摘 要：目的：探讨Toll样受体7（TLR7）、Toll样受体9（TLR9）在狼疮肾炎（LN）发病机制中的作用。方法：选择混合骨髓干细胞移植实验后的MRL/lpr狼疮鼠36只，分为空白对照组30只（PBS代替）和阴性对照组6只（昆明小鼠）。观察MRL/lpr小鼠肾组织不同病变程度中TLR7、TLR9的表达情况。结果：MRL/lpr小鼠肾组织中均有TLR7、TLR9的表达，且随病变程度增加其表达增强，与肾组织病变程度呈正相关。MRL/lpr小鼠肾组织中TLR7、TLR9的表达与其血清肌酐、尿蛋白定量存在正相关（P＜0.01）。结论：TLR7和TLR9是介导炎性反应细胞浸润和局部炎性反应的一个重要因素，其表达水平可能与LN肾脏损害程度呈正相关。
关键词：狼疮肾炎；Toll样受体；免疫组织化学
系统性红斑狼疮在临床医学上属于免疫性疾病，能够对患者的各个身体系统造成较大的伤害，而肾脏则是该病损伤较重的一类器官。Toll样受体7（TLR7）、9（TLR9）在SLE及LN的形成有着很大的作用，对其实施长时间的分析观察可以得出狼疮发病机制、病情活动、器官损害等方面的情况，弄清感染在发病时产生的影响，这能够给医生的治疗带来很大的帮助。
1 资料与方法
1.1 一般资料：本次研究共选择混合骨髓干细胞移植实验后的MRL/lpr狼疮鼠36只，将其肾组织标本采用免疫组化SABC法处理，分为空白对照组30只（PBS代替）和阴性对照组6只（昆明小鼠）。
1.2 观察方法：结果判定采用Image-Pro Plus专业图像分析软件进行半定量分析；根据Ikehara病理标准对MRL/lpr小鼠的肾组织病变程度进行评分；比较肾组织不同病变程度中TLR7、TLR9表达的程度和差异。
1.3 统计学方法：利用SPSS 13.0软件进行统计学分析，多组间比较采用单因素方差分析，肾组织TLR7、TLR9的表达与肾组织病变程度的相关性用非参数Spearman等级相关分析，与血肌酐、尿微量蛋白之间的相关性用直线相关分析。
2 结果
2.1 两组TLR7、TLR9表达的比较情况：两组的肾组织均有极少量TLR7、TLR9的表达；MRL/lpr小鼠肾组织中均有TLR7、TLR9的表达，且随病变程度增加其表达增强，与肾组织病变程度呈正相关。其中肾组织病变4度与1度、2度、3度比较，差异有统计学意义（P＜0.01），1度、2度、3度病变之间比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1～2。
表1 MRL/lpr小鼠肾组织中TLR7的表达（
）
肾组织病变程度 例数 肾小球表达情况（%） 肾间质表达情况（%） |
1度 14 10.79±2.914 9.14±3.278 2度 11 25.09±3.330 30.18±4.856 3度 6 35.17±3.545 35.17±2.787 4度 5 50.00±6.782 54.80±4.087 |
表2 MRL/lpr小鼠肾组织中TLR9的表达（
）
肾组织病变程度 例数 肾小球表达情况（%） 肾间质表达情况（%） |
1度 14 8.14±2.349 9.43±2.409 2度 11 26.91±2.119 30.09±2.256 3度 6 35.17±2.858 36.50±3.619 4度 5 46.60±3.050 48.60±1.673 |
2.2 空白对照组TLR7、TLR9的表达与其血清肌酐、尿蛋白定量的相关情况：MRL/lpr小鼠肾组织中TLR7、TLR9的表达与其血清肌酐、尿蛋白定量存在正相关（P＜0.01）。见图1～4。
图1 MRL/lpr小鼠肾小球TLR7的阳性表达与血肌酐的相关性
图2 MRL/lpr小鼠肾小球TLR7的阳性表达与尿微量蛋白的相关性
图3 MRL/lpr小鼠肾间质TLR9的阳性表达与血肌酐的相关性
图4 MRL/lpr小鼠肾小球TLR9的阳性表达与尿微量蛋白的相关性
3 讨论
狼疮肾炎是系统性红斑狼疮主要且突出的内脏损害，其严重程度直接与预后有关，传统的激素加免疫抑制剂治疗虽明显提高了患者的生存率，但重症的高死亡率并未解决，且其不良反应已成为治疗的主要问题。TLR家族利用感染、或非感染性分子引出的信号识别系统能够对肾脏疾病发病机制产生较大的作用。根据当前的医学观察可知，TLR在许多肾脏疾病的形成过程中都有着重要的影响
[1]。例如：急性肾衰竭中小管上皮细胞中活化的TLR2、TLR4能够加大细胞因子CC的分泌量，这说明其对急性肾小管的坏死过程能够导致炎性反应细胞浸润，最终引起免疫反应。对肾脏间质纤维化情况进行观察后发现，部分内源性的TLR配体在不断增多，从而引起了TLR4出现了不同程度的炎性反应；TLR2与肾脏疾病有着密切的联系，这类肾脏疾病常常是由于感染、毒物等造成的；研究显示，不排除TLR3在肝炎、艾滋病等重要病症中存在着一定的影响；TLR2/4对于免疫复合物性GN及肾脏血管炎也有着一定的影响；而TLR7、TLR9对狼疮肾炎、乙型肝炎、肾炎、小血管炎等都有相应的显示。
专家经过长期的研究后得出，内、外源的CpG-DNA能够加快TLR7、TLR9的活化，对肾小球疾病有着较为显著的影响，为LN在免疫复合物性GN中是较为常见的形式。CpG-DNA对LN而言能够导致DNA自身抗体的出现。专家还同时观察到了经CpG-ODN刺激TLR9活化能造成MRL-Fas（1pr）小鼠肾脏病情恶化
[2]。在结合狼疮鼠模型对肾组织TLRs展开分析得出，存在肾炎的狼疮鼠，其肾组织TLR9得到了明显的增长，所出现的集体反应主要集中在浸润的巨噬细胞。这说明细菌DNA、SLE-IC在TLR7、TLR9作用下能够使得肾小球炎性细胞能力加强，并且使得免疫复合物性肾小球肾炎变得更为严重，这对于感染诱发加重LN的研究提供了现实依据。
而对于肾组织中TLR7、TLR9而言，其反应出的情况跟实验室指标eGFR、尿蛋白定量都有着相应的关系，这两项指标能够将肾脏的损害及恶化程度表现出来，这说明了TLR7、TLR9在LN的形成时有着极为重要的作用。在临床上能够将肾组织TLR7、TLR9的结果当成LN肾组织病理损伤的鉴定标准，并且能够提供准确的研究结果。
综上所述，通过此次分析观察得出了TLR7、TLR9在LN疾病的形成中有着重要的影响，对TLR7、TLR9等情况进行具体的研究可以为LN发病机制、疾病活动因素、感染影响的研究提供帮助。这就需要医生在临床观察中对以上指标给予足够的重视，多进行相关的研究分析。
4 参考文献
[1] 李贞琼,刘建社,全正莉.氯沙坦对实验性糖尿病大鼠肾脏的炎性反应抑制作用[J].中国中西医结合肾病杂志,2007,8(10):569.
[2] 聂祥智,朱忠华,刘建设,等.应用基因缺失小鼠研究TLR4在LPS诱导的急性肾衰竭中的作用[J].武汉大学学报,2007,29(3):293.
