本毕业设计欲在我们的课题组建立起CRISPR/Cas9实验系统,利用其构建基因敲除细胞。我们采用lentiCRISPRv2质粒作为载体,设计了靶基因的gRNA序列,并在经过退火后将其连接到lentiCRISPRv2载体中,最终构建sgRNA-lentiCRISPR质粒。
CRISPR/Cas9基因敲除技术介绍1987年,日本大阪大学(OsakaUniversity)的科研人员在对一种细菌编码的碱性磷酸酶(alkalinephosphatase)基因进行研究时,发现在这个基因编码区域的附近存在一小段不同寻常的DN段,这些片段是由简单的重复序列组成
2、CRSIPR/Cas9介导的MC1R基因敲除效率检测本研究根据莲山黑兔MC1R基因CDS区的测序结果和蛋白质结构预测,在第二和第五个跨膜结构域上设计了两条sgRNA靶序列,成功构建了CRISPR/Cas9相关表达载体。随后在293T细胞中应用RGS荧光报告系统分别对...
王松灵教授团队长期研究唾液腺功能,基于唾液腺发现人细胞膜上硝酸盐转运通道Sialin蛋白(由Slc17a5基因编码),但由于Slc17a5基因是出生后致死基因(敲除该基因的小鼠在出生后3周内即死亡),因此如何构建成年期Slc17a5基因敲除小鼠模型成…
近日,MolecularPlantPathology在线发表了南京农业大学植物保护学院王源超课题组为“ACRISPR/Cas9-mediatedinsitucomplementationmethodforPhytophthorasojaemutants”的研究论文。该研究针对疫霉菌CR…
1黄黎珍;顾为望;;利用体细胞核移植技术生产基因敲除猪的研究[A];第九届中国实验动物科学年会(2010新疆)论文集[C];2010年2王景;穆媛媛;黎庶;陈志瑾;熊坤;丛延广;;革兰阴性菌基因敲除载体的构建及其应用[A];重庆微生物学会第九届会员代表大会暨学术年会论文摘要集[C];2009年
一、CRISPR-Cas系统简介图1CRISPR-Cas9系统介绍CRISPR-Cas9系统是一种被广泛运用的基因组编辑工具,它来源于细菌的适应性免疫系统。CRISPR-Cas9系统包括:Cas9酶和一个向导RNA。向导RNA作用是引导cas9到基因组的特异性位点上切割。如图...
基因敲除靶点应设计在起始密码子附近(包括起始密码子)或者起始密码子下游的外显子范围内。不同Cas9/gRNA靶点在基因敲除效率上有较大差异,因此同时设计构建2~3个靶点的基因敲除载体再从中选出敲减效果较佳的靶点。
为研究烟草5-磷酸脱氧木酮糖还原异构酶(1-Deoxy-D-xylulose-5-phosphatereductoisomerase,DXR)基因的表达模式和功能,从普通烟草(Nicotianatabacum)品种红花大金元中克隆了NtDXR基因,并通过荧光定量PCR技术分析了NtDXR在红花大金元不同...
期刊论文[1]CRISPR/Cas9技术敲除faf1基因对斑马鱼软骨及肌节发育的影响[J].刘菁,梁森,袁志,黄慧哲.第三军医大学学报.2017(17)[2]AttenuatedLKB1-SIK1signalingpromotesepithelial-mesenchymaltransitionandradioresistanceofnon–smallcelllungcancer...
本毕业设计欲在我们的课题组建立起CRISPR/Cas9实验系统,利用其构建基因敲除细胞。我们采用lentiCRISPRv2质粒作为载体,设计了靶基因的gRNA序列,并在经过退火后将其连接到lentiCRISPRv2载体中,最终构建sgRNA-lentiCRISPR质粒。
CRISPR/Cas9基因敲除技术介绍1987年,日本大阪大学(OsakaUniversity)的科研人员在对一种细菌编码的碱性磷酸酶(alkalinephosphatase)基因进行研究时,发现在这个基因编码区域的附近存在一小段不同寻常的DN段,这些片段是由简单的重复序列组成
2、CRSIPR/Cas9介导的MC1R基因敲除效率检测本研究根据莲山黑兔MC1R基因CDS区的测序结果和蛋白质结构预测,在第二和第五个跨膜结构域上设计了两条sgRNA靶序列,成功构建了CRISPR/Cas9相关表达载体。随后在293T细胞中应用RGS荧光报告系统分别对...
王松灵教授团队长期研究唾液腺功能,基于唾液腺发现人细胞膜上硝酸盐转运通道Sialin蛋白(由Slc17a5基因编码),但由于Slc17a5基因是出生后致死基因(敲除该基因的小鼠在出生后3周内即死亡),因此如何构建成年期Slc17a5基因敲除小鼠模型成…
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一、CRISPR-Cas系统简介图1CRISPR-Cas9系统介绍CRISPR-Cas9系统是一种被广泛运用的基因组编辑工具,它来源于细菌的适应性免疫系统。CRISPR-Cas9系统包括:Cas9酶和一个向导RNA。向导RNA作用是引导cas9到基因组的特异性位点上切割。如图...
基因敲除靶点应设计在起始密码子附近(包括起始密码子)或者起始密码子下游的外显子范围内。不同Cas9/gRNA靶点在基因敲除效率上有较大差异,因此同时设计构建2~3个靶点的基因敲除载体再从中选出敲减效果较佳的靶点。
为研究烟草5-磷酸脱氧木酮糖还原异构酶(1-Deoxy-D-xylulose-5-phosphatereductoisomerase,DXR)基因的表达模式和功能,从普通烟草(Nicotianatabacum)品种红花大金元中克隆了NtDXR基因,并通过荧光定量PCR技术分析了NtDXR在红花大金元不同...
期刊论文[1]CRISPR/Cas9技术敲除faf1基因对斑马鱼软骨及肌节发育的影响[J].刘菁,梁森,袁志,黄慧哲.第三军医大学学报.2017(17)[2]AttenuatedLKB1-SIK1signalingpromotesepithelial-mesenchymaltransitionandradioresistanceofnon–smallcelllungcancer...