有关多糖的投稿期刊

一、什么是复合多糖？

根据“科普中国”核定过后的多糖（polysaccharide）词条中显示——多糖是由糖苷键结合的糖链，至少要超过10个的单糖组成的聚合糖高分子碳水化合物，可用通式(C6H10O5)n表示。

而在健康领域以及医疗领域常常关注的“多糖”实际上是“非淀粉多糖”，值得一提的是“淀粉”本身也属于多糖。对于多糖的重要性其实我们应该有更加深刻的认知。简单来说，多糖类化合物广泛存在于动物细胞膜和植物、微生物的细胞壁中，是由醛基和酮基通过苷键连接的高分子聚合物，也是构成生命的四大基本物质之一。

而非淀粉多糖种类繁多，结构复杂，具有特殊的生物活性，如茯苓多糖、香菇多糖、银耳多糖、枸杞多糖等，这类多糖对人体的免疫功能有调节作用，是一种免疫调节剂，它们能激活免疫受体， 提高机体的免疫功能。如，它们可激活T、B淋巴细胞、巨噬细胞、NK细胞等免疫细胞，还能活化补体，促进细胞因子生成，可对免疫系统发挥多方面的调节作用。

就目前来说，多糖本身对人体健康有益的很多功效作用已经得到了科学研究的认可，比如其对人体免疫力的强化。如果说对健康养生领域确实比较了解，那么重视多糖实际上也并非什么坏事。不过需要注意的，如果有的那种打着“包治百病”旗号的宣传，那肯定也是不靠谱的。

二、多糖的研究现状

多糖为健康领域所熟知，主要还是因为上个世纪60年代，《自然》杂志中有关“香菇多糖”的研究，其中主要验证了“香菇多糖”在抗癌方面具有一定作用。

而实际上，对多糖的研究在近些年来进一步增大规模，特别是中医药在国际上受到越来越多的重视之后，进一步围绕某些中草药中所含多糖成分进行科学化的实验、解构已经成为多糖研究的一个重要方向。

比如，下图就是通过酸酶水解-HPLC 法检测香菇多糖中 β-D-葡聚糖含量的谱图，简单来说，就是进一步去围绕香菇多糖中所含有的 β-D-葡聚糖进行水解研究。β-D-葡聚糖是香菇多糖中主要活性成分，其含量是表征香菇多糖产品质量的主要指标之一。

除了在成分分析上的研究以外，学界同时十分注重对各类多糖不同功效（健康方向）的研究和梳理。比如华南理工大学廖文镇博士有关竹荪多糖功能化抗肿瘤药物研究表明：竹荪多糖DP1 具有显著的免疫调节活性，能够特异性地与小鼠巨噬细胞 RAW264.7 细胞膜表面受体CR3 相互作用，通过一系列可能的信号转导通路（PI3K/Akt/MAPK/NF-κB）激活免疫应答，促进免疫因子 NO、TNF-α 和 IL-6 的分泌。此外，DP1 具有良好的热稳定性和酸碱稳定性，经高温（145℃）、强酸（pH=2）和强碱（pH=10）的处理后，仍然具有一定的免疫调节活性。

总而言之，多糖/复合多糖从健康的角度来说，确实有着正面作用，但多糖的被科学化验证的功效则需要根据不同类型的多糖，以及在不同领域的表现进行了解，在科学验证的基础上去分析。通俗易懂的说：“香菇多糖”有着提高人体免疫力，甚至在抑制肿瘤方面也有一定的作用。

一、什么是复合多糖？

根据“科普中国”核定过后的多糖（polysaccharide）词条中显示——多糖是由糖苷键结合的糖链，至少要超过10个的单糖组成的聚合糖高分子碳水化合物，可用通式(C6H10O5)n表示。

而在健康领域以及医疗领域常常关注的“多糖”实际上是“非淀粉多糖”，值得一提的是“淀粉”本身也属于多糖。对于多糖的重要性其实我们应该有更加深刻的认知。简单来说，多糖类化合物广泛存在于动物细胞膜和植物、微生物的细胞壁中，是由醛基和酮基通过苷键连接的高分子聚合物，也是构成生命的四大基本物质之一。

而非淀粉多糖种类繁多，结构复杂，具有特殊的生物活性，如茯苓多糖、香菇多糖、银耳多糖、枸杞多糖等，这类多糖对人体的免疫功能有调节作用，是一种免疫调节剂，它们能激活免疫受体， 提高机体的免疫功能。如，它们可激活T、B淋巴细胞、巨噬细胞、NK细胞等免疫细胞，还能活化补体，促进细胞因子生成，可对免疫系统发挥多方面的调节作用。

就目前来说，多糖本身对人体健康有益的很多功效作用已经得到了科学研究的认可，比如其对人体免疫力的强化。如果说对健康养生领域确实比较了解，那么重视多糖实际上也并非什么坏事。不过需要注意的，如果有的那种打着“包治百病”旗号的宣传，那肯定也是不靠谱的。

二、多糖的研究现状

多糖为健康领域所熟知，主要还是因为上个世纪60年代，《自然》杂志中有关“香菇多糖”的研究，其中主要验证了“香菇多糖”在抗癌方面具有一定作用。

而实际上，对多糖的研究在近些年来进一步增大规模，特别是中医药在国际上受到越来越多的重视之后，进一步围绕某些中草药中所含多糖成分进行科学化的实验、解构已经成为多糖研究的一个重要方向。

比如，下图就是通过酸酶水解-HPLC 法检测香菇多糖中 β-D-葡聚糖含量的谱图，简单来说，就是进一步去围绕香菇多糖中所含有的 β-D-葡聚糖进行水解研究。β-D-葡聚糖是香菇多糖中主要活性成分，其含量是表征香菇多糖产品质量的主要指标之一。

复合多糖到底是什么意思？

除了在成分分析上的研究以外，学界同时十分注重对各类多糖不同功效（健康方向）的研究和梳理。比如华南理工大学廖文镇博士有关竹荪多糖功能化抗肿瘤药物研究表明：竹荪多糖DP1 具有显著的免疫调节活性，能够特异性地与小鼠巨噬细胞 RAW264.7 细胞膜表面受体CR3 相互作用，通过一系列可能的信号转导通路（PI3K/Akt/MAPK/NF-κB）激活免疫应答，促进免疫因子 NO、TNF-α 和 IL-6 的分泌。此外，DP1 具有良好的热稳定性和酸碱稳定性，经高温（145℃）、强酸（pH=2）和强碱（pH=10）的处理后，仍然具有一定的免疫调节活性。

总而言之，多糖/复合多糖从健康的角度来说，确实有着正面作用，但多糖的被科学化验证的功效则需要根据不同类型的多糖，以及在不同领域的表现进行了解，在科学验证的基础上去分析。通俗易懂的说：“香菇多糖”有着提高人体免疫力，甚至在抑制肿瘤方面也有一定的作用。

复合多糖是指两种或两种以上多糖组分的混合物。这种复合不是随意的混合多糖，而是有意识有目的地将不同功效的几种活性多糖进行组合。 复合多糖与单一活性多糖相比，无论在免疫激活的幅度和层面上，无论在免疫激活的幅度和层面上，都大大超过单一活性多糖的作用，可以说是现代生物医学的一大进步。 同时，复合多糖也具激发人体的免疫力系统活力、调节身体状态的功效。

复合多糖使多种多糖在不同作用机制上起效，彼此互补平衡，协同提高免疫力。  作用相对温和，能够有效“锻炼”免疫系统，使其能及时准确应对外界侵扰。 复合多糖活性明显，功效显著，在医学和保健食品领域都发挥着越来越重要的作用，但这种“复合”绝不是随意地将几种不同的多糖简单混合， 其原理与中药方剂君、臣、佐、使的配伍原则有异曲同工之妙。 例如，将香菇多糖、茯苓多糖、银耳多糖按照一定配比组成复合多糖，其调节免疫比单一多糖更明显。

与面包、馒头中多糖淀粉容易被降解成葡萄糖不同，复合多糖进入肠道后，一些多糖成分直接被小肠以完整的形式吸收，进入机体直接激活免疫系统，而另一些则通过激活肠道免疫系统进而影响机体整体免疫系统，两方复合更高效增强免疫力。

RSC(英国皇家化学学会)CNKI著名化学期刊简介 1. Science (Impact factor:24.380) 1880年，电灯的发明人、 世界最著名的科学家之一 — 托马斯·爱迪生 (Thomas Alva Edison) 创办了Science 周刊。 如今， Science 周刊已成为世界上订户最多的综合性科学刊物。 Science 周刊每星期都以高超的编辑手段， 向世界各地的16万订户提供两种不同的科学信息：该星期有关科学和科学政策的最重要的新闻报道以及报告全球科学研究最显著突破的精选论文。 在这个意义上， Science 周刊既是一个传统的学术刊物也是一个新闻杂志。 2. Nature(Impact factor:28.830) 一共有十一种刊物在Nature 这个大家族里：周刊Nature（1869年创刊）；月刊Nature Genetics（1992创刊）；Nature Structural Biology (1994创刊)；Nature Medicine (1995创刊)； Nature Biotechnology（1996创刊）；Nature Neuroscience (1998创刊)；Nature Cell Biology (1999创刊)；Nature Immunology (2000创刊)；及另外三份综述性期刊Nature Reviews Genetics, Nature Reviews Molecular Cell Biology and Nature Reviews Neuroscience (2000创刊)。创办这些期刊最主要的目的是要发表业界内最高质量的科学论文---任何有很大潜力的科学领域的文章。同时也发表一些评论性文章，新故事，简述等。投稿形式也可以是信件，新闻，综述等。 3. J.A.C.S. J.A.C.S.创刊的宗旨是想通过发表全世界化学领域最好的论文，来追踪化学领域的最新前沿,其中包括对一些重要问题的应用性方法论，新的合成方法，新奇的理论发展和有关重要结构和反应的新进展。 J.A.C.S. 创刊于1879年，是the American Chemical Society的旗舰刊物，在业界有极高的声誉。每年可以发表13,000有关化学的科学论文。作为一分周刊，J.A.C.S.对化学领域做出的贡献的不可磨灭的。主要发表科学论文，通讯，新书综述，及电脑软件综述。 4. Tetrahedron Tetrahedron 发表的是具有重要性和及时性的实验及理论研究结果，主要是在有机化学及其相关应用领域特别是生物有机化学。期刊包含领域为有机合成，有机反应，天然产物化学，机理研究及各种光谱研究。来稿必须是全文，且是原著。同时也发表一些综述性文章。 5. Tetrahedron Letters Tetrahedron Letters 集中了所有体现有机化学领域的最新进展的文章。期刊属于周刊，囊括了实验和理论有机化学在技术，结构，方法研究的最新进展。研究结果的快速发表使得研究者们可以在全世界范围内迅速交流科学资讯，从而推动研究的深入进行。 6. J.O.C. 创办The Journal of Organic Chemistry 的目的是为了与最新的激动人心的有机进展保持一致，从而向全世界的化学工作者展示有关有机化学领域的所有的最先进研究结果。 J.O.C.收录除了正规的论文，还有小的专题综述及国际会议文集。 7. Synthesis Synthesis 是一份报导有机合成进展的国际性刊物。主要发表有关有机合成的综述和论文，包括金属有机，杂原子有机，光化学，药物和生物有机，天然产物，有机高分子和材料。有关机理，光谱研究，分离技术的发展等能对有机合成造成影响的内容也是Synthesis 感兴趣的方面。 8. SYNLETT SYNLETT 报导有机合成研究结果和趋势，短篇幅的个人综述和快速的工作简报。所有有机合成领域的成果都在被收录的范畴内。 9. Organic Letters Organic Letters 是提供最新有关有机化学重大研究的简报，它的内容是所有有机化学领域最先进发展的浓缩，包括生物有机和药物化学，物理和理论有机化学，天然产物分离及合成，新的合成方法，金属有机和材料化学。 10. Natural Product Reports NPR 是双月刊，主要目的是通过发表对生物碱，类固醇，脂肪酸及杂环类的，脂肪族的，芳香类的，酯环类等天然产物的研究结果，来刺激对天然产物的研究。为了反映天然产物与各学科之间日益加强的渗透，它也收录有关光谱的最新发展和生物学研究的综述。另外，某些著名科学家的前瞻性的论文也被收录。 11. Polymer Polymer 发表所有高分子科学技术领域的原创性的研究成果，其重点在于对分子结构解释的研究。新兴领域的研究成果也是 Polymer 喜欢发表的文章类型。除了正规的文章和通讯外，它也发表综述类文章，但通常是由编辑约稿。 12. Chemical Reviews Chemical Reviews 的宗旨在于发表广泛，专业，可读性强的研究成果，这些工作涉及有机，无机，物理，分析，理论及生物化学等各个化学领域，其文章来自于全球的化学工作者。它从1985年也开始发表有关某一主题或方向的研究综述。目前生物题材的综述不多，但是其主编表示今后会逐渐增加这一重要领域文章的比例。 13. Organometallics Organometallics 被誉为世界上最好的有关金属有机的期刊。收录的是有机金属，无机，有机和材料化学等最活跃领域的文章。其形式包含论文，通讯，小综述，内容涉及合成，结构，成键，化学反应和反应机理及有机金属化合物的应用。应用范围包括有机和高分子合成，催化过程及材料化学的合成方面的问题。 14. J. M. S. The Journal of Mass Spectrometry 涵盖的范围很广，包括质谱的所有方面。如仪器设计和研发，离子化过程，离子反应机理，离子结构，生物分子分析，质谱方法论的建立，元素分析的应用和环境化学等所有可以使用质谱法的领域。主要发表科研论文，通讯和综述。 15. Carbohydrate Research 1965年创刊，Carbohydrate Research 以它发表高标准和宽范围的论文而被业界称道。范围包括碳氢化学和生物化学。主要内容是化学合成，结构和光谱研究，反应机理，天然产物分离，大分子活性，酶的活性，酶的催化机理等。文章形式包括论文，展望，快报和综述。 16. J. C. C. The Journal of Carbohydrate Chemistry 是一个便捷，国际化的论坛性期刊。内容涵盖碳水化合物新奇合成方法，碳水化合物的反应机理，药学，糖抗体，糖类和多糖合成，糖的分子模型，糖类转化的分析，分离方法，糖的光谱和晶体结构。 17. Heterocycles 从1973年创刊始，Heterocycles为有机化学，药物化学和分析化学等领域的杂环化合物研究提供了一个良好的平台。期刊发表综述，通讯及一般的科研论文。论文在被接受日起两个月内将被发表，这样就保证了科学工作者可以得到最新的有关杂环化合物的资讯。

在多糖中，一类是淀粉、果胶、纤维素等，这些多糖基本上不具有特异的生物活性。

复合多糖是什么？有什么作用？

另一类多糖是一些非淀粉多糖，其种类繁多，结构复杂，具有特殊的生物活性，如茯苓多糖、香菇多糖、银耳多糖、枸杞多糖等，这类多糖对人体的免疫功能有调节作用，是一种免疫调节剂，它们能激活免疫受体， 提高机体的免疫功能。

这些多糖虽然都具有增强人体免疫功能的作用，但是其激活人体免疫系统的途径和机理并不一致，并且效果也存在差异。因此单一多糖相对存在一定的局限性。

复合多糖不是随意几种或任意数量的混合，通过最佳比例的复合，实现了1+1不等于2，而大于3的功效。复合多糖与单一活性多糖相比，在免疫激活的幅度和层面上，都大大超过单一活性多糖的作用。同时，复合多糖也具激发人体的免疫力系统活力、调节身体状态的功效，且作用相对温和，能够有效“锻炼”免疫系统，使其能够及时准确应对外界侵扰。唤能复合多糖，润泽、滋养十方众生。

多糖的提取和纯化多糖的提取和纯化摘 要 本文较详细地介绍了多糖的提取和纯化方法，为多糖的研究和生产提供参考依据。关键词 多糖；提取；纯化；活性炭多糖（polysacharides，PS），又称多聚糖，是由10个以上的单糖通过苷键连接而成的，具有广泛生物活性的天然大分子化合物。它广泛分布于自然界高等植物、藻类、微生物（细菌和真菌）与动物体内。20世纪60年代以来，人们逐渐发现多糖具有复杂的、多方面的生物活性和功能[1]：(1)多糖可作为广谱免疫促进剂，具有免疫调节功能，能治疗风湿病、慢性病毒性肝炎、癌症等免疫系统疾病，甚至能抗AIDS病毒[2]。如甘草多糖具有明显的抗病毒和抗肿瘤作用[10]，黑木耳多糖、银杏外种皮多糖和芦荟多糖可抗肿瘤和增强人体免疫功能[3-5]。(2)多糖具有抗感染、抗放射、抗凝血、降血糖、降血脂、促进核酸与蛋白质的生物合成作用。如柴胡多糖具有抗辐射，增强免疫功能等生物学作用[6]，麦冬多糖具有降血糖及免疫增强作用[7-8]，动物黏多糖具有抗凝血、降血脂等功能[9]。(3)多糖能控制细胞分裂和分化，调节细胞的生长与衰老。如爬山虎多糖具有抗病毒和抗衰老作用[10]，银杏外种皮粗多糖具有抗衰老、抗过敏、降血脂、止咳祛痰、减肥等功能[11]。另外，多糖作为药物，其毒性极小，因而多糖的研究已引起人们极大的兴趣。由于多糖具有的生物活性与其结构紧密相关，而多糖的结构又是相当复杂的，所以在这一领域的研究相对缓慢。但人们在多糖的分离提取与纯化方面已做出了不少工作。1. 多糖的提取[12]1.1 热水浸提法：1.1.1多糖提取条件的优选根据文献报道[13]：影响热水浸提多糖的因素主要有提取时间、提取次数、溶剂体积、浸提温度、pH值、醇析浓度和植物颗粒大小等。在试验前对上述多种因素利用正交实验法做出优选，才能选出最佳提取方案。1.1.2其步骤为：原料→粉碎→脱脂→粗提（2－3次）→吸滤或离心→沉淀→洗涤→干燥首先除去表面脂肪。原料经粉碎后加入甲醇、乙醚、乙醇、丙酮或1：1的乙醇乙醚混合液，水浴加热搅拌或回流1－3小时，脱脂后过滤得到的残渣一般用水作溶剂（也有用氢氧化钾碱性水液、氯化钠水液、1％醋酸和1％苯酚或0.1－1M氢氧化钠作为提取溶剂）提取多糖。温度控制在90－100℃，搅拌4－6小时，反复提取2－3次。得到的多糖提取液大多较粘稠，可进行吸滤。也可用离心法将不溶性杂质除去，将滤液或上清液混合（得到的多糖若为碱性则需要中和）。然后浓缩，再加入2－5倍低级醇（甲醇或乙醇）沉淀多糖；也可加入费林氏溶液或硫酸铵或溴化十六烷基三甲基铵等，与多糖物质结合生成不溶性络合物或盐类沉淀。然后依次用乙醇、丙酮和乙醚洗涤。将洗干后疏松的多糖迅速转入装有五氧化二磷和氢氧化钠的真空干燥器中减压干燥（若沉淀的多糖为胶状或具粘着性时，可直接冷冻干燥）。干燥后可得粉末状的粗多糖。1.2 微波辅助提取法：其原理为利用不同极性的介质对微波能的不同吸收程度，使基体物质中的某些区域和萃取体系中的某些组分被选择性加热，从而使萃取物质从基体或体系中分离出来，进入到介电常数小，微波吸收能力较差的萃取剂中[14]。由于微波能极大加速细胞壁的破裂，因而应用于中草药中有效成分的提取能极大加快提取速度，增加提取产率。而且由于其选择性好，提取后基体能保持良好的性状，提取液也较一般的提取方法澄清[15]。聂金源等在柴胡多糖和黄酮化合物的提取[18]中对微波辅助提取法、超声辅助法和索氏提取法进行比较，发现微波辅助提取法所需时间最短（10min），多糖的提取率最高（28.46％）。1.3 超声辅助法：其原理是利用超声波的空化作用加速植物有效成分的浸出提取，另外超声波的次级效应，如机械振动、乳化、扩散、击碎、化学效应等也能加速欲提取成分的扩散释放并充分与溶剂混合，利于提取[16]。超声波辅助法与常规提取法相比，具有提取时间短、产率高、无需加热等优点[17]。1.4 索氏提取法： 将植物粉末置于索氏提取器中，加入石油醚，60℃-90℃条件下提取至无色（一般为6小时）。过滤，滤渣挥发干燥完溶媒后加入80%乙醇，再提取6小时，过滤，滤渣乙醇挥发干燥后加蒸馏水。回流提取2次，趁热过滤，滤液减压浓缩，再除蛋白，醇沉，除色素。60℃干燥，称重。1.5 醇提法：先后将90%和50%乙醇加入植物粉末中，振荡充分再抽滤。滤液中加入足量无水乙醇，至于4℃冰箱中过夜。减压抽滤，再除去色素，得多糖粗品，在60℃通风干燥箱中干燥，再置干燥皿中恒重保存。醇提法方法简单，易于操作，但提取率较低，乙醇使用量大，不宜大规模提取使用。1.6 其它方法：多糖的提取方法还有稀碱液浸提法、稀酸液浸提法、酶法等。但由于稀酸、稀碱条件下，易使多糖发生糖苷键的断裂，部分多糖发生水解而使多糖的提取率减少，因而很多试验中避免采用稀碱液浸提法和稀酸液浸提法。2. 多糖的纯化2.1 多糖中杂质除去方法 粗多糖中往往混杂着蛋白质、色素、低聚糖等杂质，必须分别除去。2.1.1 除蛋白质采用醇沉或其它溶剂沉淀所获得的多糖，常混有较多的蛋白质，脱去蛋白质的方法有多种：如选择能使蛋白质沉淀而不使多糖沉淀的酚、三氯甲烷、鞣质等试剂来处理，但用酸性试剂宜短，温度宜低，以免多糖降解。常用的方法有[19]：2.1.1.1 沙维积法（Sevag法）[20]：根据蛋白质在氯仿等有机溶剂变性而不溶与水的特点，将多糖水溶液、氯仿、戊醇（或正丁醇）之比调为25:5:1或25:4:1，混合物剧烈振摇20到30分钟，蛋白质与氯仿－戊醇（或正丁醇）生成凝胶物而分离，然后离心，分去水层和溶剂层交界处的变性蛋白质。此种方法较温和，在避免降解上有较好效果，但效率不高，如五味子多糖的提取实验中要重复处理达三十几次。并且每次除去蛋白质变性胶状物时，不可避免的溶有少量多糖，另外少量多糖与蛋白质结合的蛋白聚糖和糖蛋白，在处理时会沉淀下来，造成多糖的损失。如能配合加入一些蛋白质水解酶，再用Sevage法效果更佳。2.1.1.2 三氟三氯乙烷法[21]：多糖溶液与三氟三氯乙烷等体积混合，低温下搅拌10min左右，离心得上面水层，水层继续用上述方法处理几次，即得无蛋白质的多糖溶液，此法效率高，但溶剂沸点较低，易挥发，不宜大量应用。2.1.1.3 三氯醋酸法：在多糖水溶液中滴加5％－30％三氯醋酸，直至溶液不再继续混浊为止，在5－10℃放置过夜，离心除去沉淀即得无蛋白质的多糖溶液。此法会引起某些多糖的降解。 Sevag法、三氟三氯乙烷法和三氯醋酸法三种方法均不适合糖肽，因糖肽也会像蛋白质那样沉淀出来。对于对碱稳定的糖蛋白，在硼氢化钾存在下，用稀碱温和处理，可以把这种结合蛋白质分开[1]。2.1.1.4 酶解法[22]：在样品溶液中加入蛋白质水解酶，如胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、链霉蛋白酶等，使样品中的蛋白质降解。通常将其与Sevag法综合使用除蛋白质效果较好。2.1.1.5 盐酸法[23]：取样品浓缩液，用2mol/L盐酸调节其PH至3，放置过夜，在3000r/min条件下离心，弃去沉淀，即脱去蛋白质。 另有李知敏[23]和叶将瑜[25]等人分别在植物多糖实验中证明：盐酸法、三氯乙酸法及Sevag法脱蛋白率分别为72.5％、46.1％和42.3％，多糖的损失率分别为15.1%、6.1％和14.3％。盐酸法脱蛋白率高，但多糖的损失率也较高;三氯乙酸法较温和，但除蛋白效率不高；Sevag法的脱蛋白效果不及前两种。2.1.1.6 其它方法：可以加入5%ZnSO4溶液和饱和Ba（OH）2溶液，振荡后离心去蛋白。此法除蛋白不够彻底，可结合Sevag法使用。还可在提取液中加入50%的TCA溶液至沉淀完全，在4000r/min的条件下离心10min，收集上清液，即为除蛋白液。还有人使用4:1的氯仿-乙醇溶液除蛋白，将混合液清摇，再静置，取上清液。此过程需重复多次方可除尽蛋白。除去蛋白质的样品用紫外分光光度计检验，观察在280mm处是否有吸收，如果无吸收则表明蛋白质已经除尽[24]。2.1.2 除色素2.1.2.1活性炭（activated carbon）除色素[12]：活性炭属于非极性吸附剂，有着较强的吸附能力，特别适合于水溶性物质的分离。它的来源充足，价格便宜，上柱量大，适用于大量制备性分离。目前用于色谱分离的活性炭主要分为粉末状活性炭、颗粒状活性炭、锦纶活性炭三种。一般情况下，尽量避免用活性炭处理，因为活性炭会吸附多糖，造成多糖的损失。2.1.2.2对于植物来源的多糖，可能含有酚型化合物而颜色较深，这类色素大多呈负性离子，不能用活性炭吸收剂脱色，可用弱碱性树脂DEAE纤维素或DuoliteA－7来吸附色素。2.1.2.3若糖和色素时结合的，易被DEAE纤维素吸附，不能被水洗脱，这类色素可进行氧化脱色：以浓氨水或NaOH液调至PH8.0左右，50℃以下滴加H2O2至浅黄色，保温2小时。2.1.2.4 依次用丙酮、无水乙醚和无水乙醇洗涤多糖，即可得到较为纯净的多糖。此法较为简单，便于操作，多糖损失也较小。2.1.2.5 用4:1的氯仿-正丁醇除色素。操作简单，多糖有一定损失。2.1.2.6发酵来源的多糖颜色一般较浅，色素含量较少，一般可不除色素。2.1.2.7对于动物，微生物等提取得到的多糖也可根据不同情况按上述方法处理。2.1.3 除低聚糖等小分子杂质2.1.3.1采用逆向流水透析法。即准备好一桶蒸馏水，用一根导管将水通入透析袋的烧杯底部，另用一根导管将水引出，根据水量控制流速，使水缓慢流动48小时。这样得到的就是多糖的半精品。2.1.3.2利用溶液浓度扩散效应，将分子量小的物质如无机盐、低聚糖等从透析袋渗透到袋外的蒸馏水中，不断换水即可保持浓度差，从而除尽小分子杂质。具体的做法是根据多糖溶液的体积截取相应长度的透析袋，用透析夹夹住一端，灌入多糖液，离液面2－3cm处夹紧透析袋，置于一大烧杯中，注入蒸馏水至完全浸没透析袋后，用磁力搅拌器慢速搅拌，每12小时换一次水，重复3－4次。2.2 多糖的纯化方法 纯化是将多糖混合物分离为单一多糖的过程，纯化的方法主要有以下几种：2.2.1 分部沉淀法 根据各种多糖在不同浓度的低级醇或丙酮中具有不同溶解度的性质，逐次按比例由小到大加入甲醇或乙醇或丙酮，收集不同浓度下析出的沉淀，经反复溶解与沉淀后，直到测得的物理常数恒定（最常用的是比旋光度测定或电泳检查）。这种方法适合于分离各种溶解度相差较大的多糖。为了多糖的稳定，常在pH7进行，唯酸性多糖在pH7时－COOH是以－COO` 离子形式存在的，需在pH2－4进行分离，为了防止苷键水解，操作宜迅速。此外也可将多糖制成各种衍生物如甲醚化物、乙酰化物等，然后将多糖衍生物溶于醇中，最后加入乙醚等极性更小的溶剂进行分级沉淀分离。2.2.2 盐析法 在天然产物的水提液中，加入无机盐，使其达到一定浓度或饱和，促使有效成分在水中溶解度降低沉淀析出，与其它水溶性较大的杂质分离。常做盐析的无机盐的有氯化钠、硫酸钠、硫酸镁、硫酸铵等。2.2.3 季铵盐沉淀法 季铵盐及其氢氧化物是一类乳化剂，可与酸性糖形成不溶性沉淀，常用于酸性多糖的分离。通常季胺盐及其氢氧化物并不与中性多糖产生沉淀，但当溶液的PH增高或加入硼砂缓冲液使糖的酸度增高时，也会与中性多糖形成沉淀。常用的季铵盐有十六烷基三甲胺的溴化物（CTAB）及其氢氧化物（cetyl trimethyl ammonium hydroxide，CTA－OH）和十六烷基吡啶（cetylpyridinm hydroride，CP－OH）。CTAB或CP－OH的浓度一般为1％－10％（W/V）的多糖溶液中，酸性多糖可从中性多糖中沉淀出来，所以控制季铵盐的浓度也能分离各种不同的酸性多糖。值得注意的是酸性多糖混合物溶液的PH要小于9，而且不能有硼砂存在，否则中性多糖将会被沉淀出来。2.2.4 柱层析：包括纤维素柱层析、纤维素阴离子交换柱层析、凝胶柱层析、亲和层析、高压液相层析和其它柱层析。如用活性炭及硅胶做载体的柱层来分离多糖；或用硼砂型的离子交换树脂分离中性多糖。纤维素柱层析 纤维素柱层析对多糖的分离既有吸附色谱的性质，又具有分配色谱的性质，所用的洗脱剂是水和不同浓度乙醇的水溶液，流出柱的先后顺序通常是水溶性大的先出柱，水溶性差的最后出柱，与分级沉淀法正好相反。纤维素阴离子交换柱层析 最常见的交换剂为DEAE－纤维素（硼酸型或碱型），洗脱剂可用不同浓度的碱溶液、硼砂溶液、盐溶液等。此方法目前最为常用。它一方面可纯化多糖，另一方面还适于分离各种酸性多糖、中性多糖和粘多糖。凝胶柱层析 凝胶柱层析可将多糖按分子大小和形状不同分离开来，常用的凝胶有葡聚糖凝胶（sephadex G）、琼脂糖凝胶（sepharose bio－gel A）、聚丙烯酰胺凝胶（bio－gel P）等，常用的洗脱剂是各种浓度的盐溶液及缓冲液，但它们的离子强度最好不低于0.02。出柱的顺序是大分子的先出柱，小分子的后出柱。由于糖分子与凝胶间的相互作用，洗脱液的体积与蛋白质的分离有很大的差别。在多糖分离时，通常是用孔隙小的凝胶如sephadex G－25、G－50等先脱去多糖中的无机盐及小分子化合物，然后再用孔隙大的凝胶sephadex G－200等进行分离。凝胶柱层析法不适合于粘多糖的分离。亲和层析 用凝聚素（一般是蛋白质和糖蛋白）做亲和色谱来分离多糖。高压液相层析2.2.5 制备性区域电泳 分子大小、形状及所负电荷不同的多糖其在电场的作用下迁移速率是不同的，故可用电泳的方法将不同的多糖分开，电泳常用的载体是玻璃粉。具体操作是用水将玻璃粉拌成胶状、柱状，用电泳缓冲液（如0.05mol/L硼砂水溶液，PH9.3）平衡3天，将多糖加于柱上端，接通电源，上端为正极（多糖的电泳方向是向负极的），下端为负极，其单位厘米的电压为1.2－2V，电流30－35MA，电泳时间为5－12小时。电泳完毕后将玻璃粉载体推出柱外，分割后分别洗脱、检测。该方法分离效果较好，但只适合于实验室小规模使用，且电泳柱中必须有冷却夹层。2.2.6 金属络合物法 常用的络合剂有费林溶液、氯化铜、氢氧化钡和醋酸铅等。2.2.7 其它方法：纯化除采用上述方法外，还有超过滤法（多糖溶液通过各种已知的超过滤膜就能达到分离）、活性炭柱色谱。另据报道，国外多采用的LKB柱色谱系统，用比旋度、示差折射及紫外检测多糖，各组分的峰位自动记录，分离效果好且方便。2.3 多糖纯度的鉴定2.3.1超离心法 由于微粒在离心力场中移动的速度与微粒的密度、大小和形状有关，故当将多糖溶液进行密度梯度超离心时，如果是组分均一的多糖，则应呈现单峰。具体的做法是将多糖样品用0.1molNaCl或0.1molTris盐缓冲溶液配制成1％－5％的溶液，然后进行密度超离心，待转速达到恒定后（通常是60000r/min），采用间隔照明的方法检测其是否为单峰。2.3.2高压电泳法 由于中性多糖导电性差、分子量大、在电场中的移动速度慢，故常将其制成硼酸络合物进行高压电泳。多糖的组成不同、分子量不同，其与硼酸形成的络合物就不同，在电场作用下的相对迁移率也会不同，故可用高压电泳的方法测定多糖的纯度。通常高压电泳所用的支持体是玻璃纤维纸、纯丝绸布、聚丙酰铵凝胶、纤维素醋酸酯薄膜等。缓冲液是PH9.3－12的0.03－0.1mol的硼砂溶液，电压强度约为30－50V/cm，时间是30－120min。由于电泳时会产生大量的热，所以要有冷却系统，将温度维持在0℃左右，否则会烧掉支持体。一般单糖、低聚糖因醛基而发生的颜色反应在多糖上不明显，电泳后常用的显色剂是p－茴香胺硫酸溶液（p－anisidine）和过碘酸希夫试剂等。2.3.3凝胶柱层析 常用的凝胶是Sephadex、Sepharose、Sephacryl，展开剂为0.02－0.2molNaCl溶液或0.04mol吡啶与0.02醋酸1：1的缓冲溶液，柱高和柱直径之比大于40。2.3.4旋光测定法 在多糖水溶液中加入乙醇使其浓度为10％左右，离心得沉淀。上清液再加入乙醇使其浓度为20％－25％，离心所得二次沉淀，比较二次沉淀的比旋度。如果比旋度相同则为纯品，否则为混合物。2.3.5其它方法：官能团摩尔比恒定法，即如为纯品两次分离所得产物的官能团如－COOH、－NH2、－SO3H、－CHO等摩尔比应该恒定。类似的方法还有示查折射法、HPLC法等。此外德国常用高压液相法来检测多糖纯度，结果可靠。 必须注意的是：纯度检查一般要求有上述两种方法以上的结果才能肯定。

二次世界大战期间，美国为了尽快结束太平洋战争，在1945年的8月6号和9号在日本的长崎和广岛投下了两颗原子弹，日本被迫投降。在原子弹爆炸的地方三个月内都寸草不生，但唯独在立刻木头上长出了非常正常的香菇！！！这一现象引起了日本科学家浓厚的兴趣，于是就带回实验室去研究，终于在1963年发现香菇里有一种多糖，能够抗辐射和提升动植物的免疫力。1966年日本就把该项成果进行了产业化，试用于大量癌症患者身上，起到了良好的效果。日本因祸得福，于是把这一成果公布于世，并且号称医学界的“原子弹爆炸”！！！

1968年我们的国家总理周恩来因日理万机很不幸患上了癌，但是那时候敬爱的周总理是我们国家的顶梁柱，医学界所有的医学专家对周总理的病情束手无策。于是四处打听，最后终于打听到日本有一种香菇多糖能对周总理的病进行控制。但是那个时候中国和日本没有什么外交关系，于是就通过民间的渠道几经周折后从日本高价进口回来给周总理服用。服用一段时间后，周总理的病情得到了控制。但是当周总理知道事情的原委后，他心里非常的难过。他说“香菇在中国遍地都是，为什么我们自己不能研制出来造福我们中国人民呢？”于是就下令一定要研制出中国的香菇多糖。中国人民解放军第一军医大学（现南方医科大学）也接到这一光荣而艰巨的任务，并列入国防部重点攻关项目。

以冼显秀教授为主的科学家经过二十多年的努力，终于成功的从香菇里提取了多糖，并陆续从银耳、金针菇、灵芝、茯苓等食用菌和中草药中提取了多糖，科学家根据中医理论、运用复方技术成功的研制出复合多糖！！！当时这一科研成果远远超过日本和美国至少二十年以上。经过多次临床实验证明:复合多糖对提升人体免疫力有着非常显著的功效，对于这一成果在部队只有大校级（相当于省长）以上的人才有资格试用