论文摘要:了解上海市鸡源大肠杆菌耐药情况及耐药规律。以灭菌棉签拭采鸡肛(泄殖腔)和拭子蘸取新鲜粪便,分别对上海地区3个鸡场进行采样,按照常规法分离培养细菌,应用API20E试纸条进行细菌鉴定,采用微量肉汤稀释法测定了大肠杆菌对13种抗菌药物耐药情况。对172株大肠杆菌进行药敏试验的结果显示,其中耐药率在90%以上的有恩诺沙星(96.5%)、四环素(94.8%)、氨苄西林(94.2%)、庆大霉素(93.6%)、复方新诺明(91.3%);80%以上的有阿米卡星(85.5%)、阿莫西林(82.0%)、氟苯尼考(80.2%);70%以上的磺胺异噁唑(75.0%)、氧氟沙星(73.8%);50%以的有头孢唑啉(52.3%);40%以的有头孢噻呋(41.9%),而对粘杆菌素几乎全部敏感(99.4%)。上述3个鸡场分离的大肠杆菌株耐药性严重,耐药谱复杂,多重耐药性、交叉耐药性严重。
论文关键词:鸡,大肠杆菌,耐药性
抗菌药物在畜禽养殖上的应用,无论对治疗和预防动物疫病、促进生长,还是提高畜牧业生产效能方面都起到了积极的作用。但是,随着抗菌药物的广泛应用,细菌耐药性变得越来越严重。动物源性耐药菌株的存在,直接使抗菌药物疗效降低,病程延长,导致患病动物死亡率升高,带来经济损失;也可以直接或间接地进入食物链传播给人,造成难以控制的感染,更可能通过动物与动物之间、人与动物之间耐药基因的传递而构成潜在危害。同时,耐药性问题的加剧,迫使养殖行业不得不加大抗菌药物使用剂量、频次和范围,不仅造成耐药性的恶性循环,更引入了药物残留的问题。因此,加强抗菌药物的耐药性监测工作,合理用药,及早采取措施干预及控制细菌耐药性扩展是十分有必要的。一般情况下,大肠杆菌作为条件性致病菌和常在菌往往显示出细菌的耐药状况。为此,选择上海地区3个鸡场对大肠杆菌的耐药性进行了监测。
1材料与方法
1.1实验细菌菌株与材料
质控菌株:大肠杆菌,ATCC25922,中国兽医微生物菌种保藏中心,;饲养场分离菌株,大肠杆菌172株,由上海市兽药饲料检测所生物测定室2009年分离自上海3个鸡饲养场;营养琼脂、营养肉汤、麦康凯琼脂和Mueller-Hinton肉汤,OXIOD公司;API20E试纸,BIOMERIEUX公司;冻干型肠道菌定量药敏(MIC)检测板,中国兽医药品监察所提供。
1.2实验方法
1.2.1样本采集
以灭菌棉签拭采鸡肛(泄殖腔)和拭子蘸取新鲜粪便,分别对上海地区3个鸡场进行采样,在采样同时,询问饲养场的生产管理情况、疫病发生情况及抗菌药物使用情况(包括治疗用药及抗菌促生长剂)。
1.2.2细菌分离与鉴定
按常规方法接种于麦康凯琼脂平板,37℃培养24h,观察菌落生长情况。挑取粉红色、边缘光滑的大肠杆菌可疑菌落,用麦康凯培养基纯化一代后接种鱼营养琼脂平板,37℃培养24h,以API20E鉴定系统进行鉴定。
1.2.3药敏试验与结果判定
药敏试验采用冻干型肠道菌定量药敏(MIC)检测板使用说明进行操作,结果判定及质量控制按照农业部发布的《肠道菌和金葡菌抗菌药敏感试验规程草案和判断标准》和国际公认的《临床和实验标准化委员会》(CLSI)标准执行。
2结果与分析
2.1细菌分离情况
从3个鸡场中共采集样品180份,分离鉴定得到172株大肠[2]杆菌,分离率为95.6%。三个鸡场所占比率分别为95.0%、95.0%、96.7%。结果见表1。
表13个鸡场大肠杆菌分离情况
鸡 场 大肠杆菌 鸡场1 鸡场2 鸡场3 |
采样数 60 60 60 分离数 59 58 59 鉴定数 57 57 58 分离率(%) 95.0 95.0 96.7 |