放牧死亡
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水样中的细菌包括很多“属”和很多“种", 我国《生活饮用水卫生标准》2006版[ 1] 的卫生学评价标准是以菌落总数、总大肠菌群、耐热大肠菌群和大肠埃希氏菌4项作为微生物指标。 总大肠菌群可来自人类和温血动物的肠道及自然环境, 包含有埃希氏菌属、柠檬酸菌属、克雷伯氏菌属和肠杆菌属等一大群在37℃经24小时培养能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。他们在伊红美蓝平板生长特征是：（1）深紫黑色、具有金属光泽；（2）紫黑色、不带或略带金属光泽；（3）淡紫红色菌落。 耐热大肠菌群，又称粪大肠菌群，主要包括埃希氏菌属和耐热克雷伯菌属[6],是利用提高温度的方法将大自然的大肠菌群和粪便中的大肠菌群区分开的，它是一群能在 ℃下生长的大肠菌群，只有来源于动物和人类粪便的大肠菌群能生长，而来自大自然的大肠菌群不能耐热生长[8-9]。 大肠埃希氏菌(Escherichiacoli),以前常称大肠杆菌, 广泛存在于人类和温血动物的肠道中, 是人类和动物肠道中需氧性共生菌的优势菌群, 维持宿主健康部分生理功能必需的肠道菌.虽然大多数的大肠埃希氏菌为非致病菌, 但是当宿主免疫力降低或细菌侵入肠道的外组织或器官时, 可引起肠外感染。某些血清型可产生毒素, 为致病性大肠埃希氏菌, 可引起人类腹泻。所以生活饮用水中大肠埃希氏菌成为肠道疾病的重要致病菌之一。[2] 他们从属范围逻辑关系如下 《生活饮用水卫生标准》2006版标准, 增加了生活饮用水中大肠埃希氏菌的检验。 为了提高实验室检测能力，近日，本实验室开展了生活饮用水中大肠埃希氏菌检测的质控活动，质控活动达到如下目标： 一、使用工作中分离的耐热大肠菌群、标准菌株产气肠杆菌、标准菌株大肠埃希氏菌三种菌进行试验，观察不同大肠菌群在EC-MUG培养基荧光实况，取得阳性标本荧光视觉效果。 二、使用的试管进行酸浸泡、蒸馏水处理和水龙水直接清洗处理，寻找大肠埃希菌荧光效果影响因素。 三、使用北京陆桥EC-MUG培养基试剂及青岛海博EC-MUG培养基试剂进行比较试验，评价实验室常规使用的试剂是否优良。 1材料与仪器 EC-MUG培养基, 购自北京陆桥有限责任公司、青岛海博 伊红美兰培养基, 购自北京陆桥有限责任公司。 营养肉汤，购自北京陆桥有限责任公司。 培养箱, 36℃ ±1℃;±℃;波长366nm紫外灯 2方法与结果 方法原理 大肠埃希氏菌能特异性产生产生β -葡萄糖醛酸酶(β -glucuronidase), 此酶能分解培养基上的EC-MUG荧光底物释放出荧光产物, 使培养基在366 nm紫外光下产生特征性荧光, 以此技术来检测大肠埃希氏菌。 操作步骤与结果 上图是产气肠杆菌与大肠埃希氏菌在EC-MUG培养基经℃培养后，在日光灯背景下，产气肠杆菌液体清亮，说明产气肠杆菌在℃中不能生长繁殖；大肠埃希氏菌液体混浊，说明大肠埃希氏菌在℃中能生长繁殖。 对上述经培养过的EC-MUG培养基，在日光灯观察背景下，使用366nm紫外线灯进行观察。产气肠杆菌依然清亮，无蓝光；不同稀释度的大肠埃希氏菌菌液有明显的蓝光，蓝光间无明显差别。因此，在观察大肠埃希氏菌发酵效果时，可以在普通光线下，使用366nm紫外线灯进行观察，结果显著。 上图为在暗室下对前述经培养过的EC-MUG培养基观察实验效果。大肠埃希氏菌发酵后产生荧光，并且不同稀释度的菌液，目视无显著差别；与产气肠杆菌效果阴性效果有非常明显的差别。产气肠杆菌培养管有微弱荧光，可能存在EC-MUG培养基自身有荧光事实！ 该图是灭菌蒸馏水与EC-MUG培养基效果比对。1、2试管是泡酸清洗的试管，5、6为未泡酸清洗的试管。 在暗室下观察，产气肠杆菌在EC-MUG培养管相对于蒸馏水，用手机拍照有明显荧光，实际观察中，这种荧光相对弱些，但依然是有荧光产生。所以，普通试管及蒸馏水可能产生的荧光可以忽略不计，但试剂本身产生有一定量的荧光是实验事实。 因此，为了减少个人观察经验不足，建议，在实验过程中，应该带标进行比对观察，这样头脑中才有荧光阴阳直观效果。 上图中的耐热大肠菌群，是日常工作中检出的工作株，实验室证实他们在伊红美兰平板上能产生铁锈色样金属光泽的大肠菌群，属于耐热大肠菌群。目前该菌在EC-MUG培养基经℃培养后中也能混浊生长。 在日光灯背景下用三用紫外灯366nm紫外线波观察，各个试管有微许蓝光，实际目视观察没有很强。手机拍照显示都有微量荧光效果，产气肠杆菌颜色似乎还更深点。可以判断全部10管试验管均为大肠埃希氏菌阴性。 上图为暗室下对产气肠杆菌和工作株的耐热大肠菌群在EC-MUG荧光效果图。手机拍照显示有较强荧光，实际目视效果较弱，如没有阳性对照比较，易误以为大肠埃希氏菌阳性结果。但在暗室下观察，该耐热大肠菌群、产气肠杆菌没有差别，也可以判断为结果阴性。 通过产气肠杆菌与实验室耐热大肠菌群在EC-MUG高温培养后的荧光效果比较。产气肠杆菌在高温中不能生长，液体清亮，也不能分解荧光底物。本实验室工作株耐热大肠菌群能在高温中生长，所以液体混浊，但本次工作菌株不分解分解培养基上的MUG荧光底物释放出荧光产物，通过与产气肠杆菌（商品标准菌株）比较，判定为荧光阴性，因此可能本实验室该耐热大肠菌群工作株是耐热克雷伯菌属。（耐热大肠菌群，又称粪大肠菌群，它由埃希氏菌属和耐热克雷伯菌属组成。非细菌学分类命名，而是卫生细菌领域的用语。） 以下图片为两种不同试剂用相同处理的试管进行EC-MUG培养观察效果： 暗室下观察荧光效果图，北京陆桥产品阴阳对照明显。 日光灯下，用紫外线灯观察荧光效果图，北京陆桥产品阴阳对照明显。 暗室下观察荧光效果图，青岛海博产品阴阳对照明显。 日光灯下，用紫外线灯观察荧光效果图，青岛海博产品阴阳对照明显。 上图为正常光线下的实验培养结果照片。 通过北京陆桥、青岛海博两种试剂的比较，两种试剂在不同方式处置的试管内培养大肠埃希氏菌，稀释倍数不同，产生的荧光效果是一样的。 3.讨论 、有关文献及实验结果中，试管本身会产生微量荧光[3]。本次实验使用的试管分两部分，一部分是用酸浸泡试管七天以上，然后进行蒸馏水清洗；另一部分是直接用水龙头水直接清洗，两类试管均165℃2小时以上高温灭菌。两类试管分别均分装有蒸馏水对照、产气肠杆菌（标准菌株）、耐热大肠菌群（工作菌株）、大肠埃希氏菌株（标准菌株）。同一菌株在不同方法处置的试管，实验效果无差别，说明一般试管可能产生的荧光对实验没有影响。 、EC-MUG培养基试剂本身经培养后会溢出一定的荧光物质，如果没有阳性对照作比较，可能会误以为是真阳性，造成假阳性结果。因此，初级实验者或日常工作中，应带标准菌株同步实验并观察实验结果。 、两家试剂厂家生产的EC-MUG培养基，阳性结果产生荧光效果均显著，实际操作中，日常生活饮用水中的大肠埃希氏菌试验结果与阴性对照相差无异时，可以按未检出大肠埃希氏菌结果进行报告。 、GB/－2006检测大肠埃希氏菌有多管发酵法、滤膜法，大肠埃希氏菌酶底法。推荐的第一法为多管发酵法，是在检测总大肠菌发酵乳糖蛋白胨基础上，有选择地进行EC-MUG培养，从批量工作中，减少了工作量及工作经费。在日常生活饮用水监测中，第一法相对第二法过滤法更简便易行；相对第三法酶底法来讲，更经济实惠。因此，第一法多管发酵法，在常规检测工作中仍是值得推广的方法。 、不同稀释度的大肠埃希氏菌液在EC-MUG培养液中，产生荧光效果无显著区别。因此，总大肠菌发酵后，在下步实验操作中，移液管要一管一用，不同发酵管不能出现交叉污染，防止阳性值偏高。 参考文献 [ 1] GB5749-2006，生活饮用水标卫生标准 [S]。北京：中国标准出版社，2007 [2] , zzzzzz。水中,mmm mmm mmmJ]. 河南预防医学杂志2009年20(3):185-216. [8] GGkkk.生活饮[J].预防医学论坛, 2008，14(12)：1163-1164. [9]hhhhhhhhh等.南方地区农查[J]. 公共卫生与预防医学,2014，25(4):11-13. [gggg[J]。环境科技，2010，23（1）：67－70 [3]
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关于登报的任何疑问，你也不妨可以拨打登报平台的客服热线
文/记者张虹砚 图/杜亚光
诠释家乡的方式有千万种：杜亚光，一个普通“70后”城市打工族，年少时爱上了摄影，他背着照相机、摄像机，走遍了锦州的大街小巷。在改革开放40周年之际，他用多年来积攒下来的照片和视频资料，通过相同地点的新旧对比和市民关注的“锦州地标”、“锦州话题”等有代表性的锦州元素，制作了“改革开放四十年 看锦州巨变”系列短片——《锦绣之州——大美锦州》（以下称《大美锦州》），记录了时代洪流中家乡的变化，表达了对祖国、对家乡不变的深情。
镜头里的“老锦州”
前不久，朋友圈中流传这样一段视频：“你知道你现在所处的地点，十几年前是什么样子吗？”带着好奇心，我打开视频，里面展现的正是锦州日报社所在的位置，也就是中央南街和市府路交叉路口附近曾经的模样：没有现在的高楼林立，车水马龙；有的是土路黄沙，匆匆骑行的稀少行人——视频制作得用心且有情怀，时光穿梭，带着观者回到了十多年前我因此联系上了视频的制作者——杜亚光。
杜亚光说：“我是一个普通的锦州市民，‘70后’，清晰地记得小时候每天啃着窝窝头上学，亲眼目睹了中国改革开放辉煌的40年，见证了锦州的巨大变化。”杜亚光出身工人家庭，在酷爱美术的父亲支持下，初二那年他拥有了人生第一台“120照相机”，从此喜欢上了摄影；1990年，杜亚光有了一台“M7摄像机”，开始了自己的事业——婚礼摄像，这在当时算是新兴职业；2003年，他购买了数码相机，因为数码相机较以往的摄像机携带更加方便，他可以随时记录百姓的日常生活；2004年，喜欢尝试新鲜事物的杜亚光，拍起了街景，突发奇想地搭建了中国首个街景网站——“全景锦州”，虽然网站在2007年经营不善关闭了，但留下了数千张宝贵照片。
快手展示“新锦州”
可以说中国改革开放40年，贯穿着杜亚光的成长，2018年时，当他打开电脑，翻看一幅幅老照片时，被震撼了：“相同地点的新老街景一对比，锦州变化太大了！”。10年没有摸过的相机，已经陌生，过往时光中的酸甜苦辣起涌上杜亚光心头他下定决心利用他音像特效编辑的技能，再拿起相机，拍一部反映“改革开放40年 看锦州巨变”系列短片——《大美锦州》，以数千张改革开放过程中、各个时期锦州老街景照片与现在的景色做对比，展现40年来锦州巨大变化，也引领着他们这些“改革开放的同龄人”寻找儿时的记忆。
上世纪八十年代之前出生的人会记得：曾经的桥南小凌河，破旧的平房，黑臭的河水，随后，城市南扩，楼宇大厦拔地而起，通过两河治理，如今碧水蓝天已经融入到锦州人的生活里；曾经一群群冒雨骑车的上班族、路边顶着阳光的等车族以及 “神牛”，改革开放40年的锦州，已是满街的私家车，路边有崭新的公交车站，旧式的公共汽车也换成了环保电动公交车；公园广场、运动场所分布在城市的各个角落在《大美锦州》中，伴着恢弘的配乐，杜亚光用镜头展现了锦州街头的巨变，回首过往的一幕幕，深深地印刻着时代的烙印。
《大美锦州》会更好
在《大美锦州》的第四集，杜亚光拍了“锦州的风”。视频一开始，杜亚光采访了正在放风筝的中年人和一位晒太阳的老奶奶：现在有风没土，风沙小多了——锦州市民七嘴八舌地热议家乡的风。谈起选题初衷，作为“70后”的杜亚光说：从我记事起，也就是改革开放初期，锦州开春就刮风，一刮就是一年。视频中，真实的老街景带入：呼啸的风声，路上处处可见艰难骑车的人，女人裹纱巾，男人戴风镜。通过防沙治沙工程和推进节能减排、淘汰落后产能，黄沙天变成了蓝天，狂风变成了柔和微风，人们开始愿意走进大自然，进行休闲活动。曾经肆虐的狂风变成了柔和的微风，成了锦州的一张新名片，在杜亚光短片的最后展示了在锦州举行的“国际帆船比赛”——来自世界各地的帆船运动员和爱好者齐聚锦州，参加高水准的比赛和训练。
杜亚光的老照片也在寻找、汇集着懂它们的人。因为拍摄家乡的街景制作短视频，并每周坚持更新一到两集，杜亚光在“快手”平台上拥有了16000余名粉丝，他们中有身在海外的锦州人、有曾经在锦州工作学习过的人，也有咨询制片技巧的人为了《大美锦州》，杜亚光也有了苦恼：近10年来，他没有从事视频制作工作，如今出现了很多新平台和新技术，他要投入更多时间进行学习；在《大美锦州》制作过程中，他越做越想做得更好，深感自己在文字功底和解说方面的不足，急于得到专业的指导和大家的建议。
为了拍一个延迟镜头，经常会在烈日、寒风中蹲几个小时，杜亚光就是这样东奔西走，一个镜头接一个镜头，一个变化接一个变化，一个事件接一个事件地记录着发展变化中的家乡，以一个普通锦州人的视角讲述着“锦州故事”。杜亚光的《大美锦州》还将继续下去，正如他对摄影、对家乡的情感延绵不息。（大家可以在“快手”平台搜索“全景锦州”观看杜亚光的《大美锦州》）
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