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三级淋巴结构（TLS，也称为异位淋巴组织/器官）是在非淋巴组织中发现的淋巴组织结构。TLS可在炎症组织中发生，并与慢性炎症性疾病、自身免疫性疾病和癌症有关。因此，TLS作为肿瘤免疫调节和肿瘤治疗的有利手段，受到了肿瘤患者的关注。 三级淋巴结构可以看成是一个在架构在成纤维细胞网络上的淋巴细胞聚集体，包含两个重要的结构区域—T细胞区和（滤泡）B细胞区。成熟的三级淋巴结构被定义为存在有生发中心（Germinal centre，GC），GC内含有T滤泡辅助细胞和滤泡状树突细胞，并且与B细胞紧密联系。
异位淋巴组织生成的起始阶段是由一种局部炎症微环境驱动的，主要参与的免疫细胞包括：分泌IL-17的CD4+细胞，、NK细胞、中性粒细胞、γδT细胞和ILC3等。 这些免疫细胞与成纤维细胞、血管周围成纤维细胞、间充质细胞和间质细胞形成紧密连接，释放细胞因子如IFN-γ、IL-1β、TNF等。这些细胞因子促进粘附分子表达以及趋化因子（即CXCL12、CXCL13、CCL19和CCL21）释放，创建淋巴结构形成的基础空间环境。
释放的趋化因子，招募趋化T细胞，B细胞等更多的免疫细胞至炎症局部三级淋巴器官形成空间，基质细胞等持续释放淋巴细胞存活细胞因子等（BAFF，IL-7，CXCL12），支持迁移过来的淋巴细胞持续存活，活化，增殖形成异位淋巴器官。
激活的B细胞和T细胞释放LTα1β2，驻留的间质细胞、浸润巨噬细胞、树突状细胞和其他实质细胞产生的趋化因子（CCL19/21，CXCL12/13），FDCs促进生发中心形成，高亲和力抗体产生。B细胞也产生FDCs分化需要的 LTα1β2。
B细胞、T细胞和树突状细胞向三级巴组织的募集，激活内皮细胞的高内皮微静脉样表型。 在胚胎和新生儿时期，高内皮微静脉在所有次级淋巴器官中发育，对启动和维持免疫反应至关重要，因为它们从血液中提取幼稚和记忆淋巴细胞，并将它们输送到淋巴结内的抗原呈递细胞。
这些有助于淋巴细胞存活和/或增殖的细胞因子，自身抗体（Auto-Abs）等，为异位第三淋巴器官的维持创造一个生态位。
肿瘤内三级淋巴结构 (TLS) 的存在与积极的临床结果和对癌症免疫治疗的反应有关 。在这里，使用 空间转录组学来检查肾细胞癌 (RCC) 中 TLS 内 B 细胞反应的性质 。 B 细胞在 TLS区域中富集，在研究中可以识别所有 B 细胞成熟阶段朝向浆细胞 (PC) 的形成 。 B 细胞 repertoire 分析揭示了 在TLS 中的B细胞的克隆多样化、选择、扩增以及远处完全成熟的克隆型的存在。在 TLS+ 肿瘤中， 产生 IgG 和 IgA 的 PC 沿着成纤维细胞空间分布迁移到肿瘤bed中 。 TLS+ 肿瘤表现出高频率的产生 IgG 的 PC 和 IgG 染色和凋亡的恶性细胞，这表明具有抗肿瘤效应活性。Therapeutic responses and progression-free survival correlated with IgG-stained tumor cells in RCC patients treated with immune checkpoint inhibitors。因此， 肿瘤内 TLS 维持与免疫治疗反应相关的 B 细胞成熟和抗体产生，可能通过直接的抗肿瘤作用 。
在自身免疫性疾病、慢性感染、移植排斥和癌症中遭受慢性炎症和抗原持久性的组织中发现了三级淋巴结构 (TLS)。 肿瘤内 TLS 的存在和密度与许多癌症类型的良好预后相关 .
TLS 是在成纤维细胞网络上形成的有组织的淋巴样聚集体，包括一个 T 细胞区，其中成熟的树突细胞与 T 细胞接触，以及一个滤泡性 B 细胞区 。 成熟 TLS 的定义是存在包含 T 滤泡辅助 (Tfh) 细胞和与 B 细胞紧密接触的滤泡树突状细胞的生发中心 (GC) 。最近的证据支持这样的结论，即含有 GC 的成熟 TLS，而不是没有 GC 的早期 TLS，与肝细胞癌、肺鳞状细胞癌、结直肠癌和胰腺癌的临床益处相关。 GC的主要功能是产生记忆B细胞和分泌高亲和力抗体的 long-lived 浆细胞(PC) 。 B 细胞和 PC 转录组特征的高表达水平和高 PC 密度与几种癌症类型的较长存活率相关。在软组织肉瘤、黑色素瘤、肾细胞癌、非小细胞肺癌、尿路上皮癌和其他肿瘤中， B 细胞和成熟 TLS 的存在比 T 细胞更准确地预测了对免疫检查点抑制剂 (ICI) 的治疗反应和存活率癌症类型 。 B 细胞和 PC 影响临床结果和对 ICI 反应的机制尚不清楚。尽管一些研究显示肿瘤内 B 细胞可以在某些癌症中产生针对肿瘤相关抗原的 IgG 和 IgA 抗体，但没有证据表明它们起源于肿瘤内发生的 B 细胞分化，特别是在 TLS 部位。
在目前的工作中， 解决了 TLS 作为 B 细胞原位成熟驱动因素、产生抗体的 PC 的作用以及它们对 ICI 反应的影响的问题 。 研究了肿瘤的空间分辨转录组结构透明细胞肾细胞癌 (ccRCC) 原发性肿瘤的微环境 (TME) 。通过关注 TLS 及其附近，展示了 B 细胞在不同成熟阶段的存在，支持 B 细胞反应的产生。分析证明了 B 细胞的体细胞超突变、克隆选择和扩增，以及 PC 产生的免疫球蛋白，表明肿瘤内部产生了完整的 B 细胞反应。此外， 发现 IgG 和 IgA 阳性 PC 沿着 CXCL12 阳性成纤维细胞轨道在肿瘤内迁移 。显示抗体（主要是 IgG）与肿瘤细胞结合，并且它们的存在与半胱天冬酶依赖性肿瘤细胞凋亡有关。在 IgG 染色的肿瘤细胞附近检测到呈现 caspase 3 活化的巨噬细胞表明它们可能是通过诱导 IgG 介导的肿瘤细胞死亡的效应物。最后，具有大量 IgG 阳性肿瘤细胞的患者对 ICI 反应表现出高反应率和更长的 PFS。
为了分析 TLS 对 TME 结构的影响，使用了 10X Genomics 的 Visium 空间转录组学技术。 它使用位于直径为 55 um 的点中的空间条形码寡核苷酸以空间分辨率测量完整的转录组。 这允许在多达 5,000 个spot中量化空间基因表达。
使用冷冻（n = 12）和 FFPE 切片（n = 12）对 24 个 ccRCC 原发性肿瘤进行空间转录组学 。在对切片进行 H&E 染色后，经验丰富的病理学家 (VV) 对每个肿瘤的整体组织以及 TLS 的存在和定位进行了注释 。下图显示了一个 TLS+ 冷冻切片肿瘤、一个 TLS+ FFPE 肿瘤和一个 TLS- 冷冻切片肿瘤。 碳酸酐酶9（蛋白质名称：CAIX，基因名称：Ca9）是ccRCC肿瘤细胞的标志物，在大多数ccRCC肿瘤中的表达与23/24肿瘤中的表达一致，并且在肿瘤切片中分布均匀 。使用微环境populations (MCP)-counter评估 TME 的免疫和基质细胞群的分布， 该counter从转录组谱估计细胞类型丰度 。在下图所示的 TLS+ 肿瘤中，B 细胞谱系（包含识别从幼稚细胞到 PC 的所有成熟步骤的基因）和 T 细胞（识别不同的 T 细胞群）基因特征优先在位于TLS 区域中表达 。这些肿瘤表现出 CD8 T 细胞特征的低表达，在 TLS 区域略有富集（p = ）。 TLS 中的单核细胞谱系特征略高（分别为 p = 和 p = ），而 NK 细胞更广泛地分布在整个肿瘤切片中。内皮细胞和中性粒细胞均匀分布，在 TLS 内得分较低）， 而在 TLS 区域发现成纤维细胞特征的高表达 。 TLS 肿瘤没有显示出这种有组织的模式，MCP counter 分析显示 B 谱系评分非常低且分散分布，以及其他免疫和基质特征的分散定位。这些不同的 TME 空间组织模式在 8 个 TLS+ 和 4 个 TLS- 冷冻切片肿瘤以及 10 个 TLS+ 和 2 个 TLS- FFPE 肿瘤中始终可以识别，这表明 TLS 与 B 谱系、T 细胞和成纤维细胞特征的表达有关.
为了确定 TLS 在肿瘤中的转录组学印记， 在冷冻切片的连续载玻片上通过三重 IF 标记 (CD20/CD3/PD-1) 确认了 H&E 定义的 TLS 位置，表达分析IHC 对 FFPE 样品进行切片和 CD3/CD20 标记后，在 TLS 和肿瘤区域之间进行了差异基因 。通过留一法交叉验证对 4 个冷冻的 TLS+ 肿瘤进行了 TLS 印记markers的研究， 这是一种通过识别来自 3 个肿瘤的基因并在第四个肿瘤上验证它们来执行顺序排列的方法 。平均倍数变化超过 2 且调整后的 p 值低于 （Bonferroni 校正）的基因被考虑用于分析。在signature中选择了在至少 3 个 TLS+ 肿瘤中分别达到 曲线下面积 (AUC) 的基因，这导致了 29 个基因的 TLS imprint signature。该特征包括 12 个免疫球蛋白基因（IGHA1、IGHG1、IGHG2、IGHG3、IGHG4、IGHGP、IGHM、IGKC、IGLC1、IGLC2、IGLC3 和 JCHAIN）、5 个 B 细胞标志物（CD79A、FCRL5、MZB1、SSR4 和 XBP1）， 2 个 T 细胞标志物（TRBC2 和 IL7R）、2 个成纤维细胞标志物（CXCL12、LUM）、2 个补体蛋白编码基因（C1QA 和 C7），以及 CD52、APOE、PTLP、PTGDS、PIM2 和 DERL3 基因。这 29 个基因特征是 TLS imprint的标志物，在发现冷冻 TLS+ 肿瘤时的 AUC 范围为 至 ，而在其余冷冻 TLS+ 肿瘤的验证中，其 AUC 范围为 至 。该特征在 9/10 TLS+ 肿瘤中 AUC 范围为 至 的 12 个 FFPE 肿瘤上得到进一步验证，但一个样本的 AUC 为 且 TLS 印记特征表达较弱。发现该肿瘤缺乏 TLS 成熟度标志物，例如 CD23 和 BCL6，以及外周淋巴结寻址素阳性 (PNAd+) 高内皮小静脉 (HEV)。在 4 个冷冻和 2 个 FFPE TLS 肿瘤中仅观察到印迹特征的稀疏表达，除了一个肿瘤，其中基因特征识别出表达 MZB1 PC 相关基因和 IGHG1 的小区域，尽管没有 TLS通过 H&E 染色和 CD3-CD20 IF 标记观察。
Ig 和 B 细胞相关基因在 TLS 印记特征中的显著富集促使研究关注 B 细胞 。首先旨在精确定位与 TLS 相关的转录不同的 B 细胞亚型。使用稳健的细胞类型分解 ( RCTD，大家可以参考文章 10X单细胞空间联合分析之十（RCTD） ) 对扁桃体 B 细胞单细胞分析中定义的 B 细胞亚群进行空间映射，发现幼稚 B 细胞相关基因的表达稀少，尽管与 TLS 显著相关，并且与 FCRL4+ 记忆 B 细胞密切相关、GC B 细胞 (p = ) 和具有 TLS 的浆细胞特征。 PC 相关基因 MZB1 的表达在 TLS 中高，而在冷冻切片肿瘤的肿瘤区域中总体低 。在 FFPE 肿瘤中发现了类似的结果。然而，在肿瘤内的不同位置检测到许多分散的、远离 TLS 的 MZB1 表达点。 MZB1 是浆母细胞特征的一部分，在 PC 中高度表达。由于浆母细胞仅限于 TLS 区域，并且在 TLS 外发现 MZB1 的高表达，因此表达 MZB1 的 PC 可能不仅存在于 TLS 中，而且存在于肿瘤bed中。 由于 PC 的主要功能是产生抗体，于是分析了免疫球蛋白基因的空间表达 。 IGHM 几乎只在 TLS 区域表达，增强了 TLS 内非转换 B 细胞的存在，而 IGHG1、IGHA1 和 pan Ig（IGKC 和 JCHAIN 的几何平均值）基因在 TLS 区域高度表达，but also at distance in the tumors。 IGHG1 和 IGHA1 的分散表达表明同种型转换的 PC 已在 TLS 中形成并在远处迁移 。
值得注意的是，在与泛 Ig 基因（IGKC、JCHAIN）、IGHG1 和 IGHA1 基因相同的位置发现了泛成纤维细胞标记 COL1A1 的高表达以及 MCP-counter 成纤维细胞特征。 由于据报道 CXCL12 与位于骨髓、淋巴结髓索和慢性炎症组织中的 PC 生态位中的 PC 迁移和滞留有关，我们分析了 CXCL12 的表达，发现它与 MZB1 的表达共定位 。
为了进一步评估这些不同特征之间的空间协同定位，每个特征的表达被二分法，使用中值作为截止点，为每个spot定义“高”或“低”表达类别 。 当一个基因被两个特征共享时，它会从其中一个特征中删除，以避免其对统计分析的影响 。因此，当分析 TLS 和 CXCL12 基因表达之间的重叠时，从 TLS imprint signature 中删除了 MZB1 以分析 TLS/MZB1 重叠和 CXCL12。然后通过计算两个特征之间的卡方检验来评估有意义的重叠，并用黄色突出显示分类为“高/高”的点。 该分析不仅证实了 TLS 特征与 MZB1、成纤维细胞和 CXCL12 的共定位，而且还证实了成纤维细胞与 CXCL12、MZB1 与成纤维细胞以及 MZB1 与 CXCL12 在距 TLS 一定距离处的共定位 。 这些共定位在其他 TLS+ 肿瘤中得到证实，而在 TLS-肿瘤中观察到轻微或无关联 。总体而言，得出结论， 在 TLS+ 肿瘤中，表达 IGHG1 和 IGHA1 的 PC 存在于 TLS 附近，并且可能与成纤维细胞相关地在肿瘤内迁移 。
TLS 中 B 细胞成熟亚型和 PC 的共定位暗示了原位 B 细胞适应性免疫的产生。在此过程中，B 细胞会突变其 B 细胞受体 (BCR) 序列，并选择和扩增最亲和的克隆 。为了证明这些事件，有必要研究 BCR 的核苷酸序列。 Visium 空间技术基于条形码转录本的 RNA 测序，这能够访问原始转录本并执行空间 BCR repertoire 分析。 使用了公开可用的实施 MiXCR，这是一种旨在从 50 个 RNA 测序数据中识别 BCR IgL 和 IgH 克隆型及其种系体细胞超突变的工具，以及 30 Frozen Visium 试剂盒，它使我们能够获得足够长度的 mRNA 转录物捕获大多数 IGL 和一些 IGH 序列的完整互补决定区 (CDR)3 区域 。通过 3 倍推荐深度（每个点 150,000 个读数，相当于每个样本 亿个读数）的测序促进了这种捕获。MiXCR 鉴定了许多独特的克隆型：总共 3,015 个 λ 轻链、3,084 个 kappa 轻链和325 重链。 在 TLS+ 肿瘤中发现了最多的独特克隆型和总 Ig 计数。在 TLS 区域也发现了数量最多的独特轻链克隆型 。 通过测量 Ig 轻链序列的 V 区的突变计数与映射的 V 种系基因进行比较来评估 B 细胞成熟 。中位 V 基因突变计数在 TLS 区域中显示低至中位水平，并且引人注目的是， 在肿瘤区域中远离 TLS 的大部分是高度突变的序列 。尽管如此， 在 TLS 区域测量了全范围的突变，包括高度突变的序列，而距 TLS 一定距离的大多数 Ig 转录物富含高度突变的序列，表明体细胞超突变发生在 TLS 中，并表明突变的 PC 在整个肿瘤中迁移 . 研究了来自 47 个 ccRCC 肿瘤（包括 Visium 分析的 12 个冷冻肿瘤）的bulk 50 个 RNA-seq 中的轻链和重链突变计数，这些肿瘤使用 TLS 印记特征的中值表达被分类为 TLS 高或低。对于 VL（中位 TLS 高 = 12 个突变，中位 TLS 低 = 8 个突变，p = ）和 VH 基因（中位 TLS 高 = 19）， TLS 高与 TLS 低肿瘤的总体体细胞超突变水平显着更高突变，中位 TLS 低 = 个突变，p = ） 。为了确定体细胞超突变是否伴随着克隆型选择，研究了bulk 50 RNA-seq 数据的 IgH 库。 高 TLS 样本的所有样本都表现出大量的总克隆型计数以及计数超过 100 次的更高比例的克隆型 。事实上，30% 的 TLS 高肿瘤库被识别超过 100 次的克隆型占据，而 TLS 低肿瘤中这一比例为 1% (p = 10e-7)，揭示了 TLS 高样本中持续的免疫反应。相反，TLS-low 样本显示出较少的多样性，计数较低，大多数被测量不到 10 次，除了一个肿瘤有 123 个 IgH 克隆型，只有 2 个被计数超过 100 次。
最后，为了确定扩增的 IgH 克隆型的克隆关系和位置，对 30 个 RNA-seq 空间数据进行了克隆性评估。 克隆性由相同的 VH 基因家族、相同的 JH 基因和相同的 CDR3 长度以及 VH 序列之间的 CDR3 核苷酸序列的最大差异为 15% 来定义 。为了可视化这些关系， 计算了每个 VH CDR3 序列之间的 Levenshtein 距离，并用 TLS+ 肿瘤的圆形树表示它 。总共确定了 31 个具有 2 至 16 个独特成员的克隆家族。在一个家族中，一些克隆可以在多达 20 个不同的空间位置被检测到多达 80 次。 IgH 克隆型在 Visiumslide 上的定位证明了同一家族的克隆型聚集在 TLS 附近并在远处稀疏迁移。一些克隆型甚至可以在距它们所在的 TLS 区域高达 3 mm 处检测到可能已经生成。为了证实这些结果，在从配对的bulk 50 RNA-seq 推断的克隆型中寻找从空间 30 RNA 转录组学鉴定的克隆型的 CDR3 核苷酸序列。克隆家族 1 的 CDR3 序列 CATYNAGEGGRGYW 的克隆型也在bulk 50 个 RNA-seq 数据中发现，从而证实了分析的结果。 此外，这些克隆型位于 TLS 内部和远离 TLS 的位置，表明相应 B 细胞克隆的迁移 。
为了分析肿瘤内 PCs 和成纤维细胞的位置以及原位 CXCL12 的表达，使用多发性骨髓瘤癌基因 1 (MUM1) (IRF4) 作为 PCs 和 COL1 (Col1a) 的特异性标志物对 FFPE 肿瘤切片进行多重 IF 标记) 用于成纤维细胞 。在 TLS 区域内检测到双阳性 MUM1+ IgG+ PC 和一些 MUM1+ IgA+ PC，由连续载玻片上的显色 CD3/CD20 标记定义。在这些区域观察到 COL1+/CXCL12+ 成纤维细胞与 MUM1+ PC 并列。此外， 在远离 TLS 的地方证明了 PC 沿着成纤维细胞轨道排列，嵌入在密集的 COL1+ CXCL12+ 成纤维细胞网络中，从而证明它们在肿瘤床中的迁移 。为了定量评估 PC 和成纤维细胞之间的空间关系，对 DAPI/MUM1/IgG/IgA IF 染色样品上的成纤维细胞核进行了 AI 检测。如下图所示， 成纤维细胞核的检测映射了 COL1+ 成纤维细胞轨迹 。绝大多数 PC 与成纤维细胞核非常接近，两个肿瘤的平均距离分别为 和 19 mm，其距离分布下图所示。在 44 个肿瘤样本上测得的平均距离为 mm。总而言之， 这些数据概括了 Ig 和成纤维细胞转录物的共表达，以及成纤维细胞转录物和 CXCL12 的共表达，并验证了 PC 在 TLS 内的位置以及空间转录组学确定的成纤维细胞网状细胞 (FRC) 空间上的位置 。值得注意的是， 在被 MUM1+ IgG+ 成纤维细胞轨道包围的肿瘤巢中检测到与肿瘤细胞结合的 IgG 。
为了进一步研究 TLS、肿瘤内 PC 和 Ig 染色之间的联系，首先分析了 TLS 成熟度。 成熟 TLS 的特点是 GC 包含一个被 T 细胞区包围的 B 细胞区，其中存在 CD4+PD1+ T 细胞、CD4+ PD1+CXCR5+ Tfh 细胞和产生 CXCL13 的细胞 。 GC 区的特点是在外围检测到 CD23+ 滤泡树突细胞 (FDC)、BCL6+ CD20+ B 细胞和 PNAd+ HEV 网络。 研究了 103 个肿瘤中 TLS 的存在与 PC 密度之间的相关性。 观察到 TLS 的存在与 MUM1+ IgG+ 细胞和 MUM1+ IgA 细胞的密度之间存在显著关联。 进一步研究了 57 个 TLS+ 样本上 TLS 成熟度标记与 MUM1+IgG+ 和 MUM1+IgA+ PCs 密度的相关性。 发现含有 CD23+ FDC 网络、BCL6+ 细胞和 PNAd+ HEV 的 TLS 与 MUM1+IgG+ PC 和 MUM1+IgA+ PC 密度之间存在很强的相关性。
在肿瘤巢周围检测到高密度的产生 Ig 的 PC 和在肿瘤巢中观察到 IgG 促使研究抗肿瘤抗体的存在 。 值得注意的是，如在 TLS+ 肿瘤中所示， a bright labeling of CAIX+ tumor cell membrane，by conjugated anti-human IgG was observed as illustrated in a TLS+ tumor, whereas no labeling was observed in a TLS- tumor 。 随后对 103 个肿瘤的量化显示 IgG 阳性率很高，与 TLS- 肿瘤相比，TLS+ 中的肿瘤细胞高达 100%（中位数分别为 70% 和 30%，p = ）。 在 TLS+ 和 TLS- 肿瘤中均观察到弱 IgA 标记。 此外，发现肿瘤细胞上的 IgG 标记与 MUM1+ IgG+ PC 的肿瘤浸润之间存在显著关联（MUM1+IgG+ 高肿瘤的中位 IgG 标记 = 80%，MUM1+IgG+ 低肿瘤的中位 IgG 标记 = 40%，p = ） , IgA 标记非常低。
为了揭示肿瘤结合 IgG 抗体的潜在功能，使用检测切割的半胱天冬酶 3 的抗体搜索肿瘤细胞中发生的细胞凋亡迹象，通过其典型的大细胞核和透明细胞表型鉴定 。下图说明了切割半胱天冬酶 3 在 一个 TLS+ 和一个 TLS- 肿瘤。 在 IgG 染色高于 60%（这是区分两个肿瘤群的最佳平均值）的肿瘤中，裂解的 caspase 3+ 肿瘤细胞的密度显着高于 IgG+ 肿瘤细胞低于 60% 的肿瘤（中位数： 个细胞/ mm2 和 个细胞/mm2，p = ）。
这里解决了可能在诱导肿瘤细胞凋亡中起作用的机制的问题。 由于巨噬细胞和 NK 细胞是抗体依赖性细胞毒性 (ADCC) 的主要效应物，分别评估了 76 和 98 个肿瘤上 CD68+ 巨噬细胞和 NKp46+NK 细胞的总密度，found no correlation with the density of cleaved caspase-3+ tumor cells 。然而， 发现具有大量凋亡细胞和高百分比 IgG 染色肿瘤细胞的肿瘤比具有大量凋亡细胞但低百分比 IgG 染色肿瘤细胞的肿瘤更容易被 CD68+ 巨噬细胞浸润 （p = ）。接近性评估证明 14 个肿瘤上 CD68+ 巨噬细胞和裂解的 caspase 3+ 肿瘤细胞呈正相关，凋亡细胞数量多，IgG 染色肿瘤细胞百分比高。NK 细胞的密度低于巨噬细胞，并没有表现出这种相关性。此外， 发现 的凋亡肿瘤细胞位于小于 25 mm 的巨噬细胞处，而没有观察到 NK 细胞和凋亡肿瘤细胞之间的紧密接近 （中位数 = ）。
为了评估 IgG 肿瘤染色对 ICI 治疗患者的影响，我们评估了来自 NI 治疗患者的 35 个肿瘤和来自 Nivolumab 治疗患者的 16 个肿瘤（一名 Nivolumab 治疗患者的 IgG 肿瘤染色不可评估，一名患者缺少临床信息） .我们选择平均 IgG 肿瘤染色 (60%) 作为截止值，因为它区分了最好的两个肿瘤群体。对于 NI 治疗的患者，证明了 IgG 肿瘤细胞标记高于平均值的患者的治疗反应与 62% 的客观反应（OR：完全和部分反应）之间存在显著关联，而 IgG 肿瘤细胞标记低于平均值的患者为 18% OR (p = )，以及与低 IgG 肿瘤细胞染色相比，高 IgG 肿瘤细胞染色患者的 PFS 显著延长（中位 PFS = 个月对 个月，p = ）。仅接受 Nivolumab 治疗的患者队列太小，无法进行统计分析。然而，在接受 ICI 治疗的 51 名患者中，无论是单用 Nivolumab 还是 NI，对于肿瘤染色高的患者（未达到与 个月，p = ）相比，观察到 PFS 显著延长，并且 OR 数量呈增加趋势（58% 对 32%）。
Our study has several limitations. Spatial transcriptomic analyses reveal the architecture of a limited part of a tumor and do not take into consideration potential 3D tumor heterogeneity. This limitation is inherent to this type of analysis。
生活很好，有你更好
保留肾单位手术(NSS)可以更好地保留肾功能；对于良性和临床惰性的肿瘤，保留肾单位的手术可以降低过度治疗的风险。然而，保留肾单位手术治疗肾细胞癌仍未广泛应用，尤其是在非教学医院。近年来，越来越多的临床研究表明，与根治性肾切除术(RN)相比，保留肾单位手术可以减少心血管事件的发生。这些结果使得保留肾单位手术看似优势明显，但也存在明显的偏差：实际上高血压、糖尿病等基础疾病会影响手术的选择。欧洲癌症研究和治疗组织(EORTC)发现保留肾单位的手术不能提高患者的存活率。有鉴于此，意大利某研究所的卡皮塔尼奥博士进行了一项多机构联合研究工作，试图了解肿瘤切除、患者基础疾病和治疗方法(保留肾单位手术和根治性肾切除术)对肾癌手术后心血管事件风险的影响，并将结果发表在最近的《欧洲神经病学杂志》上。这项研究包括1987年至2013年的1331例肾癌病例。患者术前肾功能正常(即估计肾小球滤过率60毫升/分钟/平方米)。其中462例(约1/3)行根治性肾切除术(根治性肾切除术)，869例(约2/3)行保留肾单位手术，后者包括开放手术(most)、腔镜手术和机器人辅助手术。根据治疗方法的分层分析，发现保留肾单位手术患者在1、5、10年时的心血管事件发生率低于根治性肾切除术患者。单变量分析显示，治疗方法(保留肾单位手术与根治性肾切除术)与心血管事件显著相关，而多变量分析显示，保留肾单位手术患者的心血管事件风险显著低于根治性肾切除术患者。如果医院的技术可行，保留肾单位手术是目前临床T1肾癌的标准治疗方法。研究表明，保留肾单位手术与根治性肾切除术在治疗肿瘤方面没有区别，但保留肾单位手术比根治性肾切除术预后更好。此外，肾脏手术中心血管事件的风险也不容忽视。这项研究表明，RSS患者的心血管事件发生率几乎是根治性肾切除术患者的一半，可以显著降低根治性肾切除术引起的心血管事件风险。
(1)病理变化：①肾细胞癌是来源于肾小管上皮细胞的恶性肿瘤。②多见于肾之两极，尤其上极。肉眼多彩(红、黄、灰、白等)状，常有假包膜形成。③镜下瘤细胞形态和排列多样，主要类型为透明细胞癌(70%～80%)、乳头状癌和嫌色细胞癌。(2)临床病理联系：①无痛性全程肉眼血尿：肿瘤组织侵犯破坏血管或侵犯破坏肾盂肾盏，以及肿瘤组织本身含丰富的血管而发生继发改变等而造成出血。②腰部疼痛：肿瘤累及血管。③肾区包块：肿瘤体积增大。④副肿瘤综合征：肿瘤产生异位激素和激素样物质所致。患者出现红细胞增多症、高钙血症和高血压等。
病理回报中“肿瘤侵透肾包膜及侵及周围肾组织”是不良预后的指标，根据你提供的资料，肿瘤应为t3a期，建议定期复查。目前你提到的索坦和多吉美主要用于肾脏透明细胞癌，对于晚期及转移性肾癌是有效的，两种药物的作用机制相似，对于嫌色细胞癌，也有有效的病例，但尚需更大样本的临床证据来证实，祝好运。中国医科大学附属盛京医院-泌尿外科-陈小楠主治医师
01 肾嫌色细胞癌是一种非常见的肾细胞恶性肿瘤，但与普通的肾细胞恶性肿瘤相比，它的恶性程度相对较低，它的形态比较特殊，恶性程度不高，根据临床医学认识，它起源于肾集合管上皮，目前在治疗此类恶性肿瘤时，大多会进行根治性切除。 02 全肾脏切除后往往预后效果好，与同期其他类型的恶性肿瘤相比，它的5年生存期比例相对较大。 03 对于患者来说，做到早发现早治疗相当重要。它的早期症状相对较少，但是肿瘤增大后可以出现明显的血尿、持续性腰痛，同时多伴有腹部包块，以上症状也被临床医学上称之为肾癌的三联征，若出现以上症状要引起重视。
(1)病理变化：①肾细胞癌是来源于肾小管上皮细胞的恶性肿瘤。②多见于肾之两极，尤其上极。肉眼多彩(红、黄、灰、白等)状，常有假包膜形成。③镜下瘤细胞形态和排列多样，主要类型为透明细胞癌(70%～80%)、乳头状癌和嫌色细胞癌。(2)临床病理联系：①无痛性全程肉眼血尿：肿瘤组织侵犯破坏血管或侵犯破坏肾盂肾盏，以及肿瘤组织本身含丰富的血管而发生继发改变等而造成出血。②腰部疼痛：肿瘤累及血管。③肾区包块：肿瘤体积增大。④副肿瘤综合征：肿瘤产生异位激素和激素样物质所致。患者出现红细胞增多症、高钙血症和高血压等。
嫌色肾细胞癌恶性程度不高，手术后复发和转移的可能性较少，不必过于担心，嫌色肾细胞癌手术是可以根治的。手术后应该多休息，合理膳食营养，定期随访复查。平时的生活中要注意劳逸结合，多喝水，多吃新鲜的水果蔬菜，必要时可以考虑适当中医中药调理。
嫌色细胞癌为肾癌中不常见的一个类型,约占肾癌的5％.男女发病比例约为：1,平均发病年龄54岁.肾嫌色细胞癌起源于肾集合小管上皮,组织学上可分为透明细胞型和嗜酸细胞型.癌细胞以实体排列,境界明显,中等大小,圆形或多边形,肿瘤由胞质嗜酸性颗粒细胞(占9o％)及不完全透明呈空亮细网状的细胞(占10％)2种细胞组成,亦可见体积较大,胞质丰富,呈透明或泡沫样的癌细胞,核周空晕明显,细胞膜厚.低,中倍镜下癌细胞呈现鹅卵石样排列的植物细胞样.治疗上应以手术切除为主,因其对放疗和化疗不敏感,术后主张应用生物制剂提高机体免疫力,常用方案为小剂量IL-2加干扰素或则单纯大剂量IL-2或者通过中医中药抗肿瘤药物.肾嫌色细胞癌预后良好,Onishi等随访发现5,l0,20年生存率为82％ ,70％,47％. 倾向是高度怀疑的意思。祝身体健康！
本文是一篇综述，选自nature review 摘要：调节细胞死亡过程的发现促进了癌症治疗的进展。在过去的十年中，铁死亡，一种由过度脂质过氧化驱动的铁依赖形式的调节性细胞死亡，与各种类型肿瘤的发展和治疗反应有关。实验试剂(如erastin和RSL3)、批准的药物(如索拉非尼、柳氮磺胺吡啶、他汀类和青蒿素)、电离辐射和细胞因子(如IFNγ和TGFβ1)可诱导铁死亡和抑制肿瘤生长。然而，铁死亡性损伤可以在肿瘤微环境中引发炎症相关的免疫抑制，从而促进肿瘤生长。铁死亡对肿瘤生物学的影响程度尚不清楚，尽管一些研究发现了癌症相关基因(如RAS和TP53)突变、编码参与应激反应途径(如NFE2L2信号传导、自噬和缺氧)的蛋白质的基因突变、上皮-间充质转化与激活铁死亡的治疗反应之间的重要相关性。在这里，我们介绍了铁死亡的关键分子机制，描述了铁死亡和肿瘤相关信号通路之间的相互作用，并讨论了铁死亡在全身治疗、放射治疗和免疫治疗中的潜在应用。 大多数癌症治疗策略旨在选择性地消除癌细胞，而不伤害非恶性细胞。调节性细胞死亡(RCD)过程的不同致死子程序不同地影响肿瘤进展和对治疗的反应。与意外细胞死亡相比，RCD由特定的信号转导途径控制，这些途径可以通过药理学或遗传干预来调节。最广泛研究的RCD类型是细胞凋亡、焦亡、坏死和铁死亡，每一种都有独特的分子机制。死亡受体和线粒体途径是凋亡激活的两种最常见的机制，一个称为胱天蛋白酶的细胞内蛋白酶家族负责这些形式的RCD的效应期。焦亡也是一个半胱天冬酶依赖的过程，其效应期需要半胱天冬酶1或半胱天冬酶11介导的gasdermin D的裂解来释放其N端结构域，从而可以寡聚化并在质膜中形成孔。坏死的发生没有半胱天冬酶的激活，而是涉及其他效应分子，如假激酶MLKL，由RIPK3介导的磷酸化激活。 铁死亡这个术语是在2012年提出的，指的是一种由无限制的脂质过氧化和随后的质膜破裂引起的铁依赖性RCD。铁死亡可通过外在或内在途径诱发。外源途径是通过抑制细胞膜转运蛋白如胱氨酸/谷氨酸转运蛋白(也称为系统xc)或通过激活铁转运蛋白5-羟色胺转运蛋白和乳转铁蛋白来启动的。内在途径通过阻断细胞内抗氧化酶(如谷胱甘肽过氧化物酶GPX4)而被激活。尽管这一过程不涉及胱天蛋白酶、MLKL或gasdermin D的活性， 但铁死亡的效应分子仍有待鉴定 。值得注意的是，氧化损伤，一种由谷氨酸介导的神经细胞xc系统抑制引起的氧化损伤，其分子机制与铁死亡相似。 细胞凋亡在过去的30年里得到了广泛的研究；然而，肿瘤学中以凋亡调节因子(如来自半胱天冬酶或BCL-2家族的蛋白质)为靶点的治疗药物的临床应用仍然面临挑战。对凋亡的抵抗是癌症的标志，因此，靶向非凋亡的RCD过程可能提供抑制肿瘤生长的替代策略。三个早期临床前观察支持某些致癌信号和铁死亡诱导之间的联系:(1)铁死亡激活剂erastin被鉴定，因为它能够选择性地在含有突变型而非野生型RAS的癌细胞中触发细胞死亡；(2)RAS-RAF-MEK-ERK通路的激活是erastin诱导的细胞死亡所必需的和(3)铁，已知对癌细胞增殖很重要，也是erastin诱导的细胞死亡所必需的。随后的研究发现了一种通过铁积累、脂质过氧化和膜损伤控制铁死亡的复杂信号通路。 该网络作为肿瘤学中潜在的新靶点已经引起了极大的关注(表1)。特别是，对传统疗法有抵抗力或具有高转移倾向的癌细胞可能特别容易发生铁死亡敏感，从而开辟了靶向治疗研究的新领域。作为对先前综述的补充，我们旨在深入了解铁死亡在肿瘤发展中的机制和功能，并将其作为潜在的治疗靶点。我们描述了肿瘤异质性和与铁死亡敏感阈值相关的信号，并强调了临床应用的潜在治疗药物。 铁积累和脂质过氧化是铁死亡过程中引发膜氧化损伤的两个关键信号。铁死亡的核心分子机制涉及调节氧化损伤和抗氧化防御之间的平衡。 与非恶性细胞相比，癌细胞(尤其是癌症干细胞)的生长强烈依赖于微量元素铁。流行病学证据表明，高膳食铁摄入量增加了几种癌症类型的风险(如肝细胞癌(HCC)和乳腺癌)。这些特点表明，铁螯合药物(如去铁胺)或增加铁介导毒性的药物(如索拉非尼、柳氮磺吡啶、他汀类和青蒿素等诱导铁死亡的药物)可用于治疗癌症患者。 在动物模型中，由于多种水平的干预(如增加铁吸收、减少铁储存和限制铁流出)导致的铁积累增加通过整合的信号通路促进铁死亡。5-羟色胺转运体介导或乳转铁蛋白介导的铁摄取通过转铁蛋白受体(TFRC)和/或另一种未知受体促进铁转运，而SLC40A1介导的铁输出抑制铁转运。铁蛋白(一种铁储存蛋白)的自噬降解通过增加细胞间铁水平来增强铁死亡，而外泌体介导的铁蛋白输出抑制铁死亡。参与铁硫簇生物发生铁利用的几种线粒体蛋白(包括NFS1、ISCU26、CISD1和CISD2)可能通过降低有效的氧化还原活性铁含量来负调节铁死亡。 过量的铁通过至少两种机制促进随后的脂质过氧化:通过依赖铁的芬顿反应产生活性氧和激活含铁的酶(例如，脂氧合酶) 。因此，铁螯合剂和抗氧化剂可防止铁中毒。铁螯合剂去铁胺联合常规经动脉化疗栓塞的安全性和有效性目前正在不能切除的HCC患者中进行研究(NCT03652467)。 在铁死亡过程中，多不饱和脂肪酸(PUFAs)，特别是花生四烯酸和肾上腺素酸，最容易发生过氧化反应，从而导致脂质双层的破坏，影响膜功能。细胞膜中多不饱和脂肪酸的生物合成和重塑需要酶ACSL4和LPCAT3。ACSL4催化游离花生四烯酸或肾上腺素酸和辅酶a的结合，分别形成衍生物AA–CoA或AdA–CoA，然后LPCAT3促进它们酯化成膜磷脂酰乙醇胺，形成AA–PE或AdA–PE。ACSL3将单不饱和脂肪酸(MUFAs)转化为它们的酰基辅酶a酯，以结合到膜磷脂中，从而保护癌细胞免受铁敏感性。AMPK介导的beclin1磷酸化通过抑制还原型谷胱甘肽(GSH)的产生而促进铁死亡，而AMPK介导的ACAC磷酸化被认为通过限制PUFA的产生而抑制铁死亡。这些研究扩展了AMPK的已知功能，揭示了这种激酶作为能量传感器的作用，通过不同下游底物的磷酸化决定细胞命运。过氧化物酶体介导的缩醛磷脂生物合成为铁缺乏症期间的脂质过氧化提供了另一种PUFA来源。最后，不同的脂氧合酶在介导脂质过氧化以产生氢过氧化物AA-PE-OOH或AdA-PE-OOH方面具有环境依赖性作用，这些氢过氧化物促进铁死亡。例如，脂氧合酶ALOX5、ALOXE3、ALOX15和ALOX15B负责来源于各种肿瘤类型(BJeLR、HT-1080或PANC1细胞)的人细胞系中的铁死亡，而ALOX15和ALOX12在来源于非小细胞肺癌(NSCLC)的H1299细胞中介导p53诱导的铁死亡。 几种膜电子转移蛋白，特别是POR和NADPH氧化酶(NOXs)有助于铁死亡脂质过氧化的活性氧产生。在其他情况下，哺乳动物线粒体电子传递链和三羧酸循环，再加上谷氨酰胺分解和脂质合成信号，参与了铁死亡的诱导，尽管线粒体在铁死亡中的作用目前仍有争议。当新的治疗方法可用时，进一步评估不同类型肿瘤中脂质过氧化调节因子的表达谱对指导患者选择是至关重要的 抗氧化酶GPX4可以直接将磷脂氢过氧化物还原为羟基磷脂，从而作为癌细胞中铁死亡的中心阻遏物。GPX4表达和生存结果之间的关系是肿瘤类型依赖性的。例如，GPX4的高表达水平与乳腺癌患者的预后呈负相关，但与胰腺癌患者的良好生存结果呈正相关。GPX4在铁死亡中的表达和活性依赖于谷胱甘肽和硒的存在。 谷胱甘肽是由半胱氨酸、甘氨酸和谷氨酸三种氨基酸合成的；半胱氨酸的可用性是这一过程的主要限制因素。 在哺乳动物细胞中，xc系统在将胱氨酸(半胱氨酸的氧化形式)导入细胞用于随后的GCL介导的谷胱甘肽生产中起主要作用。系统xc由两个子单元组成，SLC7A11和SLC3A2。 SLC7A11的表达和活性进一步被NFE2L2正向调节，并被肿瘤抑制基因负向调节，如TP53、BAP1和BECN1 。这种双重调节构成了一种微调机制来控制铁死亡中的谷胱甘肽水平。谷胱甘肽的其他来源可能包括反式硫化途径，该途径由氨酰基-tRNA合成酶家族负调节，如CARS1，CARS1中的一些多态性与胃癌风险增加相关。 GPX4以谷胱甘肽为底物，将膜脂氢过氧化物还原为无毒的脂醇 。在GPX4中用半胱氨酸残基取代硒代半胱氨酸(U46C)增加了它的铁死亡抗性。对系统xc(用伊拉斯汀、柳氮磺胺吡啶或索拉非尼)或GPX4(用RSL3、ML162、ML210、FIN56或FINO2)的药理学抑制诱导铁死亡。同样，SLC7A11或GPX4的基因缺失会导致脂质过氧化，并导致某些细胞或组织的铁死亡。 GPX4缺失还介导小鼠中的其他RCD过程(如凋亡、坏死和焦亡)，表明脂质过氧化位于这些途径的十字路口，尽管下游效应物可能有所不同 。 几个非GPX4途径，包括AIFM2–CoQ10、GCh1–BH4和ESCRT- III膜修复系统，在防止铁死亡期间的氧化损伤方面也具有作用。这些修复途径之间可能存在协同或互补效应。事实上，AIFM2调节还原性CoQ10产生，但也可以通过激活ESCRT-III膜修复系统来防止癌细胞的铁死亡。 RAS家族(HRAS、NRAS和KRAS)的癌基因是所有人类癌症中最常见的突变。在发现索托菲尼之前，这些蛋白质被认为是“undruggable”，索托菲尼是KRAS-G12C突变蛋白质的直接抑制剂，在非小细胞肺癌患者中具有很好的活性，尽管对这种化合物的获得性抗性是常见的。KRAS-G12C的另一种选择性抑制剂阿达格列西布也显示出对KRAS-G12C阳性非小细胞肺癌和其他实体肿瘤患者的令人鼓舞的临床活性。其他针对RAS信号传导的间接策略依赖于筛选RAS依赖性生长抑制剂或特定细胞死亡诱导剂时识别的小分子。 铁死亡诱导剂erastin和RSL3对工程化RAS突变肿瘤细胞显示出选择性致死作用 。 RAS或其下游信号分子(BRAF、MEK和ERK)的遗传或药理学抑制逆转了erastin和RSL3的抗癌活性 ，可能是因为突变的RAS信号通过调节铁代谢相关基因(如TFRC、FTH1和FTL19)的表达丰富了细胞铁库。KRAS突变型肺腺癌细胞对SLC7A11抑制剂诱导的铁敏感；此外，在EGFR具有上游突变的非小细胞肺癌衍生细胞对铁死亡敏感。 这些临床前的发现支持了铁死亡的诱导可能是对抗致癌性RAS携带肿瘤的合适策略的观点 。 在临床前研究中，致癌RAS突变体(NRASV12、KRASV12和HRASV12)的异位表达降低了RMS13横纹肌肉瘤衍生细胞的铁死亡易感性，表明这些突变可能在特定情况下抑制铁死亡。此外，对117种癌细胞系对erastin的反应的分析揭示了RAS依赖和RAS非依赖铁死亡机制，这些试图破译使某些癌症易受铁死亡诱导的特定遗传特征的努力正在进行中。 在大约50%的人类癌症中，TP53是双等位基因突变或缺失的，导致野生型P53活性的丧失和肿瘤进展。所有人类癌症中最常见的六种TP53突变包括R175H()、R248Q ()、R273H ()、R248W ()、R273C ()和R282W()。众所周知， p53是一种转录因子，它与靶基因的启动子结合，然后激活或抑制基因合成 。例如，p53主动调节BBC3(也称为PUMA)和BAX的表达，以诱导凋亡。相比之下， p53介导的SLC7A11转录抑制促进癌细胞的铁死亡 。TP53改变(突变或多态性)改变了P53促进细胞凋亡和铁死亡的能力。p53 3KR (K117R，K161R，K162R)乙酰化缺陷突变株不能诱导细胞凋亡，但完全保留了诱导肺癌细胞系铁死亡的能力。另一个乙酰化缺陷突变体p53 4KR(K98R和3KR)和p53 P47S(一种位于p53 N端反式激活结构域的多态性)也不能诱导铁死亡。有趣的是，p53 R273H和R175H不能结合DNA，但仍然可以通过抑制其他转录因子的活性来抑制SLC7A11的表达，从而表明整合的转录因子网络控制了铁死亡主要调控因素的表达。 一些代谢相关基因，如SAT1、FDXR和GLS2，已被报道为在各种条件下负责p53介导的铁死亡的直接靶标，从而强调了p53在铁死亡中作为参与代谢的基因的调节剂的重要性。p53还具有通过直接结合二肽基肽酶DPP4来抑制人结直肠癌细胞中氮氧化物介导的脂质过氧化或通过诱导纤维肉瘤细胞中CDKN1A的表达来限制铁死亡的能力。DPP4抑制剂(如vildagliptin、alogliptin和linagliptin)用于降低2型糖尿病患者的血糖水平，并可能限制铁死亡激活剂的抗癌活性。 迄今发表的数据不仅暗示脂质过氧化是铁死亡的关键因素，而且单一p53靶基因或结合蛋白在铁死亡中的总体重要性可能是细胞类型特异性的 。此外，MDM2和MDMX这两种结合p53并调节其稳定性的蛋白质以与p53无关的方式促进癌细胞中的铁死亡，从而强调了铁死亡中p53的稳定性可能不依赖于来自MDM家族的蛋白质。Eprenetapopt和COTI-2都旨在重新激活突变型p53，目前正在应用于急性髓系白血病(AMLNCT03931291)和各种实体恶性肿瘤(NCT04383938和NCT02433626)；这些药物的临床活性可能与铁死亡有关。 NFE2L2是氧化应激信号的主要调节因子，在肿瘤进展中具有双重作用:NFE2L2活性不足可导致早期肿瘤发生，而NFE2L2高组成性活性可触发肿瘤进展和对治疗的抵抗。NFE2L2在癌细胞中的表达不仅受KEAP1介导的蛋白质降解调节，还受致癌信号通路(如KRAS-BRAF-MYC)的转录调节。临床前研究表明NFE2L2信号是抵抗铁死亡的重要防御机制，并与HCC细胞对索拉非尼的抗性有关。Sequestosome 1是一种多功能支架蛋白，可结合KEAP1，并防止其在癌细胞的铁死亡过程中结合新合成的NFE2L2。 NFE2L2通过反式激活铁代谢 (包括SLC40A1、MT1G、HMOX1和FTH1)、 谷胱甘肽代谢 (包括SLC7A11、GCLM和CHAC1) 和ROS解毒酶 (包括TXNRD1、AKR1C1、AKR1C2和AKR1C3、SESN2、GSTP1和NQO1)中涉及的几种细胞保护基因来 抑制铁死亡中的氧化损伤 。NFE2L2中的功能获得突变或KEAP1中的功能丧失突变进一步增加了氧化应激反应的复杂性，这反过来可能影响对铁死亡的抗性。NFE2L2对铁死亡抗性的贡献和NFE2L2抑制剂(如布鲁塞尔醇和葫芦巴碱)增强铁死亡的治疗潜力需要在临床前和临床研究中进一步探讨。 缺氧促进肿瘤形成和治疗抵抗。缺氧的主要调节因子——缺氧诱导因子包括一个氧不稳定的α亚单位(包括缺氧诱导因子1α、EPAS1(也称为缺氧诱导因子2α)和缺氧诱导因子3α)和一个组成型表达的β亚单位(ARNT)。在常氧条件下，缺氧诱导因子EGLN家族的成员将缺氧诱导因子1α和EPAS1羟基化，然后被E3泛素连接酶VHL识别用于蛋白酶体降解。在低氧条件下，羟化酶失活导致HIF1α和EPAS1积累并与ARNT形成异二聚体，从而诱导参与低氧适应和存活的基因转录。HIF1α和EPAS1表达在多种癌症类型中都升高，通常与患者预后不良有关. 在临床试验中，已经探索了使用小分子，如2-甲氧基雌二醇(NCT00030095)、BAY 87-2243 (NCT01297530)、PX-478 (NCT00522652)和PT2385抑制缺氧诱导因子信号的策略。在这些药物中，PT2385可以稍微提高转移性透明细胞肾细胞癌(RCC)患者的生存率，而长期使用PT2385会导致获得耐药性。在临床前研究中， 缺氧诱导因子似乎在调节癌细胞铁死亡中具有双重作用 。EGLN用于催化缺氧诱导因子羟基化，不仅是氧的铁依赖性传感器，也是半胱氨酸的铁依赖性传感器。铁螯合剂可能通过抑制EGLN的活性来提高缺氧诱导因子的稳定性。在HT-1080纤维肉瘤细胞中，缺氧诱导的HIF1α表达通过增加脂肪酸结合蛋白3和7的表达来抑制铁死亡，从而促进脂肪酸摄取并增加脂质储存能力以避免随后的脂质过氧化。相反，在肾细胞癌衍生的细胞中，EPAS1的激活通过上调HILPDA的表达而促进铁死亡，从而增加PUFA的产生和随后的脂质过氧化。相比之下，在肾细胞癌衍生的细胞中，活化的EPAS1通过上调HILPDA的表达促进铁死亡，从而增加PUFA产生和随后的脂质过氧化。因此，有效控制缺氧诱导因子介导的信号是维持脂质稳态以调控铁死亡反应所必需的。如果将肿瘤细胞中铁死亡调控蛋白基因的表达作为纳入/排除标准，临床试验中缺氧诱导因子抑制剂的使用可能会得到改善。 上皮-间充质转化(EMT)是上皮细胞失去与上皮表型相关的极性和细胞间粘附特性，并逐渐获得与间充质表型相关的迁移和侵袭能力的过程。在临床实践中，EMT被认为会产生癌症干细胞，导致转移性扩散并导致治疗耐药性。EMT介导的肿瘤转移和耐药性是由转录因子刺激的，如SNAI1、TWIST1和ZB1，它们都是肿瘤学中潜在的治疗靶点。除了限制大多数抗癌治疗的效果，EMT信号还可以促进铁死亡(图3)。人类癌细胞系和器官样细胞中的高度间充质样细胞状态与对铁死亡易感性相关。ZB1的高基线转录水平与细胞对铁死亡敏感性相关，部分归因于ZB1诱导的PPARγ的上调，PPARγ是肝脏脂质代谢的主要调节因子。EMT的积极调节因子蛋白LYRIC(也称为间粘附素)通过抑制GPX4和SLC3A2的表达来促进铁死亡。CD44依赖性铁内吞作用的增加促进了铁依赖性去甲基化酶的活性，从而促进了与EMT信号传导相关的基因的表达，从而使乳腺癌细胞对铁死亡敏感。来自这些临床前研究的数据表明， EMT可能赋予铁死亡治疗的敏感性 。 EMT的第一步涉及上皮细胞之间接触的中断。钙粘蛋白1介导的细胞-细胞接触据报道可防止铁死亡。相反，SNAI1、TWIST1或ZB1表达增加可恢复铁死亡敏感性。其他细胞粘附促进剂，如整合素亚单位α6和β4，也能保护体外乳腺癌衍生细胞不发生铁死亡。相比之下，参与HIPPO途径的转录因子(如YAP1和WWTR1(也称为TAZ，通常在发育过程中控制细胞数量和器官大小)的激活通过调节铁死亡调节剂(如ACSL4、TFRC、EMP1和ANGGPTL4)的表达促进癌细胞的铁死亡。总的来说，这些发现强调了理论上的使用铁死亡诱导药物特异性消除具有间充质样表型的癌细胞的可能性。未完待续………………
肾细胞癌多因肾气不足，水湿不化，湿毒内生，或外受湿热邪毒，入里蕃毒，内外合肥市邪结于水道所致。肾虚不能摄血而为血尿，腰为肾之府，肾虚则腰背痛，湿热结毒，日久气滞血瘀形成肿块。现代医学对肾癌和肾盂癌的病因亦不明了，认为可能与致癌物质长期刺激作用有关，如吸烟者肾癌发病率较高，长期服用止痛解热的非那西汀类药物者常发生贤盂肾炎，肾盂癌与发病率亦有所增加。长期的肾结石及感染可诱发上皮化生及不典型增生，后二者可发展为癌。肾脏肿瘤的病因至今未明，近年认为芳香胺、芳香族碳氢化合物、黄曲霉毒素、亚硝基化合物、烷基化合物、联胺、铅、镉等及某些药物如抗癌药、非那西汀、安非他明、利尿剂和溴酸钾等咖啡、食物的添加剂有致癌作用。多数学者认为，肾细胞癌起源于近曲小管，在用烟管直接吸入烟草或雪茄的人群，肾癌的发病率明显增加。一项研究表明，吸烟者肾癌的发病率较不吸烟者高倍，吸烟量和危险性之间有直接和显著的关系，轻度吸烟发病的相对危险性为，中度为，重度为。吸烟的程度，烟龄的长短都与肾癌的发生率呈正相关，吸烟者即使戒掉吸烟也比从不吸烟者患肾癌的危险性高2倍。烟草中的二甲基亚硝基胺诱发肾癌已经动物实验证实，Vecchia认为吸烟加上酗酒，职业接触等危险因素可进一步增加发生肾癌的危险性。吸烟者尿中有β-萘胺和乙氨基-7萘酚，这些物质已证实可致膀胱癌，同样可能导致肾癌。吕克疱疹病毒(Luck’)、鼠乳肿瘤病毒可致动物肾肿瘤，对人肾的致癌作用尚未证实。肾癌多发生于男性，特别是男性激素衰落的高龄男性易患此病，表明性激素与肾癌的发生有关，确切机理还不清楚。超体重女性肾细胞癌的发生率高，而超体重男性则不然。何种营养物质促使肾癌的发生目前尚不能得知。某些遗传性疾病如结节性硬化症、多发性神经纤维瘤等可合并肾细胞癌。肾结石由于长期局部炎症刺激可合并肾盂癌。长期血液透析病人由于体内蓄积聚胺等血透不能清除的致囊肿和致癌变物质，诱发获得性肾囊性病和癌变。总之，在肾细胞癌的发生中，可能与许多化学的和生物的因素有关。吸烟及(或)肥胖、其他因素包括磷酸铝，二甲基亚硝胺、长期的雌激素摄入、黄曲霉素B1和链脲佐菌素以及某些特殊疾病如Von～Hippel-Lindau病，均可引起肾细胞癌。一些慢性肾衰或因透析治疗发生获得性肾囊肿的患者也可发生肾细胞癌。约30%至50%长期透析患者可发生获得性肾囊肿，其中6%可发生伴有获得性囊性疾病的肾癌。
肾实质癌是一种来源于肾小管上皮细胞的腺癌，85种透明细胞癌，以及一些颗粒细胞癌和混合细胞癌。癌症中经常有出血、坏死、囊性变和钙化。出生于肾实质，当它在肾包膜外生长发育时，会渗透、压迫和破坏肾盂和肾盏，形成血管瘤血栓或转移到淋巴结和其他器官。
在国内外核心期刊上发表学术论文情况论文题目 刊物名称 刊物国家 收录情况 卷期 排名膀胱癌细胞中心体异常与肿瘤预后关系的实验研究 中国现代医学杂志 国外 2008 18（22）：3290 2 雄激素受体、凝血酶敏感蛋白-1与前列腺良、恶性疾病血管生成的关系 重庆医科大学学报 国外 2009 34（5）64 2 老年膀胱癌细胞中心体异常与P53蛋白表达的关系及意义 中国老年学杂志 国外 2009 29（10）：1229 2 膀胱移行细胞癌细胞中心体异常与P53基因突变关系的实验研究 重庆医科大学学报 国外 2009 34(7) ：870 2 12例腹腔镜全膀胱切除治疗膀胱癌的临床体会 重庆医学 国外 2009 38（17）： 2148 1 经后腹腔镜肾蒂淋巴管结扎术治疗乳糜尿的临床体会 重庆医科大学学报 国外 2009 34（9）：1213 1 应用RNAi技术沉默survivin基因对肾癌786-O细胞的影响 第三军医大学学报 国外 2009 31（24）：2444 2 野生型P53基因调控膀胱移行细胞癌中心体异常的实验研究 中国医科大学学报 国外 2010 39（2）：128 1 Survivin在肾透明细胞癌786-O细胞株中表达的实验研究 重庆医科大学学报 国外 2010 35（1）：40 2 后腹腔镜加下腹小切口术治疗上尿路肿瘤 现代泌尿生殖肿瘤杂志 国外 2010 2（4）：205 1 多发性内分泌腺瘤病2A型二例并文献复习 中国全科医学 国外 2010 13（8B）：2634 2 P53、VEGF、TSP-1在良性前列腺增生症及前列腺癌患者前列腺组织中的表达及意义 中国老年学杂志 国外 2010 30（8）：2110 2 Surviving-肾脏RNAi治疗的新靶点 现代肿瘤学杂志 国外 2010 18（6）：1233 2
肺小细胞癌的治疗:化疗+Vm26，化疗时必须配合中药双灵固本散，保护白细胞，减轻毒副反应．
小细胞肺癌并不是不治之症，只是因为它的转移速度是比较快，往往发现的时候就已经开始转移了，所以没有手术治疗的价值，但是相对来说如果发现的早，手术治疗之后也可以恢复的。
小细胞肺癌不是不治之症，尽管和其他类型肺癌性比，它的存活率要低一些，但是只要发现的早的话，并且积极配合治疗的话，生存的机会还是比较大的，因为它容易全身转移，所以小细胞肺癌一般不适合手术。
一、 氩氦刀靶向治疗系统介绍（一） 背景与发展1993年，美国人应用数十项太空专利技术发明了氩氦冷冻治疗系统，即通常所说的氩氦刀。1998年，经过5年的临床试验，FDA批准氩氦刀进入临床应用，同时美国氩氦刀也获得了欧盟的CE认证，开始用于实体肿瘤的靶向治疗。1999年，中国广州第一军医大学附属珠江医院的张积仁教授引进了亚洲第一台氩氦刀，建立了亚洲第一个氩氦刀培训和示范中心，为氩氦刀技术在中国的推广奠定的基础。2000年，日本人（日本东京大学）从中国学习氩氦刀肿瘤治疗技术并开始临床应用，2年后，日本东京大学发表论文证实：美国氩氦刀靶向治疗肝癌有效率达97%以上。2000年，美国财政部将氩氦刀治疗前列腺癌纳入全民医保计划。2002年，美国泌尿外科联合会宣布：前列腺癌的治疗首选氩氦刀，氩氦刀治疗的有效率达到97%以上，从而在美国改写了前列腺癌的外科手术治疗历史。2003年，美国使用氩氦刀的医院达到300多家，欧洲达到160多家，而中国也已经有30家医院开始使用氩氦刀技术。2003年，中国的张积仁教授总结并主编了世界第一部氩氦刀技术规范性文献《氩氦靶向肿瘤治疗技术》。2003年，国际肿瘤靶向治疗大会认定：氩氦刀治疗是肺癌治疗的最佳方法之一。在美国已是肺癌专科治疗的常规设备。（二） 技术简介1、 氩氦刀的技术原理氩氦靶向治疗系统独特的高压氩气快速冷冻系统、实时电脑温控系统和高压氦气快速加热系统，强调微创、靶向和一次性彻底摧毁肿瘤，并最大限度的保存正常组织。其治疗和摧毁肿瘤的全过程更可由B超或CT实时监控，做到了肿瘤治疗的术中评价，并可确保治疗效果。氩氦刀治疗技术可使医务人员更精确定位和准确摧毁癌细胞而又不损伤病灶周围的正常组织。它为快速消除肿瘤提供了新的治疗技术，成为肿瘤治疗的又一新的、有效的发展方向。氩氦刀有4或8个能单独控制的热绝缘超冷刀。超冷刀中空，内有循环管道系统，可输出高压常温氩气(冷媒)或高压常温氦气(热媒)。温差电偶直接安装在刀尖，可连续监测刀尖的温度。氩气快速超低温致冷技术，可籍氩气在刀尖急速膨胀，在60秒内冷冻病变组织至零下140-190°C，冷冻15分钟后，又可籍氦气在刀尖急速膨胀，急速加热处于超低温状态的病变组织，使肿瘤组织从零下一百多度极速升温至零上30-50°C从而施行快速热疗。此种冷热逆转疗法，对病变组织的摧毁尤为彻底。其降温及升温的速度、时间和温度，摧毁区域的尺寸与形状，可由计算机控制和精确设定。更重要的是由于氩氦刀制冷或加热只局限在超冷刀尖端，刀杆不会对穿刺路径上的组织产生冷热伤害。氩氦刀是目前唯一可进行微创经皮穿刺冷冻治疗的仪器。氩氦刀配有直径细至2毫米的超冷刀，可大大降低患者损伤、减少出血、使患者迅速康复。2、 氩氦刀治疗肿瘤机理① 肿瘤细胞溶解坏死基于细胞组织的生理病理学特点，病变组织能够被低温摧毁，这个过程可分为三个阶段：温度过低-结冰-化冻。为了保证癌细胞的彻底摧毁，四个因素起着决定性的作用：最低温度，冷冻速度（速率），冷冻时间，冷冻次数。温度过低现象发生在摄氏零下10—15度左右，只有当冰晶开始在细胞质中形成时，才能造成细胞组织坏死。基于这个原理，结冰阶段的功效全靠结冰速度。在温度下降过程中，如果结冰速度慢，先在细胞组织间隙形成的冰会从细胞内部吸收水分。组织内部失水会妨碍内部结冰，从而在某种程度上保护了细胞免于坏死。因此，细胞内部结冰是该阶段的关键时刻。一旦发生，结晶就会通过细胞之间的桥梁延伸到所有的细胞组织，产生一种“多米诺骨牌效应”。在冷冻结束时，化冻就开始了，化冻也能对细胞组织造成伤害。在温度从-40℃逐渐回升到-20℃的过程中，冰晶会发生膨胀现象，使在冷冻过程中形成的冰球爆裂，这一过程也如同冷冻过程一样，具有高度摧毁性。——摘自意大利特斯提大学解剖病理学系商克纳提教授（《低温论坛》1997年9月）超低温摧毁癌细胞的理论分析：低温作用（高于零度的低温）：零度以上的低温也是有害的。这些现象包括： 膜的类脂质转换可能导致细胞内容物的渗漏 由于减弱了生物化学反应的作用，可能减低离子泵功能 细胞结构的损失可导致受冻细胞更大的脆性 这些损伤方式常可逆转，当然假设冷冻持续几小时，损伤将持续低温作用（零度或以下的低温）：细胞脱水：当温度低于 ℃，细胞间液体将毫无妨碍的冷冻，但细胞内的水仍不冷冻。这个阶段将引起细胞内外化学潜在的差异，这种潜在的结果导致了细胞脱水，由脱水所致的损伤包括： 蛋白质变性所致的细胞内液浓度增加引起细胞内分子的化学性损伤 由于脱水所致的细胞形状改变损伤细胞膜 来自细胞外冰结晶压迫所致的细胞膜损伤这些损伤很大程度上依赖温度，随着温度的降低，损伤将增强。更多的损伤机制与细胞骨架有关，细胞骨架结构依赖于存在于细胞膜蛋白和细胞构架之间的化学键。温度的降低削弱化学键的活力，而使细胞骨架特别容易受到机械损害。冷冻率影响：实验观察到细胞内结冰几乎总是诱导细胞死亡，尚不能确定细胞内结冰是如何形成的，当然有几种可能的解释。通过细胞膜的水是流动的，其动力过程是依赖于转运率。当冷冻迅速时，无足够的时间让水离开细胞以平衡细胞内外渗透压的差异。超冷冻水有突然聚集及冰冻趋势，聚集可以由细胞内蛋白或通过细胞膜的一些细胞外作用诱导。无论何种机制，细胞内的冰晶会突然形成，并破坏细胞。血小板的温度如果低于类脂相位的转变温度，可导致钙离子流入, 引发血小板的激活，导致冻结病变区的血小板聚集及血管阻塞。伴随细胞一系列冷冻的病理生理改变，如Ca2++超载，Ca2++-ATP酶活性下降，脂质过氧化反应增强，细胞间液张力过强，细胞内细胞器(线粒体、内质网)肿胀或消失。细胞核碎裂或溶解, 血管基底膜肿胀或断裂等表现。冷冻时间的作用：保持细胞冷冻状态一定时间有进一步增加损害的趋势，这可能由于完成了个别细胞的脱水过程及也可能导致一种被称为重结冰晶的现象。在重结冰晶的过程中，个别冰晶聚集形成更大的冰晶，最终压迫细胞 ，导致进一步损伤。当然在冰冻外科中，由于发生时间和原始记录不应被这种损伤修改，重结冰晶损伤不是总体损伤的明显部分。多次冷冻的作用：在冷冻外科中，多次融冻循环是常见的。第二次冷冻所致损伤的机制与第一次相同。暴露于脱水及重脱水循环的细胞以减慢冷冻，额外增加了在快速冷冻过程中的可能性，将明显增加冷冻手术的破坏作用。——摘自美国加州伯克利大学首席教授Boris Rubinsky教授报告细胞冷冻生物学的研究结果提示：组织细胞被低温损伤的过程可以分为三个阶段：温度过低-冰晶形成-解冻复温。解冻和回暖也会导致细胞的损伤的过程。在冷冻状态下，如果开始回暖，在较高的低冰点温度下，冰晶有再次冰晶化的趋向。再次冰晶化将导致细胞外空间的分解，并导致组织细胞的裂解。在消融过程中，随着冰的融化，细胞外的溶液可以部分或完全的成为高渗液，使水分进入细胞，使细胞膜进一步扩张或破裂。当消融的速度很快，某些细胞将在体温的条件下保持高渗, 因而导致代谢的破坏和进一步的附加损害。基于这一原理，美国Cryocare氩氦刀在氩气冷冻后，采用氦气快速复温融解, 进一步保证了消融靶区细胞坏死的治疗效果。② 靶向冷冻栓塞效应氩氦刀靶向治疗中，靶区的冷热交替，冻融循环，可引起微小血管内皮细胞的电解质和渗透压的改变，导致细胞脱水；蛋白质变性；脂质层融解；微小血管内膜损伤；细胞膜破裂。冰晶及微血栓在微静脉及微动脉内形成；小血管的冷凝栓塞效应，对于亚临床病灶有明显治疗作用. 部分临床医生在实施肝癌氩氦靶向治疗时发现，对供血主干的瘤体实施氩氦靶向治疗后，其边缘微小病灶也随之消失。病理研究成果证实，治疗后冰晶及微血栓在微静脉及微动脉内形成，小血管冷凝栓塞。③ 提高抗肿瘤免疫能力——超低温靶向治疗调控细胞因子和抗体的分泌氩氦靶向治疗肿瘤后，患者白介素-2，白介素-6，肿瘤坏死因子和特异性抗体的水平分泌增加，分泌水平与冷冻靶区大小和时间有关。——超低温靶向治疗调控肿瘤抗原影响肿瘤的免疫逃避氩氦靶向治疗肿瘤时，肿瘤组织细胞反复冻融，细胞破裂，细胞膜融解，从而促使细胞内和处于遮蔽状态的抗原释放。肿瘤细胞的坏死，使得肿瘤正常分泌的抗原停止分泌，肿瘤免疫抑制状态解除。国内外许多研究成果均已证明：肿瘤患者血清肿瘤标志物如CEA，AFP，PSA的水平可以反映肿瘤的增殖活性和患者的免疫抑制状态。当患者接受氩氦靶向治疗后1-2周，血清肿瘤抗原水平显著下降，它不仅用于评价和监测氩氦靶向治疗的疗效，而且也可用于评估患者的免疫功能恢复情况。东方肝胆医院钱国军研究博士证实，中晚期肝癌治疗后AFP，CEA，CA19-9，CEA联合CA19-9血清水平明显降低。④ 增加综合治疗疗效氩氦靶向超低温冷冻和热融解过程对组织细胞的损伤与温度的变化和调控密切相关。超低温冷冻引起的细胞内外电解质和渗透压的改变导致细胞脱水，细胞膜损伤。细胞内外形成冰晶和微静脉及微动脉内血栓形成，细胞和小血管破坏破裂，导致相应的病理组织学变化。Endocare临床医学专家Suzy Chosy, Rukstalis, Peter Littrup等报告的动物实验结果证实，肝脏氩氦靶向超低温冷冻和热融解后，组织病理学呈现一个不可逆的充血、水肿、出血、变性、凝固性坏死过程。术后切除的大体标本，可以看见与冷冻冰球形状相符的凝固性坏死区,邻近氩氦刀探头的组织典型的表现是凝固性坏死。国内氩氦靶向治疗专业委员会的专家对治疗前后的肿瘤组织，进行了实验研究。光镜下检查可以看见损伤区细胞肿胀明显，透亮度增加，部分细胞空泡样变性, 细胞变圆皱缩，细胞间隙及血管周围间隙显著增宽,并可见灶性出血,部分区域液化，凝固。3、 氩氦刀治疗范围（美国食品及药品管理局FDA批准）氩氦刀适用学科：介入科、肿瘤科、放疗科、胸外科、肝胆外科、普外科、泌尿外科、神经外科、妇科、皮肤科、乳腺病科、呼吸内科、耳目一鼻喉科及直肠病科等。氩氦刀适用病症：——恶性实体肿瘤：肝癌、肺癌、脑肿瘤、乳腺癌、胰腺癌、甲状腺癌、前列腺癌、肾脏及肾上腺肿瘤、腹腔及盆腔肿瘤、骨肿瘤、软组织肿瘤、头颈部及皮肤肿瘤，转移性胃肠肿瘤等实体肿瘤——良性肿瘤及良性增生病变：前列腺增生、乳腺良性肿瘤、血管瘤、子宫肌瘤、囊肿、疣、痔疮、复发性癌前病变、口腔白斑病等4、 氩氦刀适应征肺癌 不能耐受手术切除的周围型肺癌 手术探查不能切除的原发性肺癌 累及叶支气管的中央型肺癌 部分靠近肺门区的中央型肺癌 较为局限的转移性肺癌肝癌 原发性巨块型肝癌直径10cm或肿瘤占肝体积50％以下者 原发性肝癌癌灶3个以下，转病灶应在5个以下 肝功能评价为Child A级或B级者 合并肝外局限性转移灶且可通过手术或联合冷冻切除者肾癌 双侧或多个小的肾肿瘤 肾实质内单个肿瘤小于3厘米 基础肾功能较差不能手术，肿瘤浸润范围小于1/3 部分肾切除术仍是有代偿肾功能单侧肾肿瘤的最佳治疗方法前列腺癌 一叶或二叶前列腺癌患者 年龄较大不能承受其他手术者 已行去势或减雄激素治疗或肿瘤手术后复发或残留者 曾经行放、化疗失败而无其他治疗选择者 对部分已有骨转移而全身状况良好，仍可选用局部冷冻手术治疗前列腺增生 具备有前列腺增生的临床表现 无尿道狭窄 无严重心肺疾病 无明显的细菌性前列腺炎 无明显肝肾功能异常 凝血机制正常脑肿瘤 脑胶质瘤：尤其是手术中无法分辨边界的肿瘤 脑膜瘤：（占脑瘤的10%）尤其位于脑深部及颅底血管区的脑膜瘤 其他脑肿瘤：海绵状血管瘤、巨大垂体瘤、脊索瘤等手术联合氩氦靶向治疗中晚期胰腺癌不能行常规手术切除、不能耐受手术切除的中晚期胰腺癌患者，病变较局限，尚未发生远处转移者。手术联合氩氦靶向治疗中晚期胆囊癌 Ⅴ期患者，肝脏有局限性孤立性浸润包块，或少量散在转移灶，未侵及肝实质大部 原发病灶切除后，肝脏内仍残留其他散在转移病灶无法切除者 Ⅲ期、Ⅳ期患者实行扩大胆囊切除术或肝脏楔形切除术后，肝脏创面遗有残留癌者 实行胆囊癌根治性手术后，出现肝脏局部复发、转移病灶者 高龄、严重并存病、主要脏器功能障碍、不能耐受创伤大的手术切除治疗经皮穿刺氩氦靶向治疗盆腔肿瘤 失去常规根治性手术治疗机会的中晚期患者 局限性盆腔转移癌，肿块位置低，与肠腔无浸润者 骶尾部原发性肿瘤或术后复发者术中直视下氩氦靶向治疗盆腔肿瘤——适应症 子宫、宫颈癌术后复发 直肠癌术后复发经皮穿刺冷冻有困难者 盆腔转移癌无法手术切除者 肿瘤虽已浸润直肠，改行人工肛门后残瘤仍可行冷冻灭活者术中直视下氩氦靶向治疗盆腔肿瘤——禁忌症 肿瘤浸润双侧输尿管及膀胱三角区者 肿瘤已广泛转移者 全身状况较差不能耐受手术者5、治疗优点① 病人损伤小—不开刀、不出血或少出血，经皮或经腔镜治疗，病人痛苦小；② 效果显著！—对于病灶大的肿瘤，氩氦冷冻手术可杀死80％的癌细胞，对于比较小的肿瘤病灶，癌细胞可达到100％地被消灭——具有良好的成功率；③ 操作容易，成功率高，并发症少；又因冷冻止血、止痛，病人易接受；④ 损害轻微，对正常器官组织细胞无毒性，可重复及反复做； ⑤ 手术时间短、创伤小，病人恢复快，对病人要求条件相对较低，一般病人都能耐受；⑥ 可单独施行，也可与放疗、化疗或手术疗法结合应用；⑦ 费用低廉，手术费用在万左右，一般一次治疗即可结束，观察3-5天即可出院，因而非治疗性开支少；易于病人接受；⑧ 氩氦冷冻所致的肿瘤免疫提高明显，冷冻治疗后相当于在体内产生了肿瘤疫苗；⑨ 适合于各期实体瘤病人，尤其可用于无法手术或其他治疗失败的病例。