肥胖症脂肪组织ATGL和HSL mRNA的表达与胰岛素敏感

摘　要：目的：测定肥胖症患者内脏及皮下脂肪组织三酰甘油水解酶（ATGL）和激素敏感脂肪酶（HSL）mRNA的表达，探讨其与胰岛素敏感性的相关性。方法：应用荧光实时定量PCR法检测皮下、内脏脂肪组织ATGL和HSL mRNA的表达，应用HOMA-IR评估胰岛素敏感性，分析其与人体测量指标和代谢指标的相关性。结果：①肥胖组内脏与皮下脂肪组织ATGL mRNA及HSL mRNA表达量均低于正常对照组皮下脂肪组织；②皮下及内脏脂肪组织ATGL mRNA表达量与体质量指数（BMI）呈负相关；③皮下及内脏脂肪组织HSL mRNA表达量与BMI、腰围呈负相关。结论：①肥胖症脂肪组织ATGL mRNA及HSL mRNA表达降低；②ATGL及HSL与肥胖相关；③ATGL及HSL与胰岛素抵抗可能无明显相关性。

关键词：ATGL；HSL；肥胖症；脂肪组织；实时定量PCR
　　激素敏感脂肪酶（HSL）和脂肪组织三酰甘油水解酶（ATGL）是脂肪分解的两个主要限速酶。本研究以择期行腹部手术的正常体质量、肥胖症患者为观察对象，研究皮下及内脏脂肪组织ATGL和HSL mRNA的表达及其与有关临床指标的相关性，并探讨与胰岛素敏感性的关系。
1 资料与方法
1.1  一般资料：选择腹部手术的住院患者共21例，男12例，女9例，年龄（56±8）岁，排除恶性肿瘤、急性炎性反应、糖尿病及妊娠患者，无使用糖皮质激素、性激素、胰岛素、降脂药等药物病史。分为正常体质量组（11例）、肥胖组（10例）。肥胖的诊断标准参照WHO标准[1]。测量血压、身高、体质量、腰围、臀围，计算体质量指数（BMI）及腰臀比（WHR）。测定空腹血糖（FPG）、血脂、胰岛素（FNS）、糖基化血红蛋白（HbA1c）。取腹部皮下及内脏大网膜的脂肪组织，立即用液氮速冻后-80℃保存。采用SYBR GreenⅠ荧光实时定量PCR法测定脂肪组织ATGL和HSL mRNA的表达，采用比较阈值法表示目的基因的相对表达[2]。采用HOMA稳态模型评价胰岛素抵抗[3]。
1.2  统计学方法：数据以（）表示，采用SigmaPlot 10.0＋SigmaStat 3.5软件处理。相关性检验利用Spearman相关分析。以P＜0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1  临床指标分析：对照组与肥胖组间年龄、性别、BP、CHOL、TG、LDL-C、Apo-B、Apo-A1/B、FNS、HOMA-IR等比较差异均无统计学意义（P＞0.05）；肥胖组BMI、腰围、臀围、WHR、Apo-A1明显高于对照组（P＜0.05）。
2.2  两组脂肪组织ATGL mRNA实时定量PCR结果见表1。
表1  两组脂肪组织ATGL mRNA实时定量PCR结果

分组	Ct36B4	CtATGL	△Ct	△△Ct	2-△△Ct
对照组皮下脂肪组织	20.40±0.38	30.37±1.12	9.97±1.00	0.00±1.00	1.0（0.50-2.00）
肥胖组皮下脂肪组织	20.67±0.35	32.20±0.56	11.53±0.60	1.56±0.60	0.34（0.22-0.51）①
对照组内脏脂肪组织	20.51±0.38	31.02±1.16	10.62±1.01	0.65±1.01	0.64（0.32-1.28）
肥胖组内脏脂肪组织	20.69±0.36	31.91±0.67	11.24±0.56	1.27±0.56	0.41（0.28-0.61）①

注：与对照组皮下脂肪组织比较，①P＜0.05
2.3  两组脂肪组织HSL mRNA实时定量PCR结果见表2。
表2  两组脂肪组织HSL mRNA实时定量PCR结果

分组	Ct36B4	CtHSL	△Ct	△△Ct	2-△△Ct
对照组皮下脂肪组织	20.40±0.38	26.63±1.37	6.23±0.45	0.00±0.45	1.0（0.73-1.36）
肥胖组皮下脂肪组织	20.67±0.35	28.40±1.04	7.73±0.36	1.50±0.36	0.35（0.28-0.45）①
对照组内脏脂肪组织	20.51±0.38	26.50±0.90	5.99±0.31	-0.24±0.31	1.18（0.95-1.46）
肥胖组内脏脂肪组织	20.69±0.36	28.05±0.92	7.36±0.27	1.13±0.27	0.46（0.38-0.55）①

注：与对照组皮下脂肪组织比较，①P＜0.05
2.4  ATGL和HSL与临床指标的相关系数分析：皮下及内脏脂肪组织ATGL mRNA表达量与BMI呈负相关（r分别为-0.442和-0.518，P等于0.017和0.04）。皮下及内脏脂肪组织HSL mRNA表达量与BMI呈负相关（r分别为-0.623和-0.374，P分别为＜0.001和等于0.045），与腰围呈负相关（r分别为-0.562和-0.389，P分别等于0.01和0.037）。ATGL mRNA和HSL mRNA表达量与胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）无相关性。
3 讨论
　　本研究结果显示，肥胖症皮下和内脏脂肪组织ATGL和HSL的mRNA的表达较正常体重者减少，提示ATGL和HSL与肥胖有相关性，肥胖状态时ATGL和HSL的表达会降低，也可能是由于ATGL和HSL表达减低而导致肥胖症的发生。目前Gaidhu在分子机制上的研究证实了ATGL和HSL在饮食诱导的肥胖有缺陷的脂肪动员和新陈代谢中起重要的作用[4]。
　　在临床上BMI与腰围是反映人体肥胖程度的指标，也是间接反映胰岛素敏感性的指标，但本研究中ATGL和HSL与BMI与腰围相关但与反映胰岛素敏感性的指标HOMA-IR无明显相关性，考虑与此次研究的样本量不足及本实验对象系中国人，肥胖者的BMI多数未达到国外研究时选择的BMI＞30 kg/m2有关，如果在今后的实验中能扩大样本量，选择更肥胖的对象，将可获得更可信的结果。
　　Lafontan等指出脂肪水解作用是在严密的激素调控下进行的，胰岛素、儿茶酚胺类、利钠肽以及年龄、解剖部位、性别、基因型均发挥了调控作用[5]。对其作用机制的深入研究对许多临床代谢性疾病的防治提供思路，使其成为治疗肥胖和肥胖相关性疾病的药物新靶点。
4 参考文献
[1] World Healthy Organization,Western Pacific Region,The international Association for the Study of Obesity and the international Obesity Task Force.The Asia-Pacific perspective:redefining obesity and its treatment[M].Sydney,Australia:Health Communications Australia Pty Limited,2000:26.
[2] Livak KJ,Schmittgen Td.Analysis of relative gene expression data using real-time quantitative PCR and the 2-Delta Delta C（T） method[J].Methods,2001,25(4):402.
[3] Matthews D R,Hosker J P,Rudenski A S,et al.Homeostasis model assessment:insulin resistance and ?-cell function from fasting plasma glucose and insulin concentrations in man[J].Diabetologia,1985,28(7):412.
[4] Gaidhu MP,Anthony NM,Patel P,et al.Dysregulation of lipolysis and lipid metabolism in visceral and subcutaneous adipocytes by high-fat diet:role of ATGL,HSL,and AMPK[J].Am J Physiol,2010,298(4):961.
[5] Lafotan M,Langin D.Lipolysis and lipid mobilization in human adipose tissue[J].Prog Lipid Res,2009,48(5):275.