偏振光在药物检测中的应用论文

偏振光（ polarized light ），光学名词。光是一种电磁波，电磁波是横波。而振动方向和光波前进方向构成的平面叫做振动面，光的振动面只限于某一固定方向的，叫做平面偏振光或线偏振光。应用汽车车灯汽车夜间在公路上行驶与对面的车辆相遇时，为了避免双方车灯的眩目，司机都关闭大灯，只开小灯，放慢车速，以免发生车祸。如驾驶室的前窗玻璃和车灯的玻璃罩都装有偏振片，而且规定它们的偏振化方向都沿同一方向并与水平面成45度角，那么，司机从前窗只能看到自已的车灯发出的光，而看不到对面车灯的光，这样，汽车在夜间行驶时，既不要熄灯，也不要减速，可以保证安全行车。摄像机镜头自然光在玻璃、水面、木质桌面等表面反射时，反射光和折射光都是偏振光，而且入射角变化时，偏振的程度也有变化。在拍摄表面光滑的物体，如玻璃器皿、水面、陈列橱柜、油漆表面、塑料表面等，常常会出现耀斑或反光，这是由于反射光波的干扰而引起的。如果在拍摄时加用偏振镜，并适当地旋转偏振镜片，让它的透振方向与反射光的透振方向垂直，就可以减弱反射光而使水下或玻璃后的影像清晰。LCD液晶屏LCD技术是把液晶灌入两个列有细槽的平面之间。这两个平面上的槽互相垂直（相交成90度）。也就是说，若一个平面上的分子南北向排列，则另一平面上的分子东西向排列，而位于两个平面之间的分子被强迫进入一种90度扭转的状态。由于光线顺着分子的排列方向传播，所以光线经过液晶时也被扭转90度。但当液晶上加一个电压时，分子便会重新垂直排列，使光线能直射出去，而不发生任何扭转。LCD是依赖极化滤光器（片）和光线本身。自然光线是朝四面八方随机发散的。极化滤光器实际是一系列越来越细的平行线。这些线形成一张网，阻断不与这些线平行的所有光线。极化滤光器的线正好与第一个垂直，所以能完全阻断那些已经极化的光线。只有两个滤光器的线完全平行，或者光线本身已扭转到与第二个极化滤光器相匹配，光线才得以穿透。

荧光偏振法快速、准确、高通量检测IgG和含Fc段衍生物 Dr. Carolanne Doherty Valitacell, NIBRT, Fosters Avenue, Blackrock, Dublin, Ireland     BMG多功能酶标仪可应用于定量IgG的新技术Valita™TITER     采用荧光偏振法直接在细胞培养上清液中检测IgG     酶标仪预设检测程序和数据分析模板提高研究速度 简介 准确、快速和高通量检测IgG对于大多数治疗性抗体的开发和生产来说是必不可少的。单克隆抗体正在生物药物领域大显身手，大量的样本正等待着进行筛选以进一步得到开发。这里我们介绍一种在细胞培养上清中直接定量IgG的全新的筛选技术：Valita™TITER。 现有的技术，包括蛋白A高效液相色谱（HPLC protein A）、ELISA技术、 蛋白A表面干涉法以及HTRF（均相时间分辨荧光）都具有明显的缺点，包括价格昂贵、耗力以及耗时。 Valita™TITER方法是一种全新的非常精确、低成本的检测IgG的方案，检测范围在2.5-80mg/L。Valita™TITER采用荧光偏振技术检测IgG的Fc段与蛋白G的结合（图1）。分析在96孔板中进行，操作简单、高通量、快速且可自动化完成。分析可以在很少量的细胞培养基中进行且没有繁琐的准备过程。 在这个应用指引中，我们介绍了在PHERAstar®，POLARstar® Omega以及CLARIOstar®多功能酶标仪上使用Valita™TITER试剂盒定量检测IgG的方案。荧光偏振可以有效地分析分子大小的改变。“不动”的荧光基团在偏振光的激发下会发出与激发光相同偏振方向的荧光。然而，转动的荧光基团的荧光偏振方向与激发光偏振方向相比会有一定的改变。在溶液中小分子比大分子转动更快，因此，连接有荧光基团的分子大小的改变，可以通过荧光去偏振程度的大小来进行测定。所以，当标记有荧光的蛋白G在没有结合其它分子时，其转动快，去偏振更多，而结合了IgG则相反（大5倍）（图2）。这种偏振的改变应用于检测溶液中的IgG。荧光偏振（FP）通过用平行偏振方向的激发光照射溶液并在平行方向和垂直方向上测定发射荧光。FP就是这两个偏振荧光的归一化后的差别，通常用mP表示。 材料和方法 Valita™TITER分析试剂盒 Valita™TITER APP软件（试剂盒里提供） IgG标准品（从人血清中获得IgG） PHERAstar, POLARstar Omega和CLARIOstar多功能酶标仪 (BMG LABTECH) 实验过程 样品的准备遵照试剂盒说明书的相应要求。标准曲线的绘制采用每个相对荧光值对应一个IgG标准品的方法。在Valta™TITER微孔板的每个孔中加入60µl重建缓冲液以及60µl标准品或样品。混匀后避光孵育30分钟。然后在POLARstar Omega、PHERAstar或CLARIOstar多功能酶标仪（BMG LABTECH公司）中，采用预置的检测程序进行读数（参数的设定详见下表）。在MARS分析软件中将获得的Raw Data转化成.csv格式文件，再用Valita™APP软件进行分析。 仪器设定结果与讨论 图3的标准曲线（2.5-80mg/L）是在BMG LABTECH公司具有荧光偏振检测功能的多功能酶标仪（POLARstar Omega、CLARIOstar和PHERAstar）上用Valita™TITER试剂盒绘制的。所有酶标仪所获得的结果都具备很高的稳定性。最后，我们用不同条件培养的样品，用Valita™TITER定量IgG的结果与用常规方法HPLC的结果进行对比。图4显示两种方法测定结果的相关性，显示两种定量方法都有很好的准确性，而Valita™TITER分析速度更快因其不需要繁琐的样本准备过程。结论 在研发和生产此类生物药物中对混合样本进行快速IgG浓度测定非常重要。这里我们介绍了一种基于荧光偏振法的快速、简单的进行高通量IgG和Fc段衍生物测定全新技术——Valita™TITER分析法。Valita™TITER分析法可以直接对待测样本中的IgG进行定量测定而无需繁琐的样本准备或纯化过程。CLARIOstar， PHERAstar和POLARstar Omega应用于Valita™TITER分析时现实出卓越的性能。与其它IgG的定量方便相比，Valita™TITER具有高通量、简单、准确、快速的特点。 推荐阅读 >> BMG酶标仪，世界第一台实现自动离体的缺氧、缺血再灌注 >> Cell Reports：缺氧，让T细胞抗癌功能更强大 >> MetaCell-TM在海德堡EMBL研讨会上隆重介绍细胞代谢金标准检测平台 >> 经久耐用， BMG酶标仪经得起数十年的考验 >> 德国BMG多功能酶标仪客户评价 >> BMG在线公开课视频：细胞代谢之胞内氧浓度实时检测 >> 细胞能量代谢三“简”主义：细胞内氧含量实时监测解决方案 >> 英国Sygnature Discovery采用德国BMG PHERAstar FSX进行高端药物研发 >> Nature Methods亮点推荐细胞代谢胞内氧检测技术 >> BMG PHERAstar FSX 高通量超灵敏HTS多功能酶标仪入选Selectscience杂志 2016最佳药物研发产品十强 想了解更多BMG多功能酶标仪的应用，在伯齐官方公众号（微信号：Bio-Gene）输入BMG酶标仪相关的关键词（不用输入序号）：1、细胞代谢；2、钙流；3、朊病毒；4、HTS； 5、FRET和BRET；6、BMG；7、BMG操作; 8、蛋白聚集 香港伯齐科技有限公司 Bio-Gene Technology Ltd. 广州伯齐生物科技有限公司 香港 北京 上海 广州 成都 武汉 济南

物理课本上都有概念的吧,偏振光就是震动方向一致的光,偏振面就是和光的震动方向垂直的面