血液vegf与肿瘤诊断研究论文

研究方向：教学方面：目前为止招收生物化学与分子生物学专业 免疫化学与分子免疫学方向博士和硕士研究生；免疫学专业 抗体技术及应用方向硕士研究生。为本科生和研究生开设了细胞生物学，动物细胞工程和抗体工程等课程。主持动物细胞工程校级精品课程建设，指导郁颖等同学的“挑战杯”作品获广东省第九届“挑战杯”大学生科技作品竞赛三等奖。科研方面： 主持了国家“863”项目、国家自然科学基金、教育部科学技术研究重点项目，广东省自然科学基金和广州市科技攻关重点项目等科研课题。申报国家发明专利6项，在国内外学术期刊发表研究论文50 余篇。主要研究方向围绕基因工程抗体与抗体药物开发，肿瘤多肽疫苗，肿瘤干细胞等开展研究。开展了抗体库的构建、人源抗体的筛选；抗体亲和力成熟和抗体的人源化改造；抗体的高效表达和纯化技术平台建立等。开展了bFGF单克隆抗体的抑制肿瘤作用研究，进一步开展抗体药物研究。开展了抑制肿瘤血管新生的多肽疫苗的研究等，建立了抑制肿瘤血管生长的细胞模型和小鼠动物模型。探讨了VEGF/bFGF多肽疫苗在肿瘤血管新生和抑制肿瘤生长转移的作用等。主要论文：bFGF 与VEGF 抗原表位筛选及复合肽的表达鉴定.2010，26（8）:688-693bFGF单克隆抗体抑制小鼠Lewis肺癌转移及血管新生. 《中国癌症杂志》2010, 20(6): 401-405嵌合内含子对抗bFGF抗体基因在293T细胞中表达的影响. 中国生物工程杂志2010, 30 (3) : 9-14 血管内皮细胞生长因子表位肽体外抗肿瘤作用研究. 中国免疫学杂志, 2010, 26(5):, 407-412bFGF 单抗与顺铂体外联合抑制黑色素瘤B16 细胞增殖效应的研究. 中华肿瘤防治杂志2010, 17 (1): 1-4 VEGF189基因合成、原核表达及鉴定. 免疫学杂志, 2009, 25,(4):469-472重组VEGF2A189 发酵、纯化及鉴定. 暨南大学学报(自然科学版).2009, 30(5):560-565苏丹红Ⅰ、Ⅲ和对位红竞争ELISA检测方法的初步建立, 食品科学, ,2008年 8月，29（8）：523-525人bFGF 单克隆抗体的制备及MabF7 对黑色素瘤B16 的体外抗瘤效应。中华肿瘤防治杂志，2008，15（1）：19-22bFGF人源性抗体Fab段基因克隆及其在大肠杆菌中的表达，免疫学杂志，2007，23(6): 598-601重组人bFGF单克隆抗体可变区基因克隆及单链抗体的构建和表达. 细胞与分子免疫学杂志，2007，23（12）：1150-1153（邓宁通讯作者）bFGF反义硫代核苷酸增强人喉癌Hep2细胞的化疗敏感性。中国肿瘤生物治疗杂志，2007， 14（5）：461-465VEGF受体结合抑制肽的重组表达与活性分析，中华微生物学和免疫学杂志，2007，27（3）：263人噬菌体抗体库的构建及人源性抗bFGF抗体的筛选，免疫学杂志，2006，22（4）：451-454 (邓宁通讯作者)bFGF mRNA、bFGF及FGFR1与神经胶质细胞恶性行为的相关性 ，中国免疫学杂志，2006，22（5）：440-444自身免疫性患者血清中抗bFGF自身抗体的检测，细胞与分子免疫学杂志，2005， 21（5）：625-627人工合成VEGF表位模拟7肽的生物学功能研究, 细胞与分子免疫学杂志，2005，21（1）：37-38

有文献显示，在VHL改变的情况下，VEGF在肿瘤和血浆中的表达似乎都降低。基因（VHL）改变是散发性透明细胞肾细胞癌（CCRCC）中的常见事件，导致高度血管化的肿瘤。血管内皮生长因子（VEGF）是参与血管生成的主要因素，但VHL失活和VEGF表达的预后意义仍存在争议。目的是分析VHL遗传和表观遗传改变，VHL表达和VEGF肿瘤或血浆表达之间的关系，并分析它们在CCRCC患者中的各自预后价值。

血清肿瘤标志物联合检测在肺癌诊断中的问题综论文

【 摘要 】 目的 探讨血清肿瘤标志物癌胚抗原（CEA）、细胞角蛋白19片段（CYFRA21-1）、神经元特异性烯醇化酶（NSE）、鳞状细胞癌相关抗原（SCCA）联合检测在肺癌诊断中的临床应用价值。方法 68例肺癌患者为肺癌组， 65例健康体检者为对照组， 采用微粒子化学发光法检测血清中CEA、CYFRA21-1、NSE、SCCA含量， 并比较肿瘤标志物单独或联合检测肺癌的灵敏度、特异度和准确度。结果 肺癌组血清CEA、CYFRA21-1、NSE、SCCA含量均明显高于对照组（P<0.05）， 4种肿瘤标志物联合检测的灵敏度为81%， 准确度为86%， 明显高于单独检测， 差异具有统计学意义（P<0.05）。结论 血清CEA、CYFRA21-1、NSE、SCCA检测在肺癌诊断中具有临床应用价值， 联合检测可提高诊断的灵敏度和准确度， 且具有较好的特异度， 有助于提高肺癌的检出率。

【关键词】 肺癌；肿瘤标志物；联合检测

目前， 肺癌的发病率和死亡率均位于我国恶性肿瘤之首[1]。肺癌早期发现和治疗具有重要的临床意义。血清肿瘤标志物不仅可用于肿瘤诊断， 并且对肿瘤分期、疗效及预后判断有重要的临床价值[2]， 但单项检测肿瘤标志物具有局限性， 本文通过检测CEA、CYFRA21-1、NSE、SCCA这4种肿瘤标志物在肺癌患者血清中的表达， 探讨肿瘤标志物在肺癌诊断中的应用价值及联合检测的意义。现报告如下。

1 资料与方法

1. 1 一般资料 选择2011年7月～2013年12月在本院住院治疗的肺癌患者68例为肺癌组， 男39例， 女29例， 平均年龄（67.2±14.9）岁， 经病理组织学检查确诊为鳞癌的27例， 腺癌24例， 小细胞肺癌17例， 同期健康体检者65例为对照组， 男37例， 女28例， 平均年龄（67.6±15.1）岁。两组一般资料比较， 差异无统计学意义（P>0.05）， 具有可比性。

1. 2 检测方法 采集受检者清晨空腹静脉血4 ml， 及时分离血清， 采用微粒子化学发光法， 用深圳新产业PLUS200仪器及配套试剂检测CEA、CYFRA21-1、NSE、SCCA水平， 严格按仪器标准操作规程及试剂说明书操作， 检测当日室内质控均再控。正常参考区间分别为CEA 0～5 ng/ml， CYFRA21-1 0～7 ng/ml， NSE 0～10 ng/ml， SCCA 0～2.5 ng/L。

1. 3 阳性判定标准 单项检测时以结果大于正常参考区间上限为阳性， 联合检测时4种肿瘤标志物中有一项为阳性即判定为阳性。

1. 4 统计学方法 采用SPSS13.0统计软件进行数据分析。计量资料以均数±标准差（ x-±s）表示， 组间比较采用t检验；计数资料以百分率（%）表示， 组间比较采用χ2检验。以P<0.05为差异有统计学意义。按照标准公式计算肿瘤标志物对肺癌诊断的灵敏度、特异度和准确度。灵敏度=真阳性/（真阳性+假阴性）×100% ；特异度=真阴性/（真阴性+假阳性）×100%；准确度=（真阳性+真阴性）/（真阳性+假阳性+真阴性+假阴性）×100%。

2 结果

2. 1 4种血清肿瘤标志物含量比较 肺癌组血清CEA、CYFRA21-1、NSE、SCCA含量均明显高于对照组， 差异均有统计学意义（P<0.05）。见表1。

2. 2 不同病理组织类型肺癌患者4种血清肿瘤标志物阳性率比较 CEA在肺腺癌中的阳性率高于鳞癌和小细胞肺癌（P<0.05）；cyfra21-1在3种肺癌中的阳性率均较高， p="">0.05）；NSE在小细胞肺癌中的阳性率高于鳞癌和腺癌（P<0.05）；SCCA在鳞癌中的阳性率高于腺癌和小细胞肺癌（P<0.05）。4项联合检测的阳性率均高于单项检测。见表2。

2. 3 4种肿瘤标志物单项和联合检测用于诊断肺癌的灵敏度、特异度和准确度 4种肿瘤标志物单独用于诊断肺癌时， 灵敏度最高的是CYFRA21-1（56%）， 最低的.是CEA （29%）， 4种指标联合检测后灵敏度可达81%， 4种肿瘤标志物联合检测的灵敏度、准确度均明显高于各项单独检测， 差异有统计学意义（P<0.05）。联合检测后特异度略有下降， p="">0.05）。见表3。

3 讨论

肺癌是一种恶性肿瘤。近年来， 虽然临床肿瘤诊断和治疗学有着很大的进展， 但肺癌的死亡率仍然居高不下[3]， 肺癌的诊断除影像学、细胞学和组织病理学以外， 肿瘤标志物的检测也是一种主要方法。肿瘤标志物主要是指在血液、体液及组织中可检测到的与肿瘤相关的物质， 这些物质达到一定的水平时能揭示某些肿瘤的存在， 肿瘤标志物在肿瘤发生明显影像学改变之前就可以通过血清学方法检测出来， 为肿瘤的早期诊断、早期治疗提供了一个新的途径。由于肺癌组织病理的多样性， 同种病理组织细胞的异质性和肿瘤生物学行为的复杂性， 多种肿瘤标志物联合检测不失为一种能有效提高肺癌检出率的手段[4]。

CEA属于非器官特异性肿瘤相关抗原， 也是最早被发现的肿瘤标志物之一， 在肿瘤的发生和转移过程中有十分重要的作用[5]。肿瘤状态时， 癌细胞分泌CEA进入血液和淋巴循环， 因此肿瘤患者血清中CEA含量可见不同程度的升高。本研究表明， 肺癌患者血清CEA水平明显高于健康对照组， 并且在肺腺癌中的阳性率达到75%， 在鳞癌和小细胞肺癌中的阳性率较低， 分别为26%和24%， 因此CEA可作为肺腺癌的辅助性诊断指标之一。

NSE是一种糖酵解酶， 为烯醇化酶的同工酶， 存在于中枢、周围神经组织和神经外胚层起源的恶性肿瘤中， 小细胞肺癌是一种神经内分泌起源的肿瘤， NSE作为小细胞肺癌的血清肿瘤标志物具有较高的敏感度和特异度[6]。本研究结果显示NSE在小细胞肺癌中的阳性率为71%， 在鳞癌和腺癌中的阳性率较低， 分别为22%和25%， 也证明了NSE在鳞癌和腺癌的诊断中意义较低， 可作为小细胞肺癌的辅助性诊断指标之一。

CYFRA21-1是细胞角蛋白19的片段， 为正常及恶性的上皮细胞支架蛋白， 主要分布在单层上皮细胞， 在上皮组织来源的肿瘤组织中的含量明显增高， 是非小细胞肺癌较敏感的肿瘤标志物[7]。本研究观察到CYFRA21-1在肺鳞癌中的阳性率为78%， 其次是肺腺癌， 阳性率为54%， 在小细胞肺癌中的阳性率很低， 与文献报道一致。

SCCA为鳞状细胞癌相关抗原， 是用单克隆技术从肿瘤相关抗原TA4提纯出的一个糖蛋白片段， 本研究观察到SCCA在肺鳞癌中的阳性率为67%， 在腺癌和小细胞癌中的阳性率均较低。

本研究结果显示4种肿瘤标志物在肺癌患者血清中的含量均明显高于健康对照组， 差异具有统计学意义（P<0.05）， 表明这4种肿瘤标志物的检测在肺癌的临床诊断中均有一定的应用价值。但单项检测的阳性率均不高， CEA仅在肺腺癌中阳性率较高， NSE可作为小细胞肺癌的辅助性诊断指标之一， CYFRA21-1在肺鳞癌中的阳性率较高， SCCA是具有较好特异度的鳞癌标志物。而这4种肿瘤标志物联合检测后在各组织类型的肺癌中均具有较高阳性率。研究也表明， 它们作为单一诊断指标应用于临床具有一定的特异性， 但灵敏度和准确度均不理想， 联合检测后提高了灵敏度和准确度， 有利于肺癌的早期诊断和治疗。

参考文献

[1]代敏， 任建松， 李霓， 等.中国2008年肿瘤发病和死亡情况估计及预测 . 中华流行病学杂志， 2012， 33（1）：57-61.

[2]Hu W， Chen H， Shi Z， et al. Dual signal amplification of surface plasmon resonance imaging for sensitive immunoassay of tumor marker. Anal Biochem， 2014， 4（453）：16-21.

[4]陈建忠， 顾利江. 肺癌患者血清CEA、NSE、CA19-9、VEGF检测的临床意义.中国现代医生， 2011， 49（8）：28-29.

[5]Canbay E， Ishibashi H， Sako S， et al. Preoperative carcinoembryonic antigen level predicts prognosis in patients with pesudomyxoma peritonei treated with cytoreductive surgery and hyperthermic intraperitoneal chemotherapy. World J Surg， 2013， 37（6）：1271-1276.

[6]Pujol JL ， Boher JM ， Grenier J， et al. Neuron specitic enolase and prognosisof non-small cell lung cancer： prospective study in 621 patients. Lung Cancer， 2001， 31（3）：221-228.