投稿原始数据溶解曲线

原始图谱做负导数换算后得到熔解曲线的导数图谱，导数图谱会出现熔解峰，熔解峰对应的温度就是Tm值。 随着PCR的进行，双链产物的不断增加，嵌入到双链中的荧光分子也不断增多，荧光信号逐渐增大。在扩增结束后，体系内的双链产物最多，荧光信号强度达到一个最高值。之后我们设置一段由65℃逐渐升温到95℃的程序，随着温度逐渐升高，DNA双链逐渐解链为单链，嵌入到双链中的荧光染料分子也会逐渐脱落下来，荧光信号强度逐渐下降。在某段温度时，双链迅速而大量地解链，荧光信号强度骤然下降，在这段温度中，一半的双链解链的温度我们称为熔解温度（即Tm值）。最终，DNA双链完全解链为单链，荧光值下降为一个本底水平。这一整体过程中的荧光信号随温度变化的曲线就是熔解曲线，称为原始图谱。

需要的科学引文索引以其独特的引证途径和综合全面的科学数据，通过统计大量的引文，然后得出某期刊某论文在某学科内的影响因子、被引频次、即时指数等量化指标来对期刊、论文等进行排行。被引频次高，说明该论文在它所研究的领域里产生了巨大的影响，被国际同行重视，学术水平高。由于SCI收录的论文主要是自然科学的基础研究领域，所以SCI指标主要适用于评价基础研究的成果，而基础研究的主要成果的表现形式是学术论文。所以，如何评价基础研究成果也就常常简化为如何评价论文所承载的内容对科学知识进展的影响。扩展资料：收录类型一、正刊二、特刊特刊往往是一期具备特定主题的正刊，比如疟疾疾病在某国家的流行情况及治疗研究进展。但是由于拥有特定的主题，特刊往往在被SCI数据库收录的时候加上special issue字样。国内目前有些高校并不认可特刊，认为其跟国内的特刊一样，质量非常的低，甚至将特刊同增刊混为一谈，这是大错特错的。正常情况下，特刊和增刊拥有以下4个区别：1、在英文当中，特刊的意思是special issue，而增刊的意思是supplementary 2、特刊是针对某一主题而集中发布的具有相同主题文章的专辑，增刊是在正常版面之外刊登的论文3、特刊有正规版面期卷号是正刊中的一期，增刊没有正式的期卷号以及页码，不是正刊中的一期4、特刊会被SCI数据库全文检索，且检索类型为论著而增刊通常很少会被检索，且检索类型通常为会议三、增刊四、会议集五、新闻六、编语参考资料来源：百度百科-SCI

总的DNA双螺旋结构降解一半的温度称为熔解温度（Tm），不同序列的DNA，Tm值不同。DNA中G－C含量越高，Tm值越高，成正比关系。原理扩增反应完成后，通过逐渐增加温度同时监测每一步的荧光信号来产生熔解曲线，熔解温度上有一特征峰（Tm，DNA双链解链50%的温度），用这个特征峰就可以将特异产物与其它产物如引物二聚体区分开，因为它们在不同的温度熔解线，随着反应中双链DNA变性，荧光染料又恢复到游离状态导致荧光信号降低，用荧光信号改变与温度作图，在扩增产物的只有染料法才需要做熔解曲线，探针法没有必要，因为熔解曲线是由于染料法的特异性差，所以通过熔解曲线考察扩增产物是否是目标产物，与电泳的其中的一个目的相同，但熔解曲线毕竟是数学推导，并且结果中包含了仪器的误差。应用分析real time PCR 结果的特异性：出现单峰说明扩增产物特异性好，出现杂峰特异性差，存在非特异性扩增，如引物二聚体等。一般是用SYBR Green作为荧光染料的时候使用，因为SYBR Green染料是非特异的染料，只要有扩增，染料就可以镶嵌在双链中发出荧光。做溶解曲线是为了观察我们扩增发出荧光的片段是不是我们需要的产物。如果溶解曲线做出来只有单峰，且出峰位置是你的退火温度，那么这个是你的产物发出的荧光，实验结果有效。

PCR熔解曲线分析法是做realtime-pcr时分析，用来确定不同的反应产物，包括非特异性产物的分析方法。原理是在扩增反应完成后，通过逐渐增加温度的同时监测每一步的荧光信号来产生溶解曲线，随着反应中双链DNA变性，荧光染料又回复到游离状态导致荧光信号降低，用荧光信号改变的负的一次导数与温度作图，在扩增产物的溶解温度上有一特征峰（Tm，DNA双链解链50％的温度），因为它们在不同的温度溶解，所以用这个特征峰就可以将特异产物与其它产物如引物二聚体区分开。我的回答不知道对你是不是有参考作用。