灵芝,又名瑞草,芝草,是我国传统的药食两用的珍贵保健药。祖国医学对灵芝的药效研究源远流长,自古以来被认为有起死回生的功效,是名贵药材中的极品,远在周朝《列子》一书中就有“朽壤之上,有南芝者”。东汉时期的《神农本草经》中载有:“益心气”、“安精魂”、“补肝益气”、“坚筋骨”、“好颜色”等功能。明代李时珍的,《本草纲目》对灵芝做如下描述:“苦、平、无毒。主治心中结,益心气。补中、增智慧、不忘。久食轻身不老。灵芝是担子菌纲,多孔菌科,灵芝属真菌。一般供药用的主要是赤芝(Ganoderma lucidum)和紫芝(Ganoderma japonim)。研究表明,灵芝的组成成分复杂,具有多种有效成分和广泛的生物学作用,能治疗多种疾病。本文就灵芝的有效成分和生物活性特别是灵芝多糖的生物活性及提取方法作一综述。1.1灵芝的有效成分和生物活性 研究证明,灵芝含有多糖、氨基酸、蛋白质、多肽、甾类、有机酸、挥发油、油脂、生物碱、长链烷烃以及我种酶和无机离子。经研究不同品种灵芝,同一品种的不同生长阶段,野生与人工培养灵芝,所含的化学成分不同。1.1.1灵芝多糖 灵芝多糖(GLP)是灵芝的主要活性成分,其种类很多,主要有葡聚糖、杂聚糖、半乳糖、甘露糖、甘露岩藻半乳聚糖、阿拉伯糖、阿拉伯木质葡聚糖等。灵芝中多糖的含量因灵芝品种、提取方法与多糖的纯度等不同而有较大差异。灵芝多糖目前已分离到的有200多种,其中大部分为B-型的葡聚糖,少数为A-型的葡聚糖,多糖链由三股单糖链构成,是一种螺旋状立体构形物,其立体构形和DNA、RNA相似,螺旋层之间主要以氢键固定定位,分子量从数百到数十万,除一小部分小分子多糖外,大多不溶于高浓度的酒精中,在热水中溶解,大多存在于灵芝细胞壁内壁。液体培养的发酵液和固体培养基中有灵芝菌丝分泌的胞外多糖。胞内多糖胞外多糖都是有效多糖。灵芝多糖大多为异多糖,即除含有葡萄糖外,大多还含有少量阿拉伯糖、木糖、岩藻糖、鼠李糖、半乳糖、甘露糖等其它单糖。单糖间糖苷键连接有(1à3),(1à4),(1à6)数种。多数有分枝,部分多糖含有肽链,多糖分枝密度高或含有采访链的其药理活性一般也比较高。灵芝多糖结构中含有较多的糖苷键可能是使其具有强烈药理活性的原因。灵芝多糖是灵芝中最有效的成分之一,因此,也特别受到医学科技工作者的重视,研究报导也最多,现知灵芝多糖有广泛的药理活性,能提高机体免疫力,能提高机体耐缺氧能力,消除自由基,抑制肿瘤,抗放射,提高肝脏、骨髓、血液合成DNA、RNA、蛋白质能力,延长寿命等。灵芝的多种药理活性大多和灵芝多糖有关。1.1.2灵芝酸 灵芝酸(Ganodenic acid)是灵芝的另一主要活性成分。灵芝酸是一种三萜类物质,基本构造为数个异戊烯首尾相连构成,大部分为30个碳原子、部分为27个碳原子。灵芝酸有四环三萜和五环三萜二类。各种灵芝中已分离到的灵芝酸已达100多种。灵芝酸是灵芝的苦味成分的主要来源,可以作为鉴定灵芝品种的依据之一。灵芝酸在不同种的娄芝中或同一品种培养基培养的及不同生长阶段的子实体中,其含量是不同的,所以其苦味程度也有所不同,一般味苦的娄芝其灵芝酸含量往往较高。日本对灵芝商品及灵芝制成品的灵芝酸含量十分重视,认为灵芝酸含量高,灵芝产品质量就好。灵芝酸有强烈的药理活性,有止痛、镇静、抑制组织胺释放、解毒、保肝、毒杀肿瘤细胞等功能,是灵芝的主要有效成分之一。灵芝酸能抑制大鼠巨细胞释入组织胺,抑制血管紧张肽转化酶的活性,降低血压,灵芝酸还能抑制大鼠肝细胞从24,25-二氢羊毛甾醇合成胆固醇,可以用来防治动脉粥样硬化和心脏病。Jorgel等从赤芝提取的几种灵芝酸具有细胞毒性,能杀伤体外培养的肝癌细胞。1.1.3各种元素 灵芝中含有多种元素。不同品种灵芝中元素的种类和含量略有差异,人工培养的灵芝与野生灵活子中的元素种类和含量也不一致。等离子体发射光谱分析(IPC)结果表明:灵芝浸膏中含有25种元素,其中Ca,Mg,P,Fe,Zn,Cu,Ni,Co,Cr,Mo,Li,B,V,Sn,Ge,Sr,Ti,Se等19种为人体必需或有益的常量或微量元素,原子吸收光谱分析(AAS)结果表明:灵芝浸膏粉中含有丰富的钙(2330ppm)、镁(2440ppm)、磷(45000ppm)、及铁(390ppm)、锰(156ppm)、锌(55.3ppm)、锗(25.0ppm)等,这些元素为人体正常生长发育所必需或在人体内起重要的保健作用。已知,Fe,Ca,Zn,Mn等有养血益肝、补肾之功效;Zn,Cu,Mn,Li等微量元素与活血化淤、益气安神等功效有关;微量元素Ti对预防心血管系统疾病起重要作用;此外,Ge,Se,Mn,Cu,Mo,Cr,Ni,等微量元素与人本抗衰老、抗癌等密切相关。在灵芝的菌丝体和发酵液中,磷的含量相当丰富,磷具有镇静安神的作用,灵芝对神经衰弱和顽固失眠的疗效与磷的作用有着密切关系。文献报道,担子菌纲多孔菌中有机锗的含量高达800—2000mg/kg,它有抑制多种肿瘤的生长,调节免疫功能等作用,因此有人认为灵芝中的有机锗有某种生理活性。但文献报道灵芝中的有机锗含量差异很大,不同产地的野生灵芝,人工培养与野生灵芝的有机锗含量均不相同。野生灵芝中有机锗的含量一般都很低,有的甚至不能检出。有一日本作者报道,不同地区和生长阶段的灵芝,有机锗含量为13—78ug/kg,而水提物中未检出。这证明,灵芝水提物的生物学作用与锗无关。中国医学科学院药物牵研究所有人将有机锗加入深层发酵培养菌丝体的培养液中,可使菌丝体中有机锗的含量显著增高。由此可见,对于人工培养的灵芝,无论是子实体还是菌丝体,都可以根据人们的需要认为的在培养基中加入某种成分,而使灵芝中该成分的含量显著提高。1.1.4生物碱 灵芝腺苷是一种活性很强的物质,是灵芝的主要有效成分之一。灵芝含有腺嘌呤和腺嘌呤核苷,尿嘧啶和尿嘧啶核苷。灵芝有多种腺苷衍生物,都有较强的药理活性,能降低血液黏度,抑制体内血小板聚集,能提高血液供氧能力和加速血液微循环,提高血液对心、脑的供氧能力。Akira Shimizu 等报道,腺嘌呤核苷是赤芝水提取物抑制血小板凝集的有效成分。动物实验表明,尿嘧啶和尿嘧啶核苷对实验性肌强直症小鼠血清醛缩酶有降低作用。紫芝中含有五种生物碱,一种为Y-三甲胺基丁酸,在窒息性缺氧模型中,有提高存活时间的作用,并能使离体豚鼠心脏冠状动脉流量增加。1.1.5其它 灵芝中含有少量蛋白质、多肽、氨基酸。赤芝孢子内脂A有降胆固醇的作用。赤芝孢子酸A有降转氨酶作用。灵芝、紫兰、薄树芝中的薄醇醚,灵芝孢子中的孢醚,可使部分切除肝脏的小鼠的肝脏再生能力增强。灵芝纤维能降胆固醇,预防动脉粥样硬化、便秘、糖尿病、高血压、脑血栓等。余竟光等从薄盖灵芝深层发酵菌丝体中分离到4种呋喃衍生物。药理实验表明其中5-羟甲基呋喃甲醛有抑制血小板聚集的作用。曾惜春等从当归分离得5-羟甲基呋喃甲醛,认为可能是扩张冠状动脉、提高小鼠心肌摄取铷的有效物质。此外,灵芝还含有多种长链脂肪酸、长链烷烃、甾类及多种酶类等,这些成分是否参与某处生理活性尚不清楚。1.2灵芝多糖的生物活性 1.2.1调节免疫 灵芝对免疫系统的影响是双向的:对抗病的特异性和非特异性免疫能力,灵芝有促进作用,而对致病的过敏反应,则有抑制作用。从两个不同角度加强了机体保持稳态、抵抗疾病的能力。此种双向作用的详细机制尚待阐明。但已可认为,调整免疫功能,抑制过敏反应也是扶正培本作用的重要内容。灵芝对支气管哮喘等与过敏有关的疾病有效,提示它可能有抑制过敏反应的作用。雷林生等控讨了GLP 对免疫抑制剂和抗肿瘤药引起的免疫作用的拮抗作用。结果表明,GLP 的拮抗作用的强度取决于这些药物的免疫抑致作用的程度,只有这些药物轻度抑致免疫反应时,GLP 才具有完全拮抗作用。1.2.1.1灵芝多糖对T细胞的影响灵芝多糖在体外直接活化脾淋巴细胞,但活化水平较低,远不如ConA或PHA的作用强,使活性E-玫瑰花结形成率增高。灵芝多糖体外协助ConA诱导的脾淋巴细胞转化,促进活化T细胞的增殖,其程度远远高于单用ConA和灵芝多糖T细胞增殖的和。但超过一定剂量时,这种促进作用消失,甚至显示出抑制作用。灵芝多糖对不同品系小鼠脾细胞的活化与增殖作用相似,对C3H、C57BL/6J、LACA、swiss等品系的小鼠脾细胞,均有显著的协同ConA诱导其转化的作用。体内给药,同样能明显促进ConA对小鼠脾淋巴细胞的活化增殖。灵芝多糖在体外能显著促进ConA诱导Th细胞产生淋巴因子IL-2和Y-IFN,但单独刺激小鼠脾细胞,只有微弱的活化作用。灵芝多糖超过一定浓度时,可Th细胞产生IL-2。其浓度比引直脾细胞拉殖抑制的浓度更低。灵芝多糖对荷S180肿瘤的小鼠IL-2活性亦有促进作用。赤芝和树舌多糖在体外能明显对抗氢化可的松和环磷酰胺对ConA诱导脾淋巴细胞转化增殖的抑制。体内给药能荷S180肿瘤小鼠的IL-2和-IFN活性降低。灵芝多糖对正常成年鼠和免疫功能衰退的老龄鼠显示出相同的活性。从赤芝提取的三种灵芝多糖能显著促进正常ConA诱导正常成年鼠和免疫功能衰退的老龄鼠的脾淋巴细胞增殖,使老龄鼠的脾淋巴细胞增殖接近正常成年鼠,显示出抗衰老的作用。平盖灵芝(树舌)多糖能显著增强甲基化的细菌a-淀粉酶和不完全的福氏佐剂(M-BaA-IF)引起的迟发性过敏反映,这一作用是由于此药能激活非特异性的具有扩大细胞免疫效应的T细胞所致,灵芝多糖成分BN3 C与 ConA 合用,可显著提高小鼠脾脏T细胞增殖,并部分对抗环磷酰胺对脾细胞增殖的抑制作用。灵芝多糖(GLP)是从灵芝菌培养物的菌丝体中提取的多糖。向小鼠腹腔连续注射大剂量的GLP(4/mg只,2mg/只)5天,对T细胞增殖、细胞表型的表达、T细胞诱生IL-2及B细胞产生溶血素抗体均有抑制作用:当适量的GLP(0.1mg/只,0.05mg/只)连续向小鼠腹腔注射5天,可明显增强上述免疫指标。表明GLP是一种生物反应调节剂,适量可增强机体的细胞及体液免疫功能,为临床应用GLP治疗免疫功能紊乱提供了理论依据。1.2.1.2灵芝多糖对B细胞的影响 赤芝多糖对抗SRBC空斑形成细胞的产生有促进作用,但对正常成年鼠作用不明显,而对免疫功能衰退的老龄鼠则有明显的促进作用。体外单独用赤芝多糖,对B细胞有轻度活化作用,高斌等报道,杩舌多糖能提高荷瘤鼠的NK细胞活性,并认为与抗肿瘤作用有关。1.2.1.3灵芝促进巨噬细胞的吞噬功能腹腔注射灵芝提取物,能促进腹膜渗出细胞、巨噬细胞和多型核白细胞的积聚。灵芝与氯喹合用,可以改善氯喹所引起的免疫抑制现象,显著增强腹腔巨噬细胞系统的吞噬功能。灵芝腹腔注射给药可使巨噬细胞的吞噬能力和巨噬细胞溶酶体酶的活性明显增强,并呈剂量反应关系。高斌等报道,树舌多糖有体外诱导小鼠腹腔巨噬细胞分泌IL-1样物质,较对照组增加约2倍。灵芝液及灵芝多糖连续给药,能提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红血球的活力。天噬百分率和吞噬指数均有提高。1.2.2抑制肿瘤 从不同品种或同一品种灵芝中提取的多糖,其抗肿瘤活性因提取方法、多糖的种灯和纯度等不同而有很大差异,其有效剂量(相当于生药)也有很大差异。口服多糖的有效剂量要比腹腔注射大得多,同等剂量时,口服一般不显示任何活性,因此各作者均采用腹腔注射给药。不同灵芝的不同多糖,其抑瘤率差异很大,与生药的有效剂量相差几十至几百倍。日本学者从灵芝中提取的多糖对S-180肉瘤有抗肿瘤作用,能抑抑制瘤细胞增殖。关洪昌等发现,灵芝多糖D6对小鼠艾氏腹水癌也有一定抑制作用。1.2.3对核酸、蛋白质合成的影响 核酸,蛋白质是生命的物质基础,体内一切重要的生命过程都与核酸,蛋白质发生联系,有的灵芝多糖能促进核酸、蛋白质的生物合成。这对机体细胞物质代谢和能量代谢的调节可能产生积极的影响,从而增强机体抗病能力,促进病人康复。这可能是灵芝扶正固本作用的机制之一。灵芝多糖D6、银耳多糖及糖及银耳孢子多糖均能促进H-亮氨酸掺入小鼠血清蛋白更新率,进一步研究证实,灵芝多糖D6、银耳多糖还能促进H-亮氨酸掺入小鼠肝脏蛋白质,这些都反映肝脏合成蛋白质的能力增强。由于引此二多糖均能促进H-尿嘧啶核苷掺入小鼠肝脏RNA,但不能促进H-胸腺嘧啶核苷掺入小鼠肝脏DNA,似表明它们能促进转录过程,加速RNA合成,但对DNA合成无影响。灵芝多糖D6还分别能促进H-Leu和H-TdR掺入小鼠骨髓蛋白质、RNA和DNA,但对H-TdR掺入艾氏腹水癌细胞DNA无影响。灵芝多糖可引起体外培养的小鼠脾细胞核DNA、RNA含量的显著增加,细胞内超微核结构改变,细胞质和细胞核的平均截面积增加,核质比下降,促进细胞的增殖。灵芝多糖可明显促进混合淋巴细胞培养中脾细胞对[H]TdR的摄取,增加脾细胞中DNA多聚酶a的活性。表明灵芝多糖可通过诱导DNA多聚酶的产生,促进免疫细胞中DNA的合成和细胞增殖,加速免疫应答过程和同种异型坑原刺激的淋巴细胞转化。灵芝多糖也可以完全拮抗环胞素A、丝裂霉素C、氟尿嘧啶和阿糖胞对小鼠混合淋巴细胞反映(MLR)的轻度抑制作用,部分拮抗氢化可的松对MLR的严重抑制作用。灵芝的一种小分子多糖,促进H-尿嘧啶核苷掺入肝RNA,其增加率为20.5%,促进H-胸腺核苷,H-尿嘧啶核苷掺入骨髓RNA和DNA,其增加率分别为48.7%和43.3%。所以这些多糖对肝病恢复,骨髓造血均有促进作用。1.2.4其它 从赤芝提取的葡萄糖、杂多糖、肽聚糖等具有降血糖作用。赤芝葡聚糖能刺激分泌胰岛素,并促进葡萄糖在外周组织的利用,对正常鼠和高血糖均有明显的陈旧降血糖作用。抗放射与促进骨髓造血机能:灵芝液具有抗放射作用,可明显降低Coγ射线照射小鼠的死亡率,并使平均存活时间显著延长。灵芝多糖D6促进蛋白质合成、改善造血机能、诱导细胞色素p-450等作用均有利于增强机体的防御功能,提高机体保持稳态的能力。灵芝多糖能增强小鼠耐缺氧存活的能力。灵芝制剂能降低机体及心肌的耗氧量,增加缺氧状态下豚鼠的冠状动脉血流量、增加心肌ATP,改善心肌缺血缺氧状态;对由于缺氧引起的家兔缺血型心电图改变有显著的对抗作用。提高小鼠耐缺氧的能力、延长缺氧小鼠平均存活时间。我的毕业论文,呵呵!