(1)在比色试管中,加入1ml标准糊精溶液和3ml标准稀碘液,混匀,作为比较颜色的标准管。(2)在25mm×250mm试管中,加入2%可溶性淀粉溶液20ml,磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液5ml,在60℃水浴中平衡约5min,然后加入预先用缓冲液稀释好的酶液,立即计时并充分混匀。定时取出1ml反应液加入预先盛有3ml比色稀碘液的试管中,然后每隔1min重复此操作,当试管中的颜色与标准管颜色相同时,即达到终点(比色时两试管面向直射光线,凭肉眼观察),记录反应总时间。此反应应在3min之内达到终点,如反应时间不在此范围内,应重新调节样品或酶的稀释度在做。(3)计算α–淀粉酶活力以1ml酶液于60℃、的条件下,在1h液化可溶性淀粉的克数为1个酶活力单位。酶活力单位(g/ml)=(60/T×20×2%×N)÷式中,60—酶活定义中反应时间为60min;T—反应时间(min);20—可溶性淀粉的毫升数;2%—可溶性淀粉浓度;N—酶液稀释倍数;—测定时所用酶液量(ml)。