检测伪狂犬病毒的论文

给你贴一个吧，不知道你能不能用：当前猪高热复合症的治疗方法及预防对策近几年，猪的高烧不退，即所谓的猪“高热复合症”发生较多，给养猪业带来严重的损失，以致许多猪场倒闭，许多农户不敢养猪。猪高热复合症是由多种病原体引起的一种以病猪持续高温、食欲废绝、皮肤发红为主要特征的复合性传染病，主要有猪附红细胞体病、猪伪狂犬病、非典型性猪瘟、蓝耳病、圆环病毒病、传染性胸膜肺炎等引起，多为混合感染或继发感染。该病自去年六月份发病以来，发病状况及发病原因与往年不同，出现了一些新特点，因而在诊断和治疗我们研究所总结了一些切实可行的治疗方法及预防对策，现介绍如下，供同行参考：1 主要临床症状病猪体温升高40OC－42OC，食欲减退或废绝，精神沉郁，淌眼屎，卧地不起，运动失调，呼吸急促，鼻流清涕，粪便干硬，小便发黄，全身皮肤发红，或腹部、耳尖发绀；或在耳根、腹部、四肢内侧等处出现紫红色血点；或眼圈青紫，肛门周围青紫。个别猪发病数天后皮肤黄染或苍白,少部分猪毛孔针尖状出血。有的猪腹泻，发抖、消瘦。四肢、眼睑周围水肿，体表淋巴结肿大。公猪不育，母猪不易受孕，怀孕猪易早产，死胎、木乃伊胎。2 剖检变化 从对病猪剖检情况来看，病猪的病变以肺部变化为主，肺脏有的苍白，有的有出血点、出血斑；有的肺脏水肿，呈斑驳状到褐色大理石样病变，有的实质变性，如海绵状，可在水中飘浮；有的似水煮状；更有很多病猪的肺脏多处部位肉变，特别是尖叶、心叶和膈叶的前缘，，部分病变肺叶支气管内充满脓性分泌物；气管内有较多的泡沫，部分气管环黏膜充血。心肌有出血点，心包积液，为淡黄色液体。肝脏有的灰白色；有的有坏死灶；有的有出血点，有的肿大变性呈黄棕色，表面有黄色条纹状或灰白色坏死灶。肾脏肿大、呈褐色或土黄色，质地较脆，有淤血现象；有的有大量针尖状出血点；有的表现典型的大理石样花纹；有的有坏死点、坏死斑。脾脏肿大、边缘有多处梗死灶。胃充血、出血；部分猪胃底粘膜出血、坏死、溃疡，回盲肠有大量溃疡灶。肠出血严重，特别是小肠和结肠多数有坏死灶。淋巴结广泛肿大，特别是腹股沟淋巴结和肺门淋巴结。部分病猪喉头粘膜水肿、出血，猪膀胱粘膜出血。个别患猪表现多发性浆液纤维素性胸膜炎和腹膜炎。3 实验室检查情况 猪瘟、猪流感和饲料霉菌毒素检测采用ELISA方法检测，猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、伪狂犬病毒（PRV）、猪圆环病毒（PCV-Ⅱ）用RT-PCR（聚合酶链式反应）方法检测，分离到的细菌用生化试验鉴定，弓形体、附红小体的检测分别用脾触片和血涂片进行检查。从实验室检查情况来看，通过对部分发病猪场进行的实验室检测结果发现，猪高热复合症今年的发病状况与往年（2001年-2005年）不同，2005年前在临床中主要以附红细胞体感染为主，少见附红细胞体与蓝耳病、伪狂犬、链球菌等病混合感染；而今年六月份以后，蓝耳病、伪狂犬、圆环病毒的发病率明显高于去年。病毒以猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪圆环病毒（PCV-II）、猪流感病毒（SIV）、伪狂犬病毒（PRV）猪瘟病毒（HC）、为主，细菌主要为猪胸膜肺炎放线杆菌（APP）、副猪嗜血杆菌病（HP）、猪链球菌属2型（SS-II）、多杀性巴氏杆菌（PM）等。

谢谢 ,不过我还有点不明白 。你说的gE（gI），是不是就是 我们做的 那个测野毒的gpi。 gE缺失的伪狂犬疫苗，能不能产生gpi抗体 测抗体的试剂合结果算得的S/N值 只能判断 阴 性 或则 阳性 。 根据S/N值怎么来判断 抗体的高低。在打过 疫苗的样品阳性中 ，试剂盒 里《0.6为阳性 那么多少才算效果好 [ ]

介绍伪狂犬病(Pseudorabies，PR又名Aujeszky's disease，AD)是由伪狂犬病毒(Pseudorabies Virus，PRV)引起的一种传染病。该病最早发现于美国，后来由匈牙利科学家首先分离出病毒。20世纪中期，PR在东欧及巴尔干半岛的国家流行较广， 60年代之前，猪被感染后其症状比较温和，在养猪业中未造成重大经济损失。编辑本段病原1.1 病原及其感染特点 PRV属疱诊病毒科疱疹病毒甲亚科，暂定水痘病毒属，病毒粒子呈椭圆或圆形，无囊膜粒子直径为110-150nm；有囊膜的成熟病毒粒子直径180nm。囊膜表面有呈放射排列的纤突，长8-1Onm，DNA分子量为87×l06。 PRV是疱疹病毒中抵抗力较强的一种。在物体表面和液体中可存活7d。在pH4-9之间保持稳定。腐败条件下，病料中的病毒经lld失去感染力。PRV对乙醚、氯仿等脂溶剂，福尔马林和紫外线照射等敏感。5%石碳酸经2min灭活，0.5%-1%氢氧化钠使其灭活。对热的抵抗力较强，55-60℃经30-50min才能灭活，80℃经3min灭活。 迄今为止，还没有发现抗原性不同的PRV毒株。在病毒与宿主的相互作用中，病毒的糖蛋白起着重要作用，现已发现在PRV至少有gⅠ、gⅡ、gⅢ、gp50、gp63、gX、gH、gL、gM、gN和gK等11种糖蛋白。 1.2 感染特点 1.2.1 潜伏感染 被感染猪不表现临床症状，但感染性病毒却能在猪体内长期以潜伏状态存在，也分离不到病毒，但用聚合酶探针方法可查出病毒基因组DNA的存在，在外界不良环境刺激等造成的免疫力减弱时，潜伏状态的病毒可转化为具有感染性的病毒。 1.2 隐性感染 在猪群使用疫苗接种或自然感染部分少量病毒后，该猪只得到部分免疫，可发生隐性感染猪和表现为亚临床症状的猪，这种带毒猪排毒可持续一年以上。编辑本段流行病学2.1 易感动物 PRV是感染动物种类多和致病性强的一种病毒。除各种年龄的猪、牛都易感外，在自然条件下使羊、犬、猫、兔、鼠、水貂、狐等动物感染发病。实验动物中家兔、豚鼠、小鼠都易感。其中以家兔最敏感。 2.2 传播形式 2.2.1 垂直传播 PRV可通过胎盘而传递给子体，而母体免疫球蛋白却不能，所以对胎儿的感染是致命的。 2.2.2 媒体传播 带有病毒的空气飞沫核可随风传到9km或更远的地方，使健康猪群受到感染。被污染的饲料、或带病毒的鼠、羊等动物也可传播。编辑本段临床症状病猪的临床症状和病程随年龄不同而有很大差异。哺乳仔猪最为敏感，15日龄以内的仔猪常表现为最急性型，病程不超过72h，死亡率100%，主要表现为体温升高、拉稀、发抖、运动不协调、流涎、颈部肌肉僵硬、四肢划水样运动，最后昏迷死亡。育肥猪则大多数伴有体温升高，呼吸困难，一般不发生死亡，耐过后呈长朗隐性感染带毒或排毒。成年猪常不呈现可见临床症状或仅表现为轻微体温升高，一般不发生死亡。母猪妊娠初期，可在感染后的20天左右发生流产，在妊娠后期，经常发生死胎和木乃伊，或者产出弱胎和死胎。 猪伪狂犬病表现有四大症状： (1)妊娠母猪发生流产、产死胎、木乃伊胎，其中以产死胎为主。 (2)伪狂犬病引起新生仔猪大量死亡，主要表现在刚生下的仔猪第1天还很好，从第2天开始发病，3～5天内是死亡高峰期，有的整窝死亡。死亡初生仔猪的日龄已观察到19日龄。发病仔猪表现出高热、食欲废绝、明显的神经症状、昏睡、呜叫、流涎、呕吐、拉稀、抑郁震颤，继而出现运动失调、间歇性抽搐、昏迷以至衰竭死亡，一旦发病，1～2天内死亡。15日龄以内仔猪死亡率可高达100％。剖检主要是肾脏布满针尖样出血点，有时见到肺水肿、脑膜表面充血、出血。 (3)伪狂犬病病毒引起断奶仔猪发病死亡，发病率在20％～40％，死亡率10％～20％，主要表现为神经症状、拉稀、呕吐等。 (4)种猪不育症。母猪不发情、配不上种，返情率高达90％，有反复配种数次都屡配不上，耽误了整个配种期。此外公猪感染伪狂犬病病毒后，表现不育、睾丸肿胀，萎缩，丧失种用能力。成年猪仅表现增重减慢等轻微温和症状。 2．综合防制 目前尚无治疗办法，但高免血清被动免疫适用于最初感染猪群中的哺乳仔猪，母猪的抗体通过初乳传给仔猪，母体源体可持续大约4～6周。母体被动免疫可以保护仔猪的致命感染。已发病或检查出伪狂犬病病毒感染阳性的猪场，建议所有的猪都应进行免疫。 (1)灭活疫苗 种猪(包括公猪)第1次注射后，间隔4～6周后加强免疫一次，以后每6个月注射一次，产前一个月左右加强免疫一次，可获得非常好的免疫效果，能将哺乳仔猪保护到断奶。留作种用的断奶仔猪在断奶时注射一次，间隔4～6周后，加强免疫一次，以后按种猪免疫程序进行。育肥用的断奶仔猪在断奶时注射一次，直到出栏。 (2)弱毒疫苗 种猪第1次注射后，间隔4～6周加强免疫一次，以后每隔4个月注射一次。育肥猪断奶时注射一次，直到出栏。 (1)妊娠母猪发生流产、产死胎、木乃伊胎，其中以产死胎为主。 (2)伪狂犬病引起新生仔猪大量死亡，主要表现在刚生下的仔猪第1天还很好，从第2天开始发病，3～5天内是死亡高峰期，有的整窝死亡。死亡初生仔猪的日龄已观察到19日龄。发病仔猪表现出高热、食欲废绝、明显的神经症状、昏睡、呜叫、流涎、呕吐、拉稀、抑郁震颤，继而出现运动失调、间歇性抽搐、昏迷以至衰竭死亡，一旦发病，1～2天内死亡。15日龄以内仔猪死亡率可高达100％。剖检主要是肾脏布满针尖样出血点，有时见到肺水肿、脑膜表面充血、出血。 (3)伪狂犬病病毒引起断奶仔猪发病死亡，发病率在20％～40％，死亡率10％～20％，主要表现为神经症状、拉稀、呕吐等。 (4)种猪不育症。母猪不发情、配不上种，返情率高达90％，有反复配种数次都屡配不上，耽误了整个配种期。此外公猪感染伪狂犬病病毒后，表现不育、睾丸肿胀，萎缩，丧失种用能力。成年猪仅表现增重减慢等轻微温和症状。编辑本段诊断4.1 病毒分离和鉴定 采取脑组织、扁桃体，用PBS制成10%悬液或鼻咽洗液接种猪、牛肾细胞或鸡胚成纤维细胞，于18-96h出现病变，有病变的细胞用H·E染色，镜检可看到嗜酸性核内包涵体。 4.2 兔体接种试验 上述悬液经2000r/min离心1Omin，取上清液1~2ml经腹侧皮下或肌肉接种家兔，通常在36-48h后注射部位出现剧痒，病兔啃咬注射部位皮肤，皮肤脱毛、破皮和出血，继之四肢麻痹，体温下降，卧地不起，最后角弓反张，抽搐死亡。 4.3 血清学诊断 4.3.1 中和试验(NT) NT有较高灵敏度，是一种常用的诊断方法。将标准病毒株与连续倍比稀释的等量血清混匀后，37℃中和lh，接种在96孔微量培养板上的单层猪肾继代细胞(PK-l5)或鸡胚成纤维细胞，置37℃，5%CO2培养观察CPE，以能完全中和试验病毒的血清最高稀释度的倒数为该血清的中和效价，中和效价大于或等于1:2的判为阳性。 4.3.2 酶联免疫吸附试验(ELISA) 程由铨等应用单克隆抗体介导的固相微球直接ELISA检测感染，小白鼠额下腺、耳下腺混合物、肝、脾、肺、肾等材料，PRV的阳性检出率为98%。黄骏明等用过氧化物酶标记的葡萄球菌蛋白A建立的Dot-ELISA对猪血清PRV抗体具有特异强、灵敏度高的优点，与血清中和试验比较，Dot-ELISA阳性检出率为28.19%(53/188)、NT阳性检出率为20.74%(39/188)。 4.3.3 免疫荧光抗体试验(FA) 程由铨等[10]建立了检测病料组织中PRV间接荧光抗体试验，并和病毒分离(VI)作了比较，对肺和扁桃体中PRV抗原检出率分别为FA86%和92%，V194%和88%。黄骏明等建立了直接FA技术检测PRV，对病猪活体取鼻咽试子涂片，对病死猪取扁桃体、三叉神经节、脑、脊髓和鼻粘膜涂片，检出率高达95%以上。 4.3.4 核酸探针检测技术 郭万栓等用斑点杂交法应用32P标记PRV全基因组DNA和重组质粒作探针检测细胞培养物中的PRV一DNA，均能检测lOpg的PRV一DNA，且有较高特异性。魏伟等用光敏生物素标记PRV特异性糖蛋白GP50克隆重组颗粒PUP作为探针，检测实验感染乳猪15头份，证明通过PCR和分子克隆技术制备的PRV特异性糖蛋白基因片段的光敏生物探针，能有效地用于检测伪狂犬病。 4.3.5 PCR技术 冉多良等，石建平等，周复春等，冉智光等先后应用PCR技术对PRV进行基因扩增，均获得了特异敏感的结果。编辑本段防治目前尚无治疗PR的有效药物。对PRV控制除常规隔离、消毒、控制人员流动以外，疫苗接种是防止PR发生流行的重要措施。Lens[3]报道用DNA重组技术研制的低毒力PR疫苗进行田间免疫，安全有效，应用该疫苗接种的猪再发生接独感染。目前国内主要应用灭活苗和弱毒苗预防PR，具有良好的免疫效果。灭活苗和弱毒苗只能降低接种猪的发病率和死亡率，但不能阻止带毒猪排毒。PR一旦传入猪场就很难根除，在发生过PR的猪场，停止使用疫苗后又会引起本病的发生。因此，在疫区进行疫苗接种外，非疫区应加强对引进猪的检疫，隔离饲养，搞好圈舍卫生，从而控制该病的发生和传播。从百度上查到的，呵呵。。。希望你满意