我们采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳对PCR产物的目的DN段纯化后作为2次PCR的模板,次PCR产物进行测序,取得较好的效果,现报道如下。1材料与方法1材料:标本为1995日至2002年10月30这些标本经提取DNA行PCRSSCP)筛查和测序确定有目的DNA突变。
测序反应中PCR产物纯化方法的比较AnalysisofResultofDifferentPurificationMethodsforDirectedPCRProductSequencing
3种PCR产物纯化方法的比较相关文档【论文】OPRM1基因PCR产物和测序产物三种纯化方法的比较OPRM1基因PCR产物和测序产物三种纯化方法的比较_专业资料。目的探讨一种快速、简便、效果好的OPRM1基因PCR产物和测序产物纯化方法,建立稳定的DNA测序技术平台。
一.原理PCR产物一般都含有过量的引物、TaqDNA酶及dNTP,这些成分的存在将直接影响到后续的酶切、双脱氧PCR测序反应等过程,因此有必要除去。目前核酸纯化的方法有很多,商用化试剂盒的出现使得DNA的纯化过程变得更加简便快捷。本实验中,Buffer...
碧云天的PCR纯化试剂盒(PCRCleanUpKit),也称DNA纯化试剂盒(DNAPurificationKit)是一种用于PCR产物纯化或从多种DNA反应体系中纯化DNA的试剂盒。
4)PCR产物纯化根据PCR产物回收试剂盒的流程回收酶切产物,最后用45μlddH2O洗脱,-20℃保存。1.2质粒1)质粒DNA的:用柱式质粒DNA小量抽提试剂盒抽提所要的载体质粒。2)或购买商业化载体1.3酶切质粒及目的基因1)PCR产物酶切及纯化
在近期发表的一篇关于DNA高纯度的研究论文中,层析时使用了无孔阴离子交换填料的色谱柱TSKgelDNA-STAT对DNA(PCR产物等)进行快速分离纯化,来代替以往的分离纯化法。(论文出自开放获取期刊OpenAccess)01TSKgelDNA-STAT色谱柱分离
MP-PCR克服了AP-PCR引物的不确定性,增加了PCR产物谱带的稳定性和针对性,该技术也已广泛应用于物种分子标记、基因图谱绘制和基因差异性分析等方面(Tian等,2014;Ding等,2014;Wei等,2014)。
将PCR产物进行纯化和荧光定量1.3高通量测序分析方法百迈客生物科技有限公司利用IlluminaHiSeq高通量测序平台测序。用检测后的合格的基因组DNA稀释后作为模板。将PCR产物进行纯化
纯化DN段加与凝胶体积相等的TE(10mmol/lTris-HClpH8.0,0.1mmol/lEDTA),置65℃水浴5分钟保温,使凝胶完全溶解。待放至室温,加等量酚(TE饱和,TE封在上层,取下层酚),轻轻混匀(不用混匀),12000rpm,3分钟离心。
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纯化DN段加与凝胶体积相等的TE(10mmol/lTris-HClpH8.0,0.1mmol/lEDTA),置65℃水浴5分钟保温,使凝胶完全溶解。待放至室温,加等量酚(TE饱和,TE封在上层,取下层酚),轻轻混匀(不用混匀),12000rpm,3分钟离心。