1、马尾藻多糖与多酚的提取及其活性研究:以广西北海涠洲岛特有的马尾藻为原料,探索了提取马尾藻多糖及多酚的最佳工艺。并分别对他们进行免疫及体外抑菌实验。 1.马尾藻多糖的提取及免疫实验 采用胶体磨机械破壁的方法对马尾藻进行预处理,破壁时间2分钟,80℃水浴10小时,过滤,离心,浓缩,用工业酒精沉淀出多糖,40℃真空干燥得多糖制品,提取率为。小鼠免疫实验表明,多糖剂量200mg/kg.d,400mg/kg.d,600mg/kg.d时对小鼠脾的重量显著增加,P<0.05:当多糖剂量为400mg/kg.d,600mg/kg.d时对小鼠腋下淋巴结的重量显著增加,P<0.05,对单核巨噬细胞的吞噬功能加强有显著影响,能明显提高小鼠碳粒廓清速率,提高吞噬指数α,P<0.05,并对巨噬细胞增生以及淋巴小结形成有明显作用;当多糖剂量为600mg/kg.d时对肝增重也达到显著水平,P<0.05。 2.马尾藻多酚的提取分离、含量测定及抗菌活性检验 不同的乙醇浓度、体积数及提取时间对褐藻多酚提取率的影响,实验表明:40ml65%乙醇提取2个小时对褐藻多酚的提取有显著影响(p<0.05),测得马尾藻中褐藻多酚的含量为7.777‰。采用纸片法对褐藻多酚的抗菌活性检验进行体外抑菌实验,结果表明当纸片法的褐藻多酚的浓度为140.055微克/每张时,对沙门氏杆菌抑菌效果明显,大肠杆菌次之,但对枯草芽孢杆菌抑菌效果不明显,对金黄色葡萄球菌不敏感。 2、马尾藻多糖对猪脾细胞免疫活性及其抗病毒活性的影响:采用MTT法测定不同浓度马尾藻多糖(Sargassum polysaccharide,SP)对正常猪脾淋巴细胞体外增殖及其感染猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PR RSV)后培养活性的影响,并用Griess和ELISA法分别检测细胞培养上清液中一氧化氮(NO)、白细胞介素2( IL-2)和γ干扰素(IFN-γ)的水平.试验结果表明:25~400 μg·mL-1的SP能协同伴刀豆球蛋白(ConA)显著促进T淋巴细胞体外增殖,400 μg· mL-1的SP显著促进脂多糖(LPS)刺激的B淋巴细胞体外增殖活性.SP提高正常猪脾细胞体外培养不同时间段的NO分泌量,与对照组比较,差异显著(P<);不同浓度SP提高PRRSV感染的猪脾细胞体外培养分泌NO量,与病毒对照组比较,培养8h时200 μg· mL-1SP、12 h时100~400 μg·mL-1SP、24h时100 μg· mL-1和400 μg· mL-1SP均能显著地促进NO分泌(P<).400 μg· mL-1SP极显著促进体外培养的猪脾细胞分泌IL-2( P<),100 μg· mL-1和400μg· mL-1SP显著促进PRRSV感染猪脾细胞IL-2和IFN-γ的分泌.结论:马尾藻多糖通过促进猪脾细胞增殖和分泌NO、IL-2和IFN-γ来调节免疫细胞活性和抗病毒能力.