小，故而可以将最小单位的支链分解，导致可以最大限度的利用淀粉，所以在淀粉加工工业中有着重要的用途和良好的市场前景。故而许多国家都争相开发，但是到现在为止，只有丹麦的NOVO公司具有普鲁兰酶的生产能力。我国只有向其进口，但是其价格昂贵，限制了普鲁兰酶在我国的应用。其实，我国早在七十年代就开发普鲁兰酶的产生菌，但是该菌的酶学性质不适合生产，至今我国在普鲁兰酶的国产化方面还没有报道。
在淀粉的加工行业上，对普鲁兰酶的酶学性质的要求是耐酸耐热，其原因是因为通常使用外加酶化法，由于所用酶类的限制，普鲁兰酶的添加可以在两步反应的任何一步，但必须满足上述的反应的条件。因此所开发的普鲁兰酶的酶学性质必须满足现有的酶法水解制糖的条件，也就是耐酸耐热。
二、普鲁兰酶的研究现状
1.产普鲁兰酶的微生物
普鲁兰酶最初是由Bender和Wallenfels于1961年通过产气杆菌(Aerobacter
aerogenes)发酵获得。他们报道了该酶的良好性能之后，各国的科研人员经过广泛深入的研究，从不同的地区的微生物中获得该酶，掀起了开发普鲁兰酶的高潮。但是迄今为止，尽管发现许多微生物能够产普鲁兰酶，但是由于当今工业生产条件(酸性，温度)，大多数微生物所产的普鲁兰酶并无商业价值。以下便介绍一下普鲁兰酶的生产菌种。
1.1蜡状芽抱杆菌覃状变种(Bacillus cereus Var.mycodes)
由日本的ToshiyukiTakasaki于1975年发现。该菌同时产生两种淀粉酶:β-淀粉酶和普鲁兰酶。最佳作用条件为pH6～6.5，温度50℃，最大转化率(淀粉水解产生麦芽糖)大约为95%.酶学研究中发现，此酶在pH5，温度60℃依然保持大部分活性，该菌的营养细胞呈棒杆状，聚集成长短不等紊乱链状，无运动性，格兰氏阳性，产芽抱时细胞无明显膨胀。该菌最适生长温度30℃～37℃ ,最高生长温度在41℃～45℃，可以利用葡萄糖，甘露糖，麦芽糖，海藻糖，淀粉和糖原。
1.2嗜酸性分解普鲁兰多糖芽抱杆菌(BaciIluS.Acidopullulyticus)
上世纪八十年代初，丹麦Novo公司获得此菌，此菌所生产的普鲁兰酶耐热
(60℃)，耐酸(pH4.5)。该公司经过投入巨资开发研究，1983年Nov。公司在日本和欧洲市场同时商业化销售，商品名Prornozyme。如今，它是应用最广，产量最大的普鲁兰酶。Bacillus.Acidopullrrlyticus呈棒状，深层发酵几小时后，可观察到类原生质体的膨胀细胞，较稳定，饱子呈圆柱体或椭圆体。格兰氏反应阳性，37℃生长良好，45℃以上和pI-1高于6.5以上不长，在以普鲁兰糖为碳源的培养基((pH4.8 ～5.2)上生长良好。
1.3枯草芽饱杆菌(Bacillus subtilis)
1986年，日本的Yushiyuki Takasaki报道了一株能产生耐热耐酸普鲁兰酶的菌种，被命名为Bacillus subtilis TU。此菌种所产生的酶为普鲁兰酶和淀粉酶的混合物，可水解淀粉为麦芽三糖和麦芽搪.水解普鲁兰糖为麦芽三糖，其中普鲁兰酶最佳作用pH为7.0～7.5，但在pH5.0时亦有约50%的酶活，此普鲁兰酶最佳作用温度60℃。
1.4耐热产硫梭菌(Clostridum Themosulfurogenes)
1987年.德国的E.madi等报道了一株能同时产a淀粉酶、普鲁兰酶和葡萄糖淀粉酶的菌种:耐热产硫梭菌。该菌种所产普鲁兰酶有较广的温度适应范围(40℃～85℃)，在pH4.5～6.0有较高的活性，在如此广的范围内都有较强活力无疑将扩大该普鲁兰酶的应用领域.
1.5 Bacillusnaganoensis,Bacillus deramificans,Bacillus.Acidopullulyticus
上世纪九十年代，Deweer发现了普鲁兰酶产生菌Bacillus naganoensis;Tomimura筛选出Bacillus deramifrcans。这两株菌所产的普鲁兰酶的酶学性质与Bacillus. Acidopullulyticus的酶学性质相似。这两株菌都是中度嗜酸菌，在pH6.5以上就不生长，温度超过45℃以上同样也不生长。这两株普鲁兰酶产生菌的发现，进一步拓宽了普鲁兰酶的应用。
1.6产普鲁兰酶的高温菌菌种
自上世纪八十年代以来，人们逐渐意识到在通常的自然条件下，很难筛选得到极端耐热的普鲁兰酶生产菌种，于是各国的科学家便把目光转移到温泉嗜高温细菌的筛选，而且现在已经取得较多的成果。Bacillus如vorcaldarius所产普鲁兰酶的最适温度和pH分别是75～85℃, pH6.3, Thermotoga maritime的最适温度和pH分别是90℃, pH6.0, Thermurs caldopHilus的最适温度和pH分别是75℃,pH5.5, Fenidobacterion pernnavoran最适温度和pH分别是80～85℃, pH6.0o
2.普鲁兰酶的分子结构
至今为止，许多普鲁兰酶的基因己经被克隆，但是还没有见到任何有关普鲁兰酶结构的报道，但是在根据序列相似性对糖普键水解酶的分类，普鲁兰酶属于第13家族，α淀粉酶家族，这个家族中包含了30多种酶，可以分为水解酶，转移酶。异构酶三大类。这些酶能够水解和合成α～1.4,α～1.6,α～1.2,α～1.3,α～1.5,α～1.1糖苷键。其中很多酶的结构已经被报道，它们都采取了(β/α)8的结构，通过生物信息学的研究，这个家族的蛋白都有一个共同的结构，酶的活性中心都是(β/α)8折叠筒的结构，命名为结构域A。第13家族的大多数酶还具有结构域B，它是位于(β/α)8折叠筒中，第三个β片层与第三个α螺旋之间的一段序列，其特点是结构和长度差异较大，推测其功能是与底物的结合有关。在紧接着(β/α)8折叠筒后，还有C结构域，紧接C结构域，部分家族成员还有结构域D。
3.普鲁兰酶的应用
普鲁兰酶，在食品工业中是一种用途广泛的酶制剂和加工助剂。它能专一性分解淀粉中的支链淀粉和糖原分子及其衍生的低聚糖分支中的α～l, 6糖苷键，使分支结构断裂，形成长短不一的直链淀粉。因此，将该酶与 其它 淀粉酶配合使用时，可使淀粉糖化完全。近年来，普鲁兰酶己作为淀粉酶类中的一个新酶种，应用于淀粉为原料的食品等工业部门，在食品工业中有如下几方面的作用:
3.1单独使用普鲁兰酶，使支链淀粉变为直链淀粉
直链淀粉具有凝结成块，易形成结构稳定的凝胶的特性，因此，可作为强韧的食品包装薄膜。这种薄膜对氧和油脂有良好的隔绝性，又因涂布开展性好，故适合于作为食品的保护层。它还适合于淀粉软糖制造，也可用作果酱增稠剂，用于装油脂含量高的食品，以防止油的渗出以及肉食品加工。近年来在食品工业中提倡使用可被生物降解的薄膜，直链淀粉在这些方面具有较大的发展前途。豆类直链淀粉含量较高，因此绿豆淀粉制成的粉丝韧性比其它淀粉好，如果用普鲁兰酶处理谷物淀粉，再制成直链淀粉后，可以制成高质量的粉丝。一般谷物淀粉中，直链淀粉含量仅占20%，支链淀粉含量约为80%。工业上每生产1吨直链淀粉就有4吨副产品的支链淀粉。美国虽然通过遗传育种的方法.得到含直链淀粉60%玉米新品种，但不大适于大量生产。国外已采用普鲁兰酶改变淀粉结构，可使支链淀粉变为直链淀粉。据报道，采用此法收率可达100%.制造直链淀粉的方法为，先采用普鲁兰酶分解经液化的分支部分，使其转变为直链淀粉，并以丁醇或缓慢冷却法沉淀淀粉。再回收含少量水分的晶型沉淀物，最后通过低温喷雾干燥法制成粉状的直链淀粉。
3.2普鲁兰酶与β～淀粉酶配合使用生产麦芽搪
饴糖是我国传统的淀粉糖产品，其中所含部分麦芽糖，广泛用于糖果、糕点等食品工业。目前生产方法是以α～淀粉酶进行液化，再用β～淀粉酶水解支链淀粉，这样只能水解侧链部分。接近交叉地位的α～1.6糖苷键时，水解反应停止。但如果使用普鲁兰酶共同水解，便能使分支断裂，提高淀粉酶水解程度，降低了β极限糊精的含量，大大提高了麦芽糖的产率，有利于生产麦芽搪浆。目前对加普鲁兰酶进行糖化己作了较大规模的试验。
试验条件为。每批投料量约为900公斤碎米，粉浆浓度为15～16Be°数皮用量1.5%(对碎米计)，β～淀粉酶活性2,000单位/克以上，pH5.8;普鲁兰酶活性45,000～55,0 00单位/克，系由产气气杆菌生产，每批用量为1公斤。试验结果表明，加入普鲁兰酶糖化的试验糖与对照糖品相比，还原糖平均增加14.8，麦芽糖含量平均增加了45.6，糊精含量平均减少了26.7高浓度麦芽糖浆较之高浓度葡萄搪浆，具有不易结晶，吸湿性小的特点，所以高浓度麦芽糖浆在食品工业中有着广泛的用途。采用普鲁兰酶与p一淀粉酶配合使用，成本低廉，麦芽糖收率达到70%左右，其至更高。
3.3用于啤酒外加酶法糖化
啤酒生产中麦芽，既是酿造啤酒的主要原料，也为酿造过程提供了丰富的酶源。在啤酒酿造的糖化过程中，麦芽中分解淀粉的主要酶是α～淀粉酶、β～淀粉酶和分解淀粉α～1. 6糖瞥键的R一酶(植物普鲁兰酶或植物茁霉多糖酶)。β～淀粉酶与另两种淀粉酶协同作用，可使淀粉分解成麦芽糖(也包括少量的麦芽三糖和极少量的葡萄糖)和低分子糊精。使麦芽汁有比较理想的糖类组成。在工业生产中为了节约麦芽用量，采用所谓外加酶法糖化，即在减少麦芽用量的前提下，增加淀粉质辅助原料的比率，并加入适当种类的酶制剂进行搪化。要使大麦及其它辅助原料糖化完全，需要外加a一淀粉酶和分解α～1.6糖苷键的普鲁兰酶制剂等。单独使用a一淀粉酶时产生麦芽糖和麦芽三搪是很不完全的。假如分解淀粉α～1.6糖苷键的酶活性不足，淀粉分解就不完全，其结果是可发酵性糖含量低，制成的啤酒发酵度达不到要求。若采用能分解α～1.4和α～1.6糖苷键的糖化型淀粉酶，则其反应产物为葡萄糖，容易使酒味淡薄。采用普鲁兰酶与α～淀粉酶协同，效果良好，其分解产物主要是麦芽糖和少量的麦芽多糖。采用外加酶法糖化时，加入酶制剂的用量为:淀粉酶6～7单位/克大麦及大米:蛋白酶，60-80单位/克，并配合以菠萝蛋白酶10ppm，普鲁兰酶50单位/克大麦。以上三种酶制剂均添加于糖化或酒化开始。
总之，普鲁兰酶无论作为酶制剂和食品工业的加工助剂均有广阔的发展前途。
研究目的和意义：
酶制剂工业是上世纪七十年代就己经形成的一个重要的产业，目前世界酶制剂总产值达100亿美元，我国的产值约为100亿人民币，并且随着其应用领域的不断扩大以及新酶种的开发，这一市场正在迅猛发展。但是全球酶制剂产业几乎被几家外国公司所垄断，其中丹麦的NOVO公司几乎占全球总销售额的一半。本研究对普鲁兰酶的开发，对酶制剂产业的发展有重要的意义。
其次我国自从七十年代开始便对普鲁兰酶进行研究开发，但是所开发得到的普鲁兰酶，既不耐热也不耐酸，这就使其在工业化应用中受到了局限。为了改变我国对进口产品的依赖，填补我国这一领域的空白，寻找一条国产化的道路，本研究的目的是利用自然微生物资源，普鲁兰酶，提高我国淀粉原料的利用率，从而提高整个淀粉加工行业的生产率，这对我国淀粉加工产业的意义是不言而喻的。
研究内容(内容、结构框架以及重点、难点)：
一.普鲁兰酶产生菌的筛选
(1)样品的采集;
(2)菌种初筛;
(3)菌种复筛;
(4)菌种保藏方法;
(5)酶活力测定方法的建立。
二.产普鲁兰酶菌株的产酶条件的研究
(1)碳源，氮源对发酵产酶的影响;
(2)初始PH对发酵产酶的影响;
(3)接种量对发酵产酶的影响;
(4)发酵温度对产酶的影响;
(5)金属离子对产酶的影响。
重点或关键技术：
(1)纯菌株的分离;
(2)菌株的鉴定方法的选择。
研究方法、手段：
一.普鲁兰酶产生菌的筛选
(1)样品的采集：选择适合产生的地点(面粉厂.菜地.果园等)采集土样
(2)菌种初筛：在采集的土样用无菌水稀释后，在含有淀粉类的培养基中做平板涂步， 37℃培养48h后，用碘液进行显色反应，将有淀粉酶产生的菌落接于斜面中保存。
(3)菌种复筛：将前期分离的能产生淀粉酶的菌株涂步于普鲁兰糖平板上，37℃培养48h后用95%乙醇进行透明圈实验。有透明圈产生说明菌株产生普鲁兰酶，将产生透明圈的菌落挑于斜面培养基培养。
(4)菌种保藏方法： 采用4℃低温保藏。
(5)酶活力测定方法的建立：采用发酵培养液经过离心后利用DNS显色法 520nm测定吸光值，测定标准葡萄糖标准曲线，利用标准曲线计算普鲁兰酶酶活大小。
二.产普鲁兰酶菌株的产酶条件的研究
(1)碳源，氮源对发酵产酶的影响：采用不同碳源，氮源培养基培养一段时间，测定酶活力。(其他条件相同：接种量，装瓶量，初始PH值，转速，培养时间。)
(2)初始PH对发酵产酶的影响：采用相同发酵培养基，在不同初始PH下接种等量种子液。在相同条件下培养，测定发酵液的酶活。(其他条件相同：接种量，装瓶量，转速，最佳培养温度，最佳培养时间。)
(3)接种量对发酵产酶的影响：在发酵培养基中分别接入2%，4%，6%，8%，
10%，14%，18%的种子培养液于最佳碳源，氮源，最佳初始PH的培养基中，在相同条件下培养，分别检测酶活。(采用以上确定的最佳碳源，氮源，最佳初始PH。)
(4)发酵温度对产酶的影响：采用相同培养基，在不同温度下(25℃，30℃，35℃，40℃，45℃)培养一定时间，测定酶活力。
(5)金属离子对产酶的影响：在基础培养基中加入少量不同金属离子，发酵后测酶活。(金属离子有： 锰离子，钙离子，锌离子，镁离子，铁离子，铜离子。)
研究进度
：完成项目总体进度30%，样品土样的采集及前期的准备工作,菌株的初筛，包括(样品土样原液的涂步培养及摇床培养，产支链淀粉酶菌株的挑选及斜面培养)。
：完成项目总体进度50%,菌株的复筛，包括(产普鲁兰酶菌株的筛选及斜面培养),葡萄糖标准曲线的测定,酶活测定方法的建立,并以酶活大小对菌株进行再次筛选。
：完成项目总体进度80%,产酶条件的研究。包括：碳源，氮源，初始PH值，接种量，发酵温度，金属离子。并通过各中单因素试验确定发酵培养基的最佳碳源，氮源，初始PH值，接种量，发酵温度，金属离子。
2009、4—2009、5 ：完成项目总体进度100%,课题总结，撰写论文。
文献综述(包括：国内外研究理论、研究方法、进展情况、存在问题、参考依据等)
自从1961年Bender H.等人在研究一株产气气杆菌Aerobacter aerogenes(典型菌为肺炎克雷伯氏杆菌Klebsiella.pneumoniae)时首次发现普鲁兰酶后，国际上对产生这种酶的微生物进行了广泛研究，发现许多微生物可以产生此酶，并筛选出一些适用于工业化生产的优良菌株。随着该酶的应用发展，对耐热性普鲁兰酶的研究也逐渐增多，已成功克隆并表达了该酶的基因。国内1976年开始对一株产气气杆菌(Aerobacteraerogenes 10016)的普鲁兰酶进行研究，对该菌株的产酶条件、酶的分离提取及酶学性质作了报道，并研究了该酶的食品级提取技术。此外，陈朝银、刘涛等人从云南温泉水样中筛选到一株产普鲁兰酶高温栖热菌菌株，通过诱导等实验将该酶的酶活从0.069u/mL提高到170u/mL，酶产量提高了近2500倍左右，酶的最适作用温度及pH分别是75℃和4.5，具有一定的耐热和耐酸特性。
陈金全等从温泉水样中筛选到一株产耐热耐酸普鲁兰酶的野生菌株，并根据形态、生理生化特征、细胞化学组分分析及16SrDNA序列比对、基因组DNA的G+C摩尔百分含量、同源性比对等实验，鉴定其为脂环酸芽抱杆菌属(Alicyclobacillus)的一个新种，所产酶最适作用温度为60℃，最适pH值4.0，具有较好的耐热耐酸特性。杨云娟等利用毕赤酵母成功构建了普鲁兰酶表达量较高的基因工程菌，摇瓶发酵酶活可达350.8U/mL，最佳发酵条件下产量可达504.5-510.1U/mL .酶的最适作用温度为600C，最适pH值4.5，具有较好的耐热耐酸性。目前我国仍没有具备独立生产普鲁兰酶能力的厂商，要实现低成本、国产化的生产，还有很长的路要走。
技术应用于耐热脱支酶的研究，使耐热异淀粉酶的研究有了很大发展。Coleman等人将嗜热厌氧菌T. brockii普鲁兰酶基因克隆到B.subtilis中得到的克隆子分泌的普鲁兰酶数量高于出发菌株，Okada等人将Bacillus Steanther, onhiu:中编码热稳定异淀粉酶的基因克隆到B.subtilu:中，得到的转化菌株其异淀粉酶能在60 ℃稳定15分钟。Burchadf将。ostridium thermosulf urogenes DSM38%的嗜热异淀粉酶基因克隆并在E.coli中表达，所得酶的最适pH和最适温度与出发菌相同，而且在高温下仍能保持活性.Antranikiam等人将Pyrococcus舟riousous的异淀粉酶基因克隆到E.coli中并分离得到了酶蛋白。尽管如此，目前尚未有已将转基因的耐热性异淀粉酶工程菌应用到工业生产中的报道。众所周知，利用物理和化学诱变剂单独或复合处理微生物细胞是选育高产变种菌株行之有效的经典方法，它在为培育多种抗生素、氨基酸、核苷酸激酶(尤其是蛋白酶和淀粉酶)的高产变种菌株方面曾经起过极为重要的作用，至今仍然是方便易行和行之有效的方法之一。
主要参考文献：
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