流式细胞仪是医学检验中常用的一种仪器设备,用于自动分析和分选细胞。该仪器能够实现对液体中悬浮分散细胞的快速测量、贮存、显示,同时给出生物化学、生物物理等各方面的特征参数,还能够依据预先设定的参量范围,从中分选出指定的细胞亚群。很多普通的流式细胞仪只能够对细胞中的总蛋白量、总核酸量等指标加以检测,而无法鉴别测出某个特定位置的蛋白或核酸,因此在细节分辨率上通常为零。不过,这仍然不会影响其在医学检验中的应用价值,例如在细胞表面物质、细胞内抗原物质、细胞受体、肿瘤细胞DNA、RNA含量和免疫细胞功能的分析中,其都能发挥巨大的作用。
流式细胞仪的介绍
流式细胞仪是一种比较先进的新型高科技仪器设备,整合了单克隆抗体技术、细胞荧光化学技术、计算机技术、光电测量技术、电子物理技术和激光技术等诸多先进技术,能够在快速直线流动的细胞或生物颗粒中,实现快速定量分析多种参数及分选目标细胞亚群的功能。目前,随着技术水平的不断发展,流式细胞仪得到了进一步的完善,在细胞分析及分选中能够发挥出更大的作用。流式细胞仪在生物化学、细胞遗传学、细胞生物学、肿瘤学、血液学和免疫学等诸多基础医学或临床医学领域中都有所应用,为临床疾病的研究提供了巨大的帮助。流式细胞仪的构成主要包括了四个部分,分别是计算机及分析系统、光电管及检测系统、激光源及光学系统、流动式及液流系统。
流式细胞仪的操作使用方法
使用流式细胞仪前,操作人员需要进行调试和校准,确保仪器最佳的运行状态。调试内容主要包括了测量区光路、液流速度、激光强度等。操作使用中,操作人员先将电源打开,并预热系统,然后将气体阀打开,调节压力参数,得到适合的液流速度,并将光源冷却系统开启;将去离子水加入样品管中,冲洗液流喷嘴系统;使用校准标准物品调整仪器,调定放大器电路增益、光电倍增管电压、激光功率,确保散射荧光强度达到最高,变异系数达到最小;选定测量参数、测量细胞数、流速后,以相同工作条件,分别测量目标样品及对照样品;选择计算机屏上数据显示方式,直接观察和了解测量进程;测量完成后使用去离子水冲洗液流系统;实验数据存入计算机系统后,关闭气体阀及测量装置,让计算机处理数据,得出最终结果。
流式细胞仪在医学检验中的应用
在医学检验中,流式细胞仪的具体应用非常广泛,本文只选取几个比较有代表性的应用予以介绍。
(一)在肿瘤学中的应用
流式细胞仪在肿瘤细胞学诊断中,能够达到较高的准确率。相关人员可以使用该仪器开展细胞周期分析、DNA倍体分析、检测细胞增殖标志物定量分析、细胞表面物质分析、癌基因蛋白产物分析、耐药蛋白分析、细胞凋亡分析等。通过检测可以得到更加充足的信息,在肿瘤的临床诊断、治疗、预防中,提供依据和指导,辅助选择化疗药物及放疗时间强度,同时还可早期诊断癌症,鉴别肿瘤良恶性等。利用流式细胞仪检测肿瘤细胞多药耐药相关蛋白表达水平,医生能够辅助选择肿瘤化疗药物,并监测判断肿瘤化疗效果。
(二)在免疫学中的应用
流式细胞仪可用于测定淋巴细胞亚群,如NK淋巴细胞群、B淋巴细胞群、T淋巴细胞群等。自身免疫性疾病患者,淋巴细胞水平可能会升高,如自身免疫性溶血、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮等。免疫缺陷性疾病的患者,自身免疫功能下降,因而淋巴细胞水平较低,如再生性贫血障碍、活动性肝硬化、肿瘤、病毒感染、艾滋病等。在具体的临床应用中,通过测定CD4+淋巴细胞、CD8+淋巴细胞的水平占比,能够监测免疫反应患者、自身免疫性疾病患者、免疫缺陷疾病患者的免疫状态。
(三)在血液病中的应用
流式细胞仪可以用于诊断、分型白血病,同时能够辅助医生选择治疗方案,判断评估预后情况,研究疾病发病机理等。白血病类型主要包括T淋巴细胞白血病、B淋巴细胞白血病、NK淋巴细胞白血病、红白血病、巨核细胞白血病等。医生可以使用该仪器检测白血病及淋巴瘤,特别是对在细胞化学染色及形态学检查中无法确诊的患者,能够达到理想的诊断效果。通过细胞仪分析判断白血病,医生能够有效补充和深化常规形态学方法,如形态学检出急性淋巴细胞白血病,或急性未分化白血病,可利用流式细胞仪判断特异性淋巴细胞系统,从而提高診断准确率。
流式细胞仪在医学检验中有着十分广泛的应用,在很多疾病的辅助诊断、选择治疗方案、评估预后效果、分析发病原理等方面,都有较好的应用效果,具有重要的临床应用价值。