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摘要：.目的探讨HCV感染外周血TCRβV基因重组的多样性以及发现可识别丙型肝炎病毒的T细胞受体.方法分离HCV感染的外周血淋巴细胞提取RNA,反转录为cDNA一链,进行多重PCR扩增,构建测序文库,进行高通量测序,分析其TCR多样性以及表达的差异.结果6例HCV感染...
优化后的条形码DNA经过PCR扩增后,将扩增产物连接到pMD-18T载体上,转入E.coliDH5α感受态细胞。经Amp+抗性筛选和菌落PCR鉴定出阳性菌落,然后用Amp+液体培养基增殖阳性菌落,提取重组质粒,进行酶切…
实时荧光定量PCR对丙肝RNA检测的影响因素.doc,精品论文参考文献实时荧光定量PCR对丙肝RNA检测的影响因素刘永胜隆元英（江油市人民医院检验科四川江油621700）【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2012）23...
然而，通过RT-PCR捕捉负链RNA的技术此时并不成熟，特异性很差——即使只加入一种引物（正链或负链），HCV的正负两链都会出现扩增。针对这一困境，NCCRI于1993年提出假说，指出问题的核心在于目标RNA模板中混入了宿主细胞的RN段。
选择NS5b区PCR扩增后行进化树结构分析是目前公认的基因分型“黄金标准”【2】。所有这些方法都能正确辨别主要的基因型组别，但只有核苷酸的直接测序在区分亚型中是有效的"】。而且，这些基于PCR方法的分型方法都具有其缺点和优点。
3.3文件审批：实验室主任。3.4执行：PCR实验室所有工作人员。4.参考文献：4.1中山大学达安基因股份有限公司丙型肝炎病毒核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）说明书。4.2中山大学达安基因股份有限公司核酸扩增荧光检测系统DA7600型使用说明书。
为验证引物设计策略的正确性,我们另外设计了3对引物,扩增依次延长的目的片段,并将这3对引物与本方法中根据设计原则设计的引物进行统计学比较。结果显示,第一,新的提取方法(MiRcute提取柱)比QIAGEN的RNA提取方法更有优势,具有统计学差异(p0.037)。
慢性丙肝高通量测序TCR-CDR3免疫组库研究.张园海葛国洪陶艳邵江波吴迪.【摘要】：目的探讨HCV感染外周血TCRβV基因重组的多样性以及发现可识别丙型肝炎病毒的T细胞受体。.方法分离HCV感染的外周血淋巴细胞提取RNA,反转录为cDNA一链,进行多重...
第二部分GSTpulldown联合质谱筛选丙肝病毒蛋白NS5A结构域I的相互作用蛋白目的通过对1b型丙肝病毒Con1株的NS5A结构域I宿主相互作用蛋白的鉴定分析,为研究NS5A功能及其参与病毒复制机制提供理论基础。.方法采用GSTpulldown实验技术联合液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)对...
即实时荧光定量核酸扩增检测系统，也叫实时定量基因扩增荧光检测系统，简称QPCR。问：QPCR、DNA检测、PCR之间的关系？答：聚合酶链式反应（PolymeraseChainReactio简称PCR）原理凭借敏感、特异、快速的特点荣获93年诺贝尔化学奖。
摘要：.目的探讨HCV感染外周血TCRβV基因重组的多样性以及发现可识别丙型肝炎病毒的T细胞受体.方法分离HCV感染的外周血淋巴细胞提取RNA,反转录为cDNA一链,进行多重PCR扩增,构建测序文库,进行高通量测序,分析其TCR多样性以及表达的差异.结果6例HCV感染...
优化后的条形码DNA经过PCR扩增后,将扩增产物连接到pMD-18T载体上,转入E.coliDH5α感受态细胞。经Amp+抗性筛选和菌落PCR鉴定出阳性菌落,然后用Amp+液体培养基增殖阳性菌落,提取重组质粒,进行酶切…
实时荧光定量PCR对丙肝RNA检测的影响因素.doc,精品论文参考文献实时荧光定量PCR对丙肝RNA检测的影响因素刘永胜隆元英（江油市人民医院检验科四川江油621700）【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2012）23...
然而，通过RT-PCR捕捉负链RNA的技术此时并不成熟，特异性很差——即使只加入一种引物（正链或负链），HCV的正负两链都会出现扩增。针对这一困境，NCCRI于1993年提出假说，指出问题的核心在于目标RNA模板中混入了宿主细胞的RN段。
选择NS5b区PCR扩增后行进化树结构分析是目前公认的基因分型“黄金标准”【2】。所有这些方法都能正确辨别主要的基因型组别，但只有核苷酸的直接测序在区分亚型中是有效的"】。而且，这些基于PCR方法的分型方法都具有其缺点和优点。
3.3文件审批：实验室主任。3.4执行：PCR实验室所有工作人员。4.参考文献：4.1中山大学达安基因股份有限公司丙型肝炎病毒核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）说明书。4.2中山大学达安基因股份有限公司核酸扩增荧光检测系统DA7600型使用说明书。
为验证引物设计策略的正确性,我们另外设计了3对引物,扩增依次延长的目的片段,并将这3对引物与本方法中根据设计原则设计的引物进行统计学比较。结果显示,第一,新的提取方法(MiRcute提取柱)比QIAGEN的RNA提取方法更有优势,具有统计学差异(p0.037)。
慢性丙肝高通量测序TCR-CDR3免疫组库研究.张园海葛国洪陶艳邵江波吴迪.【摘要】：目的探讨HCV感染外周血TCRβV基因重组的多样性以及发现可识别丙型肝炎病毒的T细胞受体。.方法分离HCV感染的外周血淋巴细胞提取RNA,反转录为cDNA一链,进行多重...
第二部分GSTpulldown联合质谱筛选丙肝病毒蛋白NS5A结构域I的相互作用蛋白目的通过对1b型丙肝病毒Con1株的NS5A结构域I宿主相互作用蛋白的鉴定分析,为研究NS5A功能及其参与病毒复制机制提供理论基础。.方法采用GSTpulldown实验技术联合液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)对...
即实时荧光定量核酸扩增检测系统，也叫实时定量基因扩增荧光检测系统，简称QPCR。问：QPCR、DNA检测、PCR之间的关系？答：聚合酶链式反应（PolymeraseChainReactio简称PCR）原理凭借敏感、特异、快速的特点荣获93年诺贝尔化学奖。
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