1、2006年中国流感病毒抗原性及基因特性研究2、用螨原代培养细胞检测螨体内汉坦病毒和恙虫病东方体复合感染的研究3、环孢素A促进HepG2.2.15细胞中乙型肝炎病毒核心蛋白入核的研究4、一起病毒性脑炎病因的分子生物学鉴定5、北京地区儿童急性呼吸道感染与肠道病毒关系探讨6、SiRNA对丙型肝炎病毒5′非翻译区的干扰作用实验研究7、先天性巨结肠患者人类巨细胞病毒UL139基因多态性的研究8、慢性乙型肝炎或乙肝肝硬化重叠急性戊型肝炎临床特点分析9、单纯疱疹病毒糖蛋白D与IL-2基因共表达质粒的构建及其免疫学鉴定10、人博卡病毒母婴感染的临床前瞻性研究11、不同剂量乙型肝炎疫苗对慢性乙型肝炎患者特异性T淋巴细胞应答反应的影响12、自身免疫性肝炎CD4+CD25+high调节性T细胞的研究13、Nr-CWS对TC-1细胞致瘤作用的影响及抗女性下生殖道人乳头状瘤病毒感染的研究14、甲3型流感病毒M基因披甲RNA的研制15、湖南3县(市)狂犬病病毒分子生物学研究
PCR技术是一种体外酶促合成、扩增特定DNA片段的方法。下面是我整理的关于pcr技术论文，希望你能从中得到感悟!
技术的研究进展
摘要 PCR技术是一种体外酶促合成、扩增特定DNA片段的方法。因其高强的特异性和灵敏度以及检测速度快、准确性好等优点，已被广泛地应用于水产、微生物检测等许多领域。该文从PCR技术的原理及应用方面进行了综述，并对其发展做出了展望。
关键词 PCR技术;研究进展;应用
中图分类号 Q819 文献标识码 A 文章编号 1007-5739(2012)10-0047-02
PCR(polymerase chain reaction，PCR)即聚合酶链式反应，它是一种体外酶促合成，扩增特定DNA片段的方法。1985年，美国Karray等学者首创了PCR技术，并由美国Cetus公司开发研制[1]。随着科学技术的发展和突破，PCR技术已在多个领域得到广泛地应用，如微生物检测、兽医学、水产养殖等方面。由于该技术具有较强的灵敏度、准确度和特异性，又能快速进行检测，因而其应用领域也在不断延伸[2-3]。随着PCR技术的不断发展，在常规PCR技术的基础上又衍生出了许多技术，如多重PCR(mutiplex PCR)技术[4]、实时荧光定量PCR(real-time fluorescent quantitative PCR，FQ-PCR)技术[5]、单分子PCR技术[6]。
1 PCR技术原理
PCR技术是根据待扩增的已知DNA片段序列、人工合成与该DNA 2条链末端互补的2段寡核苷酸引物，在体外将待检DNA序列(模板)在酶促作用下进行扩增。PCR的整个技术过程经若干个循环组成，一个循环包括连续的3个步骤：第1步是高温条件下的DNA模板变性，即模板DNA在93~94 ℃的条件下变性解链;第2步是退火，即人工合成的2个寡核苷酸引物与模板DNA链3’端经降温至55 ℃退火;第3步是延伸，即在4种dNTP底物同时存在的情况下，借助TaqDNA聚合酶的作用，引物链将沿着5’-3’方向延伸与模板互补的新链[7]。经过这个循环后，合成了新链，可将其作为DNA模板继续反应，由此循环进行。循环进程中，扩增产物的量以指数级方式增加，一般单一拷贝的基因循环25~30次，DNA可扩增l00万~200万倍[1]。PCR反应的步骤很简单，但是具体的操作是复杂的，如退火温度的确定、延伸时间的长短以及循环数等。因此，不同的反应体系应该确定适当的反应条件，以避免假阴性或假阳性等情况的产生。
2 PCR技术的分类
在传统PCR技术的基础上，根据人们的需要以及各个领域的应用要求，又衍生出很多种类的PCR技术。新技术在各领域广泛应用并逐渐改进，为进一步的研究提供了基础。
2.1 实时荧光定量PCR技术
1996年，学者经过研究，在传统PCR技术的基础上，首创了实时荧光定量PCR技术，新技术已经应用至医学领域、分子生物学和其他基础研究领域。实时荧光定量PCR技术基于传统技术的优势，还具有实时性、准确性、无污染，实现了自动化操作和多重反应，是PCR技术研究史上从定性到定量的飞跃[8]。
荧光定量PCR技术最大的特点是能将荧光基团加入到PCR反应体系中，借助于荧光信号，累积实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析[9]。实时监测这一特点是常规PCR技术所不具有的，因为其对扩增反应不能进行随时的检测。常规PCR技术的扩增终产物需要在凝胶电泳等条件下才能进行，无法对起始模板进行准确的定量，而荧光定量PCR技术的反应进程可以根据荧光信号的变化做出准确的判断[10-11]。一个PCR循环反应结束之后，定量PCR仪可以收集1个荧光强度信号，荧光信号强度的变化可以反映产物量的变化情况，这样就可以得到1条荧光扩增曲线[12]。荧光信号在指数扩增阶段，PCR产物荧光信号的对数值与起始模板量之间存在线性对应关系，然后进行定量分析[13]。
2.2 多重PCR技术
多重PCR(mutiplex PCR)技术是PCR技术的一种，为同一管中加入多对特异性引物，与PCR管内的多个模板反应，在一个PCR管中同时检测多个目标DNA分子。多重PCR技术可以扩增一个物种的一个片段，也可以同时扩增多个物种的不同片段[14]。
在同一反应体系中，多重PCR技术进行多个位点的特异性扩增时，引物间的配对、引物间的竞争性扩增等会对扩增效果产生重要影响。一方面，如果能选择适宜的反应体系和反应条件，可极大地提高多重PCR的扩增效果[15]。主要包括退火温度、退火及延伸时间、PCR缓冲液成分、dNTP的用量、引物及模板的量等。另一方面，DNA的抽提质量也影响多重PCR扩增效率，如DNA抽提不干净或降解都将影响PCR扩增效果[16]。
2.3 单分子PCR技术(SM-PCR)
单分子PCR技术是在传统PCR技术的基础上发展的，基本循环过程相同，但在反应条件、模板数量、DNA 聚合酶选择、引物设计方面具有不同点。该技术是以少量或单个DNA分子为模板进行的PCR[17]。
单分子PCR技术反应中，DNA 模板浓度极低，这就要求模板有较高的质量。因为这是试验成败的决定性因素。在设计引物时，应该严格控制GC的含量和Tm值，同时尽量避免引物间存在可配对序列。在反应混合物模板数极低的情况下，若引物之间存在少量配对序列，扩增时极易形成二聚体，使反应无法进行，得不到所需要的产物[18]。由于单分子PCR技术反应的变性温度(96~98 ℃)大多比常规PCR技术(94 ℃)略高，因而对DNA 聚合酶热稳定性的要求也更加严格，需要有较好的热稳定性，以防止温度过高而使其失活。其变性时间(5~15 s)、退火时间及延伸时间也短于常规PCR技术[17]。
3 PCR技术的应用
3.1 PCR技术在水产上的应用
基因表达是检测某个基因在不同发育期或不同组织中的表达量变化，或受到某种试验处理过程中的影响而出现表达量变化的情况。有学者应用real-time PCR技术研究碳水化合物含量对翘嘴红鲴糖代谢酶G6Pase、GK以及PEPCK表达量的影响[19-21]，研究结果可为翘嘴红鲴饲料配方中的最合适糖含量提供理论依据。孙淑娜等[22]研究叶酸拮抗剂对斑马鱼心脏发育相关基因BMP2b及HAS2表达的影响，表明叶酸拮抗剂对早期胚胎的心脏发育影响较大，可导致斑马鱼心脏发育延迟及心脏形态异常，并下调斑马鱼心脏发育相关基因BMP2b及HAS2的表达，这可能是叶酸生物学活性受抑后导致心脏发育异常的机制之一。Sawyer et al[23]以斑马鱼的未受精卵、胚胎、仔鱼和成鱼为研究材料，采用实时荧光定量PCR技术，检测了P450aromA和P450aromB在不同组织的表达量，表明在各组织中均有2种基因的表达，但表达量显著不同，呈现组织特异性。
3.2 PCR技术在微生物检测上的应用
1990年，Bej et al[24]在利用多重PCR的方法检测了Leg-ionella类菌种和大肠类细菌，其结果是通过点对点方法固定的多聚dT尾捕捉探针和生物素标记的扩增DNA进行杂交来检测的。张志东等检测口蹄疫病毒(FMDV)持续性感染的带毒动物，表明实时荧光定量PCR技术具有快速检测、准确、客观等优势，较优于传统的检测方法[25-26]。Metzger-Boddien et al[27]对PCR-ELISA的方法进行了评价，结果显示，样品中沙门氏菌的检出率可以达到98%。
4 展望
传统PCR技术以及衍生出来的新型PCR技术自面世以来，已被广泛应用到生命科学的各个领域。随着技术方法的不断改进与完善，荧光定量PCR技术将会逐渐完善并广泛应用。多重PCR技术在食品病原微生物、非致病微生物及环境微生物检测中具有重要作用;未来的研究主要集中在去除食品抑制因子干扰、改进样品前处理技术等方面，其次是整合应用多重PCR与其他技术，必将在未来食品微生物检测中有非常好的应用前景。
5 参考文献
[1] 常世敏.PCR在食品微生物检测中的应用[J].邯郸农业高等专科学校学报，2004，21(4)：23-25.
[2] 唐永凯，俞菊华，徐跑，等.实时荧光定量PCR技术及其在水产上的应用[J].中国农学通报，2010(21)：422-426.
[3] 吴学贵.LPS刺激点带石斑鱼免疫相关基因的克隆与组织表达差异性分析[D].海口：海南大学，2011.
[4] 侯立华，黄新，朱水芳，等.双色荧光多重PCR技术及在禽流感病毒检测中的应用[J].生物技术通报，2010(1)：168-172.
[5] 查锡良.生物化学[M].7版.北京：人民卫生出版社，2009：483-485.
[6] 张杰道.生物化学实验技术PCR技术及应用[M].北京：科学出版社，2005：12-18.
[7] 谢海燕.黑线仓鼠LHR部分序列克隆及组织器官的表达差异[D].曲阜：曲阜师范大学，2011.
[8] KUBISTA M，ANDRADE J M，BENGTSSON M，et a1.The real-time pol-ymerase chain reaction[J].MoLecular Aspects of Medicine，2006，27(2-3)：95-125.
[9] AGINDOTAN B O，SHIEL P J，BERGER P H.Simultaneous detection of potato viruses，PLRV，PVA，PVX and PVY from dormant potato tubers by TaqMan real-timeRT-PCR[J].J Virol Methods，2007，142(1-2)：l-9.
[10] 李丽平.小麦慢锈品种叶片受条锈菌侵入后的木质素合成及调控研究[D].雅安：四川农业大学，2009.
[11] 薛霜，独军政，高闪电，等.实时荧光定量PCR技术研究进展及其在兽医学中的应用[J].中国农学通报，2010(7)：11-15.
[12] SCHUBERT J，FOMITCHEVA V，SZTANGRET-WISNIEWSKA J. Dif-ferentiation of Potato virus Y strains using improvedsets of diagnostic-PCR-primers [J].J Virol Methods，2007，140(1-2)：66-74.
[13] 袁继红.实时荧光定量PCR技术的实验研究[J].现代农业科技，2010(13)：20-22.
[14] 朱善元.生物检测技术PCR及其在兽医微生物检测中的应用[J].黑龙江畜牧兽医，1999(11)：21-22.
[15] 黄银花，胡晓湘，李宁，等.影响多重PCR扩增效果的因素[J].遗传，2003，25(1)：65-68.
[16] 陈诺，唐善虎，岑璐伽，等.多重PCR技术在食品微生物检测中的应用进展[J].生物技术，2010，37(10)：72-75.
[17] 刘连生.常规PCR技术与单分子PCR技术[J].医学信息，2010，23(11)：4379-4380.
[18] 顾超颖.汗孔角化病的临床分析，SSH1、ARPC3基因突变检测和表达谱分析[D].上海：复旦大学，2008.
[19] 唐永凯，俞菊华，刘波，等.翘嘴红鲌肝脏G6Pase催化亚基的克隆以及摄食和饲料中碳水化合物对其表达的影响[J].水产学报，2007，31(1)：45-53.
[20] 刘波，谢骏，苏永腾，等.高碳水化合物日粮对翘嘴红鲌生长、GK及GK mRNA表达的影响[J].水生生物学报，2008，32(1)：47-53.
[21] 俞菊华，戈贤平，唐永凯，等.碳水化合物、脂肪对翘嘴红鲌PEPCK基因表达的影响[J].水产学报，2007，31(3)：369-373.
[22] 孙淑娜，桂永浩，宋后燕，等.叶酸拮抗剂甲氨喋呤导致斑马鱼心脏发育异常及BMP2bHAS2表达下调[J].中国当代儿科杂志，2007，9(2)：159-163.
[23] SAWYER S J，GERSTNER K A，CALLARD G.Real-time PCR analysis of cytochrome P450 aromatase expression in zebrafish：gene specific tissue disyribution，sex differences，developmental programming，and estrogen regulation[J].General and comparative endocrinology，2006，147(2)：108-117.
[24] BEJ A K，MAHBUBANI M H，MILLER R，et a1.Multiplex PCR amplif-ication and immobilized capture probes for detection of bacterial patho-gens and indicators in water[J].Mol Cell Probes，1990，4(5)：353-365.
[25] ZHANG Z D，ALEXANDERSEN S.Detection of carrier cattle and sheep persistently infected with foot-and-mouth disease virus by a rapid real-time RT-PCR assay[J].Journal of Virological Methods，2003，111(2)：95-100.
[26] ZHANG Z D，BASHIRUDDIN J B.Quantitative analysis of foot-and-mouth disease virus RNA duration in tissues of experimentally infected pigs[J].TheVeterinary Journal，2009，180(1)：130-132.
[27] METZGER-BODDIEN C，BOSTEL A，KEHLE J.Salmonella sp.PCR-ELISA for analysis of food samples[J].J Food Prot，2004，67(8)：1585-1590.
点击下页还有更多>>>关于pcr技术论文
在日常学习、工作抑或是生活中，大家最不陌生的就是作文了吧，作文根据体裁的不同可以分为记叙文、说明文、应用文、议论文。相信许多人会觉得作文很难写吧，下面是我收集整理的初一作文7篇，仅供参考，欢迎大家阅读。
夏季中的一天，天气正好，爸爸带我去郊外散心。
映入眼帘的是一片荷花池，放眼望去，如碧玉般的翠绿的荷叶丛，或待放或盛开的荷花仿佛俊俏的少女亭亭玉立，在池中伫立含笑，愈发显得清秀、脱俗、洁雅。再看那生它育它的脏黑的污泥地，分明一个天上一个地下，世人所赞颂的”出尘脱俗、洁雅清白的君子“如今看来，一点也不为过。
此时，我却是想起了以前曾看过的一个故事：科学家无意中从地下挖出了几颗莲子，谁也不知道它们沉睡了多少年，所以大都以为它们不会重生了，便随手扔进了湖里。但是来年夏季，人们惊奇地发现，它们竟奇迹般地再次绽放，那身姿在蓝天碧水间，越发显得独立脱俗。
一颗小小的莲子，仍能保持如此顽强的生命力；一朵小小的荷花，竟能“出污泥而不染”。这究竟是怎样的一种力量啊！即使我们没有莲子的坚定，没有荷花的高雅，至少也该抱着一份信念，让它屹立在心中，成为不屈的品格，才能雨后天晴，体验那万里晴空的美丽；才能攀上高峰，享受傲视苍穹的感觉。
思及，心中不禁豁然开朗，看向远处，竟发觉前途一片明媚美好。是的，未来一片阳光，只待我们启程呢。准备好了吗？该走了，向着前方前进！
目前正是春季来临前夕，是冷热交替繁多之时，上呼吸道感染等极易发作。你总是喜欢悄悄地来到了我们身边，只要教室一安静下来，就听见你的呼喊“咳咳”“啊嚏”。先不说你带来的垃圾桶一大堆的纸巾，就单是同学们的密切关系也被你狠狠地拆开了。
你这个著名的“混世魔王”怎么能没有一个响当当的名片呢。你看，这就是你的简介。流行性感冒，是流感病毒引起的急性呼吸道传染病，病原体为甲、乙、丙三型流行性感冒病毒而乙型和丙型则以局部暴发和散发流行为特征。流感疫苗的接种还是控制流感的重要的手段，但由于流感病毒的抗原性变异较快，因而人类无法获得持久的免疫力，这也正是流感病毒至今仍然肆虐的主要原因。通过飞沫传播，临床上有急起高热、乏力、全身肌肉酸痛和轻度呼吸道症状，病程短，有自限性，中年人和伴有慢性呼吸道疾病或心脏病患者易并发肺炎。流感在流行病学上最显着特点为：突然爆发，迅速蔓延，波及面广，具有一定的季节性(我国北方流行一般均发生在冬季，而南方多发生在夏季和冬季)。瞧瞧，你可真是一个让人们全军覆灭的“杀手锏”呢！
你的习性呀，看真是模糊不定，每年以不同形式出现，人体无法对你产生免疫。而且人们一遇上流行性感冒，就会发热头疼、全身疼痛、流鼻涕，难受得不行。由于流感病毒的检测难以短期内提供有价值的线索，所以临床对于散发或轻型的流感病例，诊断上仍有一定的困难。值得一提的是：年老体弱或年幼多病的者始终是高危群体。据统计：流感每年的发病率为10%-30%，其流行方式也具有一定的季节性。我国始终是流感的高发区域，在过往的20世纪4次世界性的大流行有3次起源于我国。
我们可不希望你总是来看望，我们喜欢一个你的仇敌“健康”。健康的生活方式是指人们的生活水平的健康、生活习惯健康、生活态度的健康和目的。世界卫生组织称，由于不良生活方式导致的疾病即“生活方式病”，如高血压、心脑血管病、癌症等，已成为人类健康的头号杀手。这类疾病与吸烟、酗酒、高盐、高脂饮食、缺乏锻炼及长期精神状态不佳等不良生活方式有密切的关系。因此，要预防慢性疾病的发生，一定要建立科学、健康的生活方式，这主要就是不吸烟，不酗酒，注意合理营养，平衡膳食结构，经常参加锻炼，保持乐观的心境。医学专家指出，这种生活方式可使人的平均期望寿命至少增加10年。
世界著名科学家爱因斯坦也是一个爱健康的人，他惜时如金，但竟舍得每天抽出时间从事文体活动。
这里有他一段美谈：他去比利时访问时，国王和王后准备隆重地欢迎这位杰出的老科学家。火车站上张灯结彩，官员们身着礼服列队在车站迎接。火车到站后鼓乐齐鸣。可是，旅客都走光了，也不见爱因斯坦的影子。原来，他提着皮箱，拿着小提琴，从前一个小站下车，一路步行到王宫。王后问他为什么不乘火车到终点站，而偏偏徒步受累呢？他笑着答：“王后，请不要见怪。我生平喜欢步行，运动常给我带来无穷的乐趣。”
健康和运动是一个能预防流行性感冒的一个好方法。在体育课时，大家不要因为懒惰而放弃跑步，在阳光充足的地方更是我们好好运动远离感冒的好时间。在上洗手间时，要勤洗手，防止流感在手里转向身体的传染。
今天对我来说是个特殊的日子，因为今天我可以看到梦中的大海了。
早上4：30，我就起了床，吃过早饭，我和爷爷、奶奶来到市体育馆，登上了前往了日照的旅游双层大巴。窗外流动的美丽风景，让我兴奋不已，经过五个多小时的车程终于抵达了日照。
下午一点，我们到了码头，开始今天的第一个项目：乘坐快艇。这是我第一次乘快艇，我心里既激动又紧张，刚坐上快艇，我的双手就紧紧地抓着救生衣。船缓缓地离开了岸，两岸的人和建筑物都在渐渐往后退。快艇加速了，风在我耳边呼呼地响，海面上激起一朵朵雪白的浪花，我感到非常凉爽。当快艇转弯的时候，船身都要贴到水面了，真是太刺激了，我高兴地高声叫了起来。接下来，我们又乘坐了帆船，船在海面上下起伏，那种忽上忽下的感觉比坐海盗船还刺激。远眺大海，一眼望不到边，海天相接，浑然一体，让人不得不感叹大海的宽广。
下了码头，我们来到海战馆参观。海战馆坐落于日照万平口海滨风景区，展馆建筑为万平口景区的标志性建筑。一进大门，我便看到有一个巨大的池子，里面有五、六头海狮在游泳。你看这头，不时地探出小脑袋，好奇地看着大家；快看那头海狮，它还在水面上原地转圈呢！真是个可爱的小家伙。再往前走，是一个展厅，里面陈列了许多古代海战兵器、遗留物、战船模型、图片、史实资料、沙盘、雕塑、抗战时期的用品等。出了馆，上了楼，我们便来到了“莲花台”，因它外形像莲花而得名，“登上莲花台，好运自然来”，站在最高处，欣赏远处的海景，多么惬意呀！
走出海战馆，沿着一条小路行走，便来到了沙滩。我迫不及待地脱下鞋，赤脚走在柔软的`沙子上，非常舒服。一阵海浪奔向沙滩，我的脚立刻埋进了海水里，凉丝丝的，瞬间带走了暑意。沙滩上有许多形态名异，五颜六色的贝壳，看得我手直痒痒，我迅速跑向目标，拾起心仪的贝壳，开心极了。
时间过得真快，一天就这么结束了，虽然玩得比较累，但我心里却十分高兴，好期待明天，希望明天的旅行更加精彩。
又是一年五月，又是一季花开。那亭亭玉立的槐树，那不计优劣环境顽强生存的槐林，一片片，遍布山山岭岭。那小巧玲珑的花序，密密麻麻挂满枝头，盛开之处，如雪压枝，风吹来时，落瓣随舞，有如白蝶翩翩，诗情画意……数十年来，睹槐生情，思绪纷飞，缠缠绵绵，难舍难分。
与槐结情还是在上个世纪60年代初，正是黄毛丫头的我与全家人和全屯的乡亲们一起苦度饥荒岁月。那是被老人们称为“低标准”的“三年困难时期”，每天面临的不仅仅是吃不饱穿不暖的问题，而是没粮做，没饭吃，每天饥肠辘辘，生命面临死亡的危险。谁都害怕饿死，谁都不想失去生命，谁家都在想方设法寻找能咽下的食物。大人们又是找又是挖又是扒又是摘，谷糠、野菜、树皮、柏树叶，还有苞米扒下来的窝子和里面的“骨子”都被粉碎了当粮食吃。山村里的槐树特别多，大家摘光了榆树钱，不知是谁带头盯上了槐树花，家家户户就拿槐树花当救命粮。我和十几岁的姐姐每天都走上河堤爬上山坡摘槐树花，一包一包的送回家。辛苦操劳的母亲将槐花放到锅里用开水焯一下，捞出来用刀剁几下，就用槐花做汤喝，还将很少的面搅拌到槐花里起到粘合作用，给我们蒸菜团子吃，槐花做出的汤和菜团子，味道甜滋滋的，有馨香味。后来，一连数年，每到五月青黄不接时，大家都盼槐花早点盛开，以解燃眉之急。
近中年时，离家进城工作，喧嚣的闹市代替了山村的清新和宁静，槐花也从我的记忆中逐渐远去。伴随时代的发展，日子一天天好起来，生活质量大幅度提高，有时回老家，离老远就看见满山雪白的槐花，那馨香味使劲往鼻子里钻。生活越来越富裕了，再也没人吃槐花了，那山上的槐花竟成了一道鲜亮的风景。
十多年前，喜欢清静的我俩，将家从繁华地段搬到城市边角山坳的小区居住，那年五月下旬，窗前偶抬头南望，但见南山上出现一片雪一样洁白的景象，瞬间的恍惚过去后，不仅心花怒放，一阵激动和兴奋顿时涌上心头，“是槐花！”我心里默喊，立即放下手里的杂活，像风一样旋向楼前南山。槐花无言也解语，浓郁的馨香立即扑鼻而来，直入心脾。我围着槐林转来绕去，数十年前的情景席卷而来，不仅情如潮涌，思绪翻腾，回家后提笔落字，写下了散文《又见槐花飘香时》，记下了自己对槐花的一往情深。
此后，每年槐花盛开时，我都会登山赏槐，也摘几朵放进嘴里慢慢咀嚼，又咀嚼出了当年的味道……
人们都说味道也有记忆，我相信这是真的。许多年来，槐花那馨香的甜味牢牢地留在我的记忆里，那是悠悠岁月冲不走的味道。
常常想说，感谢槐花，救了我们生命；常常想说，感谢时代，让我们这些经历过苦难的人过上了天堂一样的生活。
不知从什么时候开始就好怕天黑，天色暗淡下来，自己的心也随之暗淡下来。好像天黑最能让人伤感，让人思念。
那种感觉就犹如海浪一般扑打过来，让我有些措手不及，而又惊慌失措了。
天一点点的黑了，思念一点点的多了，每天都是如此。而因思念产生的忧愁与牵挂，还有那负罪感也与日俱增。
人世间最悲惨的事情不是永不能相间，而是明明如此的近，却又感觉相隔着千上万水一样那种想伸手去抓，明明就在眼前，却怎么也抓不到的感觉，是最凄最惨最悲最痛的事情了。
每抬一次头，天就变黑一些，心也随之沉下来一些，思念犹如尘埃一般――不起眼，而时间久了，沉积多了，便越来越明显了，也就不那么容易擦干净了。
于是，思念便在心中，犹如黑夜里一道无明的痕，烙下了，也就挥只不去了。
轻轻吹开谷皮，品一盏甘甜的清茶；悄悄抖落一身的尘土地，为爱撑起一方晴空，采撷一片阳光。
茶水里的点点谷皮是妈妈额上的皱纹，是那一双似乎和她年龄不相符的粗糙之手。但正是那双在黑夜中引领着我走向黎明，正是那双手在人生的十字街头坚定了我徘徊的脚步，正是那双手让我懂得了搏击风雨的坚强。妈妈是平凡的，她没有娇艳的容颜，也没有华丽的衣饰，但她拥有一个世界上最崇高的称呼：母亲。
茶水里的点点谷皮是老师心中对我们执着的爱：是谁为我们备课到深夜竟摔倒在漆黑的走廊里，第二天仍踏上那讲台？是谁在我生病时无微不至的关怀，而把自己生病的孩子托付给邻居？是谁生病却坚持给我们授课，只为了能将我们送进理想的学府？
哦，是亲爱的老师啊！面对你无悔的付出，世界上任何华丽的语言都显得苍白无力，因为爱只能用心灵去表白啊。
茶水里点点谷皮是陌生人脸上的一丝微笑。不会忘记抗洪抢险中那一道道爱筑起的城墙，不会忘记“非典”肆虐时那一首首真情赞歌，更不会忘记是爱引领我们创造出一个又一个生命的奇迹。
他们是那样的无私，他们为我在成长的路筑起上凉亭，备好清茶。我要向他们学习，我要拼搏，为人生铺满花香，去回报那一路的风风雨雨兼程的陪伴。为爱采撷一片阳光，让生命在爱中流光溢彩。
那天，落雨了。我独自漫步在雨中，我喜欢雨中温湿的感觉，和那股清醇的香味。这是一种奇特的香味，有草的气息，有自然的美感，还有喧闹的人声在雨中渐渐隐去的安静，我喜欢独自享受，因为，我没有朋友。其实以前有一个，但是后来她却独自去了一个很安静的地方，传说，应该是冥界吧。而我们的友谊，第一次最最真诚的友谊，也就这样悄然逝去了。
我伸出手去接雨儿，很可惜，一颗硕大的雨滴从我的指尖滑落了。我抓不住，就好像我抓不住她一样。
“嗨，”是个女孩的声音。
谁呢？我悲哀地想。一回头，竟然是翩。她是个可爱的女生，活泼开朗，文采飞扬，像极了以前的那个她。但是翩有一双奇特的眼睛，好象能看穿别人似的，而她没有。对面的翩正朝我笑，然后淋着漫天飞舞的雨儿，轻柔地说：“我也喜欢雨，它很纯洁。”
“是，”我应声着。我忽然发现。我很喜欢与翩在一起，与她在一起，很轻松，也很高兴。没有一个人能使郁闷的我突然开朗。翩笑了，柔柔的，很舒服。接着翩走到我身旁，坐在栅栏上，给我讲了许许多多关于雨的故事。大部分时间我都静静地听，但是后来我也饶有兴趣地讲了起来。
我慢慢地发现，她有的，翩都有。而翩有的，她却没有。雨停了，当我准备走时，翩却伸出了手说道：“交个朋友吧，我知道你很郁闷，或许有一件事曾令你难忘，但人是不能一直往回走的，向前看吧，阳光很美好，一直都很美好。”
突然我明白了什么，也伸出了手对翩说：“你说得对，我们做个朋友吧。”
雨后青青的草地上，有两个好朋友手牵手走着，而天空中多了一丝灿烂的阳光。
在2019快临近春节的日子里，一种新型冠状病毒突如其来，大家因此只能宅在家中学习，休闲，上网课。本来一个热闹的春节显得那么单调，那么无聊。
在这样等待。等待春天赶快到来的日子里。我们能及时地及早地控制住病毒，那时候将会春暖花开，鸟语花香，春色满园，落红如雨，千树琼花，草长莺飞，兰馨蕙草，杨柳拂提，碧波涟漪。
终于经历了无数的期盼之后，我们盼来了这一天，疫情被我国的医学专家基本上控制住了，春天也悄然的到来，爷爷兴奋地打来电话说，乡下也解封了。爸爸在艳阳高照的一天，带我们去了老家春游。
午饭之后我便去寻找春天的足迹，我悠然自得地漫步着，我走着走着，就来到了油菜花田，油菜花的身上有种诱人的金黄色远远的望过去金灿灿的一片耀眼极了，也许那就是春天的颜色了吧，油菜花还散发着一种它本身就特有的那种气味，也许那就是春天的气味了吧，春天，你好，我在油菜花中发现了你，在小河边我也发现了你，小鱼儿欢快地游，在枝头，我也发现了你，小鸟叽叽喳喳地叫，仿佛在说：“春天到了，太好了。”妹妹们手拉着手，一边奔跑，一边唱着：“春天在哪里呀，春天在哪里，春天在那青翠的山林里。”走着走着就开始连蹦带跳，特别特别开心。现在春天真的来了，代表着抗疫的日子也快要结束了，春天十分美好，但是抗议的过程也十分不容易。
不出门，不聚餐出门必须要带上口罩，在家要经常开窗通风透气，勤洗手，将手上的病毒消除在下雪天不要用手去摸雪，因为它可能会带有空中的病毒，出门回来后要多用消毒水消一消毒。
现在疫情被控制住，解封不是放松，零新增并不是零风险，不能放松警惕，加油，我们一定会打赢这场战斗。
如果出现类似于感冒发烧的症状该怎么办？？甲型h1n1流感症状是什么？
1。首先，发烧应注意不能盲目的吃退烧药，确需使用退烧药时也应严格按体重，控制在安全剂量正确服用，退烧药吃多了对身体不利，应查清病灶所在，对症下药，从根本上根治病灶。
2。甲型H1N1流感的早期症状与普通人流感相似，包括发热、咳嗽、喉痛、身体疼痛、头痛、发冷和疲劳等，有些还会出现腹泻或呕吐、肌肉痛或疲倦、眼睛发红等症状或其中部分症状，如果不及时治疗，病情延续会继发肺炎和呼吸衰竭，甚至死亡。
3。注意：猪流感早期高烧体温并非全部都是马上高于39°，也有渐渐升高或反复发作的。
4。虽然秋季到来，季节交替的时候很多人都容易感冒，发烧等身体不适，但甲型H1N1流感的早期症状恰恰与普通人感冒相似，很难鉴别。由于现在是甲型H1N1猪流感流行时期，如果其症状与甲型H1N1流感症状中的部分早期症状相似，为了安全起见，就应该极早到医院发热门诊或感染性疾病科去检查一下，做一个甲型H1N1流感病毒检测。
5。注意：现在是甲型H1N1猪流感流行时期，去医院这种高传染源的地方一定要戴上口罩，口罩要选标准的防尘口罩，薄的普通口罩只能保证病不传染给别人，却无法保证去医院途中及就诊时被别人传染H1N1 。马虎不得！！！！！！
6。我建议如果有与甲型H1N1流感相似的症状出现，感觉身体不适，就应该马上到公立医院去检查一下.免得耽误病情！大医院有保障些，迟了会影响您的健康。
希望我的回答对您有所帮助。
怎么预防甲型H1N1流感？？？
国内目前还没有甲型H1N1流感预防药物研发生产出来，切勿轻信网络上非官方的H1N1流感药物宣传。
最好的预防“防范”措施就是接种疫苗，我建议您还是极早去接种h1n1流感疫苗。
1。各地的“疾病控制中心”（卫生防疫站）和医疗行政机关指定的公立医院都可以接种甲型H1N1流感疫苗！
2。接种疫苗的具体细节可以向当地的“疾病控制中心”（卫生防疫站）和医疗行政机关咨询。
3。“疾病控制中心”（卫生防疫站）和医疗行政机关的咨询电话可以向“114查号”台查询。
4。注意：现在是甲型H1N1猪流感流行时期，去医院这种高传染源的地方一定要戴上口罩，口罩要选标准的防尘口罩，薄的普通口罩只能保证病不传染给别人，却无法保证去医院途中及就接种h1n1流感疫苗时被别人传染H1N1 。马虎不得！！！！！！
希望我的回答对您有所帮助。
您的周围有人出现流感症状就应该注意：
1。勤开窗通风，保持室内空气清新，去药店购买消毒液（现在各地的医药商店都备有大量的用于预防甲型H1N1流感病毒的消毒液）对室内进行全面的消毒，尤其是房门的把手、衣柜门、茶几、沙发扶手等更应该严格消毒；餐具茶餐也应严格消毒并专人专用，提倡分餐制。
2。保持良好的生活习惯，做好个人卫生，勤晒衣服被褥，要勤洗手，生活用品勤洗刷，勤消毒。
3。当您接触过家庭其他（她）成员的公共物品后一定要先洗手，再去做其它事情，切忌在不洗手的情况下触摸自己的眼睛、鼻子和嘴巴等容易感染的部位。
4。多喝板蓝根等清热解毒系列冲剂茶能起到预防保健作用。
5。保持健康良好的心态，积极参加体育锻炼，增加抵抗力，提高自身的免疫功能。
希望我的回答对您有所帮助。
这类文章或从正面提出某种见解、主张，或是驳斥别人的观点。杂文、说法或日常生活中的思想感受等，都属于议论文的范畴。
议论文又叫说理文，它是一种剖析事物、论述事理、发表意见、提出主张的文体。作者通过摆事实、讲道理、辨是非等方法，来确定其观点正确或错误，树立或否定某种主张。议论文应该观点明确、论据充分、语言精炼、论证合理、有严密的逻辑性。
文体简介
议论文是以议论为主要表达方式，通过摆事实，讲道理，直接表达作者的观点和主张的常用文体。它不同于记叙文以形象生动的记叙来间接地表达作者的思想感情，也不同于说明文侧重介绍或解释事物的形状、性质、成因、功能等。总之，议论文是以理服人的文章，记叙文和说明文则是以事感人，以知授人的文章。
议论是作者对客观事物进行分析、评论、说服，以表明自己的见解、主张、态度的表达方式，通常由论点 、论据、论证三部分构成。议论文题目分为论题，论点，寓意型。论题型为作者观点但以简洁为主，所以中心论点一般不能直接抄论题，论点型，论点型一般没有观点倾向性，例如：君子之交淡如水。寓意型一般与论题论点并存且不能直接作为中心论点要还原本意。
叮叮叮”“叮叮叮”这单调的音乐对同学来说就像一首悦耳的歌声，课间的10分钟来了，大家都高高兴兴地玩了.在课间上有的玩游戏、有的打球、有的讲故事等等.有一位同学提起建议玩“老鹰捉小鸡”我们同意后就来了，我做“老鹰”，我看见一大群的“小鸡”藏在“鸡妈妈”身后，我一看“鸡妈妈”原来是我班的学习委员，虽然他是男的，男的做“鸡妈妈”是好，有能力.但是他是学习的料不擅长运动.他做“鸡妈妈”就会连累一群的“小鸡”，我们开始玩了，我采取事先想好的策划，我左跑跑，右跑跑，把“鸡妈妈”弄累了就进攻，我先朝一个方向跑，“鸡妈妈”也跟着我跑，我们跑的特别快，然后我来一个180度转身去捉“小鸡”，“鸡妈妈”没来的及反应，我一下只捉了许多.没有被捉住的“小鸡”责怪“鸡妈妈”没有守好，我们玩的很开心.“叮叮叮”“叮叮叮”上课了，大家都回到自己的教室了.感谢课间10分钟，是您给了我们快乐.如果有所帮助请给好评谢谢。
古时候有个渔夫，是出海打鱼的好手。可他却有一个不好的习惯，就是爱立誓言，即使誓言不切实际，一次次碰壁，也将错就错，死不回头。
这年春天，听说市面上墨鱼的价格最高，于是便立下誓言：这次出海只捕捞墨鱼。但此次渔汛遇到的全是螃蟹，他只能空手而归。上岸后，他才得知，现在市面上螃蟹价格最高。渔夫后悔不已，发誓下次出海一定只打螃蟹。
第二次出海，他把注意力全放到了螃蟹上，可这一次遇到的却全是墨鱼。他只好又空手而归。晚上，渔夫躺在床上，十分懊悔。于是，他又发誓：无论遇到螃蟹，还是墨鱼，他都捕捞。
可第三次出海，墨鱼、螃蟹，渔夫都没有遇到，他遇到的只是马鲛鱼。于是，渔夫再一次空手而归。渔夫没有赶上第四次出海，就在自己的誓言中饥寒交迫地离开了人世。
请以"目标与现实"为话题，结合自身经历或所见所闻写一篇文章。文体不限。记叙经历，讲述故事，发表议论等等，均可。题目自似，不少于800字。精彩构思
金牌之路 从人物事迹入手，说明实现目标需要当前的努力。
孔令辉终于拿到了奥运金牌，然而这条通往领奖台的路不是一帆风顺的：第一次参赛拿的是铜牌，第二次与好友对垒得的是银牌，这次才终于赢得金牌。这一路是伴着汗水-还有泪水走过的。但他终于将目标变成了现实，给世人特别是青少年树立了一个榜样。
目标与现实 从目标与现实的关系入手，写一篇议论文。
目标应建立在现实的基础上才有可能实现，如一家全国排名一百的企业，如果想提升到90名是有可能的，但如果想一下子排名第一则是不太现实的。制定目标后还必须有切实可行的计划、步骤，不然目标只是梦幻。如企业想提高排名，必须狠抓质量，扩大市场，提高员工素质等。只有这样，目标才能变为现实。
不断延伸的目标 采用片断拼接的形式，通过虚构的人物经历表现人的 追求是无止境的。
空飘起雨点。
仿佛一个个调皮的孩子，大的小的在空中斜斜地密织着，朦胧了视野，也朦胧了人心。清明节也是个朦胧的时节吧？扫墓、踏青，落泪或欣喜，其实我们缅怀失去的，又追求新的是否矛盾呢？冒着雨，坐上车出发去扫墓。
车窗也成了一片朦胧，透过它向外望去，一片绿的，一片红的，一片黄的，模糊的颜色上加了一层灰。看到形状却看不到轮廓，景物正如心情一样淡雅。
随着一点点事物地逝去，目的地也越来越近。堵车了，是的，这一天所有人都不由自主不约而同地奔向一个目标，一种思念.下车步行，道路是泥泞的，鞋子被迎面而来的雨滴弄得潮湿，望着远方的小土堆，土黄色的泥土，高低不平，有一个巨大的洼地，蓄积了一大潭清水，呈现着淡青色.人头攒动，各种雨伞像是花朵，是这个朦胧的梦中唯一的鲜艳.也有没打伞的人，顶着雨，潮湿得溶进了景物之中.走进墓园，一块块墓碑林立，大理石庄严肃穆，鸭子在清水中雨中成群地游动，拔动人们的心弦，是不是一种前奏？打着伞，鞠躬三次，心中却是一片空白，并不是对离去的人不想念，只是想更加坚强，老人落泪了，抽泣或默默地哭着，他们的追逐即将停止.我望着他们的皱纹，苍白的脸上红肿的双眼，苍老的背影，那些还没有刻完的墓碑，等待和自己相伴一生的人，死后再去长相厮守，也许恍惚之间明白了清明节的谛.清明一如既往不变的追寻.离去的人找到了最安静的归宿，缅怀他们就是回忆过去，寻找自己原来的方向与目标，也许是一种停歇整理心情后再决绝地走下去.那么还是为了更好的明天，还是为了追寻未来.在眼泪凝聚的那一瞬间忍住并停止伤痛，过去和怀念并不是为了沉溺，还是为了更美好的明天.让这场雨抚慰你并清洗你，因为明天还有更加漫长的路要走下去.我们的目标仍旧在心中从未丢失.清明，是休息而不是停止.总有一天要比现在更加努力地走下去。
看来你是一个很爱文学可者很爱学习的人吧，我很欣赏你的，我是一名老师，在我看来现在像你这样的学生越来越少了，所以有辛碰到你我很高兴，也非常愿意教你，希望你看过之后有真正的收获.虽然这篇文章不是我写的，但我看来的确是非常有用的，我经常拿来教我的学生.也希望你能好好的读一读.从中获取收获 如何提高写作水平 提高写作水平，需要对自己进行多方面的培养和锻炼.对每个人来说，提高的过程是不尽相同的.但是，从总体上来说，主要应该从以下几个方面入手. 提高写作水平的基本途径 1.开阔视野，多方面观察、感受生活 文章是现实生活的反映，要想写好作文，首先要注意观察和感受生活.古往今来，凡是写文章有所成就的人，都十分重视这一点.汉朝的司马迁说：读万卷书，行万里路.这“行万里路”，就是指要从多方面观察和感受生活.他本人也正是这样做的，从20多岁就开始漫游全国，考查史迹，采访史料，终于写出了著名的《史记》. 多方面观察和感受生活的意义在于：首先，可以从生活中获得丰富的写作材料.因为我们写作文，无论是写人、写事、还是描写景物，都是在写现实生活，都需要现实的生活情景、生活细节.而这些生活情景和生活细节，是不能凭空捏造出来的，只能通过多方面观察和感受生活才能获得.即使是合理想象的那部分，也是以现实生活为基础的.其次，可以使文章获得较深刻的思想意义.因为只有与现实生活有较多的接触，我们才能准确地把握事物的本质，才能有较深切的感情体验.准确地把握了事物的本质，有了较深切的感情体验，才能写出思维意义深刻的好文章. 多方面观察和感受生活，首先要尽量多参加社会活动，在生活中观察身边的各种人、事物和景物，把它们的面貌和特征装进大脑这个“仓库”.这样，等到我们动笔写文章的时候，这些装进“仓库”里的材料，就会自动出现在我们的思考过程之中.其次要留心身边的人和事，注意多听多看.因为不管是谁，活动范围总是有限的，不可能每一种活动都能参与.所以，我们就要多听多看，从别人的嘴里以及他们的活动里获得生活材料.这样做，有时甚至比亲身参与的获取量还要大.比如，我们在北京却可以听到广州的事；还有，我们作为旁观者的时候，却可以比当事人观察得更仔细，因为当事者迷，旁观者清等等.再次，我们在接触生活的时候，仅仅用眼睛和耳朵还是不够的.还要用大脑.要对面前的事物进行深入的思考，看看它到底有什么样的表现形式，特征是什么，说明什么问题.只有这样，我们才能发现生活中的道理，把握事物的本质，产生较为深刻厚重的思想感情. 2.广泛阅读文章 古人说过：读书破万卷，下笔犹有神.鲁迅也曾这样说：只看一人的著作，结果是不大好的，你就得不到多方面的优点；必须如蜜蜂一样，采过许多花，这才能酿出蜜来，倘若叮在一处，所得就非常有限、枯燥了. 这都是前人的经验之谈，是有很深刻道理的，很值得我们认真借鉴. 广泛阅读为什么如此重要呢？一方面，它可以弥补我们体验生活的不足，使我们间接地获得许多生活材料及对生活的感受；另一方面，可以使我们博采众长，多方面地学习别人的写作方法和技巧. 广泛阅读应该采取正确的方法.在这方面，前人有过不少好的经验.比如粗读和精读相结合，就是一个行之有效的方法. 粗读，就是拣各种范文进行阅读，读的时候不必做详细分析，对文章的思想意义和写作技巧有个大致的了解即可.这是从“广”的角度下功夫，使自己获得多方面的营养.但是，只“广”不“深”也是不行的.对那些好的文章，还需要精读.精读，不但要认真思考，看看人家主题是怎么表现的，结构是怎么安排的，语言是怎么运用的，读后还应该把这些记在本子上.俗话说，好记性不如烂笔头.只有把这些记下来，才能时常温习，不至忘掉.通过精读，可以获得好的写作方法和技巧，使我们向“深”的方向发展. 3.要多练笔 多练笔，可以加快从学习写作知识到会用写作知识的过程，可以说这是提高写作水平最关键的一环.清代唐彪曾这样说： “谚云‘读十篇不如做一篇’.盖常做则机关熟，题虽甚难，为之亦易；不常做，则理路生，题虽甚易，为之则难……” 大意是说，读十篇文章也不如做一篇文章收获大.常写，作文的方法、道理就熟练，即使题目很难，写起来也觉得容易；不常写，作文的方法、道理就生疏，即使题目很容易，写起来也会觉得很难. 所以，我们必须要重视“读十篇不如做一篇”的道理，经常进行认真的练习，这样才能逐渐摸索出作文的“思路”和“机关”. 练习应该带着明确的思想感情目的来进行.初学写作的同学，开始可先写一段表达思想感情的话，练习所有的话都围绕着中心来讲.接下来，看看表现中心的几部分安排得是否合理，学习掌握结构方面的知识.然后，再看这几部分哪些地方需要详写，哪些地方需要略写，学习写人、记事、描写景物方面的知识.最后，再考虑用词造句，并进行相应的练习.这样带着明确的思维感情目的来练习，比单纯孤立地学习叙述、描写、结构等，收效要大得多，有利于我们较快地掌握作文的“思路”和“机关”.有了一定写作知识的同学，在练习写作时.，也应该始终把思想感情放在第一。
题目 妈妈的爱 母爱难道只是给我们好吃的、好玩的爱吗？不，起码对我来说不是这样.母亲的爱是多种多样的，在一件事之前，我还没理解这句话的含义.那时在我很小的时候，在幼儿园不慎跌伤了，流了很多血，回家向妈妈哭诉，本以为妈妈会说：“哎哟，这是怎么回事啊！快来，妈妈给你看看，给你上药.”可是没想到，妈妈说出了几句令我至今难忘的话：“怎么了，哦，没事，就一点小伤，怕什么，擦点药就好了.”我听了之后很吃惊，又很伤心，妈妈肯定不喜欢我了，我当时就是这样想的.晚上睡觉的时候，我一个人偷偷地哭泣，突然听到妈妈的卧室传来说话的声音，我赶紧屏住呼吸，只听见爸爸说：“孩子受伤了，你也不安慰一下.”我心想，爸爸说的对！又听见妈妈说：“你知道什么，孩子马上就长大了她不能再依赖我们了，她有一天迟早会独自生活，到时候她受伤了，怎么办……”我突然间明白了，妈妈是爱我的，她这样做，是为了我好！我又哭了，不过这次的泪水不是委屈的，而是感谢的！因为妈妈的几句话，我在困难面前从未低过头：数学考试没考好，抓紧在家复习，争取下一次考个好成绩……我也知道了，人的一生注定要独立生活，不能依靠父母.所以，现在有一点小事，我都会自己解决，并把这件事解决到最好！妈妈的爱难道只是给我们好吃的、好玩的爱吗？不，起码对我来说不会是这样，妈妈的爱是多种多样的，是无私的，是伟大的。
