、评价药用植物种质优劣的标准、种的关系等4,。结果和结论:,,种质资源研究特别是种,因此需要投入更多力量加以研究。
药物开发
药用植物资源的开发是一项旨在防病治
病、提高人类健康水平的科学事业。近年来,随着人们生活水平的不断改善和全球范围“回归大自然”呼声的日益高涨,国内外出现了一个药用植物资源开发热。药用植物除被更有效的用作中药材或提供制药原料外,也被广泛用于保健食品、饮料、调味剂、香料、化妆品、植物性农药、禽畜用药等诸多新领域。这种令人鼓舞的形势给作为药材生产源头的药用植物种质资源的研究注入了巨大的活力,也提出了更高的要求。1 种质资源遗传多样性在药用植物开发中的重要意义
111 “药用植物种质资源”的概念
的“种质资源”通常是就某一具体物种而言的,
是包括栽培品种(类型)、野生种、近缘野生种和特殊遗传材料在内的所有可利用的遗传材料。种质资源研究的主要内容,是对作物品种(类型)进行的考察与收集、鉴定与评价、保存和应用以及遗传学基础、起源和演化的研究。其中种质资源的遗传多样性(geneticdiversity)研究,是当今种质资源研究的热点[1],是收集、保存、评价和利用作物品种的依据,也是研究作物起源、演化的基础。因此,药用植物种质资源遗传多样性的研究对药用植物开发具有十分重要的意义。112 种质资源遗传多样性是药用植物种质鉴定的基础
遗传多样性是种内所有生物个体全部基因和染色体变异的总和。种下的遗传分化即基因或染色体的变异有不同的表现形式,既有不同结构水平的遗传多样性:如生物体的形态结构、染色体的核型、DNA的碱基差异等,又有生理、生化、生长发育等不同功能上的遗传多样性。人们依据这些变异的大小和遗传关系将种质资源划分成“变种variety”、“变型form”和“化学宗chemicalrace”;或“农家类型landingrace”、“品种variety”“、品系line”等。例如,我国的樟
・579・
“种质资源”是农业上作物育种学经常使用
的术语“,种质germplasm”一词来源于德国著名遗传学家魏斯曼(Weismann)1892年所提出的“种质论”,认为“种质遗传物质,不受环境的影响并产生“体质”。“药用植物的种质资源”是泛指一切可用于药物开发的植物遗传资源,是所有药用植物物种的总和。我国拥有世界上最丰富的药用植物物种资源,1995年全国中药资源普查结果表明,已被应用的植物来源的中药有11,118种(包括1,208个种下单位)。狭意
中国中药杂志 1998年第23卷第10期
树Cinnamomumcamphora(L.)Presl可划分成主含樟脑的本樟、主含黄油素的油樟和主含芳香樟醇的芳樟等多个化学型,但它们的形状并无区别。现代生物技术的发展,使我们有能力进一步区分分类等级以下的种质资源,检测到居群之间甚至个体之间细微的遗传差异,这就为我们更有效的利用种质资源创造了条件。不同领域的研究者对不同性状的遗传多样性发生兴趣,正如分类学家最关心“花结构”变异,农学家最关心“农艺性状”变异一样,药学家更关心“化学成分”的遗传变异,并以“有效成分tivecomponent”113 基础
构成了该物种的基因库(genepool),其中可能蕴藏着丰富的已知或未知的有用基因[2],如控制高产、抗病、抗逆等优良性状的基因和控制有效成分代谢途径和代谢速度的基因。种质资源遗传多样性的研究将为评估基因资源的开发前景提供重要信息。众所周知,基因通过转录和翻译代谢酶来调控化合物的合成,最终决定中药的药性和疗效。次生化合物的合成需要相当多的代谢酶(包括同工酶)基因参与,这些基因的遗传变异直接影响药材的功效[3],此外,许许多多控制生长发育的基因和遗传变异也间接影响药材的成分和功效。目前已有不少调控次生化合物代谢的关键酶基因被研究[4]。例如,苯丙烷类代谢酶系是目前了解最清楚的植物次生代谢物合成途径,其中许多酶基因已被克隆。黄酮、木质素、水杨酸等的生物合成都由此途径合成,这个途径的关键酶是本丙氨酸解氨酶(PAL)、肉桂酸242羟化酶(CA4H)和42香豆酸CoA连接酶(4CL)[5]。对药用植物优良农艺性状基因的研究也已受到重视。基因的多态性为发现该基因提供了线索[6],在定位这些基因时又要借助更多连锁基因作桥梁,经过连锁分析和染色体行走和跳跃(chromosomalwalkingandjumping)找到目的基因[7,8]。这些都要求对药・580・
用植物基因多态性有更多的认识。然而令人担忧的是,在人类远未充分利用这些基因资源之前,其载体———种质资源,正面临严重破坏甚至面临丧失的威胁。因此,在健全和有效实施资源保护法律法规的同时,加速药用植物种质资作。114 ,要获得好的疗效和经,在引种之前,首先必须在众多遗传资源中筛选出最有用的遗传资源,以便在消耗同等数量物资的情况下获得更多的产品。例如,对著名的抗癌植物红豆杉Taxus属的种质资源研究表明,世界上本属有11种(含中国4种1变种),种下又有许多地理品种和栽培种,仅欧洲红豆杉T.baccataL.就有不少于40个地理品种,有效成分紫杉醇taxol在树皮中的含量通常仅有0.01%。1990年前后美国在广泛调查的基础上,在北美栽培品种中筛选出一杂交类型T.media“Hicksii”,含量为0.014%,并具有生长迅速等优良性状,于是,这一类型被大规模引种栽培[9]。另一方面,从资源保护的角度来看,对濒危药用植物进行有效的迁地保护,必须保留尽可能多的遗传多样性。植物种质资源的遗传多样性不仅包括遗传变异的高低,也包括遗传变异分布格局,即居群的遗传结构[10]。在引种之前,对该种野生药用植物居群遗传结构的深入研究,可以为采样策略的制定提供科学依据和量化指标,例如,仅取少量地点的材料即可代表绝大部分遗传多样性,起到事半功倍的佳效。采样不当将丢失遗传多样性,丢掉人类尚未认识的宝贵基因,也降低了植物抗逆性。总之,无论是对种质资源进行开发还是保护,都要进行遗传多样性的研究和比较,我国已有两千多年的种药历史,迄今为止,约有300种常用中药已进行过引种栽培[11,12]。但仍有许多野生药材和列入保护名单的濒危药用植物[15]有待引种,一些存在问题的品种也面临重新引种
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的任务,这些都要求我们加强种质资源遗传多样性的研究。115 种质资源遗传多样性是育种的基础药用植物的“优良品种”对药材生产存在着巨大的潜力,许多疗效优异的“道地药材”的形成在某种程度上应归功于“地方品种”的作用。“高含量育种”是药用植物育种的主要目的和特色。任何一个新品种的培育都是在原有的植物资源基础上通过选择、杂交、回交、诱变等方法修饰、加工、改良后培育出来的。例如,近年由对人参的天然变异类型“化后得到的。,再。由此可见,占有种质资源是育种的基础,育种上突破性的成就取决于关键基因的发现和利用。另一方面,植物遗传多样性的研究特别是分子多态性的研究是遗传图谱的构建、基因的定位和分离及标记辅助选择技术(MAS)应用的基础[14]。我国药用植物的育种已具有初步基础,许多药材如薄荷、红花、枸杞、地黄、贝母、山药、玉竹、桔梗、菘蓝、大麻、银杏、薏苡、石斛、益母草、金银花、杜仲、番红花等已形成地方优良品种。但更多的药材正面临艰巨的育种任务,同时也需要加速引进育种学新技术。这些方面都要求药用植物种质资源的研究要加速进行。2 DNA指纹技术在种资源研究中的应用
DNA指纹(DNAfingerprinting)技术是近年来发展起来的一组可以检测出大量DNA位点差异性的分子生物学新技术,因它们的电泳谱带类似人的指纹图形而得名,这些技术包括RAPD[17,18],AFLP[19],PCR2RFLP,DNA探针杂交[20],小卫星(minisatellite)[21],微卫星指纹分析等。这一方法的建立是植物资源学研究方法的重大突破,在种质资源研究上有广泛的应用前景。211 在药材种质鉴定上的应用
传统的中药鉴别方法是以药材表型特征为
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[22]
[15,16]
基础的鉴别方法,包括形态组织比较和化学成
分分析。然而,常规方法对一些疑难种、易混种的鉴定往往很难得出正确有效的结论。90年代以来一种以药材DNA分子标记特征为鉴定指标的新兴技术———药材DNA指纹鉴定技术的出现,[23,24]。,排除。DNA。
212 在遗传多样性分析上的应用
对药材种质资源尤其是多年生药用植物进行遗传分析在以往是很困难的,例如,采用经典遗传学中的子代分析法比较野生人参与栽培人参的遗传性状差异至少要花9年时间,这使得人们对繁殖周期较长的药用植物的遗传研究望而却步。90年代RAPD的发明以及相关分子生物学高新技术的发展,为了解山参等多年生药用植物的遗传背景提供了有力的新工具,这一简便、快捷的先进技术第一次使我们仅用少量干燥材料即可直接比较不同种质遗传物质DNA的细微差异,分析种质资源的遗传多样
性,获得丰富的遗传信息。213 在其它方面的应用
通过对许多DNA指纹图进行分析比较,可以计算品种之间的遗传距离和相似系数,从而给出品种之间的聚类关系图,并进一步研究品种的起源、进化问题。此外,DNA指纹图也是药用植物构建遗传图谱的重要工具,遗传图谱是植物基因的档案,对育种工作有极大的参考价值。
总之,DNA指纹技术在药用植物种质资源的研究中具有极大的应用前景。越来越多的研究报道说明,DNA指纹新技术的应用正在推动药用植物种质资源研究蓬勃的向前发展。3 参考文献
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陈彤云 北京中医医院主任医师
陈德昌 北京协和医院主任医师
徐莲芝 北京佑安医院主任医师
石学敏 天津中医一附院院士
薛伯寿 广安门医院国医大师
科普影响力奖：10名
郁琦 北京协和医院
袁芃 中国医学科学院肿瘤医院
孟化 中日友好医院
吴浩 首都医科大学宣武医院
程蕾蕾 复旦大学附属中山医院
姚兰 北京大学国际医院
王凯 北京大学人民医院
张宏征 南方医科大学珠江医院
李小江 天津中医药大学第一附属医院
王强 东南大学附属中大医院
金柳叶刀奖：10名
胡跃林 北京大学第三医院
杨尹默 北京大学第一医院
卢丹 首都医科大学附属北京妇产医院
张潍平 首都医科大学附属北京儿童医院
赵德伟 大连大学附属中山医院
符伟国 复旦大学附属中山医院
王靖 中国医学科学院肿瘤医院
邢宝才 北京大学肿瘤医院
周芳坚 中山大学肿瘤防治中心
余力生 北京大学人民医院
人文情怀奖：10名
梁军 北京大学国际医院
张桂英 湘雅常德医院
孙敬武 中国科学技术大学附属第一医院（安徽省立医院）
陈文莉 武汉市中心医院
李莉 首都医科大学附属北京儿童医院
韩树萍 南京市妇幼保健院
王学艳 首都医科大学附属北京世纪坛医院
樊东升 北京大学第三医院
郭良 中国科学院大学附属肿瘤医院（浙江省肿瘤医院）
张文 武汉大学中南医院
美丽天使奖：12名
赵芳 中日友好医院
张俊霞 首都医科大学附属北京地坛医院
倪芳 武汉市中心医院
耿淑霞 北京大学第六医院
童素梅 北京大学第三医院
颜美琼 复旦大学附属中山医院
单春剑 南京市妇幼保健院
段怡 上海市第一妇婴保健院
刘婷 首都医科大学宣武医院
王莉 首都医科大学附属北京儿童医院
胡永群 湖北省妇幼保健院
和芳 中国医学科学院肿瘤医院
青年创新奖：11名
马千里 中日友好医院
夏敏 中国科学技术大学附属第一医院（安徽省立医院）
王昕 中国医学科学院肿瘤医院
徐燕 北京协和医院
毛华伟 首都医科大学附属北京儿童医院
刘玥 中国中医科学院西苑医院
杨骥 复旦大学附属中山医院
何菁 北京大学人民医院
权哲峰 首都医科大学附属北京佑安医院
吴巍巍 北京清华长庚医院
季晶 江苏省人民医院（南京医科大学第一附属医院）
中华医药贡献奖：10名
周德安 首都医科大学附属北京中医医院
王书臣 中国中医科学院西苑医院
胡元会 中国中医科学院广安门医院
王少杰 北京大学人民医院
王宪波 首都医科大学附属北京地坛医院
陈新宇 湖南中医药大学第一附属医院
乔成林 西安交通大学第二附属医院
金哲 北京中医药大学东方医院
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张冰 北京中医药大学
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韩付涛 河南省长垣市佘家镇中心卫生院
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李国防 河南省滑县白道口镇石佛卫生室
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杨吟光 江苏省镇江市镇江新区大港街道社区卫生服务中心
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孙华 北京协和医院
刘志顺 中国中医科学院广安门医院
刘长信 北京中医药大学东直门医院
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专科精英奖-呼吸：6名
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王孟昭 北京协和医院
孙铁英 北京医院
潘磊 首都医科大学附属北京世纪坛医院
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朱春梅 首都儿科研究所附属儿童医院
专科精英奖-心脑血管：5名
陈红 北京大学人民医院
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唐熠达 北京大学第三医院
周达新 复旦大学附属中山医院
马根山 东南大学附属中大医院
专科精英奖-康复：6名
宋为群 首都医科大学宣武医院
吴文 南方医科大学珠江医院
王宁华 北京大学第一医院
朱玉连 复旦大学附属华山医院
江山 中日友好医院
倪朝民 中国科学技术大学附属第一医院（安徽省立医院）
金牌团队奖：11个
北大人民医院胸外科
复旦大学附属中山医院心外科
北医三院呼吸与危重症医学科
北大医院皮肤性病科
北京儿童医院贾立群超声团队
北京友谊医院消化道早癌团队
宣武医院神经疾病高创中心
北京安贞医院心脏超声医学中心
浙大妇院生殖内分泌科
东南大学附属中大医院介入与血管外科
北医六院临床心理中心
