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covid19检测方法小论文

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covid19检测方法小论文

影响因子: : 32377375 期刊年卷:Cell Discov 2020;6 生物二区 细胞生物学 Q2 60/190 DOI:

使用单细胞测序,作者分析了血液中免疫种群的复杂性,并分析了10位患者的70,858个细胞。作者确定了ERS患者的高炎症反应,这可以解释为什么某些患者出院后生病,并建议应重新评估当前的出院标准。此外,作者鉴定了髓样,NK,T和B细胞的独特标志,并指出了TCR和BCR表位的变化。作者的发现有助于阐明抗病毒免疫机制,并揭示了使用疫苗和中和抗体开发免疫疗法的有希望的机会。

用于了解SARS-COV-2清除后的免疫细胞组成(来自PBMC)

回顾性了解免疫细胞反应并告知可能的疫苗设计/药物靶标

用于识别康复患者的免疫特征

作者将患者区分为早期康复阶段(n = 5,ERS,自从对COVID19呈阴性以来<7天)和晚期康复阶段(n = 5,LRS,> 14天),并将这些患者与健康对照组进行比较(n = 5)

PBMC的单细胞RNA测序

scBCR-seq和scTCR-seq评估扩增的B细胞和T细胞克隆的克隆性

计算方法没有得到很好的描述,因此某些数字并未直接突出显示得出的结论

使用的某些工具不是标准的工作流程工具,因此需要在方法中进行进一步说明

优点:

缺点:

由SARS-CoV-2引起的COVID-19最近影响了1,200,000多人,造成60,000多人丧生。关键的免疫细胞亚群发生变化,其在COVID-19过程中的状态仍不清楚。作者试图通过单细胞RNA测序技术全面表征COVID-19恢复期外周血单个核细胞的转录变化。发现在COVID-19的早期恢复期(ERS)中,患者的T细胞显著减少,而单核细胞增加。具有较高炎症基因表达的经典CD14 ++单核细胞比例增加,并且ERS中CD14 ++ IL1β +单核细胞的丰度更高。CD4 + T细胞和CD8 + T细胞显著减少,并在ERS中表达高水平的炎症基因。在B细胞中,浆细胞显著增加,而幼稚B细胞减少。确定了几个新的B细胞受体(BCR)的变化,例如IGHV3-23和IGHV3-7,并确认了以前用于病毒疫苗开发的同种型(IGHV3-15,IGHV3-30和IGKV3-11)。最强的配对频率IGHV3-23-IGHJ4表示与SARS-CoV-2特异性相关的单克隆状态,尚未有报道。此外,综合分析预测,IL-1β和M-CSF可能是炎性风暴的新型候选靶基因,而TNFSF13,IL-18,IL-2和IL-4可能对COVID-19患者的康复有益。作者的研究提供了ERS中炎症性免疫信号的第一个证据,提示出院后COVID-19患者仍然易受伤害。新的BCR信号转导的鉴定可能导致开发用于治疗COVID-19的疫苗和抗体。

为了绘制COVID-19患者的免疫微环境图,作者鉴定了血液中的镜像变化,并查明了与疾病严重程度和恢复相关的细胞特异性变化。然后,作者从 早期恢复阶段(ERS)或晚期恢复阶段(LRS)(70,858 PBMC)的总共10例COVID-19患者中整合了scRNA-seq,单细胞配对BCR和单细胞配对TCR分析。作者还从五个健康供体作为对照收集了scRNA-seq数据(57,238个细胞)(图 1a ** 和补充图 S1a–c )。**该数据集通过了严格的高质量过滤。使用10x Genomics将scRNA-seq样品的单细胞悬液转化为条形码的scRNA-seq库。Cell Ranger软件(版本)用于测序数据的初始处理。

图1:COVID-19患者单免疫细胞谱分析的研究设计和分析

作者使用t分布随机邻居嵌入(t-SNE),根据典型谱系标记物和在每个簇中上调的其他基因的表达,分析了三种免疫细胞谱系,髓样,NK,T和B细胞的分布(图 1b,c )。对于标记基因,位于t-SNE中的每个细胞中的表达值如图 1d 所示。接下来,作者分别将每个谱系的细胞聚类,并鉴定出总共20个免疫细胞簇。

从COVID-19感染中恢复过来的患者的免疫细胞区包括所有主要的免疫谱系。作者分析了通过质量控制的128,096个scRNA-seq概况,包括来自五个HC,五个ERS和五个LRS患者的36,442个髓样细胞,64,247个NK和T细胞以及10,177个B细胞。补充图 S2a中 显示了每个主题的粗略聚类分析景观,图 2a中 显示了每个组的合并图像。作者发现,与HCs相比,包括ERS和LRS在内的COVID-19患者的髓样细胞比例更高,但NK和T细胞比例更低(图 2b,c )。有趣的是,与ERS患者相比,LRS患者的B细胞,NK和T细胞更多,但髓样细胞却更少(图 2b,c )。因此,这些发现表明COVID-19患者外周血中淋巴细胞计数降低,而髓样细胞计数升高。

为了进一步了解COVID-19恢复早期和晚期患者中单核细胞的变化,作者进行了基因表达分析,并使用统一流形近似和投影(UMAP)将髓样细胞亚群化为六个转录不同的亚群。

经典CD14 ++单核细胞(M1), 非经典CD16 ++(FCGR3A)CD14- / +单核细胞(M2), 中间CD14 ++CD16 +单核细胞(M3), CD1C + cDC2(M4), CLEC9A + cDC1(M5 )和 pDC(CLEC4C +CD123 +)(M6)

存在于六个不同的簇中(图 3a,b )。作者发现在HCs和COVID-19患者之间,单核细胞亚群的区室显著不同(图 3c )。在髓样细胞中,ERS患者中经典CD14 ++单核细胞(M1)的比例高于HCs,而LRS患者中则几乎是正常的(图 3c )。

图3:恢复期COVID-19患者血液中的髓样细胞亚群及其状态

作者发现,COVID-19患者的CD14 ++ IL1β +单核细胞和IFN激活的单核细胞比HCs富集(图 3d–f )。与CD14 ++炎性单核细胞(M1)相关的基因具有高表达水平的炎性基因,例如 IL1β,JUN,FOS,JUNB 和 KLF6 。趋化因子 CCL4,CXCR4 ; 以及干扰素刺激的基因 IFRD1,IRF1 和 IFI6 。相比之下,与HCs中的CD14 ++单核细胞(M1)相关的抗炎基因在COVID-19患者中被下调(图 3d,e )。值得注意的是,UMAP中的IL1β表达值同时具有对比,表明ERS组中IL1β上调,而LRS患者中IL1β下降(图 3f )。与HCs相比,ERS组的DC集群中也证实了这一点(补充图 S3a,b )。接下来,作者获取了COVID-19患者与HCs中每个髓样细胞scRNA-seq亚型的平均炎症基因(补充图 S3c )。这些结果表明,细胞因子的激活驱动单核细胞群的扩展(尤其是CD14 ++感染COVID-19的患者中的炎性单核细胞)。为了探索M1簇中转录变化的生物学意义,作者用DEG进行了GO分析(图 3g )。作者观察到与细胞因子信号传导和炎症激活相关的途径的富集,这是由 IFITM3 和 IFI6 和 IL1β,JUN,FOS,JUNB 和 KLF6 的上调驱动的(图 3g )。

T细胞和NK细胞在呼吸道感染中发挥病毒清除关键作用 15 , 16 。作者的聚类分析基于规范标记(图 4b 和补充图 S4a )将T和NK淋巴细胞分为10个子集(图 4a )。

NK细胞高表达NCAM1,KLRF1,KLRC1和KLRD1 ;

(1)NK细胞细分为CD56 + CD16 - NK细胞(NK1),它们表达高水平的 CD56 和低水平的 CD16 ;

(2)C56 - CD16 + NK细胞(NK2),它们表达高水平的 CD16 和低水平的 CD56 。

CD4 + T细胞表达CD3E和CD4 ; 然后将这些细胞细分为四个簇:

(1)幼稚的CD4 + T细胞(T1),它们表达高水平的 CCR7,LEF1 和 TCF7 ;

(2)中央记忆CD4 + T细胞(T2,CD4 Tcm),表达高水平的 CCR7 ,但与单纯CD4 + T细胞相比, AQP3 和 CD69 更高;

(3)效应器记忆CD4 + T细胞(T3,CD4 Tem),表达高水平的 CCR6,CXCR6,CCL5 和 PRDM1 ;

(4)调节性T细胞(T4,Treg),表达 FOXP3 。

CD8 + T细胞表达CD8A和CD8B,并细分为三个簇:

(1)幼稚CD8 + T细胞(T5),其表达高水平的 CCR7,LEF1 和 TCF7 ,与幼稚CD4 + T细胞相似;

(2)效应记忆CD8 + T细胞(T6,CD8 Tm),表达高水平的 GZMK ;

和细胞毒性CD8 +淋巴细胞(CD8 +CTL)(T7),它们表达高水平的 GZMB,GNLY 和 PRF1 。

(3)增殖性T细胞(T8,T prol)是TYMS + MKI67 +细胞。

图4:恢复的COVID-19患者血液中T和NK细胞反应的特征。

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在HCs和COVID-19患者之间,T细胞和NK细胞亚群的组成存在显著差异(图 4c )。在COVID-19患者中,CD8 + T细胞的绝对数量,特别是效应记忆CD8 + T细胞亚组和NK细胞的绝对数量减少,而ERS中NK细胞的相对比例高于HCs。CD4 + T细胞的比例是稳定的,但HCs和COVID-19患者之间CD4 + T细胞亚群的组成存在显著差异。在CD4 + T细胞中,中央记忆CD4 + T细胞的比例明显更高,而幼稚CD4 + T细胞,Tregs和效应记忆CD4的比例+  T细胞低于HCs,尤其是ERS组。值得注意的是,与CD4 + T细胞相关的基因具有较高的炎症相关基因表达水平,并且在COVID-19患者中明显上调(图 4d )。CD4 + T细胞在COVID-19的ERS患者中具有高表达水平的炎症基因,包括 FOS,JUN,KLF6 和 S100A8 (图 4e )。相反,COVID-19患者的CD4 + T细胞相关的抗炎基因相对于HCs被下调(图 4d,e )。这表明CD4 +T细胞是病毒感染的主要参与者。CD4 + T细胞中DEG的比较揭示了参与细胞因子途径和炎症激活的基因的丰富,包括 IFITM3 和 IFI6 以及 IL1B,JUN,FOS,JUNB 和 KLF6 (图 4f )。需要进一步的研究阐明与COVID-19发病机制有关的IFN途径。

TCR-seq分析显示,ERS组的T细胞扩增明显低于HC组(图 4g )。此外,幼稚或中枢记忆T细胞几乎没有克隆扩增,而效应记忆T细胞,末端效应CD8 + T细胞(CTL)和增殖T细胞则显示出更高的扩增水平(图 4h )。另外,ERS组中扩增最高(最大)的克隆是TRAV8-6-TRAJ45:TRAV7-8-TRBJ2-1(补充图 S5d )。COVID-19患者中CD8 + T细胞比例的降低可能暗示了CD8 + T细胞在病毒清除中的作用(图 4c )。而且,CD8 +与HCs中的克隆相比,具有扩展克隆的CTL还表现出过度活化的炎症和抗病毒活性(图 4i 和补充图 S4b )。总之,这些发现表明COVID-19患者外周血中CD8 + T细胞的克隆扩增有助于控制该病毒。作者还通过Seurat FindAllMarkers 分析进行了DEG分析,并在T prol细胞中发现了相似的结果(补充图 S4c )。接下来,作者将COVID-19患者中每个NK和T细胞亚群scRNA-seq子集的炎症基因与正常RNA-seq数据的 平均值进行比较 (补充图 S4d )。

通过使用扩散图预测B细胞的基因表达数据,作者使用

scRNA-seq鉴定了四个B细胞簇:

表达 CD19,CD20(MS4A1),IGHD,IGHM,IL4R和 TCL1A的 幼稚B细胞(B1);**

表达 CD27,CD38和 IGHG的 记忆B细胞(B2); **

仅表达 CD19和 CD20(MS4A1)的 未成熟B细胞(B3 ) ;**

以及表达高水平 XBP1和 MZB1的 浆细胞(B4)(图 5a,b 和补充图 S5a )**。

图5:在COVID-19患者中单细胞B细胞的表征。

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与HCs相比,COVID-19患者的浆细胞百分比显著增加,而COVID-19患者的幼稚B细胞百分比显著降低(图 5c )。记忆B细胞和浆细胞(MPB)可能在病毒感染的控制和过继免疫的发展中起重要作用,因为它们协同工作并诱导特异性抗体。此外,与 HCs相比 ,包括 S100A8,IGLL5,SSR3,IGHA1,XBP1 和 MZB1 在内的B细胞活化相关基因主要在ERS组的MPB中表达(图 5d )。作者还在浆细胞,抗体分泌细胞(ASC)中发现了类似的结果(补充图 S5b,c ),提示ASC在病毒控制中起关键作用。接下来,作者将COVID-19患者每个B细胞亚群的炎症基因平均值与正常RNA-seq数据进行比较(图 5e )。ERS和HCs之间的基因差异表明COVID-19患者的B细胞反应和抗体分泌增强。GO分析表明, MPHA中IGHA1,XBP1,MZB1,JUN,POLR2L 和 ZFP36 的表达过高,这表明COVID-19患者的B细胞增殖和病毒转录增强(图 5f )。单细胞BCR-seq分析表明,与HC中相比,COVID-19患者中IgA同种型的表达过高(图 5g) )。这与血清IgA水平升高相对应,这在其他冠状病毒感染中也很明显。此外,在ERS患者中,(IgA + IgG + IgE)与(IgD + IgM)的比例显著增加,并且随着恢复时间而呈下降趋势(图 5h )。

使用sc-BCR-seq评估患者血液中克隆扩增的状态,作者发现IL4R +幼稚B细胞显示出很少的克隆扩增,而CD27 + CD38 +记忆B细胞显示出在各种B细胞亚群中最高的扩增水平(图 6a )。在个体水平上,作者发现与HCs相比,COVID-19患者的克隆明显扩增,这支持了B细胞在SARS-CoV-2感染下经历了独特的VDJ克隆重排的假设。作者还发现,与LRS患者相比,ERS中始终保持较高的B细胞克隆性(图 6b)。 )。此外,对每个受试者的最大扩增(最大)克隆的定量显示,ERS组中最大克隆的比率高于HCs中的最大克隆的比率(图 6c )。为了了解扩增的克隆B细胞的功能状态,作者在克隆的记忆B细胞和其他B细胞之间进行了DEG分析。作者的结果表明B细胞基因的表达增加,包括 CD27,SSR4,IGHG1,MZB1 和 XBP1 ,这进一步支持了扩增的克隆B细胞的优异效应子功能(图 6d )。而且,随着时间的流逝,扩增的B细胞的差异基因会明显消退,而在LRS患者中会降低(图 6d )。

图6:在COVID-19患者中观察到BCR克隆扩增,VDJ基因使用偏倚。

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为了研究COVID-19患者中BCR的独特变化和偏好基因,作者比较了COVID-19患者和HCs中VDJ基因的使用情况。作者确定了IGHV3家族的过度表达,COVID-19患者相比尤其是在IGHV3-7,IGHV3-15,IGHV3-21,IGHV3-23和IGHV3-30 (图 6E )。优选的IGKV是IGKV1-17,IGKV2-28和IGKV3-15,而优选的IGLV是IGLV1-44,IGLV2-8和IGLV3-27(图 6e )。此外,ERS患者的前两个配对频率是IGHV3-23-IGHJ4和IGHV3-7-IGHJ6(图 6f) )。这些细胞显示出IGH亚基与分别由IGLV1-44-IGLJ3和IGKV1-17-IGKJ1编码的IGK / L亚基配对,这表明与SARS-CoV-2特异性相关的扩展状态。单独地,ERS-4和ERS-5具有最大的克隆,分别参考IGHV3-23-IGHJ4(补充图 S5e )和IGHV3-7-IGHJ6(补充图 S5f )。

总之,以IgA和IgM同种型为主的COVID-19克隆性的增加,以及IGHV基因的偏斜使用,提示SARS-CoV-2对发病机理的贡献。值得注意的是,COVID-19患者中主要IGV基因(尤其是IGHV3-23和IGHV3-7)的偏好为合理设计SARS-CoV-2疫苗提供了框架。

用于预测可能有助于ERS和LRS中T细胞,B细胞,单核细胞和树突状细胞(DC)不同功能状态的细胞间相互作用(图 7a,b )。在ERS COVID-19患者中,作者发现了与单核细胞激活,增殖和炎症信号有关的适应性信号(图 7a,b )。

T细胞表达的基因编码TNFSF8,LTA,IFNG,IL17A,CCR5和LTB的配体与TNFRSF8,TNFRSF1A / TNFRSF14,IFNGR1,IL-17RA,CCR1和LTBR的配体相关,这些基因在单核细胞上表达,可能有助于促炎状态。其他T细胞-单核细胞相互作用涉及CSF2和CSF1的表达。

T细胞可能通过CSF2和CSF1的表达激活单核细胞,而CSF2和CSF1与CSFR(CSFR2 / 1)结合并促成炎性风暴。CD14 +单核细胞簇仅表达IL1β,据预测它将与T细胞表达的IL1RAP结合。T细胞与单核细胞的相互作用可能会增强免疫应答,并且仅针对COVID-19患者(图 7a,b )。

此外,作者发现单核细胞高表达脊髓灰质炎病毒受体,在脊髓灰质炎病毒复制和诱导NF-κB信号传导的第一步中,它作为脊髓灰质炎病毒的细胞受体。从B细胞单核细胞和B细胞T细胞的相互作用中,作者发现B细胞可以分泌大量IL-6,LTA和LTB,并与在单核细胞中表达的IL-6R,LTAR和LTBR结合,大量的IL-6应用于T细胞,以促进IFN-γ,IL-1β和其他炎症细胞因子和趋化因子的分泌。因此,在ERS COVID-19患者的发病高峰中形成了高表达IL-6及其后代的炎性单核细胞的级联特征(图 7c )。这些活化的免疫细胞可能大量进入肺和其他器官的循环,并发挥免疫破坏作用。

在LRS COVID-19患者中,预计DC配体会与参与细胞增殖和抗体产生的B和T细胞受体相互作用。作者发现LRS患者的外周血含有多种抗体。作者发现,在作者对DC-B细胞相互作用的分析中,IL18-IL18RAP,TNFSF13-TNFRSF13B,TNFSF13-TNFRSF17,TNFSF13B-TNFRSF17,TNFSF13B-TNFRSF13B和TNFSF13B-TNFRSF13C高度表达(图 7d )。因此,作者推测DC产生IL-18,TNFSF13和TNFSF13B来促进B细胞的增殖,然后在ERS的血液中分泌许多抗体。

从DC-T和T细胞-B细胞的相互作用中,作者发现DC不仅产生IL-18,而且产生IL-7以促进T细胞的增殖。此外,T细胞产生IL-2以促进B细胞的增殖和抗体产生(图 7d )。因此,细胞间的相互作用有助于作者理解为什么COVID-19患者表现出高单核细胞率和低淋巴细胞率,以及为何康复患者外周血中淋巴细胞的比例逐渐增加。

图7:在COVID-19患者中免疫细胞之间的细胞间通讯。

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使用单细胞测序,作者分析了血液中免疫种群的复杂性,并分析了10位患者的70,858个细胞。作者确定了ERS患者的高炎症反应,这可以解释为什么某些患者出院后生病,并建议应重新评估当前的出院标准。此外,作者鉴定了髓样,NK,T和B细胞的独特标志,并指出了TCR和BCR表位的变化。作者的发现有助于阐明抗病毒免疫机制,并揭示了使用疫苗和中和抗体开发免疫疗法的有希望的机会。

核酸检测是疫情期间比较常见的一种检测方法,它可以在短时间内判断是否有病毒感染。核酸检测一般都是用棉签从喉咙或鼻子里面采样,然后进行检测得出结果。核酸检测一个试管可以放一个标本或采样,也可以放几个标本或采样,具体要看检测方式。

这个主要看核酸检测的类型,如果是单检,一个试管放一个标本,也就是一个试管放一个采样。如果是混检,一个试管会放多个标本或采样,有的是一个试管放5个,有的是一个试管放10个,具体看核酸检测的方式。

核酸检测可分为分离检测和混合检测。单检,顾名思义,就是将一个人的样本放入一个收集管中,用试剂进行检测。混合检测通常为“5混合1”和“10混合1”,即将5或10人的样本放入采集管中,用检测试剂进行检测,更适合于在大规模人群中尽快筛查感染者。

“单检”适用于检测高危人群或发热、可疑人群,“混检”适用于检测低危人群,特别是近期部分地区首轮全员核酸检测“混合检测方法提高了检测效率,降低实验室耗材和设备运行效率,主要缩短时间80%-90%。

以10人为例,混合检测是将10人采集的10个拭子样本采集到一根采集管中进行核酸检测。如果检测结果为阴性,则表示10个样本全部为阴性,即均为正常;如果混合试验筛查结果为阳性,将立即通知相关部门暂时隔离混合管的10名受试者,并重新收集单管拭子进行复查,以确定10名受试者中哪一人为阳性。采用样本混合检测模式可以大大提高检测效率,发挥多重筛查、早期诊断的作用,减少传播,节约社会成本。该检测模式适用于大规模和群体筛查。

通常,核酸检测可以一次完成。然而,对于有流行病学史的新型冠状病毒肺炎患者,或有新冠肺炎病毒诊断或感染史的患者,通常有两次进行试验。在一次阴性核酸检测后,需要在24小时后再次检测核酸。

新型冠状病毒肺炎病毒复制是新型冠状病毒肺炎。这是因为新冠肺炎病毒的复制具有间歇性,导致核酸检测呈阴性,从而避免新冠肺炎患者或无症状感染的漏诊和误诊。

一种新型冠状病毒肺炎试验通常在阴性检测后24小时。在核酸检测后,一些人,如新冠肺炎患者,即使在第三次检测后也会进行核酸检测。

核酸检测的结果取决于检测方法。C2019冠状病毒疾病的检测方法目前主要是通过PCR检测,即通过鼻咽部采集相应的咽拭子样品进行PCR检测。普通的PCR检测方法耗时较长,结果一般为24小时左右。

然而,针对目前2019冠状病毒疾病的发展状况,各国已对COVID-19核酸PCR检测方法进行了改进,可以做到2-8小时的结果,最快30分钟就能产生结果。当然,并不是测试结果出来得越快越好。从理论上讲,检测结果出来的时间越短,假阴性概率越高,更容易漏诊,造成阳性率低的现象。因此,2019冠状病毒疾病2019冠状病毒疾病的检测也可根据COVID-19感染的特点进行。与核酸检测时间相比,检测时间大大缩短,结果可在15分钟内得到,假阴性率低,特异性强。因此,如果怀疑COVID-19感染,就必须结合核酸检测和抗体检测,特别是对于无症状感染者。

万方检测论文方法

万方是查重报告检测最快,本身它的数据量收录也是非常大,所以相对来说也很准,论文修改过后降重效果也比较直接,目前很多学校都是使用万方查重的。

万方检测系统全称是万方相似性检测服务(Paper Similarity Detection Service),是由北京万方数据股份有限公司开发的一套专门用于在海量数据文献资源中对学术成果进行相似性检测的系统,并提供客观详实的检测报告。一般万方的检测系统提供学术出版、科研、学位论文等提供检测支持。并与国内多所高校进行合作,所以很多我们的高校检测论文的时候都是使用的万方的检测系统,那么万方到底好不好呢?有的同学检测论文的时候发现自己的论文检测结果为0,对此感到非常的惊讶,不敢相信,在这里我说这是可能的,并且是正常的。为什么呢?下面就来看看吧!首先我们要了解的是万方的检测文献库有些什么,这个相当于检测系统的灵魂,一个系统是否强大,文献库的广泛与否是非常重要的。万方检测系统共有四个库:中国学术期刊数据库中国学位论文全文数据库中国学术会议论文数据库中国学术网页数据库单单从4个库来说,对比知网的10多个文献库来说,是比较少的,那是不是因为是这些库不够所以才造成自己检测的论文经常为0呢?情况不是不可能,但是不是主要的原因,细心的同学们通过对比可以发现,有一个非常特殊的文献库,那就是互联网资源,对互联网稍微了解的同学都知道,这个是个非常庞大的检测范围,无论是你是抄袭的还是撰写的时候和别人类似了,这些的可能性将变的更大,万方检测系统没有互联网的库,只有自己的收录过的文章的文献库,从这两个方面来说,这个检测抄袭的可能性就大大降低了,所以说出现0的情况是可能的,因为万方没有检测网络资源,这个是关键。对于万方系统来说,自己收录过的文章才算是真正别人的文章,你是不允许抄袭的,如果只是在网上发布了,而万方的文献库没有收录,它是检测不出来的,所以很多同学说为什么我抄袭了些内容,万方系统没有检测出来,这就是原因。什么时候该使用万方的系统?1、如果同学们的学校指定了使用万方检测系统,那么恭喜,论文写完后,直接使用万方检测系统检测一下,然后认真修改,再进行检测,通过了学校的标准就万事大吉了,如果出现了0也不用担心,拿到学校检测也一样是0。2、如果学校指定的是知网或者是其他的论文检测系统,那么对于万方的这么少的数据库而言就不够了,这时候万方论文检测系统只适合在论文写作完成初期的时候进行第一次检测,进行稍微的修改,然后再继续进行写作,直到文章写作完毕,最后定稿的时候就使用知网的系统,这才是正确的选择,但是一定不要拿万方和知网的系统进行比较,毕竟不同的检测系统有不同的算法和文献库,你怎么比较也比较不出什么。所以将精力放在论文写作上

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rohs检测方法论文

参考IEC62321:2008电子电气产品中六种限用物质浓度的测定程式 A. 首先用XRF进行无损筛选,快速高效,非破坏性,成本低。但干扰因素多,误差较大。 B. 微波消解、酸消解後利用AAS或ICP-AES测定Pb, Cd, Hg浓度。 C. 索氏提取後用GC-MS测定多溴联苯、多溴联苯醚等的浓度。 D. 利用斑点法或水煮法测定Cr6+的浓度。

有害物质限用指令(英语:Restriction of Hazardous Substances Directive 2002/95/EC,缩写RoHS)是欧洲联盟在2003年2月所通过的一项环保指令(但并非法律),定于2006年7月1日起生效,主要针对产品成分及在制造上的工程制程标准。

检测项目

铅(Pb),镉(Cd),汞(Hg),六价铬(Cr6+),多溴联苯(PBBs)和多溴二苯醚(PBDEs),增邻苯二甲酸二正丁酯(DBP),邻苯二甲酸正丁基苄酯(BBP),邻苯二甲酸(2-己基)己酯(DEHP),邻苯二甲酸二异丁酯(DIBP)。

适用范围

欧盟27个成员国: 法国、联邦德国、意大利、荷兰、比利时、卢森堡、英国、丹麦、爱尔兰、希腊、西班牙、葡萄牙、奥地利、瑞典、芬兰、塞浦路斯、匈牙利、捷克、爱沙尼亚、拉脱维亚、立陶宛、马耳他、波兰、 斯洛伐克、斯洛文尼亚、保加利亚、罗马尼亚 。

标签和文件

RoHS 2 指令范围内的产品必须显示CE 标志、制造商名称和地址以及序列号或批号。需要了解更详细合规信息的各方可以在负责设计的制造商(品牌所有者)或欧盟代表创建的产品的欧盟符合性声明中找到相关信息。

该法规还要求产品供应链中的大多数参与者(进口商和分销商)保留和检查此文件,并确保遵循合规流程并提供正确的语言翻译说明。

制造商必须保留某些文件以证明符合性,称为技术文件或技术记录。该指令要求制造商通过使用所有材料的测试数据或遵循协调标准(IEC 63000:2016 是撰写本文时的唯一标准)。

监管机构可能会请求此文件,或者更有可能从中获取特定数据,因为它可能非常大。

以上内容参考 百度百科-ROHS检测

RoHS 即2011/65/EC于2013年1月3日正式实施,同时将在欧盟各成员国更新,届时旧版RoHS即2002/95/EC将被废除。 之前我们出的报告中标准为2002/95/EC,限制物质为6项,即铅(Pb),镉(Cd),汞(Hg),六价铬(Cr6+),多溴联苯(PBBs)和多溴联苯醚(PBDEs)。即日起将更新为2011/65/EC,限值物质增加到10项,即新增邻苯二甲酸二正丁酯(DBP),邻苯二甲酸正丁基苄酯(BBP),邻苯二甲酸(2-己基)己酯(DEHP),六溴环十二烷(HBCDD)。

物理方法 ROHS检测仪化学方法 一系列化学检测手段

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建筑工程质量检测工作是做好建筑工程质量管理的重要手段和技术基础。我为大家整理的建筑工程质量检测技术论文,希望你们喜欢。建筑工程质量检测技术论文篇一 浅议建筑工程质量检测 【摘要】 建筑工程质量检测工作是做好建筑工程质量管理的重要手段和技术基础。本文对检测行业的现状进行了分析,探讨了建筑工程质量检测的主要内容与检测技术,并提出了做好检测工作的策略。 【关键词】 质量检测;检测内容;策略 【中图分类号】 【文献标识码】 B 【 文章 编号】 1727-5123(2012)03-045-02 建筑工程质量不仅关系工程的适用性和建设项目的投资效果,而且关系到人民群众生命财产的安全。随着我国现代化建筑事业的蓬勃发展,建筑规模不断扩大,一旦发生工程质量问题,会直接影响公共利益和公众安全,因而,建筑工程的质量检测越来越成为人们所关注的 热点 。 1检测行业的现状 改革开放以来,建设工程质量检测行业规模由小到大,工作类型由单一到综合,检测市场化概念已经形成。但是在实际工作中仍然存在很多问题。⑴从只能检验砂石、水泥、砖瓦、钢材发展到市政工程材料、地基基础检测、建筑工程结构可靠性检测、建筑节能检测、室内环境检测等,检测的内容越来越精细,检测技术也在不断进步;⑵建筑企业试验室属于第一方试验室,即企业为了保证自身承包的工程质量而设立的试验室,由于其自身性质很大程度上限制了它们的发展,使其在经济实力、检测能力、规模和技术力量等环节处于劣势,在检测市场所占分额很小。但是这种情况正在改变,企业的试验室正在逐步分离出来, 成立具有独立法人资格的检测机构;⑶市场的竞争,使检测费用远远低于成本,导致部分试验无法正常进行;⑷检测行业目前的技术门槛过低,造成人员技术素质较低。虽然现在实行的是见证取样,施工现场的见证人员不仅没有相应的资格,甚至有一些人员连最简单的常识都不懂,样品的真实性得不到保证,所得到的数据与实际严重不符。 2建筑工程质量检测的内容 地基基础工程的质量检测。 地基。通常采用钻孔取芯试验、静载荷试验和触探试验对复合地基进行检测。检测要求有:⑴砂石桩复合地基的质量检测要求。施工后等待一段时间,抽查检测砂石桩的处理效果;可采用静力触探、标准贯入、原位测试的 方法 检测桩间土的挤密质量;⑵振冲桩复合地基的质量检测要求。施工结束后间隔一定的时间,可采用单桩载荷试验对振冲桩的质量进行检测;对于场地复杂或是重要的工程,应检测复合地基的处理效果。 桩基工程。桩基检测项目主要有:⑴单桩竖向承载力试验。在同一个条件下,试桩的数量应大于3根;应采用油压千斤顶加载;基准桩与压重平台支座、试桩之间的中心距应符合相关规定;制作的试桩应符合要求;加载方式选择慢速维持载荷法;测读桩沉降量的时间间隔应掌握好;严格按照要求确定单桩竖向极限承载力;⑵基桩高应变动力检测。检测之前需对电源、传感器、仪器、设定参数等进行检查,确保无误;锤击设备选用自由落锤时,应保证最大锤击落距小于3mm;如果只需检测桩身的结构完整性,可降低落距,减轻锤重;⑶混凝土灌注桩终孔持力层检验。人工挖孔桩终孔时,应按照设计要求对孔走向、表面岩状及桩端持力层进行检验;可采用原位载荷试验测得的结果,并结合实践 经验 和桩基设计要求,对桩孔孔底土层的承载力进行复验。地基基础工程质量检测另外还有地下结构施工监测和建筑物的变形检测等。 钢筋混凝土结构工程质量检测。钢筋混凝土质量检测可分成三类。⑴外观检查。对于混凝土外表产生的质量问题,可用此法,如尺寸偏差、蜂窝麻面、表面损伤、缺棱掉角、裂缝、冻害等;⑵预留试块检测。这种方法有一定的误差,如预留试块的取样不当,试块与结构没有同条件养护,试块的振捣方法与结构的施工方法相差过大,则试块就没有代表性;⑶在结构本体上进行检测。这种检测内容有:混凝土的强度和缺陷、钢筋混凝土结构质量问题的常用手段,其测试结果可作为判断结构安全问题的重要依据。后者称为破损检验,是在非破损检测尚无法确定其承载能力时使用,或对新结构需要分解其受力性能时使用。常用较成熟的非破损检测方法有:回弹法(表面硬度法)、拔出法(半破损法)、超声波法(声波法)等。回弹法是一种测量混凝土表面硬度的方法,利用回弹仪冲击动能测量回弹锤撞击混凝土表面后的回弹量,确定混凝土表面硬度,用试验方法建立表面硬度与混凝土强度的关系曲线,从而推断混凝土的强度值;拔出法是直接测定混凝土的力学特性的方法,使用拔出仪拉拔埋在混凝土表面层内的锚杆,根据混凝土的拉拔强度,推算混凝土抗压强度;超声波法可以测定混凝土的强度,用超声波发射仪,从一侧发射一列超声脉冲进入混凝土中,在另一侧接收经过混凝土介质传送的超声脉冲波,同时测定其声速、振幅、频率等参数,判断混凝土的质量。 砌体结构工程检测。 砌体结构的现场检测方法。砌体结构主要指砖砌体,砌体强度是由砖块和砂浆强度或施工时制做的砌体试块强度来决定的,传统的检测方法是直接从砌体结构上截取试样,进行抗压强度试验而砌体结构的特点导致取样存在较大难度,取样时的扰动又会对试样产生较大损伤,从而影响试验结果。因此,砌体结构的现场原位非破损或半破损试验方法理所当然地受到重视,并广泛开展研究和工程实际应用。砌体强度直接测定法包括:抽样检测法、原位检测法、动测综合法、微观结构法等。 砌体强度的间接测定法。砌体强度与砂浆和砖块强度有直接关系。由砂浆和砖块强度等级可确定砌体的抗压强度,间接测定法就是使用专门的仪器和专门的测试方法,测量砂浆和砖块的某一项强度指标或与材料强度有关的某一项物理参数,并由此间接测定砌体强度。主要方法有:冲击法、回弹法、推出法,此外尚有筒压法、点荷法等通过测定砂浆的强度来测定砌体强度的方法,都已在工程中得到应用。 3做好检测工作的策略 建立检测信用档案 良好的信用是建立社会主义市场经济体制的必然要求。检测机构及检测人员信用档案,包括检测机构和人员的业绩、检测市场违法违规行为及不良行为记录等。检测机构和人员的信用档案是对检测机构申请资质和奖惩的重要依据。完善检测信用管理,建立诚信获利和失信惩戒机制,发挥信用管理调控市场的作用。通过各种 渠道 ,宣传质量检测信用好的单位,扩大其社会信誉度和知名度。 完善建筑工程质量保证体系。针对建设项目规模,建立相应等级试验检测机构和质量保证体系,对工程质量负责。试验检测机构业务范围内的有关规范、规程、标准等技术文件应齐全,试验检测应严格按有关标准、规程及规范进行。各级质量管理部门应各司其责,按质量第一的方针和全面质量管理要求,采取切实有效的 措施 ,不断提高质量管理水平。在实际工作中,应严格实行质量自检,加强质量管理和质量监督,逐步建立完善质量保证体系。还要增强建设各方面的质量意识,分工负责,责任到人,真正落实质量岗位责任制。 培养高素质的技术队伍,加大技术创新的投入。勘察设计单位是技术密集型企业,对设计工作的要求很高。因此,提高设计质量的首要任务是提高人的素质,包括提高技术人员的质量意识和生产技能。同时,必须加大技术创新的投入,增加技术储备,为设计生产提供资源和技能保障。 坚持质量 教育 ,建立质量原理和质量责任制度。在质量管理工作中,质量意识的提高有两个途径:⑴靠坚持不懈的质量教育;⑵建立和落实质量管理和质量责任制度。因此,质量教育经常化和质量管理制度化是我们质量管理工作的重点。 严格验收工程。完成项目工程能否交付好的产品,关键在于最后验收。⑴工序验收是验收工作的基础。工序验收的过程是:先由操作者自检,再交由班组长检验。要采取必要经济制约手段,完善签字鉴证手续,严格执行每道工序,确保质量;⑵分项分部工程验收是验收工作的主要组织部分。分项分部验收要做到规范和严细:首先,保证验收工程的全面性,验收项目的品种和数量不得缺少。其次,从保证项目到允许偏差项目,验收都要严格执行国家标准,不得降低等级,严禁弄虚作假。最后,建设(监理)单位现场质量监督员应参加验收并签字鉴证;⑶竣工工程验收是工程交工的前提。工程整体验收应注意三个环节:首先,施工单位的自评;其次,建设(监理)单位的预验;最后,工程主管部门的正式验收。验收不但要现场检测,而且还要进行观感评定;不但要听取汇报,而且要严格审查一整套的工程技术档案资料。验收要明确工程遗留的质量问题,提出处理意见,确定保修条款,保证交付用户一个满意的产品。 总之,在将建筑工程质量检测行业推向市场的过程中,要加强见证取样工作的监督,无论是招标、规划、质量监督工程的各个部门在工程的每个环节都不要放松。做到每一个样品的取样合理,真实可靠。各检测单位还要提高建筑工程质量检测的质量意识和法律意识。树立服务观念,在市场经济中找准自己的位置,树立现代 企业管理 观念,借鉴和利用一切企业管理的先进手段和办法来帮助检测机构健康发展。 建筑工程质量检测技术论文篇二 刍议建筑工程质量检测 【摘要】建筑工程的数量也随着社会主义发展而不断增加,而工程检测是现代建筑必不可少的环节,这也是保证工程施工质量的有效途径。工程检测质量的好坏关系到了整个建筑质量的好坏,结合具体的工作经验,本文对建筑工程质量检测遇到的相关问题展开了简单的探讨。 【关键词】质量检测;建筑工程;问题探讨 在建筑行业不断发展的同时,我们也看到了很多潜在的安全隐患。近几年,我国建筑行业的意外事故发生率在不断增加,很多施工场地都出现了伤亡事故。这些都在警示人们,工程建筑施工必须要做好质量检查工作。检测时需要积极运用先进的技术手段,结合科学的实施程序,提高建筑工程的检测效率,尽可能避免过大的经济损失,维护建施工的安全进行。 一、建筑工程检测的主要内容与技术 1、地基基础的检测 (1)桩基工程的检测 桩基是隐蔽工程,支撑着地面上的构筑物,它是建筑物的基础,其质量优劣直接影响到这些建筑物的安全。在桩基础的施工过程中,桩基检测是一个不可缺少的环节。 a.单桩竖向承载力。在检测的同时必须要注意几个重点:在相同环境下,保证试桩的数量在3根以上;需使用油压千斤顶进行加载;对基准桩、压重平台支座、试桩三者的间隔要控制在标准范围内;设计的试桩需要满足实际工程需要;严格控制测读桩沉降量的时间长短好;根据具体标准来限制单桩竖向极限承载力。b.基桩高应变动力。在现场进行检测工作需要结合相关要求进行:在检测前期需做好相关的检查,如:电源、仪器、设定参数等,保证无误后投入使用;在锤击设备采取自由落锤时,要将最大锤击落距控制在3mm 以内;若需要对桩身的结构整体性进行检测,需要降低落距,减小锤重。c.混凝土灌注桩终孔持力层检验。检验技术要点:人工挖孔桩终孔时,应按照设计要求对孔走向、表面岩状及桩端持力层进行检验。 (2)建筑物的变形检测 a.倾斜。对建筑物倾斜情况实施检测是不可缺少的环节,其主要包括了直接测定法、间接测定等方式。直接测定法有:经纬仪投影法、垂线法、天顶天底仪观测法等;间接测定法有:对建筑物基础的相对沉降实施测定等。b.挠度与裂缝。通过运用检测仪器来做详细的观察;c.沉降。对地基的实际情况做好检查分析,避免因地基严重而影响到建筑质量。 (3)地下结构施工的监测 a.结构内力监测。钢筋混凝土的结构内力测试,主要是通过在支护结构构件主筋上布置钢筋应力计,以监控支护结构的应力变化。b.支护结构的侧向变形观测。采用测斜仪可以测量不同深度支护结构及土体的侧向变形程度。 二、对钢筋混凝土结构的质量检测 1.对混凝土内部状况的检测 由于混凝土材料的缺陷才导致的内部状况。这是因为施工大意、技术管理不到位等造成的。通过超声波可以探明缺陷具体存在的位置,并进行及时补救。直角传播法、钻孔对测法、单面平测法和直接穿透法等都是主要的检测方法。 2.对混凝土中钢筋的质量检测 对钢筋锈蚀的检测。如果钢筋发生锈蚀,则会对混凝土结构的安全性和耐久性会产生影响。通过采用半电池检测的方法,利用钢筋锈蚀程度与测量电位间建立的关系,对钢筋的锈蚀程度进行判断。对钢筋的位置进行检测。可以利用钢筋位置检测仪,这一先进的仪器设备进行测量,其能准确的测出混凝土中钢筋的位置以及保护层的厚度,确保其稳定性。 3.对混凝土强度的检测 主要是针对混凝土的内部结构而进行的非破损强度检测,主要运用回弹法等方法,对当前的建筑行业而言,这是对混凝土强度检测中比较常用的方式[2]。其重点主要在于:①在检测前需要对被检测对象的相关情况进行熟悉;②在构件上,要确定试样及分布其测区;③对回弹值、碳化深度要进行循环测试;④对试验数据要做好处理。 三、钢筋混凝土结构检测 (1)混凝土中钢筋的质量检测 a.钢筋锈蚀的检测。钢筋发生锈蚀会直接影响混凝土结构的耐久性和安全性。可采用半电池检测法,利用测量电位与钢筋锈蚀程度间建立的关系,判别钢筋的锈蚀程度。b.钢筋的位置检测。钢筋位置检测仪作为一种先进的仪器设备,可以准确的测定钢筋混凝土中钢筋的位置以及保护层厚度,保证其稳定性。 (2)混凝土强度 主要是针对混凝土结构的非破损强度进行,主要运用的方法包括了回弹法,这是当前建筑行而言比较常用的混凝土强度的方式。其重点在于:a.检测前需熟悉被检测对象情况;b.于构件上确定试样并分布测区;c.逐渐测量回弹值、碳化深度;d.对试验数据做好处理。 四、建筑材料的质量检测 建筑材种类繁多,各种材料进入施工现场后必须根据相关的规范要求进行试验检测,其检验的项目也必须符合国家、行业、地方的相关要求。常规检测项目有:主体结构(梁、板、柱) 砼标号及钢筋数量检测,竣工后房屋空气质量状况检测,钢筋抽样检测,混凝土试块检测,瓷砖性能检测,铝合金门窗三性检测等,这些项目都是强制性要求必须检测的项目。 五、建筑门窗 (1)塑料门窗 检测对象包括:a.根据断面图标准,对配合尺寸、断面尺寸的允差检查;b.低温落锤冲击试验;c.检测加热后的尺寸大小变化。 (2)铝合金门窗 包括:a.表面质量。检查门窗的装饰表面是否出现损伤,其表面的致密、配合情况是否良好。b.装配标准。检查运用的材料能否达到要求,其硬度与强度之关系是否合理。c.性能。门启闭力在50N 以下;抗风压性能要尽可能更强。 六、做好检测工作 1、建立检测信用档案 检测信用档案,包括检测机构和人员的业绩、检测市场违法违规行为及不良行为记录等。检测信用档案是对检测机构申请资质和奖惩的重要依据。完善检测信用管理,就是要建立诚信获利和失信惩戒的管理机制,发挥信用管理在市场调控中的作用。 2、完善技术管理工作制度 要认真执行工程技术标准,它是工程质量和安全的最基本保障,是工程建设领域的技术法规。要想使质量管理工作科学化、规范化、程序化、制度化,必须健全和完善建设各方主体工程质量技术保证体系,建立健全工程各方主体的质量技术管理控制机制,督促施工单位结合自身情况制定施工工艺、操作规程和内部控制标准。 3、培养高素质的技术队伍,加大技术创新的投入 勘察设计单位是技术密集型企业,对设计工作的要求很高。因此,提高设计质量的首要任务是提高人的素质,包括提高技术人员的质量意识和生产技能。同时,必须加大技术创新的投入,增加技术储备,为设计生产提供资源和技能保障。 4、严格验收工程 工程整体验收应注意三个环节:一是施工单位的自评。二是建设(监理)单位的预验。三是工程主管部门的正式验收。验收不但要现场检测,而且还要进行观感评定;不但要听取汇报,而且要严格审查一整套的工程技术档案资料。验收要明确工程遗留的质量问题,提出处理意见,确定保修条款,保证交付用户一个满意的产品。 结束语 对建筑工程实施质量检测具有十分重要的意义,对工程的质量具有决定给作用,在一定程度上可以降低工程成本的过度消耗,并对建筑物的结构安全起到了维护的作用。根据具体的需要,进而由施工单位采取相应的科学措施来进行检测。 参考文献: [1]杨莉萍,谢平.浅议工程质量检测工作的重要性及要求[J].云南建筑,2008(5) [2]王晓萍.关于混凝土构件荷载检验方法的探讨[J].河北建筑工程学院学报,2008(5) [3]周涛.浅谈工民建工程的质量检测[J].城市建设,2009(32) 看了建筑工程质量检测技术论文的人还看 1. 建筑工程技术论文范文 2. 建筑工程技术研究论文范文 3. 建筑工程技术管理毕业论文3篇 4. 建筑工程技术毕业论文范文 5. 浅谈工程技术建设论文

论文查重检测方法

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毕业论文是每个高校毕业生离开学校最关键词的一步,目前知网查重网站是所以大部分高校都用论文查重系统,只要我们使用和学校要求一致的系统,那么检测结果的差异化还是不会很大的。第二,上传的文档格式正确。每个学校也都要求论文格式,因为查重系统会自动识别论文的内容和参考文章,然后对比论文的正文。如果我们上传的是PDF文档而不是Word文档,系统会得到错误查重。重复的部分一般用红色字体标注,也会有不同颜色的绿色和灰色字体的不同含义。第三,选择最合适的时间完成查重工作。论文在提交到学校前,提前校对修改查重是非常重要的一步,因为我们无法保证自己的论文内容没有重复。即使论文的内容都是我们自己完成的,还是会有类似的部分。只要被论文查重系统数据库收记录下来,就一定会被查出来。所以查重什么时候上传到学校检测是很重要的。论文重复率和质量也需要查重,确保能达到学校的要求。我们最好在要提交到学校前的一段时间再次进行查重,得到的重复率结果没问题再提交给学校查重,因为时间太长也可能会导致数据库更新重复率出现差异的情况。论文怎么进行查重?

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