灵芝多糖的分离纯化毕业论文

毕业论文（设计）要包括以下组成部分：1.封面（附1）2.扉页（附2）3.任务书（附3）4.中文摘要、关键词5.英文摘要、关键词（*）6.目录7.正文8.致谢（*）9.参考文献10.附录（*）11.指导教师评审表（附4）12.评阅人评审表（附5）13.答辩评审表（附6）14.封底一、封面与扉页常出现问题及正确写法（见范例1、2）1. 封面上的英文题目的首单词第一个字母和有实际意义的单词第一个字母要大写，其他小写（如and, the, of, in, by，a, an）如：Study on the Bio-deacidification in Hawthorn Fruit Juice2. 封面和扉页上的导师姓名后面要写上职称，职称用小括号括起来。3. 封皮上的申请学位是工学学士学位4. 封皮所填写内容的横线要长度一致5. 封面顶部左侧的“分类号”：食品科学与工程专业写：081401 食品质量与安全专业写：081407W6. 封面顶部右侧的“编号”：为当年年份加学号，如2009-21505127二、任务书常出现问题及正确写法（见范例3） 任务书按这样的格式改具体要求：（大家写一样的） 1）认真查阅相关资料，弄清实验目的、意义，搞好整体设计2）认真探索实验方法，找出实验的关键3）熟练实验操作技术，保证实验数据的准确性4）实验数据真实可靠，文献引用要合理，论文撰写要规范主要参考文献：（一个英文的，一个中文的。每个文献资料都要写全） [1] 赵玉平.山楂的综合利用和开发[D].天津科技大学博士学位论文,2004,51 [2] Johnson R L, Chandler B V. Ion exchange and adsorbent resins for removal of acids and bitter principles from citrus juices[J].Journal of Science and Food Agricultural,1985,36(6): 480-484 （超过一行的要左对齐）进度安排：老师的签名不要打上，日期不要打上三、摘要1、[摘要]黑体小四“摘要”，并外加“［］”[摘要]中文摘要的编写执行GB6447-86规定，不应出现图、表、数学公式、化学结构式和非公知公用的符号、术语和缩略语。至少5～6个整句，内容包括目的、方法、结果、结论（四要素缺一不可）等。摘要应以第三人称撰写，避免使用“本文”、“作者”等词汇，不应出现“本实验”等主语性的开头。应写成报道性文摘，并具有独立性和自明性，即不阅读全文，就能获得全文的主要信息（特别注意所述内容均应包含在正文中，且数据一致）。不要重复题目，给出文中的主要信息、关键步骤或数据，以便于检索；篇幅：报道性的以300字左右，指示性的以100字左右，报道-指示性的以200字左右为宜；英文摘要一般与中文摘要内容相对应；缩写词首次出现时请给出全称，如：基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱（MALDI-TOFMS）。（字体：宋体，小四）2、关键词：毕业；论文；设计.3、中文和英文摘要中不能出现参考文献的标识,即不能出现［x］。4.英文关键词的第一个字母不需大写5.摘要与关键词之间要空一行四、目录1、目录中不能出现参考文献标识2、 目录格式采用小四、宋体，第一层次加粗，行距18磅；用密集的点的制表符，处于字的中间。3、结论、致谢、参考文献前不标数字。4、摘要和目录都不用页眉，页脚采用阿拉伯数字标注。五、正文1、页面设置版面页边距上3cm，下、左，右2cm；页眉加“烟台大学毕业论文”，字体为隶书3号字，居中，页眉距边界2cm；页码用小五号字，底端居中，页脚距边界。装订线为厘米左方。2、 “目录，致谢，结论”，两个字之间空两个格3、层次（级）标题的规定层次标题一律用阿拉伯数字连续编号；不同层次的数字之间用小圆点（为半角）相隔，末位数字不加标点符号。如“1”，“”，“”， “”等，编号到四级为止。各层次的序号均左顶格起排，后空1个汉字距，再排标题。标题不得排在页末。正文部分一级标题一般为“0 前言”、“1 材料和方法”、“2 结果”、“3 讨论”、 “4 结论”。 一级标题序和标题用小二号黑体字。一级题序和标题居中放置，一级标题序和标题距下文双倍行距。题序和标题之间空一个汉字，不加标点，下同。正文部分汉字之间的标点符号用全角。二级、三级、四级标题的各层次题序和标题一律沿版面左侧边线顶格安排。二级标题，如：“ 实验方法”，左顶格排。一、二级标题后的内容另起一行排。其题序和标题用小三号黑体字。单倍行距，段前、段后分别为行。三级标题，如：“ 山楂中有机酸的测定方法”，左顶格排。与后面的内容用冒号隔开，内容接排。三级题序和标题用四号黑体字。单倍行距，段前、段后行。四级标题，如“ 山楂中总酸的测定方法”，左顶格排。四级及以下各层次题序及标题一律用小四号黑体字，单倍行距。正文即非标题文字，汉语用宋体小四号字，行间距18磅；4、正文中所有数字、英文都用Times New Roman，包括英文摘要5、标题、表头和图中都不能加参考文献的标注，表和图一般必须位于同一页面。6、图和表都要有自明性，即写清图和表所表示的内容。表的表头（表题）在表格的上部，图的图头（图题）在图的下部。7、毕业论文中对表格的要求，所有的表都应用阿拉伯数字标上号码，所有表格都必须使用三线格。如表 1 双栏表格示例（五号宋体，加黑）Table 1 Example of a double column table (Word Style “Times New Roman”)栏头column 1 栏目column 2 栏目column 3 栏目column 4 栏目column 5××× ×× ×× ××2) ×××××× ×× ×× ×× ×××注：（1） 表中文字字体为宋体，英文、数字字体为“Times New Roman” ，五号；（2）××××××。表注超过一行每行顶格。院级、校级、省级的优秀毕业论文必须有中文、英文两种表头，其它毕业论文最少应用中文表头。表头和表格内文字都使用五号字。8、插图：毕业论文中的图要求准确、清楚。图要精选，应具有自明性，切忌与表及文字表述重复。图（Figures）均应有中文和英文图题，置于图下，格式与表题相同。线条要清晰、均匀、虚实分明，准确无误。所有的Figures都应用阿拉伯数字标上号码。9、毕业论文所涉及的全部内容中的植物、动物和微生物的的学名：属名、种加词（包括亚种、变种）用拉丁文斜体。属的首字母大写其余小写；属以上用拉丁文正体。病毒一律用正体，首字母大写。限制性内切酶：内切酶前3个字母用斜体，后面的字母和编码正体平排，如：BamHⅠ、Hind Ⅲ、Sau3AⅠ等。氨基酸和碱基的缩写：氨基酸缩写用3个字母表示时，仅第一个字母大写，其余为小写，全部正体。碱基缩写为大写、正体。10、单位和分子式之间需空一格如：正确为 1mol/L NaOH, NaCl 错误的是1mol/LNaOH, 、 微生物数量的表示应该用CFU/g和 CFU/mL，常出现的错为“个/mL”“个/g”在对微生物的数量进行描述时应该正确，如正确的是1×109 cfu/×10－6 cfu/mL，错误的是写成1×109 cfu/mL，×10－6 cfu/mL，忘记了写上标。12、 单位使用体积 毫升——mL (大写)、微升——�0�8L(大写)、升——L(大写)重量g, kg，吨t溶液浓度：用mol/L和mmol/L表示，而不用M 或 NpH 的p小写 温度℃， ℉光密度：用OD表示，斜体转/分——r/min，而不用rpm 压力：用MPa、Pa或kPa表示，而不用磅或kg/cm2 放射性元素60Co热量单位Cal/g、Cal/kg、Cal/mL、Cal/m3黏度mPa�6�1s统计学符号一般统计学符号用斜体。本刊常用统计学符号如下：样本算术平均数用英文小写x；标准差用英文小写s；t检验用英文小写t；F检验用F；卡方检验用x2；相关系数用r；样本数用n；概率用P。概率P（大写斜体）等生物大分子的分子量：蛋白质用 kD，D；核酸用 bp或 kb。时间：日（天）用d，小时用h，分钟用min，秒用s 表示。13、长度计量单位、℃和%不能省略；例如: 20 cm× cm，不能写成20× cm; 20℃-30℃，不能写成20-30℃；20%-30%，不能写成20-30%；短线和顿号前的其他相同单位可省略；短线“-”为Symbol字体。14、 正文中的符号应该是中文半角，特别注意粘贴内容中的逗号和引号。15、 公式中乘号的正确形势为“×”不能用“*”。其中的标注如下面的形式：C—葡萄糖标准液的浓度，g/L；V1——滴定10mL菲林试剂所需葡萄糖标准液的体积，mL；V2—消耗的样品的体积，mL；16、 使用英语字母所写的分子式切记注意上下标Na2SO4→→→→→→→→Na2SO4 Fe3+→→→→→→→→Fe3+六、参考文献部分参考文献是出现错误最多部分，也是观察一个人的学术修养的最重要的地方。希望能收起同学生的高度重视。参考文献用五号字，[1]---[9]题序与文字之间空两格，往后的只空一格。参考文献所有标点为英文半角，不能有汉语的句号。最后一定要核实一下参考文献中的顺序与正文标注的是否一致。最好使用endnote软件编辑参考文献参考文献格式：[1] 中国科学院北京植物研究所.中国植物志36卷[M].北京:科学出版社,1974:189[2] 《全国中草药汇编》编写组.全国中草药汇编彩色图谱,第二版[M].人民卫生出版社，2000,7:26[3] 大连轻工业学院等.食品分析[M].中国轻工出版社,1998, 118-213[4] 杜朋,孙伊萍.山楂和胡萝卜酶法液化工艺研究[J].食品工业科技, 1993(5):10-20[5] 姜毛毛,杨成等.山楂浓缩原汁(清型)生产工艺的研究[J].食品工业科技,1992, (1):18-22[6] 杜朋.果蔬汁饮料工艺学[M].北京:农业出版社,1992,161-166[7] 会议论文集：作者（报告人）.题名.见（C）：编者（ed，eds）.会议录或会议名. 出版地，出版时间：页码.例：YUFIN S A. Geoecology and computer[C]// Proceedings of the Third International Conference on Advance of Computer Methods in Geoetechnical and Geoenvironmental Engineering, Moscow, Russia, February 1-4,2000. Rotterdam: A. A. Balkema, 2000.裴丽生.在中国科协学术期刊编辑工作经验交流会上的讲话[C]//中国科协学术期刊编辑工作经验交流会资料选.北京：中国科学技术协会学会工作部，1981: 2-10.[8] 学位论文：作者. 篇（题）名[D].学位授予单位城市名：单位名称(若为学校只标注到大学名)，年. 例：ALMSR B .Infrared spectroscopic studies on solid oxygen[D].Berkeley：University o f California, 1965.张珏．灵芝多糖的硫酸化修饰及其衍生物抗肿瘤活性的初步研究[D]．无锡：江南大学，2005．[9] 专利：利申请者（所属单位）.专利题名：专利国别，专利号[P].公告日期或公开日期[引用日期].获取和访问路径.

灵芝菌丝体多糖的提取（一）材料⒈菌种：湖南省食用菌研究所提供的韩国灵芝母种。⒉种子培养基：玉米粉2% 大米粉2%蔗糖2% 磷酸二氢钾硫酸镁 ph值自然⒊发酵培养基：麦麸浸出液10% 葡萄糖2%硫酸铵磷酸二氢钾 ph值自然（二）方法 1.种子培养：⒉发酵培养生产菌丝体。⒊测定干、湿菌丝体。将发酵液进行离心，然后取其沉淀物，加人60%蔗糖，进行高速（3000转/分）密度梯度离心5分钟，取上层菌丝体，洗净蔗糖再压干，即得湿菌体，然后再将湿菌体于高温下烘干即为干菌体。分别称取其重量。⒋多糖的提取。菌丝体预处理。取适量的灵芝湿菌体，用乙醇等有机溶剂进行处理，以除去湿菌体中的脂类物质，同时使糖苷酶失去活性，防止多糖的降解。⑵用热水提取多糖。取上面经预处理的灵芝湿菌体，放人1：20的热水（95℃）中浸提，一次3小时，连续浸提3次，合并3次的水浸提液减压、浓缩至一定体积，再用3倍体积的95%乙醇混合，静置10－12小时，再离心，最后加入75%的乙醇反复洗涤，以沉淀多糖。此沉淀物为粗多糖，其中混杂有蛋白质、色素、低聚糖等小分子杂质，一般要经过纯化。⑶多糖的纯化，去蛋白质和deae纤维素柱层析。去蛋白质一般采用sevag法：加入倍多糖溶液体积的氯仿和倍体积的正丁醇混合振荡半小时进行分离，直至氯仿与水的界面无沉淀为止，且要重复处理2-3次才能有效除去多糖中的蛋白质。多糖纯化一般采用硼酸型deae纤维素柱层析法：取脱蛋白后的多糖，分别以、的硼砂，的氢氧化钠溶液进行洗脱，然后用恿铜硫酸液比色测定吸收度，收集有多糖的洗脱液，再浓缩脱盐即得所需的多糖。⑷多糖纯度的鉴定。可用电泳法进行鉴定，如果存在单一带，说明为纯多糖。⒌多糖与多糖中蛋白质含量的测定：取一定量菌丝体粗多糖，加水煮沸溶解，用sevag方法脱去蛋白考马斯亮兰法测其粗多糖中蛋白质和多糖的含量。测得菌丝体中粗多糖含、多糖含、蛋白质含量。灵芝子实体多糖的提取（一）材料 1.菌种：韩国灵芝栽培种。⒉子实体栽培生产料：木屑78%，米糠20%，蔗糖1%，石膏1%，ph值自然。（二）方法⒈子实体栽培。⒉灵芝子实体预处理。⒊子实体多糖的提取。取适量的灵芝子实体，捣碎成粉末，用80目筛过筛，然后用热水提取法进行提取。具体操作同菌丝体多糖的提取。提取出的粗多糖含有色素、蛋白质等小分子杂质，也须除去。⒋去除蛋白质和色素。子实体粗多糖去除蛋白质也采用se阴法。去除色素，目前尚未发现很理想的方法。一般用乙醇进行反复冲洗，但效果不很理想。⒌多糖纯度的鉴定。同菌丝体多糖纯度的鉴定。⒍子实体粗多糖、多糖及蛋白质含量的测定。具体方法同菌丝体多糖及蛋白质含量的测定。测得子实体中粗多糖、多糖，蛋白质，其含量均低于菌丝体中的含量。可见菌丝体阶段就形成了灵芝多糖的有效成分，为灵芝液体深层发酵生产菌丝体提供了科学依据。