即使是技术娴熟、经验丰富的科学家们,将实验的影响因素来源减至最低程度,仍可能无法再重现实验结果。
说到失败原因,通常会想到以下几个问题:
1. 抗体的批号是什么?
2. 溶液是否正确制备、过滤和储存?
3. 是否在执行不同加液前更换了移液吸头?
这些实验的影响因素来源均由人为失误引起,通过仔细计划和执行实验并保持谨慎就可以避免,这是好的一面。然后不幸的是,对于手动移液操作用户,许多实验影响因素虽然并非完全无法控制,但控制难度很大,这就是它们不为人知的原因。大多数科学家可能从来都没有考虑过这些影响因素。通过今天的探讨,请做好准备,改变您计划下一批实验的方式。
压力
在实验室感受到有压力并不是什么新鲜事。数据质量和完成期限都带来很大的压力。但是,另一种压力来源会妨碍实验——大气压。在所有手动移液过程中,气压是一个一直存在的变量,而且它的大小取决于处理的液体体积、吸头的直径以及手持微量加样器的角度。
忘记预先湿润
如果实验室空气干燥(这是很有可能的情况,除非你的实验室是露天的),吸头吸入的微量液体与吸头里的干燥空气相遇时将变成水蒸气。如果遇到这种情况,最简单的方法就是预先湿润吸头,也就是在吸入和打出最终样品前,先重复几次吸液和打液的动作。这样可以消除影响重现性的蒸发。不过请记住,每次更换吸头时都需要重复这样的操作。
温暖的手,冰冷的实验室
大多数实验室及其设备的温度保持在 20~25°C,而人体通常为37°C左右。当你用温暖的手握住较冷的微量移液器时,你正在破坏你拿起的精密测量设备。除非你可以将微量吸液管升温到37°C或将手冷却至20°C(两者均不建议),均无法改变这种事实。