水稻稻瘟病毕业论文

1. Pb1是一个稻瘟病抗性基因，可以使水稻对稻瘟病表现较强的抗性。

2. Pb1编码一个CC-NBS-LRR蛋白，但是Pb1并没有P-loop，并且其他的几个R蛋白保守的motif也发生退化，暗示Pb1可能有不同的机制。

3. 有研究表明，一些R蛋白的核定位或者细胞质到细胞核的转运对其功能的行使非常重要。

4. SA在植物系统获得性免疫过程中发挥重要作用。在水稻SA信号通路中，WRKY45发挥重要作用。

本文对Pb1增强稻瘟病抗性的分子机制进行了解析，发现了Pb1和SA信号通路之间的crosstalk。

1）之前有研究报道，R蛋白的CC domain可以和WRKY转录因子互作。受此启发，本文对Pb1和是否也能和WRKY蛋白家族成员互作进行了检测。

2）作者挑选了不同家族的WRKY转录因子，通过酵母双杂系统发现，只有WRKY45会和Pb1-CC发生互作，并通过GST-pull down，Co-IP以及 split LUC系统进行了验证。

3）通过预测及定点突变，发现了四个疏水氨基酸影响Pb1-CC和WRKY45的互作。

新问题 ：Pb1-CC和WRKY45互作，对Pb1介导的稻瘟病抗性有什么影响呢？

1）WRKY45转录和蛋白水平都和稻瘟病抗性正相关

2）在Pb1+或者Pb1OX背景下knock down WRKY45，会使稻瘟病抗性降低

3）过表达影响和WRKY45互作的位点突变的Pb1（Pb1-Quad），稻瘟病抗性增强效果减弱

1）GFP-Pb1在细胞核和细胞质中都有定位，WRKY45-GFP定位在细胞核中。并通过核质分离实验对Pb1的亚细胞定位进行了验证。

2）Pb1的核定位对其功能是不是必须的？

构建了HA-Pb1-NES载体，转化植株发现，稻瘟病抗性减弱

3）既然Pb1的核定位那么重要，稻瘟菌侵染会改变其亚细胞定位吗？

并不会！

原文没有回答的问题 ：Pb1的胞质定位是不是也是其增强稻瘟病抗性所必须的？

WRKY45是SA通路中的重要组分，Pb1介导的稻瘟病抗性和SA有什么关系吗？

在Pb1OX背景下过表达SA降解蛋白NahG，会降低稻瘟病抗性，说明Pb1介导的稻瘟病抗性部分依赖于SA通路。

1）在使用小麦胚芽提取物系统表达WRKY45蛋白时，添加MG132增加WRKY45蛋白表达量，说明WRKY45会被ubiquitin蛋白酶体降解

2）WRKY45和Pb1共表达也会增加WRKY45蛋白含量，暗示Pb1可能会抑制UBQ对WRKY45的降解，增加其稳定性。由于小麦胚芽提取物是外源表达系统，在水稻中是不是也是这样呢？

3）将WRKY45和Pb1在水稻原生质体中共表达，也会增加WRKY45的含量，并且随着Pb1蛋白的增加，WRKY45也增加。

问题 ：Pb1稳定WRKY45是直接的还是间接的？和他俩互作有无关系？

4）Pb1-Quad和Pb1-NES对WRKY45的稳定效果减弱，说明Pb1通过和WRKY45互作直接稳定WRKY45蛋白。

1）对于一些生物体内容易降解或表达量低的蛋白，可以分别进行体外翻译，得到纯化蛋白后，再进行体外的孵育和Co-IP实验。

2）WRKY45一直有双带，和Pb1共表达时，下面的条带变弱，文章并没有对这一现象进行解释。

3）R蛋白易降解，表达量低，不容易检测到。把标签放在R蛋白的N端和C端对R蛋白的检测及功能有没有影响？

在市场经济条件下，水稻的市场交易为广大的农民带来了良好的经济收入。但是，在水稻的生长过程中会出现各种病害，稻瘟病是水稻重要病害之一，一般导致水稻减产10%——30%，严重时可导致绝收。那么，水稻稻瘟病是什么呢？水稻稻瘟病如何防治呢？水稻稻瘟病防治方法有哪些呢？下面一起来了解一下吧。

一、水稻稻瘟病的传播途径

稻瘟病的病菌主要靠空气气流传播，在当年发病的稻草上越冬，次年7月上旬，温度适宜时，病稻草上的病菌借气流传播到水稻叶片上引起发病。在病斑上发生大量的灰绿色霉层就是病菌，靠风、雨再传染到其他叶片、节、穗颈上，造成持续发病。水稻不同品种间抗病性差异较大，种植感病品种、插秧密度过大、施用氮肥过多过晚，都会导致发病加重。若7月阴雨连绵，雨日多，形成低温、高湿，光照少的田间小气候有利于稻瘟病的发生。

二、水稻稻瘟病的发病条件

气候条件不仅影响水稻植株的抗病能力，并直接影响病菌的繁殖，传播和侵染。

温度：适于稻瘟病菌繁殖和侵入的温度为25-28℃，水稻连续遭受数天低温再转为正常温度时，3-6天后稻株抗病性显著降低，尤其夜间有15℃以下的低温影响更明显，因而晚稻抽穗期遇寒露风或骤然降温，常加重穗颈瘟的危害。

湿度：平均相对湿度90%以上时有利于病害发生，雾多雾重或时晴时雨，雨日多，阴雨连绵等湿度大的天气，病菌生长繁殖快，孢子形成多，侵入率增高。光照：光照不足有利于病菌孢子形成，萌发和侵入，并使稻株同化作用缓慢，呼吸量减少，淀粉与氨态氮比例低，硅质化细胞少，组织柔嫩，抗病率降低，易发生病害。

品种和生育期在导致稻瘟病发生流行因素中，水稻本身的抗病性是主要的。同一品种在不同生育期，发病程度不同，幼苗3-5叶期、分蘖盛期和孕穗期至抽穗始期易感病，同一器官（如叶、茎节、穗等）在幼嫩时期较老熟时期易感病，所以在水稻分蘖盛期，新叶增长速度时易感染叶瘟。

三、水稻稻瘟病的发生症状

稻瘟病可在水稻整个生育期造成危害，具体可分为苗瘟、叶瘟、节瘟、穗颈瘟和谷粒瘟等不同类型，其中以叶瘟、节瘟、穗颈瘟危害为严重。

苗瘟：由种子带菌造成，常发生于3叶前。受害后，苗基部变灰黑，上部变褐，若田间湿度较大，则可产生灰黑色霉层（病原菌分生孢子梗和分生孢子）。

叶瘟：根据病斑可分为4种类型，即慢性型、急性型、褐点型、白点型。慢性型病斑边缘褐色带有淡黄色晕圈，中央灰白色，由暗绿色小斑扩大为梭形斑，叶背有灰色霉层，病斑较多时连片形成不规则大斑，发展较慢；急性型病斑呈近圆形或椭圆形，叶片正反面均有褐色霉层；褐点型病斑一般在高抗品种或老叶上产生针尖大小的褐点，叶舌、叶耳、叶枕等部位也可发病；白点型病斑在嫩叶上产生白色近圆形小斑，一般不产生孢子。

节瘟：水稻抽穗后在稻节上产生褐色小点，后绕节扩展，病部变黑，易折断。

穗颈瘟：穗颈部初现褐色小点，造成枯白穗和秕谷。

四、稻瘟病的综合防治技术

（1）减少菌源

收获后及早处理病稻草，不在秧田附近堆积病稻株，稻草不堆放在明年准备做种田的附近，病稻草堆放在避风雨处，不能用病稻株催芽、盖种、扎秧把、堵水口或搭棚，以免菌源传播。利用病稻草做堆肥，要充分腐熟后施用（堆肥发酵温度在52-56℃，病菌经10天左右死亡）。另外要搞好播种前种子处理，种子播种前晒1-2天，用泥水选种，再用1%生石灰水侵种2-3天，也可用50%多菌灵千克兑水50千克侵30千克谷种，侵泡48小时。

（2）栽培管理

肥料：一次性过量施用氮肥比分次施用或在保肥力差的沙土、浅土田比粘土、深土田上施用都更有利于病害流行。偏施、迟施氮肥使稻株贪青徒长，组织幼嫩，硅质化程度下降，株间通风透光不良，田间湿度增高，都可加重病害发展。适施补施磷钾肥，可以选用“以色列沃叶磷酸二氢钾”可提高稻株的钾氮比，促进氮的正常代谢，降低可溶性氮化物含量，增加茎秆纤维素，稻株组织坚硬，生长健壮，提高抗病力。

灌溉：水分管理对稻瘟病的发生流行影响也很大，稻田长期深灌，冷水串灌使土温水温降低，土壤缺氧，根系发育不良，降低生活力和抗病力。同时田间湿度增大，有利于病菌生长繁殖。

（3）水稻稻瘟病用药要点

遵循“重在预防，早抓叶瘟，狠治穗瘟”的原则。主要按3个步骤进行：第1步早期预防。在水稻拔节期，如果阴天或下雨天连续2d以上，应马上施药预防稻叶瘟。预防用药有三环唑、咪鲜胺或新长山的稻瘟酰胺等产品，视天气情况连续预防2——3次，每5——7d喷施1次，可基本控制稻瘟病的发生。第2步及时用药。在病害发生初期，及时用药控制病情，以防病菌扩散全田造成流行。选用的药剂有富士一号、50%氯溴异氰尿酸可溶性粉剂等，不可漏喷。第3步看田施药。如果叶瘟和穗瘟发生已经很严重，每穴有30%以上的有效穗受害时，可根据水稻所处生育期采取2种解决方法：一是稻穗未到完熟期，叶片有20%保持绿色，这时要继续施药以控制病害扩散，而且必须先用强氧化剂先灭菌，然后用富士一号等进行后期保护。二是稻穗已经达到完全成熟，粒皮黄色，稻粒干硬，这种情况就不必采取防治措施，因为即使不防治也不会进行再侵染和扩展。

在药剂防治过程中，喷撒农药时要求做到“五准”：一是病虫诊断要准。二是用药要准，对症下药。三是药液配兑要准，按说明书剂量要求配药。四是面积要准，以便准确用量。五是时间要准，把握病害发生的时期及时用药，喷药时间一般选择15：00以后喷药，早上叶片有露水不宜喷药，中午日照强，药液挥发快，不宜喷药。若喷药后8h内降雨，药液被冲洗，等雨后天晴还应补喷，或加入优质的增效剂，才能收到良好的防治效果。

近年来，水稻种植面积逐渐扩大，稻瘟病发病率及发病程度逐渐增加，科学有效防治稻瘟病已成为水稻生产的重要环节，应引起充分重视。

在国内外期刊发表论文90多篇,2000年后发表论文70多篇：其中Sci论文4篇、核心期刊47篇、第一作者42篇、通讯作者10篇。主编（译）专著5部；参与编写、翻译出版专著8部。完成农业部“水稻病虫害网络专家诊断系统”病害部分内容。 1. 南方优质稻米生产技术：中鉴100和中香1号生产技术 黄发松主编、参编 中国农业出版社ISBN7 -80119-433-O/ 2002-062. 浙江效益农业百科全书：优质稻 参编 中国农业出版社ISBN7 -80119-433-O/ 2002-063. 水稻杂草防除—全球综合状况（原著：联合国粮农组织之粮农组织植物生产与保护论文集139） 参译（第11章） 中国农业科学技术出版社 2002-104. 优势农产品生产技术规范 (水稻病虫害综合防治技术) 参编 中国农业出版社 2004-025. 水稻病虫害诊断与防治原色图谱 傅强、黄世文主编 金盾出版社 2005-036. 农民增收百项关键技术丛书：优质水稻品种及栽培关键技术 参编 中国三峡出版社农业科教出版中心 2006-017. 超级稻栽培技术 黄世文副主编 金盾出版社 2006-128. 中国现代水稻 参编第13章4万字 金盾出版社 2007-019. 2009年中国水稻产业发展报告 参编 中国农业出版社 2009-0810. 水稻生产100问：水稻技术100问/现代农业产业技术一万个为什么 参编 中国农业出版社 2009-0311. 水稻病虫害及防治原色图册 傅强、黄世文、谢茂成主编 金盾出版社 2009-1112.水稻主要病虫害防控关键技术解析 黄世文、王玲、刘连盟主编 金盾出版社 2010-0413. 稻田浮萍：农业综合体系中多功能小型水生植物,原著：Ronald A. 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