食品中亚硝酸盐的测定是。紫外-可见分光光度法检测原理,是根据物质分子对波长为200-780nm这一范围的电磁波的吸收特性所建立起来的一种定性、定量和结构分析方法。操作简单、准确度高、重现性好。
波长长频率小的光线能量小,波长短频率大的光线能量大。分光光度测量是关于物质分子对不同波长和特定波长处的辐射吸收程度的测量。
亚硝酸盐采用盐酸萘乙二胺法测定,试样经沉淀蛋白质、除去脂肪后,在弱酸条件下亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后,再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫红色染料,外标法测得亚硝酸盐含量。
采用分光光度法测定亚硝酸盐的操作注意事项
1、样品必须粉碎均匀,以便充分提取。
2、硝酸盐含量高的产品必须在样品入库后尽快完成检测,例如:蔬菜类应在样品入库后第一时间完成检测,不容拖延;因为样品的硝酸盐经长期放置后会经硝酸盐还原细菌的作用转化成亚硝酸盐。
3、显色时,必须按顺序添加对氨基苯磺酸和盐酸萘乙二胺,不得颠倒顺序。
4、认真判定样品的滤液是否澄清、透明、无干扰色;若有干扰色必须进行样品空白扣除实验。
5、比色管和容量瓶等这些玻璃器材应该用稀盐酸浸泡24小时,然后用蒸馏水冲洗干净,然后倒扣在比色管架子上,控水,让比色管自然晾干。
6、用在紫外分光光度计上的比色皿应该处理干净,处理的方法是浸泡在重铬酸钾溶液中,也可以浸泡在乙醇盐酸溶液中,这样处理比色皿就比较干净了。
7、紫外分光光度计应该做好暗电流矫正,应该提前预热半个小时才能使用,预热的目的是让机器更稳定,数据更加的准确。
8、在配制磺胺等各种溶液的时候,应该使用不含有亚硝酸盐的蒸馏水,这样能保证实验的准确,能保证实验更容易成功。