一、目的与要求： 1、明确亚硝酸盐的测定与控制成品质量的关系。 2、明确与掌握盐酸萘乙二胺法的基本原理与操作方法。 二、原理： 样品经沉淀蛋白质，除去脂肪后，在弱酸条件下硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后，生成的重氮化合物，再与萘基盐酸二氨乙烯偶联成紫红色的重氮染料，产生的颜色深浅与亚硝酸根含量成正比，可以比色测定。 三、试剂与仪器 1、亚铁氰化钾溶液：称取106克亚铁氰化钾[K4Fe9(CN)]，溶于水后，稀释至1000毫升。 2、乙酸锌溶液：称取220克乙酸锌[Zn(CH2C00)2·2H20]，加30毫升冰乙酸溶于水，并稀释至1000毫升。 3、饱和硼砂溶液：称取5克硼酸钠(Na2B07·10H20)，溶于100毫升热水中，冷却后备用。 4、％对氨基苯磺酸溶液：称取克对氨基苯磺酸，溶于100毫升20％的盐酸中，避光保存。 5、％盐酸萘乙二胺溶液：称取克盐酸萘乙二胺，溶于100毫升水中，避光保存。 6、亚硝酸钠标准溶液：精密称取克于硅胶干燥器中干燥24小时的亚硝酸钠，加水溶解移入500毫升容量瓶中，并稀释至刻度。此溶液每毫升相当于200微克亚硝酸钠。 7、亚硝酸钠标准使用液：临用前，吸取亚硝酸钠标准溶液毫升，置于200毫升容量瓶中，加水稀释至刻度，此溶液每毫升相当于5微克亚硝酸钠。 8，小型绞肉机。 9、分光光度计。 四、操作方法： 1、样品处理：称取克经绞碎混匀的样品，置于50毫升烧杯中，加工毫升饱和溶液，搅拌均匀，以70℃左右的水约30毫升将样品全部洗入500毫升容量瓶中，置沸水浴中加热15分钟，取出后冷至室温，然后一面转动一面加入5毫升亚铁氰化钾溶液，摇匀，再加入5毫升乙酸锌溶液以沉淀蛋白质，加水至刻度，混匀，放置小时，除去上层脂肪，清液用滤纸过滤弃去初滤液30毫升，滤液备用。 2、测定 吸取40毫升上述滤液于50毫升比色管中，另吸取、、0．40、0．60、、、、、毫升亚硝酸钠标准使用液(相当于0、1、2、3、5、7、10、微克亚硝酸钠)，分别置于50毫升比色管中，于标准与样品管中分别加入2毫升％对氨基苯磺酸溶液，混匀，静置3-5分钟后各加入1毫升％盐酸萘乙二胺溶液，加水至刻度，混匀，静置15分钟，用2厘米比色杯，以零管调节零点，于波长538nm处测吸光度，绘制标准曲线比较。 计算： X=(A×1000)/(m×40/500×1000×1000) X：样品中亚硝酸盐的含量，g／kg； m：样品质量，g； A：测定用样液中亚硝酸盐的含量，ug．
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