论文首先以溶菌酶为模型蛋白质,比较了常规的稀释复性和凝胶过滤层析复性在溶菌酶复性中的应用。在稀释复性中考察了不同原料液处理过程对于活性回收率的影响,并总结出先酸化再脱除还原剂DTT是最适合于稀释复性的原料液处理过程。
摘要综述了包涵体形成、包涵体分离和溶解、包涵体折叠复性的方法、复性产率低下的主要因素以及通过分子伴侣、低分子量添加物等的应用而提高了蛋白质复性产率。关键词包涵体蛋白质复性AbstractStrategiesfordecreasingtheformationofinclusionbodies...
本论文的目的在于利用疏水作用层析技术开发一种新的疏水作用层析辅助包涵体蛋白质复性方法,实现蛋白质在高浓度下的高活性和高回收率。.本论文分为四个部分。.第一部分对复合干扰素的稀释复性条件及复性方法进行了优化,考察了聚乙二醇、甘油等...
蛋白质复性方法及其注意事项.蛋白质复性方法及其注意事项蛋白前期准备查阅目标蛋白相关文献,了解其等电点,标签等注意点。.如果目标蛋白易降解,可在纯化时加1-2mMDTT,全程低温,及时处理。.透析Buffer的选择可参考文献。.蛋白复性包涵体:在某些生长条件...
【摘要】:蛋白质复性是利用基因重组技术生产药用蛋白的关键步骤。本文针对蛋白质复性过程中聚集体的形成,在已发现的同电荷离子交换凝胶介质能够抑制蛋白质聚集、辅助蛋白质复性的基础上,探索同电荷固相介质的性质对其辅助蛋白质复性效果的影响,并对同电荷聚合物辅助蛋白质复性的...
【摘要】:蛋白质复性技术的研究对于基因工程重组蛋白质的生产具有重要意义。本论文以天然溶菌酶为模拟体系,综合运用实验研究、结构分析和分子模拟等方法研究表面活性剂十六烷基三溴化铵(以下简称CTAB)辅助溶菌酶复性过程的热力学和动力学特性。
梯度透析法和稀释法蛋白的复性.doc,蛋白的复性重组基因在表达宿主中表达量过高或速度过快,以至于没有足够的时间进行折叠,二硫键不能正确配对,导致蛋白以包涵体的形式存在。导致包涵体形成的主要原因有以下几点:=1\*GB2⑴重组蛋白的氨基酸组成,一般说来含硫氨基酸越多越容易...
论文蛋白质的排阻色谱复性的新进展王超展,耿信笃西北大学现代分离科学研究所现代分离科学陕西省重点实验室,西安710069摘要相关文章Metrics全文:PDF(196KB...
【摘要】:变性蛋白质体外复性的方法主要有传统的辅助复性法包括了:稀释法、透析法、超滤法以及蛋白质折叠液相色谱法(PFLC),也有在此基础上模拟体内分子伴侣、折叠酶、人工分子伴侣、反胶束的辅助复性方法。到目前为止,在复性液中添加小分子试剂是提高体外辅助蛋白质复性效率的策略之一。
精氨酸是一种在蛋白质折叠复性中应用最广泛的聚集抑制剂,但是研究发现精氨酸对于某些含二硫键蛋白的聚集几乎没有抑制作用,目前对于其作用机理还未做过系统研究。.本文选取了结构性质完全不同的CAB、溶菌酶、GFP和rhG-CSF为模型蛋白,考察了精氨酸辅助...
论文首先以溶菌酶为模型蛋白质,比较了常规的稀释复性和凝胶过滤层析复性在溶菌酶复性中的应用。在稀释复性中考察了不同原料液处理过程对于活性回收率的影响,并总结出先酸化再脱除还原剂DTT是最适合于稀释复性的原料液处理过程。
摘要综述了包涵体形成、包涵体分离和溶解、包涵体折叠复性的方法、复性产率低下的主要因素以及通过分子伴侣、低分子量添加物等的应用而提高了蛋白质复性产率。关键词包涵体蛋白质复性AbstractStrategiesfordecreasingtheformationofinclusionbodies...
本论文的目的在于利用疏水作用层析技术开发一种新的疏水作用层析辅助包涵体蛋白质复性方法,实现蛋白质在高浓度下的高活性和高回收率。.本论文分为四个部分。.第一部分对复合干扰素的稀释复性条件及复性方法进行了优化,考察了聚乙二醇、甘油等...
蛋白质复性方法及其注意事项.蛋白质复性方法及其注意事项蛋白前期准备查阅目标蛋白相关文献,了解其等电点,标签等注意点。.如果目标蛋白易降解,可在纯化时加1-2mMDTT,全程低温,及时处理。.透析Buffer的选择可参考文献。.蛋白复性包涵体:在某些生长条件...
【摘要】:蛋白质复性是利用基因重组技术生产药用蛋白的关键步骤。本文针对蛋白质复性过程中聚集体的形成,在已发现的同电荷离子交换凝胶介质能够抑制蛋白质聚集、辅助蛋白质复性的基础上,探索同电荷固相介质的性质对其辅助蛋白质复性效果的影响,并对同电荷聚合物辅助蛋白质复性的...
【摘要】:蛋白质复性技术的研究对于基因工程重组蛋白质的生产具有重要意义。本论文以天然溶菌酶为模拟体系,综合运用实验研究、结构分析和分子模拟等方法研究表面活性剂十六烷基三溴化铵(以下简称CTAB)辅助溶菌酶复性过程的热力学和动力学特性。
梯度透析法和稀释法蛋白的复性.doc,蛋白的复性重组基因在表达宿主中表达量过高或速度过快,以至于没有足够的时间进行折叠,二硫键不能正确配对,导致蛋白以包涵体的形式存在。导致包涵体形成的主要原因有以下几点:=1\*GB2⑴重组蛋白的氨基酸组成,一般说来含硫氨基酸越多越容易...
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【摘要】:变性蛋白质体外复性的方法主要有传统的辅助复性法包括了:稀释法、透析法、超滤法以及蛋白质折叠液相色谱法(PFLC),也有在此基础上模拟体内分子伴侣、折叠酶、人工分子伴侣、反胶束的辅助复性方法。到目前为止,在复性液中添加小分子试剂是提高体外辅助蛋白质复性效率的策略之一。
精氨酸是一种在蛋白质折叠复性中应用最广泛的聚集抑制剂,但是研究发现精氨酸对于某些含二硫键蛋白的聚集几乎没有抑制作用,目前对于其作用机理还未做过系统研究。.本文选取了结构性质完全不同的CAB、溶菌酶、GFP和rhG-CSF为模型蛋白,考察了精氨酸辅助...