肉桂是樟科植物,树皮芳香,可做香料,肉桂的桂皮含有挥发油,油中主要成分为桂皮醛、少量乙酸桂皮酯,桂皮酸和肉桂醇D1、D2等。肉桂药用价值最早载于《神农本草药》,有温经通脉,健脾燥胃,消肿利湿,发汗解肌之功能[1],但关于其抗肿瘤研究少且不够深入。宫颈癌是全球妇女最常见的恶性肿瘤之一,发病率居第二位[2],传统的放化疗治疗方法副作用大,目前的研究表明中医药在肿瘤防治中前景广阔,中药治疗癌症有高效低毒的优点。本次实验通过体外实验观察肉桂对人宫颈癌Hela细胞生长的影响。
1 材料与方法
1.2 细胞培养 用10%小牛血清DMEM培养基培养Hela细胞,置于5% CO2,37 ℃培养箱中培养。
1.4 方法
1.4.1 CCK-8法测定细胞生长抑制率
1.4.3 对细胞迁移能力的影响 采用划痕实验,实验分组同上,按参考文献[3]进行。
1.4.4 FCM测细胞周期 实验分组同上,采用PI染色法,将PI染色的单细胞悬浮液用流式细胞仪测试10 000个细胞,进行细胞计量术分析,用Wincycle 32软件进行数据分析。
1.5 统计学处理 实验数据用SPSS 17.0处理,计量资料以(x±s)表示,采用t检验。计数资料采取 字2检验,实验图像采用Image pro plus 6.0分析处理,P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.2 贴壁率结果 Hela细胞对照组的贴壁率为100%,肉桂组的贴壁率为48.3%(P<0.05)。
2.3 对细胞迁移能力的影响 细胞划痕实验结果见表1。与对照组相比,肉桂组的Hela细胞划痕间隙恢复缓慢,说明肿瘤细胞迁移能力显著下降(P<0.05)。
3 讨论
肉桂含有多种有效成分,以往实验已证实肉桂中的桂皮醛对人多种肿瘤细胞具有杀伤作用,肉桂酸对人肺腺癌细胞有诱导分化作用,邻羟基肉桂酸锗对小鼠宫颈癌有抑制作用,肉桂提取物可通过调节CD8+T细胞抑制肿瘤的生长[4-6]。
本实验结果表明肉桂能显著抑制宫颈癌细胞增殖,且该抑制作用具有量效和时效作用,并能显著抑制宫颈癌细胞的贴壁,降低细胞迁移能力。细胞周期结果显示肉桂组S期比例明显降低,G2期明显增多,说明肉桂可能通过抑制染色体复制,将宫颈癌细胞阻滞在G2期。
参考文献
[1] 韦如萍,黄永芳,胡德活,等.肉桂的研究现状及发展趋势[J].经济林研究,2006,24(3):65-70.
.Drug Discov Today,2005,10(14):949-950.
[3] 黄敏丽,罗国客,陈维平,等.Tumstatin肽对条件培养基下视网膜脉络血管内皮细胞迁移的影响[J].实验研究,2008,26(6):448-450.
[4] 梁秋霞.肉桂有效成分提取及其生物活性研究[D].广西大学,2010.
[5] 叶连宝,欧小敏,涂洁琼,等.邻羟基肉桂酸锗对小鼠U14宫颈癌的抑制作用[J].西北药学杂志,2010,25(6):438-439.
.Cancer Letters,2009,278(2):174-182.