大肠菌群是指一群能发酵乳糖、产酸(培养基原来的颜色是红色的，如果产酸会变成黄色)、产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。食品检出大肠菌群，则表示该食品曾受粪便污染。结果报告为每100ml（g）样品中大肠菌群的最近似数（MPN）设备和材料：1. 温箱：36±1度2. 冰箱：0-4度3. 恒温水浴：±度4. 天平5. 显微镜6. 均质器或乳苯7. 平皿：直径为90mm8. 试管9. 吸管10. 广口瓶或三角烧瓶：容量为500ml11. 玻璃珠：直径为5mm左右12. 酒精灯13. 试管架培养基和试剂：1. 乳糖胆盐发酵管2. 伊红美蓝琼脂平板3. 乳糖发酵管4. EC肉汤5. 磷酸盐缓冲稀释液6. 生理盐水7. 革兰氏染色液操作步骤：）.检样稀释 以无菌操作将检样25ml(或g)放于含有225ml灭菌生理盐水或其他稀释玻璃瓶内（瓶内予置适当数量的玻璃珠）或灭菌乳苯内，经充分振摇或研磨作成1：10的均匀稀释液。固体检样最好用均质器，以8000-10000r/min 的速度处理min,作成1：10的均匀稀释液。 用1ml灭菌吸管吸取1：10稀释液1ml，注入含有9ml灭菌生理盐水或其他稀释液的试管内，振摇试管混均，作成1：100的稀释液 另取1ml灭菌吸管，按上条操作依次做成10倍递增稀释液，每递增稀释一次，换用1支1ml灭菌吸管。 根据食品卫生标准要求或对检样污染情况的估计，选择三个稀释度，每个稀释度接种3管。 乳糖发酵试验将待检样品接种于乳糖胆盐发酵管内，接种量在1ml以上者，用双料乳糖胆盐发酵管。每一稀释度接种3管，置36±1度温箱内，培养24±2小时，如所有乳糖胆盐发酵管都不产气，则可报告为大肠菌群阴性，如有产气者，则按下列程序进行。 分离培养将产气的发酵管分别转种在伊红美蓝琼脂平板上，置36±1度温箱内,培养18-24小时，然后取出，观察菌落形态，并做革兰色染色和验实试验。 证实试验在上述平板上，挑取可疑的大肠菌群1-2个进行革兰氏染色，同时接种乳糖发酵管，置36±1度温箱内培养24±2小时，观察产气情况凡乳糖管产气、革兰氏染色为阴性的无蚜苞杆菌，即可报告为大肠菌群阳性。 报告根据证实为大肠菌群阳性的管数，查MPN检索表，报告每10ml(g)大肠菌群的mpn值。8 粪大肠菌群用接种环将所有产气的乳糖胆盐发酵管培养物（见条）转种于EC肉汤管内，置±度水浴箱内（水浴箱内的水面应高于EC肉汤液面），培养24±2小时，经培养后，如所有EC肉汤管均不产气，则可报告为阴性；如有产气者，则将所有产气的EC肉汤分别转种于伊红美蓝琼脂平板上，置36±1度培养18-24小时，凡平板上有典型菌落者，则证实为粪大肠菌群阳性。 结果报告根据证实为粪大肠菌群的阳性管数，查MPN检索表，报告每100ml（g）粪大肠菌群的MPN值
老王弃治疗
