摘 要：目的：探讨Ezrin、CD44v6、E-cadherin蛋白在食管鳞癌中的表达及其与临床病理和预后的关系，Ezrin、CD44v6、E-cadherin三者的表达在食管鳞癌中的相关性。方法：应用免疫组织化学S-P方法检测Ezrin、CD44v6、E-cadherin蛋白在70例鳞癌组织和21例癌旁组织、24例正常的食管黏膜上皮组织中的表达，分析其与临床病理诸因素的关系，并对所有病例进行随访。结果：Ezrin、E-cadherin及CD44v6在食管鳞癌组织、癌旁和正常黏膜中阳性表达率分别为74.2%（52/70）和13.3%（6/45）、25.7%（18/70）和75.6%（34/45），78.5%（55/70）和28.9%（13/45），差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论：Ezrin、CD44v6、E-cadherin表达均与食管鳞癌的发生、分化及淋巴结转移有关，检测三种蛋白的表达情况对于评估患者预后具有重要的参考价值。
关键词：食管鳞癌；Ezrin；CD44v6；E-cadherin；SP免疫组化
食管癌一直是预后较差的恶性肿瘤之一，由于早期症状多不明显，大多数患者出现症状就诊时已属中晚期。研究显示，影响患者生存的关键因素是肿瘤的外侵转移，是造成食管癌临床治疗失败和患者死亡的主要原因[1]。因此，研究食管癌的发生、发展和浸润转移的细胞机制和分子机理，发现与肿瘤转移过程高度相关的蛋白表达，作为评估食管鳞癌患者的预后指标，为患者进行治疗评估、取得对患者个体化的合理治疗方案。本研究采用免疫组化技术检测食管癌细胞Ezrin、CD44v6、E-cadherin三种蛋白的表达，探讨其与食管癌发生、分化、浸润深度、有无淋巴结转移的关系，及Ezrin与CD44v6、E-cadherin三者之间相关性，为揭示食管癌患者的预后评估提供理论依据。
1 资料与方法
1.1 一般资料：取自本医院病理科2005年～2006年经手术切除的食管癌标本70例，其中男58例，女12例，年龄38～79岁，中位年龄52.5岁。全部病例均经病理科医师证实为食管鳞癌，并由两位年资较高的病理科医师，根据2010年AJCC（美国癌症联合委员会）食管癌的G分级标准将70例食管鳞癌分为高、中、低分化。取距瘤缘1.5 cm的癌旁不典型增生组织21例，取距瘤缘＞5 cm的正常食管黏膜组织24例作对照。
1.2 试剂和方法：Ezrin、E-cadherin、CD44v6蛋白抗体和试剂盒均购自福建迈新有限公司，采用免疫组化S-P法，采用已知阳性切片作为对照，以PBS代替一抗作阴性对照。
1.3 免疫组织化学染色结果的判定：Ezrin、E-cadherin、CD44v6蛋白的阳性产物表达主要定位于细胞膜，呈棕黄色颗粒。采用Weidner评分的方法进行结果判定，评分以着色细胞数量为标准：＜25%为0分；25%～50%为1分；51%～75%为2分；＞75%为3分。着色细胞程度标准：细胞无显色为0分，浅黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分。根据两个标准之和判断结果，0～2分为阴性，3～4分为阳性，5～6分为强阳性。
1.4 统计学方法：应用SPSS 10.0统计软件进行χ2检验和Spearman等级相关检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 病理观察结果：对每一例标本进行Ezrin、E-cadherin、CD44v6蛋白染色，Ezrin在食管鳞癌组织中阳性表达率为74.2%（52/70）、在癌旁正常黏膜的阳性表达率为13.3%（6/45），差异有统计学意义（P＜0.05）。E-cadherin在食管鳞癌组织中阳性表达率为25.7%（18/70）、在癌旁正常黏膜的阳性表达率为75.6%（34/45），差异有统计学意义（P＜0.05）。CD44v6蛋白在食管鳞癌组织中阳性表达率为78.5%（55/70）、在癌旁正常黏膜的阳性表达率为28.9%（13/45），差异有统计学意义（P＜0.05）。Ezrin、CD44v6随肿瘤分化程度表达增强，E-cadherin蛋白表达减弱。见图1～4。
图1 Ezrin 蛋白在鳞状细胞癌中表达情况 400×
图2 E-cadherin蛋白在食管鳞状细胞癌中表达情况 400×
图3 E-cadherin蛋白在食管正常上皮细胞表达情况 400×
图4 CD44v6蛋白在食管鳞状细胞癌中表达情况 400×
2.2 Ezrin、E-cadherin、CD44v6蛋白表达结果：见表1。
表1 Ezrin、E-cadherin、CD44v6蛋白表达结果
临床病理指标 | 例数 | Ezrin | E-cadherin | CD44v6 | ||||||
阳性[例（%）] | χ2值 | P值 | 阳性[例（%）] | χ2值 | P值 | 阳性[例（%）] | χ2值 | P值 | ||
性别 | ||||||||||
男 | 52 | 39（75.0） | 0.000 | ＞0.05 | 14（26.9） | 0.006 | ＞0.05 | 41（78.8） | 0.000 | ＞0.05 |
女 | 18 | 13（72.2） | 4（22.2） | 14（77.8） | ||||||
年龄 | ||||||||||
≥55岁 | 46 | 34（73.9） | 0.010 | ＞0.05 | 12（26.1） | 0.010 | ＞0.05 | 37（80.4） | 0.277 | ＞0.05 |
＜55岁 | 24 | 18（75.0） | 6（25.0） | 18（75.0） | ||||||
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