植物多糖的水提取毕业论文

植物活性多糖的提取方法有多种,在水提醇沉的基础上,常采用酶解、微波、超声波,膜处理和CO<2>超临界萃取等方法进行辅助提取或精制.最常用的还是水提醇沉法.举例: 蒽酮比色法，具体步骤 一、仪器、试剂和材料 1.仪器：电子天平，超声波清洗器，电热恒温水浴锅，抽滤设备，分光光度计，容量瓶，刻度吸管等2.试剂：(1)葡萄糖标准液：l00 µg/mL(2)浓硫酸(3)蒽酮试剂： g蒽酮溶于100 mL浓 H2SO4中。当日配制使用。3.材料：甜高粱，甘草二.操作步骤 1.葡萄糖标准曲线的制作取7支大试管，按下表数据配制一系列不同浓度的葡萄糖溶液： 管号 1 2 3 4 5 6 7 葡萄糖标准液（mL） 0 蒸馏水（mL） 1 葡萄糖含量（µg） 0 10 20 30 40 60 80在每支试管中立即加入蒽酮试剂，迅速浸于冰水浴中冷却，各管加完后一起浸于沸水浴中，管口加盖，以防蒸发。自水浴沸腾起计时，准确煮沸l0 min，取出，用冰浴冷却至室温，在620 nm波长下以第一管为空白，迅速测其余各管吸光值。以标准葡萄糖含量（µg）为横坐标，以吸光值为纵坐标，绘出标准曲线。2.植物样品中可溶性糖的提取：将样品粉碎，105 ºC烘干至恒重，精确称取1~5 g，置于50mL三角瓶中，加沸水25mL，加盖，超声提取10 min，冷却后过滤（抽滤），残渣用沸蒸馏水反复洗涤并过滤（抽滤），滤液收集在50mL容量瓶中，定容至刻度，得可溶性糖的提取液。3.稀释：吸取提取液2mL，置于另一50mL容量瓶中，以蒸馏水定容，摇匀。4.测定：吸取1 mL已稀释的提取液于试管中，加入 mL蒽酮试剂，平行三份；空白管以等量蒸馏水替代提取液。以下操作同标准曲线制作。根据A620平均值在标准曲线上查出葡萄糖的含量（µg）。三、结果处理： C × V总 × D样品含糖量（%）= ————————————— × 100% W × V测 × 106其中：C——在标准曲线上查出的糖含量（µg），V总——提取液总体积（mL），V测——测定时取用体积（mL），D——稀释倍数，W——样品重量（g），106——样品重量单位由g换算成µg的倍数

水提醇沉水提除蛋白脱色 脱盐

用水在80摄氏度下提取1-2小时，提取之后离心，取上清液，向上清液（水溶液）中加入乙醇，使乙醇的最终浓度达到80%，这时候多糖就会析出沉淀下来，因为多糖易溶于水，不易溶于乙醇溶液。

将原料浸没在水中，加热至50-100℃，保温20分钟-2小时，具体参数要看原料的性质，多糖会大部分溶解在水中，将多糖水溶液减压浓缩，喷雾干燥可以得到多糖的干粉。

溶剂提取法溶剂提取法[2]是从植物中提取多糖的常用方法，溶剂提取法首先要考虑的因素是选择溶剂，一般应遵循相似相溶的原则，即极性强的有效成分选择极性强的溶剂，极性弱的成分选择极性弱的溶剂。多糖是极性大分子化合物，应选择水、醇等极性强的溶剂。在所有溶剂中，水是典型的强极性溶剂，对植物组织的穿透力强，提取效率高，在生产上使用安全。它能用于各种植物多糖，被广泛应用。用水作溶剂来提取多糖时，可以用热水浸煮提取，也可以用冷水浸提。水提取的多糖大多是中性多糖。一般植物多糖提取多数采用热水浸提法，该法所得多糖提液可直接或离心除去不溶物；或者利用多糖不溶于高浓度乙醇的性质，用高浓度乙醇沉淀提纯多糖；但由于不同性质或不同相对分子质量的多糖沉淀所需乙醇浓度不同，它也可以用于样品中不同多糖组分的分级分离；还可按多糖不同性质在粗分阶段利用混合溶剂提取法对植物中不同的多糖进行分离；其中，以乙醇沉淀最为普遍[3]。刘青梅[4]等在紫菜粗多糖提取方式研究中，热水提取控制条件为：温度为20~100℃，水与紫菜的液固质量比为50:1，提取时间30~180min，经多次试验最终得率为。周峙苗[5]得到热水浸提羊栖菜多糖的最佳因素：浸提温度为煮沸(102℃)，pH为，浸提时间为3h，液固质量比为40:1。李战[6]对三种紫球藻的提取工艺研究表明，三种紫球藻的最佳提取工艺各不相同。铜绿紫球藻的最优提取工艺为乙醇浓度5%，乙醇用量为3倍体积，醇沉时间为。氯仿与正丁醇的比例4:1，样液与Sevag试剂的比例1:2，作用时间为15min。淡色紫球藻的最优提取工艺为乙醇浓度75%，乙醇用量为2倍体积，醇沉时间为1h，氯仿与正丁醇的比例3:1，样液与Sevag试剂的比例1:2，作用时间为45min。血色紫球藻的最优提取工艺为乙醇浓度50%。乙醇用量为1倍体积，醇沉时间为，氯仿与正丁醇的比例4:1，样液与Sevag试剂的比例2:1，作用时间为45min。酸碱提取法有些多糖适合用稀酸或碱溶液提取，才能得到更高的提取率。但酸碱提取法有其特殊性，因多糖类的不同而异。只在一些特定的植物多糖提取中占有优势，而且即使有优势，在操作上还应严格控制酸碱度[3]。因为某些多糖在酸性或者碱性较强时，可能引起多糖中糖苷键的断裂。另外，稀酸、稀碱提取液应迅速中和或迅速透析，浓缩与醇析而获得多糖沉淀。赵宇[7]等对海篙子多糖的提取方法研究发现，从硫酸根含量及粗多糖产率看酸提方法好于水提方法。具体方法为：100g海篙子干粉，加入1000ml HCL溶液提取。室温搅拌1h后过滤，重复操作三遍，合并滤液；滤液减压浓缩至总体积的1/5，再加入95%乙醇至乙醇浓度达30%，沉淀，离心除去沉淀中的褐藻酸，继续向上清液中加入乙醇至乙醇浓度达7%。室温放置过夜使沉淀完全，离心，沉淀干燥得海篙子粗多糖，多次试验算得平均产率为。孟宪元[8]等在茜草多糖提取研究中发现酸提相对多于水提，以稀酸提取茜草多糖，产品纯度较高。具体方法如下茜草根粗粉1000g 5%HCL浸泡、离心、取上清液加入ETOH并调节至浓度为7%，静置，2500rpm离心，收集棕色沉淀物，95%ETOH洗涤3次，用45%HCL溶解。加1%活性炭脱色，真空抽滤，滤液4℃过夜，弃去容器底部少许沉淀物。溶液置透析袋内，逆水法透析3d，冷冻干燥，得白色粉末状多糖约10g。Hayashi Katsuhiko[9]发明了一种从绿色藻类中提取酸性多糖的方法，而这种多糖用常规的热水法是无法得到的。具体过程为：将干燥的绿藻粉末制成悬浮液，热水浸泡提取或将含水绿藻直接用热水提取后离心分离，取粘稠的固状物，加入碱水，在pH≥10的条件下再进行搅拌提取，碱水提取液在搅拌的同时加入酸水调节pH值为，静置沉降后离心得酸性多糖。生物酶提取法酶技术是近年来广泛应用到有效成份提取中的一项生物技术，在多糖的提取过程中，使用酶可降低提取条件，在比较温和的条件中分解植物组织，加速多糖的释放或提取。此外，使用酶还可分解提取液中淀粉、果胶、蛋白质等的产物，常用的酶有蛋白酶，纤维素酶，果胶酶等。孟江[10]研究不同酶对大枣渣多搪提取效果的影响，根据多糖得率、多糖含量及蛋白质含量进行综合评分得到最适合的酶为复合酶2(先胰蛋白酶提取，后木瓜蛋白酶提取)，接下来依次是木瓜蛋白酶、复合酶、(木瓜蛋白酶+胰蛋白酶)、胰蛋白酶、胃蛋白酶(pH=)、胃蛋白酶(pH=)。复合酶2作用条件温和，多糖得率及含量较高，且蛋白含量较低，实为一种理想的酶提取剂。通过进一步正交实验考察得出最佳工艺：先用胰蛋白酶3%，40倍体积在pH=，65℃温浸后，再加木瓜蛋白酶，在pH=，50℃水温浸1h，过滤残渣加40倍体积水，迅速升温至80℃，然后温浸。此外，植物多糖的提取方法还有超滤法，超声波强化法，微波法等等。植物多糖的提取方法和技术在不断改进和创新，但对于同一种方法和技术又需在不同植物多糖的提取中研究考察。在选取提取分离方法的同时，应当根据目标多糖的特点、物理化学性质，综合比较，进行实验，选取最佳方法和提取工艺。