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当然会，否则就不会维普那么便宜，知网那么贵了，毕竟系统不一样。 在国内就是知网/维普/万方这三大系统，这里面的资源是不断更新的，每一年毕业生的论文除有保密要求外的基本上都是收这三大系统收录作为比对资源库，所以你就可不能大意啊国内就是三大系统，知网/维普/万方知网不对个人开放，维普及万方对个人开放万方不检测互联网及英文，知网及维普都检测互联网及英文。现在，所有学校对于硕士、博士毕业论文,必须通过论文检测查重才能算合格过关。本科毕业生，大部分211工程重点大学，采取抽检的方式对本科毕业论文进行检测查重。抄袭或引用率过高，一经检测查重查出超过百分之三十,后果相当严重。相似百分之五十以下，延期毕业，超过百分之五十者，取消学位。辛辛苦苦读个大学，花了好几万，加上几年时间，又面临找工作，学位拿不到多伤心。但是，所有检测系统都是机器，都有内在的检测原理，我们只要了解了其中内在的检测原理、系统算法、规律，通过检测报告反复修改，还是能成功通过检测，轻松毕业的。 特别需要注意的问题：面总结几个常见问题：一、有些书籍的年份久远，知网等检测系统没有收录这些材料，大段大段的copy是不是很安全？也有同学认为，数据库大多是往届学生论文和期刊的文章，书本和政府工作报告等暂未入库，直接抄书一般也不会“中招”。答：这些做是存在风险的。第一，虽然中国知网没有收录书籍，但是可能存在a同学或者老师，他同样也抄了同样的内容，并且已经将其抄书的论文发表了，中国知网能数据库全文收录a的文章，那么你再抄同样的内容，在进行论文检测的时候，很可能指向a的文章，将会被认定为抄袭。“但如果所抄书本，前几年有人抄过，还是会被测到，因此大家会选择最近两年出版的新书来抄。”但是，新书也可能存在抄别人或者被别人抄的现象。另外，在论文评审的时候，评审专家的经验和理论水平比较丰富，你大段的引用可能被这些老专家们发现，到时候结果就很悲催了！二、现在有些网页上也有很多相关材料，撰写论文能不能复制上面的内容？比如百度文库、豆丁？”。答：也是很危险的。网页很大程度上来源于期刊网，不少文章是摘抄期刊网上的文章，通过n篇论文粘贴复制而成。另外有些数据库已经将互联网网页作为数据库的组成部分之一。连续13个字相同，就能检测出来你可以把原文的内容，用新的文字表达出来，意思相似就可以了，最好用联想法，就是看一遍用自己的语叙述出来，但要做到专业性，就是同义词尽量用专业术语代替，要做到字不同意思相同。例如主动句改成被动句，句式换了，用同意词或是用专业术语代替等等。还要注意论文框架。 降低抄袭率率的方法：1划分多的小段落来降低抄袭率。 2.很多书籍是没有包含在检测数据库中的 ，比如论著。可摘抄3.章节变换不可能降低复制率4.论文中参考文献的引用符号，但是在抄袭检测软件中，例如一篇文章有5000字,文章的1%就是50字，如果抄袭了多于50，即使加了参考文献，也会被判定为抄袭。 只要多于20单位的字数匹配一致，就被认定为抄袭修改方法：首先是词语变化。文章中的专业词汇可以保留，尽量变换同义词；其次，改变文中的描述方式，例如倒装句、被动句、主动句；打乱段落的顺序，抄袭原文时分割段落，并重组。 知网查重是以句子为单位的。即将文章以句子为单位进行分割，然后与知网数据库中的论文逐句对比，若其中有主要内容相同（即实词，如名词、动词、专业词汇等），则标红。若一个段落中出现大量标红的句子，则计算在论文重复率中。按照我自己的经验，避免查重最好的办法，就是把别人论文中的相关段落改成用自己的语言写出来。比如调换句子之间的顺序，更重要的是改变句子主谓宾的结构。按照这样的方法，我的论文重复率大概在3%左右，没有任何问题。希望可以帮到你！ 是这样的。因为基本上都是以句子为单位的。不过从现在掌握的情况来看，实际上是针对每段的内容，将该段的所有句子打散，然后逐句对比查重。比如说你的论文中的一段有A、B、C、D四句话，数据库中一篇文章的一段中有E、F、G、H四句话。那么比较的时候，应该是A、B、C、D分别于E、F、G、H比较，笨一点说，就是比较16次。这样的话，单纯改动句子顺序就不好用了，必须改变句子结构才可以。 一、各个数据库论文检测系统的比较和选择 众所周知，数据库有三驾马车：中国知网（cnki）、万方、维普；一般高校硕士、博士毕业论文都用的是知网论文检测系统（本科毕业论文我不太清楚，不过80%应该用的也是知网论文查重系统），因为知网是全国学位论文和期刊论文收录最齐全，势力最强大的一种数据库，万方其次，维普的就比较糟糕，不值得一提了，收录量比较少。一般数据库的收录程序是这样的，各个数据库去高校联络本校毕业论文资源，基本上是几家数据库垄断的，给知网就不会给万方，给万方就不会给知网，因为知网势力强大，提供的优惠多，所以绝大多数高校都是将资源提交给了知网，我为什么要说这个呢，很多同学检测论文抄袭的时候，不知道是选择知网还是万方或者维普，知网是有绝对的权威性和垄断性，跟学校检测的结果是一致的，所以才敢这么牛气，要价这么高，不过我还听说，价格高是因为知网一次只能检测5000字，所以一篇硕士有2-3万次，需要提交好多次才能检测完，到底是不是这样我也没有得到证实。 二、知网检测系统的工作原理和对策第一、知网学位论文检测为整篇上传，上传论文后，系统会自动检测该论文的章节信息，如果有自动生成的目录信息，那么系统会将论文按章节分段检测，否则会自动按每一万字左右分段检测。第二、有部分同学反映说自己在段落中明明引用或者抄袭了其他文献的段落或句子，为什么没有检测出来，这是正常的。中国知网对该套检测系统的灵敏度设置了一个阀值，该阀值为3%左右，以段落计，低于3%的抄袭或引用是检测不出来的，这种情况常见于大段落中的小句或者小概念。举个例子：假如段落1有10000字，那么引用单篇文献100字以下，是不会被检测出来的。实际上这里也告诉同学们一个修改的方法，就是对段落抄袭千万不要选一篇文章来引用，尽可能多的选择多篇文献，一篇截取几句，这样是不会被检测出来的。第三、针对标红文字的修改方式除了第二点中提到的外，还有改词、换句、改变描述方式（变原句为倒装句、被动句、主动句等）、打乱段落顺序、替换关键词汇、关键句等。经过实践证明，使用以上方法结合，可有效降低复制比，保证顺利通过。例如下句：过热故障中的过热与变压器正常运行下的发热是有区别的，正常运行时的其发热源来自于绕组和铁芯，即铜损和铁损，而变压器过热故障是由于受到有效热应力而造成的绝缘加速劣化，它具有中等水平的能量密度。几乎被标红，说明与相似文献存在重合和高度相似，经过以上方式结合，本句可改为： 过热故障中出现的过热容易与变压器正常运行下的发热相混淆，后者是因为其绕组和铁芯会出现铜损和铁损的现象，这是正常运行过程中的发热，而变压器过热故障是受到有效热应力造成的绝缘加速劣化，具有中等水平的能力密度。 第四：Google新用如果说以上所有同学的“反反抄袭”密招都还在大家的理解范围之内的话，那么这种“反反抄袭”法，则让人瞠目结舌，以为自己遇到了火星人。 这种方法，命名为“Google法”。“所‘Google法’，就是找一篇现成的论文，把论文的每一段都用Google在线翻译成英文，然后将翻译好的英文用Google在线翻译全部转回中文。猛地看上去，跟原文差不多；可是仔细一看，其实每句话都不一样！只要自己再把少量的语病改一改，就大功告成了。” 知网论文检测的系统原理是连续13个字相似或抄袭都会被红字标注，但是必须满足3里面的前提条件：即你所引用或抄袭的A文献文字总和在你的各个检测段落中要达到5%。如果13个字里有一半相似，会算一半疑似相似，所以一定要变换句式，用专业术语代替，要改的仔细彻底，切记，切记。 知网检测范围：中国学术期刊网络出版总库中国博士学位论文全文数据库中国优秀硕士学位论文全文数据库中国重要会议论文全文数据库中国重要报纸全文数据库中国专利全文数据库互联网资源英文数据库(涵盖期刊、博硕、会议的英文数据以及德国Springer、英国Taylor&Francis 期刊数据库等)优先出版文献库港澳台学术文献库互联网文档资源 知网系统计算标准详细说明：1．看了一下这个系统的介绍，有个疑问，这套系统对于文字复制鉴别还是不错的，但对于其他方面的内容呢，比如数据，图表，能检出来吗？检不出来的话不还是没什么用吗？学术不端的各种行为中，文字复制是最为普遍和严重的，目前本检测系统对文字复制的检测已经达到相当高的水平，对于图表、公式、数据的抄袭和篡改等行为的检测，目前正在研发当中，且取得了比较大的进展，欢迎各位继续关注本检测系统的进展并多提批评性及建设性意见和建议。 2．按照这个系统39%以下的都是显示黄色,那么是否意味着在可容忍的限度内呢?最近看到对上海大学某教师的国家社科基金课题被撤消的消息,原因是其发表的两篇论文有抄袭行为,分别占到25%和30%. 请明示超过多少算是警戒线？百分比只是描述检测文献中重合文字所占的比例大小程度，并不是指该文献的抄袭严重程度。只能这么说，百分比越大，重合字数越多，存在抄袭的可能性越大。是否属于抄袭及抄袭的严重程度需由专家审查后决定。 3．如何防止学位论文学术不端行为检测系统成为个人报复的平台？这也是我们在认真考虑的事情，目前这套检测系统还只是在机构一级用户使用。我们制定了一套严格的管理流程。同时，在技术上，我们也采取了多种手段来最大可能的防止恶意行为，包括一系列严格的身份认证，日志记录等。 4．最小检测单位是句子，那么在每句话里改动一两个字就检测不出来了么？我们对句子也有相应的处理，有一个句子相似性的算法。并不是句子完全一样才判断为相同。句子有句子级的相似算法，段落有段落级的相似算法，计算一篇文献，一段话是否与其他文献文字相似，是在此基础上综合得出的。 5．如果是从相关书籍上摘下来的原话，但是此话已经被数据库中的相关文献也抄了进去，也就是说前面的文章也从相关书籍上摘了相同的话，但是我的论文中标注的这段话来自相关的书籍，这个算不算学术抄袭？检测系统不下结论，是不是抄袭最后还有人工审查这一关，所以，如果是您描述的这种情况，专家会有相应判断。我们的系统只是提供各种线索和依据，让人能够快速掌握检测文献的信息。6．知网检测系统的权威性？学术不端文献检测系统并不下结论，即检测系统并不对检测文献定性，只是将检测文献中与其他已发表文献中的雷同部分陈列出来，列出客观事实，而这篇检测文献是否属于学术不端，需专家做最后的审查确认。 关于知网相关抽查规定：有规定的，可以进行第一次修改，修改之后通过就可以答辩，如果第二次不通过就算结业，在之后4个月内还要交论文或者设计的。这个是在抄袭30%的基础上的。 如果抄袭50%以上的话，直接结业 在之后4个月内还要交论文或者设计的。1．被认定为抄袭的本科毕业设计（论文），包括与他人已有论文、著作重复总字数比例在30%至50%（含50%）之间的，需经本人修改。修改后经过再次检测合格后，方可参加学院答辩。再次检测后仍不合格的，按结业处理。须在3 个月后提交改写完成的毕业设计（论文），检测合格后再参加答辩。2．被认定为抄袭的本科毕业设计（论文），且与他人已有论文、著作重复总字数比例超过50%的，直接按结业处理。须在4 个月后提交改写的毕业设计（论文），检测合格后再参加答辩。
1.Copycheck
新用户分享他们的网站或关注他们的微博就可以免费获得一次6000字数的论文检测高校版检测机会。他的相似度超低，估计其检测技术比较落后。不过检测字数比较多，在前期还是可以用来粗略检测一下的。
推荐指数：★★★
2.WriteHelp
写邦2.0检测系统正式上线，新用户注册可免费获取3000字论文检测。这是个新的，14年8月成立的，但从未用过，大家没事可以去试试。
推荐指数：★★★
3.PaperTest
注册成为会员，以手机短信验证方式获取免费使用的验证码，进行免费测试。每天送出3000个5000字的免费论文检测资格。找出的都是网上的资料!
推荐指数：★★★
4.中国搜文章照妖镜
中国搜文章照妖镜，可以说是全免费的，但它每次只能检测3000个字，检测功能是嵌入在众果搜里的，用户体验度不是很好，但至少是全免费的，有兴趣的可以试试。(界面就很low，可以自己去看)
推荐指数：★★
随便说一下付费的，论文检测最牛的当然是知网，它唯一的缺点就是贵，两百多啊，有钱的推荐去用，可以去淘宝上买，有便宜些的。还有一个paperpass，听说还可以。有两个同学用过，需要等比较长的时候，有一次等到第二天才出来
以上是环球青藤小编整理的免费查重网站的相关内容，希望对各位小伙伴们有所帮助，更多考研相关信息尽在本平台，一起来看看吧!
PaperRater 第一次使用可以免费20000字。第一步：百度搜索 paperrater 第二步：进入网站注册检测账户第三步：参加免费检测活动，获取免费检测第四步：提交检测，查看检测结果
第一，同义词替换:
修改硕士论文时，最简单的就是替换简单的同义词。在表达上，可以对原句进行调整，保持原意。或者使用翻译系统对内容进行多次翻译和整理，但论文质量相对较低，后期应该会有所改进。建议尽量少用。
二、图像、文字和图形的结合:
由于学生知识有限，很多观点并不具有很强的说服力。需要依靠专家和作者表达的观点来支持自己的论文论点。借用别人的意见是不可能的。这些内容不能删除。但是这些内容会让我们的论文重复率很高，所以建议同学们尽量用表格或者图片来代替文字，因为表格通常不在考察范围之内。文献中也有一些有效的表格数据，也可以用文字表达。
网页链接
娱乐圈是个美丽浮华的名利场，很多明星在镜头前呈现的形象都是人设，所以娱乐圈有很多人设崩塌的明星，自然也有很多令我庆幸自己及早脱粉的。
Angelababy
喜欢她的原因很简单，漂亮就好。个人认为Angelababy的颜值是娱乐圈顶尖的那层，虽然各花如各眼，但这花我独爱。她的黑历史很多，演技很烂这点大家都知道。我也曾为了美貌看过《孤芳不自赏》，那妆容那造型简直不要更美，那剧情那颜值简直不要更瞎，看完之后我都有种“我行我上”的错觉了。真正让我脱粉的是她不自知的言论，她在采访中表示上天给她这样的容貌，所以就可以承受得起一部电视剧8000万的片酬。并且自己一路不顺，顺利的话早就拿大满贯了。
这件事情让我不能接受，人可以无知但不能无耻吧。喜欢这个颜值尚且要忍受糟糕的演技看电视剧，但人不能得了便宜还卖乖，在浪费了这么多优质资源之后，低调本分地锻炼演技才行。
肖战
当然我也是因为觉得肖战长得帅喜欢他的，个人认为只有王爷和魏无羡的造型和颜值我可以接受，其他电视剧里颜值真心不太够，眼睛有点白眼的感觉。脱粉的原因是肖战的粉丝太疯狂了，疯狂到我觉得她们不但是年龄小而且是脑子有问题，肖战方对此根本没有正确的引导和管理。
就拿2月27日的举报事件来说，两三个大粉号召了近万名粉丝实名甚至是装作家长举报LOFTER和AO3，最终AO3被墙，很多圈子的粮仓直接没掉了。不仅如此还给网盘、b站这样的良心APP打一星。肖战迟迟不回复，只有工作室一篇无关痛痒、不讲重点的道歉。前几天甚至想用公益洗白，坑害无数基层人员。实在是没有太多的良知。
翟天临
我也曾非常喜欢学霸这个人设，娱乐圈的博士简直就是大熊猫，多么难得啊！但是一次直播，翟天临说了那句：“知，知网是什么”以后，我脱粉了。哪怕我只是个大学生，我都知道知网对论文的意义。一个博士不知道知网，就相当于一个厨师不会炒菜，简直是对学术的侮辱！这件事以后，翟天临的论文被扒，重复率非常高，人设崩塌学术圈震荡，甚至毕业生的论文被改变了查重标准，一个人震动了一个圈。现在写论文时，心里都不免暗骂翟天临。
写在最后
明星人设崩塌的概率太高了，个人认为对待明星还是要辩证一点，毕竟是个连面都没有见过的人，所以不要放置自己的所有信仰。
其实这样的网站不少，但这样的网站很少能够真正的做到搭桥的作用，为什么？第一网站自己的实力不足，不能全心全意为去投资人和项目人全方位服务，第二，不能完全的深入这样行业，因为创业，毕竟不是经常性的，所以这样的网站平时的留言量和回头率等不会高，而投资人也很难通过简单的说明详细了解项目。除非你做的网站形式和运用模式完全区别与现在存在的这类网站。
这个是肯定的，查重一般在毕业论文或者发表文献时用的比较多，要求自己的东西要重复率要小于多少多少，百度百科上的资料也是从书上借鉴过去的，凡是书上的资料也就是说已经出版的资料肯定是不能过多的用的，要想用的话可以用自己的话把你搜到的东西在说一遍，现在很多的大学生毕业论文很多都是这么写的
最好是不要直接复制百度百科的内容，因为论文会查重，直接复制百度百科的内容会导致重复率很高，论文会通不过，建议用自己的语言概括出来，这样可以减少重复率，论文过的机会也会比较大。论文是指进行各个学术领域的研究和描述学术研究成果的文章，它既是探讨问题进行学术研究的一种手段，又是描述学术研究成果进行学术交流的一种工具。包括学年论文、毕业论文、学位论文、科技论文、成果论文等。
其实最重要的呢，你就是注重于主题或者是其他的中心那论点，然后的话呢就是看有没有跑题而已。
首先知网查重期刊的时候价格与流程是如何的？知网查重对不同类型的文章都设置了专门的认可，比如本科生论文以及研究生论文都有对应的检测入口。其中也包含了知网期刊职称论文查重系统，也就是主要针对于期刊，价格大概在几十一篇。从根本上来说不同系统的分类，实际上的区别就是数据库不同。知网期刊职称论文检测系统的资料库收入全部为历年期刊杂志相关文献资料，其中本科查重系统收入为历届本科毕业论文。因为有分类，所以大家在选择的时候一定不要选错系统，如果期刊的文章进入本科查重系统，这样的结果对比以往的毕业论文，肯定是有误差的。
其次那知网查重期刊的流程是怎样操作的呢？论文的查重流程大同小异，我们选择好对应的查重入口后，再将论文提交到查重系统里面，这里要注意的就是论文格式。上传成功后接下来就是查重系统去进行，等待一段时间会得到一份查重报告，会详细的显示出查重率以及具体重复内容，那么就能按照查重报告的标红进行针对性的修改。
论文查重费一年内暴涨10倍，论文查重乱象太多
5月26日，话题#大四学生知网账号被盗后现电商平台#冲上微博热搜，揭开论文查重背后的多个乱象。不少毕业生反映称，论文查重率的要求更严格了，不仅为论文查重、降重“掏空了身体”，还“掏空了钱包”。
近日，“翟天临，睡了吗”这一话题在社交媒体引起热议。在该话题下，有网友称“论文改的面目全非，降重还没降下去”“学校的查重费已经飙升到800+了”“查重了四次还不过，翟天临你赔我的生活费”……
24日凌晨，演员翟天临通过个人实名认证微博发文：“我知道写论文的过程挺难的，如果骂我能帮助大家缓解论文季的压力，那我觉得被骂也是一件有意义的事。希望大家文明宣泄，宣泄完了加把劲儿，加油！保过（保佑过）”。
2019年年初，翟天临因在直播间问“知网是个什么东西”，其博士学位真实性遭到舆论质疑，也引起了学术界对论文抄袭现象的高度关注。此后，不少高校纷纷压低论文查重率。有当年毕业的网友回忆称，“往年是20%的论文查重率被压至15%以下”。
今年也被广大毕业生戏称为“天临三年”，也就是翟天临“不知知网”事件发生的第3年。不少毕业生反映称，论文查重率的要求更严格了，不仅为论文查重、降重“掏空了身体”，还“掏空了钱包”。
那么，论文查降重究竟多烧钱？
“购买论文查重、降重服务，总共花了6000多元。当时重复率显示合格，但学校查重时却没通过。”临近毕业季，河北某高校研究生李飞仍为毕业论文未能过审而发愁，为了降低论文重复率，他在某电商平台上购买了论文查重、降重服务，但“服务”效果并不理想。“论文写了大概6万字，光降重就花了3700元，但对方降重后，论文意思都变了。”
和李飞一样，不少高校毕业生也为论文查重降重担忧。于是，一些毕业生选择在电商平台购买论文查重、降重服务，而论文查降重的价格也因此一路水涨船高，部分店铺内的查重价格一年内暴涨10倍。
查重价格一年内暴涨10倍
“查重价格涨得太快了，我年前在淘宝买查重只花了128元，现在想再次购买，发现价格已经涨到380元了。”四川某高校毕业生张悦表示，从论文初稿到定稿，她购买了五、六次知网查重，目前她已在论文查重上投入近两千元。
尽管学校每年都会向毕业生提供免费论文查重机会，但往往查重次数较少，并不能满足毕业生论文写作的需求。且论文查重率又是论文送审及答辩的重要参考标准，因此毕业生们会想方设法寻求更多查重机会。
打开某电商平台搜索关键词“知网查重”，注意到，提供此项服务的卖家不在少数。其中，本科论文查重价格在180元至500元之间，硕士论文查重价格多在1300元以上，最高定价1800元。
知网论文查重报告单
论文重复率要求因学校、学历不同而有所差异，据论文查重网站PaperFree显示，部分高校对论文重复率要求在20%—30%之间即认为合格，另一些高校要求则较为严格，论文重复率需控制在5%—10%以内才能合格。
四川某高校毕业生论文查重要求
以毕业生的身份联系到某电商平台上自称可提供论文查重服务的卖家，该店客服称在售的本科论文及硕博论文查重服务皆为知网查重，“我们使用的是学校剩余名额”。该店铺信息显示，本科论文查重售价220元，硕博论文查重售价1380元。
该店所售产品的历史价格信息披露，从2020年5月至2021年5月，硕博论文查重价格从140元飙升至1380元，去年7月甚至涨至1980元，其价格一年内暴涨近10倍。
某电商平台所售硕博论文查重服务历史价格截图
5月19日，中国知网官方客服表示，知网所提供的论文查重服务只针对机构开放，个人无法通过知网官方渠道购买到查重服务。“我们也不太清楚查重服务定价方式和具体价格，需要问负责查重业务的销售。”
专家：花高价购买降重是投机取巧
北京云嘉律师事务所赵占领律师在接采访时表示，虽然电商平台高价出售学校向学生免费提供的知网论文查重名额不涉嫌违法，高校教师暗中倒卖知网查重机会也并未触及相关法律规定，但上述两种行为可能违反知网的相关约定，需要承担相应的违约责任。一般情况下知网会将出现违约转让、租借等行为的账号进行封禁处理。
“高校学生购买有偿论文降重服务不涉及违法，但从大原则上来讲可能存在学术行为不规范。”赵占领指出，毕业论文重复率过高不尽然是因为抄袭，很多学生只是不清楚学术规范，从而造成引用文献过多或引用格式不合理，导致论文查重率偏高。“与其花高价钱购买降重服务，不如在写作过程中严格遵守学术论文写作规范，从自身出发思考可行的论文提升路径。”
盘古智库高级研究员江瀚称，论文查重的目的是为了让学生的学术创作过程更加规范，保证学术成果的原创性。花高价去购买降重服务实际上是一种投机取巧的行为，对于整个学术规范而言，没有更好发挥其执行力，更没有发挥传统论文查重的价值。
整治论文查重黑市，需要联合发力
有需求就有市场，论文查重黑市就是这样。不仅有盗卖查重指标收费几元到几千元的，还有以假网站乱真的，让查重失去了价值和意义。对论文查重黑市必须联合整治。学生要从自我做起，端正学术思想，合理借鉴写出真知灼见。查重平台要加快系统升级，实行实名制认证，让盗用“无门”。学校要做好保密工作，敦促学生及时修改密码。相关部门要加强执法，共同发力，打击论文查重黑市。唯有多方共同发力，才能铲除黑市，肃清学术环境。
近日，正值毕业论文答辩季，与论文相关的.话题多次引发热议。
5月26日，话题#大四学生知网账号被盗后现电商平台#冲上微博热搜，揭开论文查重背后的多个乱象。
临近毕业，武汉一高校的多名大四学生反映，学校提供的免费中国知网账号被盗。查询后得知，其账号里附带的论文查重机会，被当作商品挂在电商平台上售卖。
据新京报消息，该校另有学生告诉记者，有班级共有38人，其中被盗号的就有14个人。
一位毕业生提到，并非所有高校都会提供知网免费查重的机会，有些学生就会选择上网购买。
知网：不对个人提供检测服务
其实，近些年大学生论文查重账号被盗屡禁不止。
2018年，广东中山市警方就曾接到过此类报案，警方调查发现，账号被盗用的学生人数多达两百余人；2019年，中国传媒大学南广学院多名学生也曾反映，学校提供的两次论文查重机会被人占用。
记者在多个平台搜索“知网论文查重”，发现有大量提供论文查重服务的网站与店铺，一次查重的价格从几元到上千元不等。
对于上述情况，知网法务部工作人员回应称，“知网不对个人提供检测服务，网上售卖的知网论文检测基本都是违规的。”建议学生拿到账号后立即修改密码，如有账号被盗，应联系学校或报警。
论文查重价格一年内暴涨10倍
近些年，不少高校纷纷压低论文查重率。据 消息，有当年毕业的网友回忆称，“往年是20%的论文查重率被压至15%以下”。
部分为论文降重担忧的毕业生选择在电商平台购买论文查重、降重服务，而论文查降重的价格也因此一路水涨船高，部分店铺内的查重价格一年内暴涨10倍。
该店所售产品的历史价格信息披露，从2020年5月至2021年5月，硕博论文查重价格从140元飙升至1380元，去年7月甚至涨至1980元，其价格一年内暴涨近10倍。
而店家则称，“我们使用的是学校剩余名额”。
为何高校免费查重名额会被拿到电商平台高价出售呢？中国知网法务部相关负责人此前在接受央视财经采访时曾表示，“一种情况是，高校内部存在部分人倒卖知网账号，学校有一些多余的检测篇数，可能就会被一些人拿去使用。”
在进行论文检测方面，知网论文查重可以说是该领域中的领导者。对该查重系统，很多学生也知道，只不过由于很多人是第一次接触，对该系统以及论文查重等还有很多不了解的地方，因此在检测的时候遇到很多问题。为了避免大家检测论文的时候遇到问题，影响大家毕业，paperfree论文查重下面为大家介绍一下该系统查重的注意事项。若是学校要求应用知网论文查重的话，大家一定要先确定学校是否直接提供查重，以及学校查重的要求等。有些学校是自己进行查重的，也就是说学生不需要额外的进行查重。但是有些学校会有查重次数的要求，有些是一次，有些是有几次机会，这些学生都要弄清楚，以为自身论文查重以及后期的修改提供一定的帮助与支持。对于学校不提供查重的，毕业生一定要对查重系统的选择给予重视，保障所选择到的是正规的知网，只有选择的是可靠的系统、不是假冒的系统，才可以得到真实、可信的查重结果。除了论文查重系统选择以外，在查重时间方面，毕业一定要给予重视。以往就有一些毕业生咨询，说论文查重报告怎么还没有出来。这一点大家一定要记清楚，知网的查重时间是比较长的，需要半小时到两三个小时。对于毕业生来说，不建议大家铤而走险，只留下半小时的时间去查重，即便是半小时内有结果了，可是超出了学校的要求，还需要进行进一步的修改，那你就已经没有时间来进行修改了。所以建议一定要提前，可以提前半天，这样即便是论文查重结果没有达到标准，也有足够的时间来进行修改。可以说这也算是有备无患吧，给自己留有一定的时间，这样就可以更好的解决问题。
室内空气污染现状分析与对策思考随着生活水平的提高和生活方式的改变，人们在室内生活的时间越来越长，室内空气质量的优劣直接影响到人们的工作和生活。低劣的空气质量会使人注意力分散，工作效率下降，严重时还会使人产生头痛、恶心、疲劳、皮肤红肿等症状，统称为“病态建筑综合症。”人们急切盼望改善日益恶劣的居室、办公环境，提高生存质量。一、室内空气污染情况分析人们一直认为空气污染严重的是室外。而事实上，办公室、居室、饭店、影剧院、歌舞厅等建筑物的室内环境对人们健康的影响远比室外要大得多。人的一生约有80％的时间是在室内度过的，因此，室内环境质量的好坏直接影响到人体健康。从现实情况看，室内空气质量远劣于室外大气环境。环保工作者提醒人们：室内空气污染程度常常比室外空气污染严重2～3倍，在某些情况下，甚至可达100多倍。在室内可检测出约300多种污染物，68％的人体疾病都与室内空气污染有关。造成室内空气的污染主要来源于以下5个方面：一是人体呼吸、烟气；二是装修材料、日常用品；三是微生物、病毒、细菌；四是厨房油烟；五是空调综合症。这些污染物随着呼吸进入人体内部，长期积累，严重危害着人们的身体健康。1．人体呼吸、烟气研究结果表明，人体在新陈代谢过程中，会产生约500多种化学物质，经呼吸道排出的有149种，人体呼吸散发出的病原菌及多种气味，其中混有多种有毒成分，决不可忽视。人体通过皮肤汗腺排出的体内废物多达171种，例如尿素、氨等。此外，人体皮肤脱落的细胞，大约占空气尘埃的90％。若浓度过高，将形成室内生物污染，影响人体健康，甚至诱发多种疾病。吸烟是室内空气污染的主要来源之一。烟雾成分复杂，有固相和气相之分。经国际癌症研究所专家小组鉴定，并通过动物致癌实验证明，烟草烟气中的“致癌物”多达40多种。吸烟可明显增加心血管疾病的发病机率，是人类健康的“头号杀手”。2．装修材料、日常用品室内装修使用各种涂料、油漆、墙布、胶粘剂、人造板材、大理石地板以及新购买的家具等，都会散发出酚、甲醛、石棉粉尘、放射性物质等，它们可导致人们头疼、失眠、皮炎和过敏等反应，使人体免疫功能下降，因而国际癌症研究所将其列为可疑致癌物质。3．微生物、病毒、细菌微生物及微尘多存在于温暖潮湿及不干净的环境中，随灰尘颗粒一起在空气中飘散，成为过敏源及疾病传播的途径。特别是尘螨，是人体支气管哮喘病的一种过敏源。尘螨喜欢栖息在房间的灰尘中，春秋两季是尘螨生长、繁殖最旺盛时期。4．厨房油烟过去，厨房油烟对室内空气的污染很少被人们重视。据研究表明，城市女性中肺癌患者增多，经医院诊断大部分患者为腺癌，它是一种与吸烟极少有联系的肺癌病例。进一步的调研发现，致癌途径与厨房油烟导致突变性和高温食用油氧化分解的致变物有关。厨房内的另一主要污染源为燃料的燃烧。在通风差的情况下，燃具产生的一氧化碳和氮氧化物的浓度远远超过空气质量标准规定的极限值，这样的浓度必然会造成对人体的危害。5．空调综合症长期在空调环境中工作的人，往往会感到烦闷、乏力、嗜睡、肌肉痛，感冒的发生机率也较高，工作效率和健康明显下降，这些症状统称为“空调综合症”。造成这些不良反应的主要原因是在密闭的空间内停留过久，CO2、CO、可吸入颗粒物、挥发性有机化合物以及一些致病微生物等的逐渐聚集而使污染加重。上述种种原因造成室内空气质量不佳，引起人们出现很多疾病，继而影响了工作效率。二、改善室内空气污染的对策室内空气质量好坏直接影响到人们的生理健康、心理健康和舒适感。为了提高室内空气质量，改善居住、办公条件，增进身心健康，必须对室内空气污染进行整治。1．使用最新空气净化技术对于室内颗粒状污染物，净化方法主要有静电除尘、扩散除尘、筛分除尘等。净化装置主要有机械式除尘器、过滤式除尘器、荷电式除尘器、湿式除尘器等。从经济的角度考虑首选过滤式除尘器；从高效洁净的角度考虑首选荷电式除尘器。对于室内细菌、病毒的污染，净化方法是低温等离子体净化技术。配套装置是低温等离子体净化装置。对于室内异味、臭气的清除，净化方法是选用0．2～5．6微米的玻璃纤维丝编织成的多功能高效微粒滤芯，这种滤芯滤除颗粒物的效率相当高。对室内空气中的污染物，如苯系物、卤代烷烃、醛、酸、酮等的降解，采用光催化降解法非常有效。例如利用太阳光、卤钨灯、汞灯等作为紫外光源，使用锐态矿型纳米TiO2作为催化剂。2．合理布局及分配室内外的污染源为了减少室外大气污染对室内空气质量的影响，对城区内各污染源进行合理布局是很有必要的。居民生活区等人口密集的地方应安置在远离污染源的地区，同时应将污染源安置在远离居民区的下风口方向，避免居民住宅与工厂混杂的问题。卫生和环保部门应加强对居民生活区和人口密集的地方进行跟踪检测和评价，以提供室内空气质量对人体健康的影响程度。3．加强室内通风换气的次数对于甲醛、室内放射性氡物质等，应加强通风换气次数，尤其是对甲醛的污染治理，其方法有三种：一是使用活性炭或某些绿色植物；二是通风透气；三是使用化学药剂。室内放射性氡的浓度，在通风时其浓度会下降；而一旦不通风，浓度又继续回升，它不会因通风次数频繁而降低氡子体的浓度，惟一的方法是去除放射源。对室内空气质量的要求不仅仅局限于家居，而是所有的室内场所都存在，如宾馆、酒店的房间、餐厅、娱乐场所和商场、影剧院、展览馆等，还有政府部门的办公室、会客室、学校以及其他办公场所。除重视科研与监测、加强队伍建设、制定行业标准、加强立法与宣传外，同时还要加大经费的投入，采用高新技术，研制新的高效率室内污染净化装置，消除室内空气污染，保障人们身体健康，这是十分近切而必要的。随着“以人为本”观念的逐步深入，人们对生存空间的质量越来越关注，对室内环境污染治理也日益重视。我们相信不久的将来，室内环境污染治理的状况一定会有一个较大的改观。
到是可以给你点资料参考。例如动物可以分为有无脊柱两类再在无脊椎动物里分环节动物和节肢动物脊椎动物又分为5类：爬行的，两栖的，鱼类的，鸟类的和哺乳的请根据微生物的不同点说先分为3类再在这3类里面有两个各自分为2种，一类分为3种~
微生物论文>>巧塔桥助达标19世纪德国教育学家第斯多惠认为：“一个坏教师奉送真理，一个好教师则教人发现真理。”这是很有道理的，因为学习是复杂的思维活动，是在教师引导下不断提出问题、分析问题和解决问题的过程。因此，在教学过程中，教师应根据学生实际，积极创造条件，巧妙搭桥，帮助学生达标。巧设疑，搭好兴趣—思维之桥课堂提问是教学活动中的重要形式，是师生感情交流的纽带，是课堂教学中信息反馈的主要途径。同时，也能诱发学生学习兴趣，启迪其思维，有助于达到教学目标。好的提问是启发学生思维的“激活酶”，强化记忆的“催化剂”。在讲授某一内容伊始，可先用适当有趣的事物来设置疑问，以诱发学生急于解疑的思维活动，引起他们强烈的学习欲望。例如，在讲授线形动物门——蛔虫时，学生对蛔虫比较熟悉，可是教师提出：蛔虫体积这样大，怎么能在人体内寄生呢？人体小肠分泌的消化液为什么不能将其消化吸收呢？这些问题对学生来说是陌生的。抓住学生熟悉但又不完全了解的事物，提出问题，设置悬念，可收到良好的教学效果。课堂问题设计成功与否，关键在于了解学生，掌握教学内容、目标，从而设计出不同的提问形式。所设计的问题要严谨，有针对性、灵活性，能引起学生的注意和思考，激发其兴趣，启发其思维，才能真正帮他们高效达标
笑死了。你以为天上掉馅饼？你觉得那个傻×会浪费时间帮你写？
农业的有农业科学，土壤微生物的选择《土壤科学》
多的是，去图书馆找咯，外文中文都有。特别推荐美国的《土壤微生物学》，挺小的一本，不过很详细也很专业。做的话，真菌、细菌、放线菌都可以做。具体也不知道你的方向是微生物生态类还是其他的，不好说那个好。
分子生物技术在微生物降解环境 污染物中的应用 [摘要〕介绍了与环境微生物关键降解酶基因的筛选、克隆及应用相关的分r生物技术，包括聚合酶链式反应技 术、基因重组技术、荧光原位杂交技术和生物信息学等技术，并对这些技术在污染物降解基因检测、筛选和克隆方 面的应用进行了阐述与探讨、 [关键词]分子生物技术;微生物;基因;环境污染物;降解 随着现代j:\地技术的发展，多环芳烃、含氯有 机物和硝基苯类化合物等人工合成井难以降解的 污染物大量排放，造成世界范围内的环境污染和生 态破坏，严重地威胁人类和其他生物的正常生存和 发展。利用微生物修复技术对受污染的水体及土 壤进行处理，凸显了其重要的意义和可行性。研究 人员发现并筛选到一些微生物，它们不仅对环境有 较高的适应性、对污染物有较高的耐受性，而且对 污染物有较强的降解效率和专一性。然而环境中 存在的大量微生物中仅有少于1%可通过传统的培 养方法进行培养、分离和纯化，绝大多数细菌需要 非常严格的营养条件川。因此，为了对修复环境有 所贡献却难以培养的微生物进行更全面了解，也为 了筛选到更多有利于降解环境污染物的微生物菌 种及其关键酶基因，分子生物技术和手段逐渐被广 泛应用到环境可降解污染物及降解机理方面的研 究中。 本文对近年来发展起来的聚合酶链式反应 (PCR)技术、基因重组技术、荧光原位杂交(FISH) 技术和生物信息学等多种分子生物技术进行了介 绍，并总结了它们在污染物降解基因检测、筛选和 克隆方面的应用。 1与环境污染物降解相关的分子生 物技术 1.1PCR及其相关技术 PCR是一种利用脱氧核糖核酸(DNA)半保留 复制原理，在体外扩增位于两段已知序列之间的 DNA区段从而得到大量拷贝的分子生物技术。根 据其模板、引物来源或扩增条件的不同，PcR技术 可分为以下几种:(l)反转录pCR(RT一PeR)技 术，将mRNA反转录为cDNA后再对其进行PCR 扩增，可用来构建cDNA文库，分析不同生长时期 的mRNA表达状况和相关性以及mRNA的定量测 定等;(2)巢式PCR技术，在扩增大片段目的DNA 时，先用非特意性引物扩增再用特意性引物对第一 次扩增产物进行第二次扩增，以获得可供分析的 DNA;(3)竞争PCR技术，是一种定量PCR，向PCR 反应体系中加人人工构建的带有突变的竞争模板， 通过控制竞争模板的浓度来确定目的模板的浓度， 对目的模板作定量研究;(4)实时荧光定量PCR技 术，在PCR反应体系中加人荧光基团，利用荧光信 号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线 对未知模板进行定量分析，该法已广泛用于基因表 达研究、转基因研究等方面;(5)扩增的rDNA限制 酶切分析技术，根据原核生物rDNA序列的保守性， 将扩增的rDNA片段进行酶切，通过酶切图谱来分 析菌间的多样性;(6)RNA随机引导PCR技术，基 于任意寡核昔酸引物与RNA之间可能的配对，在 低严谨度条件下经聚合酶催化使链延伸，将细胞总 RNA或InRNA作为反转录反应的模板，此技术结 合单链构象多态性，用非变性胶分辨大小相同而构 象不同的片段，可用于诊断遗传突变及分析污染条 件下序列的多态性;(7)随机扩增多态DNA (RAPD)技术，是一种基于PCR检测PCR引物结合 位点序列改变的方法，通常以10bp的寡核昔酸序 列为引物，对基因组DNA随机扩增，电泳分离染色 扩‘增产物，再分析多态性。 1.2FISH技术 FISH技术利用荧光标记的探针在细胞内与特 异的互补核酸序列杂交，通过激发杂交探针的荧光 来检测信号。荧光探针比放射性探针更安全，具有 较好的分辨力，不需要额外的检测步骤。近年来， 由于FISH技术具有灵敏、便捷等优点，迅速发展完 善成为研究环境微生物的有力工具。此外，可用不 同激发和散射波长的荧光染料标记探针，在一步反 应中同时检测几个靶序列。该技术主要包括试样 固定、预处理、预杂交、探针和试样变性、杂交、漂洗 去除未结合的探针、检测杂交信号等步骤。由于 165rRNA具有遗传稳定性，因此成为FISH技术检 测最常用的靶序列。 1.3基因重组技术 基因重组技术是从供体生物的基因组中通过 酶切扩增等手段获取目的基因，与载体连接形成重 组DNA分子，再导入到受体细胞中，让外源基因得 以表达。在已经分离出的许多菌株中，与降解能力 有关的基因多在质粒体上。由于质粒很容易在细 菌的繁殖过程中遗失，对细菌降解能力的长期稳定 非常不利，可将其与污染物降解有关的酶基因重组 到大肠杆菌等微生物中进行表达，以此构建的各种 生物降解特性增强的重组菌可用于污染环境的治 理修复或发酵某些废弃物。 1.4生物信息学 20世纪后期，生物学的迅猛发展，从数量上和 质量上极大地丰富了基因组数据库、蛋白质数据 库、酶数据库和文献数据库等许多生物科学的数据 资源。已有多个国家和国际科研组织建立了生物 信息数据库，如欧洲分子生物学实验室(Eur叩ean MolecularBiologyLaboratory)核酸序列数据库和美 国国家生物技术情报中心(Nationaleente:fo:Bio- technologyInformation，NCBI)基因序列数据库等。 科学家利用计算机及生物信息分析软件分析这些 数据资源，确定大分子序列、结构、表达模式和生化 途径与生物数据之间的关系，区分生物个体间遗传 差异，揭示DNA多样性。例如，基本局部比对搜索 工具(BasieLoealAlignmentSearehTool，BLAST)， 是一套在蛋白质数据库或DNA数据库中进行相似 性比较的分析工具。它基于Altschul等的方法「2〕， 在序列数据库中对查询序列进行同源性比对工作。 BLAST程序可对一条或多条、任何数量、任何形式的 序列在一个或多个核酸或蛋白序列库中进行比对，甚 至将有缺口的比对序列也考虑在内，利用比较结果中 的得分对序列进行相似性说明。基因的序列分析可 揭示出生物物种之间的关系，在污染治理研究中可用 于生物基因组特殊区域或特异基因的测序。 2分子生物技术在环境污染物降解 中的应用 2.1土壤试样总DNA的提取 用适当方法直接从土壤中提取DNA并纯化， 是从分子生物学角度对土壤微生物进行研究的前 提条件，而后可进行酶切、PCR扩增、核酸分子杂交 等分子生物学技术操作。从土壤中提取微生物 DNA主要分为汽接法和间接法}’{。直接法是在 ogram等的方法基础卜发展起来的，其主要包括2 个步骤:(l)原位细胞裂解;(2)DNA提取和纯化。 直接法提取的DNA超过细菌总DNA的60%且省 力，但提取的DNA常常有折断、腐殖酸污染、甚至 提取物中还夹杂有未知的胞外DNA和真核生物的 DNA。最先报道间接法的是Faegri等[‘〕，其主要包 括4个步骤:(l)分散土壤;(2)分离细胞与土壤; (3)细胞裂解;(4)DNA纯化。间接法提取DNA 产量低且费力，但纯度较高、DNA损伤小，提取的 大片段DNA可用来构建cos而d和细菌人工染色体 文库等。 2.2采用PCR及相关技术扩增分析DNA片段 可降解污染物的微生物必然能产生分解代谢 该污染物的酶。selvaratnam等L’l用编码苯酚单加 氧酶dmpN摹因的RT一PCR技术来检测序列间歇 式活性污泥反应器‘{一，降解酚的假单胞菌。检测结 果表明，RT一PCR技术不仅能检测微生物降解酚的 能力，还能测量dmpN基因的转录水平，从而确定假 单胞菌特殊的分解活性，发现了在转录水平下，酚 浓度与通气时间之问存在正相关关系。 将PCR技术和变性梯度凝胶电泳(DGGE)结 合起来，在变性条件适当的情况下能分辨一个碱基 对，分辨率较高。染色后的凝胶用成像系统进行分 析，可在一定程度l几反应试样的复杂性。条带的多 少能反应试样「 一 }1微生物组成的差异，条带的亮度能 反应试样中微生物的多少。基于以上优点，日前该 技术在微生物群落结构的分析和动态研究方面得 到了厂‘泛应用。DGGE可通过分析PCR扩增的基 因点突变来探索微生物的复杂性。徐玉泉等[“〕从 某废水中分离出一株能以苯酚为惟一碳源的菌株 PHEA一2，使用PCR一DGGE技术对该菌165 rDNA进行分析，发现该菌与醋酸钙不动杆菌同源。 M盯sh等r了)利用PcR一DGGE技术获得了活性污泥 中真核微生物的种群变化情况。王峰等下8〕采用 PCR一DGGE技术对城市污水化学生物絮凝处理中 活性污泥和生物膜微生物种群结构进行了分析，结 果表明活性污泥培养前后微生物种群结构发生r 很大改变。 RAPD技术也是一种应用比较广泛的以多态性 引物来扩增某些片段的技术。RAPD技术可用于检 测含有混合微生物种群的各种微生物反应器中微 生物的多样性。用RAPD技术分析检测实验室规 模的油脂淤泥培养料中的细菌菌群发现，用油脂淤 泥改良过的培养料比未改良的更适于不同的微生 物种群生长[9j。vainio等t’。〕从516种孤立的菌落 中提取出165rDNA，经PCR扩增后进行测序，检测 活性污泥中微生物种群的结构。这些组合技术的 应用显著增强r对微生物的检测和鉴定能力，为理 论研究工艺优化及提高生物处理效率提供了条件。 2.3基因重组 基因工程技术应用于环境保护起始于20世纪 80年代。其基本原理是通过基因分离和重组技术， 将目的基因片段，比如可编码降解某种污染物的 酶，转移到受体生物细胞中并表达，使受体生物具 有该目的基因表达显现的特殊性状，从而达到治理 污染的目的。找到特定污染的抗性基因，利用基因 重组技术转基因后也可获得其他抗性植株以及筛 选到可转化污染物的植物，还可开发超量积累植物 进行污染土壤的生物修复。 罗如新等L”〕用放射性同位素标记tfdc基因片 段作探针，Southemblot杂交定位Ll菌株的邻苯二 酚1，2一双加氧酶基因位于Pstl的I片段和BamH I的M、N片段，回收并将其直接克隆至表达载体 pKT230卜，获得的重组子能转化不具开环酶活性 的甲胺磷降解菌P2，得到高于天然宿主21倍的邻 苯二酚1，2一双加氧酶。stingley等{”〕通过构建基 因文库和重组质粒等基因工程方法证实了NidAB 双加氧酶是降解菲的关键酶类，并首次鉴定出此基 因通过磷苯二甲酸实现降解功能。chae等‘”}发现 不能降解苯酚的su如lobusso扣taricu、98/2菌株中 的儿茶酚2，3一双加氧酶基因与能降解苯酚的 sulfolo右u，，o如taricu、咫有[6J源区，分析得知它们 是山共同祖先进化而来。把儿茶酚2，3一双加氧酶 基因克隆到大肠杆菌中表达，可获得有较高降解活 性的双加氧酶。 重金属污染是环境污染的重要方面之一。随 着分子生物学技术的发展，越来越多的修复性蛋白 基因正被从植物、微生物和动物中陆续分离出来， 如汞离子还原酶基因、有机汞裂解酶基因、汞转运 蛋自基因、金属硫蛋白基因、植物络合素合成酶基 因、铁离子还原酶基因和锌转运蛋白基因L’‘〕。这些 基因通过基因工程的改造，重组到合适的受休细胞 中表达相应的蛋白质和酶，达到治理难以降解的有 毒有害污染物的目的。sorsa等〔”〕把MTS插人 LamB序列的153位点，在E.eoli中表达MTs，解决 r细胞内MTs对金属离子有限的吸附能力。综L 所述，基因重组技术具有快速、高效的特性，已逐渐 成为环境生物技术的研究热点。 2.4FISH技术 FISH技术利用核糖体内长度适中(约1500bp)、 高度保守的165:RNA序列作为理想的基因分类靶 序列，其中使用的165:RNA寡核普酸探针一般是 进行了荧光标记的20bp左右特异性核昔酸片段， 利用该报告分子(如生物素、地高辛)与荧光素标记 的特异亲和素之间的免疫化学反应，经荧光检测系 统对待测DNA进行定性、定量或相对定位分析。 FISH技术能提供处理过程中微生物的数量、空间分 布和原位生理学等信息。 硝化细菌是一类生理上非常特殊的化能自氧 菌，传统的研究方法要经过富集、分离、分类和鉴定 步骤，耗时长。HSH技术的引人解决了上述困难。 FlsH技术还被广泛用于活性污泥系统、硝化流化床 反应器和膜生物反应器等废水处理系统}’61。 基因工程微生物越来越多地被用于农业害虫 控制和环境污染的生物修复，对人类健康和环境的 影响引起广泛关注。1994年出现了一种新的标记 系统:绿色荧光蛋白(GFP)，由于GFP基因表达产 物对细胞没有毒害作用，且由GFP产生的荧光标记 检测卜分方便、简单。在某些被污染的环境中可分 离出降解该污染物的细菌，通过基因重组等手段使 用GFP分子标记，可更容易的分离检测被标记的 细胞叫。 Bastes等[’8]进行了苯酚降解菌染色体GFP基 因标记实验。通过PCR和Southemblot分析，证明 GFP基因已成功整合到宿主细胞的染色体中。对 标记菌与野生型的降解能力比较结果证明，GFP分 子标记的插人并不影响细胞的苯酚降解能力。 用G即标记Pseudomonasputida，研究活性淤 泥中细菌存活情况{’9飞。Pseudomonasputida被转到 活性淤泥2min后，观察到细胞在淤泥絮凝物间自 由游动;培养3d后，发现荧光细胞减少，大部分已 被合并到淤泥絮凝物中，以防止细菌被原生动物捕 食。用oFP标记石.eozi和Serraliamarceseern，考 察菌株附到絮凝物卜的过程{’()j。使用表面荧光显 微镜能将带有GFP标记的细胞从活性污泥中区分 开，井进行观察和记数。而聚焦激光扫描显微镜 (cLsM)可使GFP标记细菌产生三维轮廓，结合表 面荧光显微镜和CLSM观察GFP标记细胞，结果表 明，细胞表面疏水性在细菌附到絮凝物的过程中起 重要作用，两种细菌附在絮凝物上的模式有很大不 同，通过这种方法可更好地理解细菌赫附机理，有 助于提高废水处理效果。 3结语 分子生物技术的应用使研究人员可从微观的 角度更细致深人地了解微生物对污染物降解的具 体生理生化机制，在分子水平 _ _ [揭示生物体吸收、 迁移、积累有害物质最终被毒害，及适应、抗性等生 态问题，从而筛选到更多有利用价值的微生物。随 着越来越多微生物全部基因序列的解码，对各种细 菌体内可降解基因的分布和表达会有更深人的了 解，有关技术的发展和成熟必将对污染物的降解过 程有一个整体的、生态水平上的认识。 参考文献 l李凤，刘世贵 . 分子生物学技术在环境微生物研究中的 应用 . 世界科技研究与发展，2003，25(4):88一92 2AltsehulSF，GishW，MillerW，etal.Basieloealalign- mentsearehtool . 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感觉根菌这块研究价值大不过个人不是学微生物的，具体细节也不太清楚。