蛹虫草的栽培技术毕业论文

蛹 虫 草 栽 培 技 术 江苏新沂市康原食用菌研究所 Tel: 蛹虫草又称北虫草，属子囊菌类的麦角菌目、麦角菌科。近年来野生资源日渐匮乏，而人工栽培的蛹虫草以良好的医疗保健功效深受消费者欢迎。 一、蛹虫草的生物学特性 1、营养：蛹虫草可利用的主要碳源物质是葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、淀’粉、果胶等，但以单糖或小分子双糖的利用效果为佳。其次，氮元素是北虫草合成蛋白质和核酸物质的必要元素，北虫草能利用的氮类物质尤其是有机态氮的种类较多，如蛋白胨、豆饼粉、酵母膏等均可；也可利用若干无机态氮，但以有机态氮的利用效果为好。再次，北虫草菌丝及其子座生长中，必不可少的元素即是矿质元素，因此，生产中应予酌量添加。第四，适量的生长素有效刺激和促进北虫草菌丝的生长，并大大提高其生物量，生产上多以添加维生素类为主要措施。最后，合理的基质碳氮比(CN)是人工栽培北虫草的必需条件，否则，将导致或者菌丝生长缓慢、或者污染严重、或者气生菌丝过旺，难以发生子座，即便有子座分化，其产品数量和质量均有不同程度的下降。生产中一般以调CN在3-4：1之间为宜。 2、温度：北虫草菌丝生长温度为 6-30°C，最适温度为18-22°C；原基分化温度在10-25°C之间，生产中为刺激原基的适时形成，可适当调控温差在24小时内5-10°C的范围；子座生长温度为10- 25°C，最适20-23°C；孢子弹射温度为 28-32°C，最高应控制在34°C以下；若非育种或分离以及特殊需要，单纯栽培、以获得子实体为目的时，不要达到或超过 28°C。 3、水分：水分是生命的重要基础，北虫草也不例外；作为菌丝及子座在生命运行过程中必不可少的溶剂，北虫草所需水分的绝大部分来自于培养料中，因此，调配基质含水率于适当的水平，直接关系到北虫草的生长发育状况。实际生产中，基质含水率宜调至60％-65％，菌丝培养阶段的相对空气湿度保持在60％—70％，形成原基后应调至80％-90％。 4、氧气：北虫草与其它食用菌相仿，生长发育过程同样是一个吸氧排碳的代谢过程，尤其原基分化后需氧量更多，故需保持相对较清新的空气，以保证氧气的充足供应。但由于北虫草生长速度慢、代谢量很小，加之其自身耐二氧化碳的能力相对较高，所以，生产中将二氧化碳浓度在0．5％左右即可满足。 5、光照：北虫草生长的前期即菌丝发育阶段，光线尤其是强光对菌丝有较大的抑制和损伤作用，故应保持完全黑暗状态，即便是临近完成发菌时提前施行光照处理，也会诱导过早进人生殖阶段，而使产量严重降低、质量大打折扣。全部发满菌后，需约200勒克司光照刺激转色，该阶段如光照均匀、每天时间达到10小时以上，可使菌丝转色好、色泽深，为后期获得高质量的子实体打下基础，该特性与野生北虫草在浓密树阴下不发生子座的情况一致。出现原基后，可适当缩短光照时间、提高光照强度至300勒克司，并力求光照均匀，以使子实体正常发育生长。 6、pH值：北虫草适酸性环境，菌丝生长阶段适应5-7的基质，最适5．2- 6．8之间，人工栽培生产时，基质pH可调到7-7．5，经高压灭菌后，pH值自然下降，加之后期菌丝的自然(产生有机酸)调节，即可使基质pH降至6左右。 二、菌种制作 1、获取适应性强、出草率高的种源，是北虫草栽培成功的关键条件之一，除有条件自行分离、培育外，大部分生产者需通过引种渠道获得。 2、菌种转管配方：葡萄糖10克，蛋白胨10克，酵母膏2克，磷酸二氢钾1．5克，硫酸镁0．6克，VB1 50mg，琼脂15-20克，水1000毫升，pH值6-7。常规灭菌等操作，使用已备种源接种，一般每支种源可转接20支左右。23-25°C条件下培养，经约10天左右，菌丝长满斜面，即为一级母种；二级母种只可用于栽培生产，不得再行继续转扩，否则，将导致“出草”稀少、稀疏、甚至根本不能“出草”的严重后果。 3、液体菌种生产有一次生产量大、生产周期短、易于人工控制：栽培接种后发菌快、菌丝立体式占领料面等诸多优势，现在已成为北虫草栽培用种的首选方式。 4、菌种的选择：选用菌丝洁白、适应性强、见光后转色、出草快、性状稳定的速生高产优质菌种，是栽培成功和高效的关键。 三、原材料要求 1、选用新鲜无霉变、无污染的大米。 2、采用罐头瓶或选用厚度毫米以上，规格为15厘米×30厘米或17厘米×30厘米，薄厚均匀、无破漏、韧性强的优质聚丙烯塑料袋为栽培容器。 四、栽培管理 1、培养基配方：大米或小麦1千克，水千克。（营养液配方：蚕蛹粉100g、蔗糖50g、蛋白胨10g、VB1 50mg） 2、配制方法：大米或小麦按每袋50克或100克分装入瓶或塑料袋。按料水比（即大米或小麦与营养液的用量比）1克:毫升称取营养液倒入装好大米的瓶或塑料袋内。分装完后用塑料绳将每个塑料袋中部和口部各扎一道；。 3、灭菌：灭菌锅内加适量水，把培养料袋放入灭菌锅，升温至100℃，保持8小时。取出，冷却后移入接种室（箱）。用优质气雾消毒剂或常规方法密闭消毒后，即可接种。 4、接种：进入接种室应迅速关好门（防止含有杂菌的空气进入）。接种工具、菌种外壁、操作人员双手等，用75%酒精擦拭。现介绍易推广的用固体大米菌种接种的方法： ①试管原种的转扩栽培：拔去试管塞后用消毒的接种钩挖取豆粒大小的菌种2-3块，接入培养基面上，稍扎紧袋口即可。 ②用原种转扩栽培袋时，先将菌种捣成指头或豆粒大小块状，每袋接入5-10克菌种，均匀分布在料面上。如条件允许可适当增加接种量，以利菌丝较快生长。接种完后按原扎口方法稍扎紧袋口，即可移入经杀菌和防虫处理的培养室内培养。 ③采用液体菌种接种方式的，在无菌条件下，打开封口材料，用接种枪将液体种喷匀即可。接种量视容器大小而定，也有在液体菌种中加入一定比例的无菌水再接种的。 5、管理：北虫草属中低温菌类，菌丝生长温度范围为5-30℃，菌丝最适生长温度为15-25℃，子座最适生长温度为18-22℃。一般最初将温度保持15-18℃遮光培养。当菌丝生长至培养基1/2-2/3时，可将温度升至20℃，20天菌丝可发满袋（液体菌种1周左右）。几天后，当培养基上部出现菌丝突起时，给予10-15℃的温差刺激，并增加光照刺激转色。7-10天转完色后对培养室消毒30分钟，然后解去培养料袋中部扎绳，用手把袋折成直筒状，为子座生长提供空间。当子座长至1厘米，及时对栽培袋通气；瓶或塑料盆栽培的可在封口薄膜上打小孔通气。温度保持18-22℃，空气相对湿度80-90%。 6、采收：子座呈橘红色或橘黄色棒状不再生长时，打开袋口用小刀或剪刀将其从基部采下，放入洁净器具内及时烘干或晾干，勿暴晒以免褪色。干燥后存放在密闭塑料袋内保存。

蛹虫草天然蛹虫草资源稀少，人工固体栽培周期长，也不易控制条件。通过液体深层培养法获得虫草菌丝体丝体的化学组成与从天然采集的虫草的化学组成接近，而且可以从发酵液中得到人们需要的物质，还能大大缩短生产周期。虫草菌丝的最适生长温度为20~25°C。在进行菌丝发酵时碳源以蛋白胨为最优，采用1∶2或1∶3的碳氮比较为合适。发酵最佳培养基组成是：5%大米粉、豆饼粉、麦芽粉、，·7H2O。影响蛹虫草菌胞外多糖产量的实验因子显著性大小的排列顺序为：甜菜糖>；酵母浸出粉>KNO3>MgSO4·7H2O>FeSO4>K2HPO4。胞外多糖最佳发酵工艺参数：初始pH值为7，500ml三角瓶中培养基装液量为100ml，接种量6%，温度28°C。周期为96h。培养基配方为：玉米粉4%，黄豆粉，酵母粉，，，接种量3%，。认为碳源因子对胞外多糖的产生影响显著。蛹虫草发酵的适宜培养基组成为：蔗糖，玉米浆，酵母膏，MgSO4·，，认为蔗糖为碳源最好，以酵母膏为氮源，菌体产量最高。蛹虫草菌丝的生长可以利用多种碳源和氮源，在以红糖碳源、奶粉为氮源的液体培养基中生长最佳，且碳源/氮源合适的比例为，适宜PH为。培养基成分确定为蛋白胨，，，VB15mg/L，2，4D2mg/L。在相同条件下，优化培养基比原来培养基的发酵得率提高了，研究初步得到蛹虫草液体培养条件和生长动力学，为工业化生产提供了一定的理论依据。培养基配比可将该菌株的虫草素含量提高到，比用Czapek培养基提高倍。柴建萍等通过实验得出玉米粉为最优碳源，蚕蛹粉为最优氮源，MgSO4为最优无机盐。液体发酵最佳培养基配方为：玉米粉（20g/1000ml），蚕蛹粉（5g/1000ml），硫酸镁(）。