实验医学杂志冠状病毒

北日报讯（记者张文君、王峻峰）从1月26日石家庄市召开的新冠肺炎疫情防控工作第22场新闻发布会上获悉，1月26日0至12时，全市新增新冠肺炎本土确诊病例4例，全部来自隔离点，其中藁城区2例、平山县2例；全市无新增新冠肺炎无症状感染者。截至1月26日12时，全市累计报告新冠肺炎本土确诊病例858例，现有新冠肺炎无症状感染者71例。1月25日12时至26日12时，石家庄市有29例新冠肺炎确诊病例治愈出院。截至1月26日12时，累计新冠肺炎确诊病例治愈出院136例，累计解除集中医学观察91例，累计死亡1例。冷链食品与群众生活息息相关，石家庄市通过把好冷链食品的入口关、检测关、流通关、销售关，确保冷链食品安全可控。市、县两级市场监管部门彻底摸排辖区销售、使用冷链食品的食品生产、经营单位，动态掌握冷链食品数量、流向、经销商的信息，实现冷链食品源头可追溯、流向可追踪。货物核酸检测结果为阴性后，食品生产经营单位方可开箱使用。加强对装卸、生产、加工等一线人员的个人防护，坚持每周进行一次核酸检测，确保流通环节从业人员不被病毒感染。督促销售企业实行上岗员工登记、测温、消毒、查验等防控制度，定期开展核酸检测，实行“绿码”上岗制。冷链食品销售单位要有专用通道进货、专区存放、专区销售，无报关单、出入境检验检疫证明、核酸检测报告及消毒证明文件、河北冷链二维码的不得销售。对于不落实提前24小时报备、不配合检测消杀、不使用河北冷链物品追溯系统、不分区存储、不亮码销售等销售单位停业整顿，坚决切断疫情传播途径。

病毒性肺炎，这是一种新型的病毒，对它的了解还有限。目前已经知道的，新型冠状病毒对热敏感，在56℃下30分钟就能被灭活。除此之外，75%的酒精、过氧乙酸、含氯消毒剂（氯己定除外）都能够有效地杀灭新型冠状病毒。其他方这是一种新型的病毒，对它的了解还有限。目前已经知道的，新型冠状病毒对热敏感，在56℃下30分钟就能被灭活。除此之外，75%的酒精、过氧乙酸、含氯消毒剂（氯己定除外）都能够有效地杀灭新型冠状病毒。其他方面，目前暂时只能参考其它冠状病毒的资料。冠状病毒在4℃的温度条件下，合适的维持液中为中等程度的稳定，-60℃可保存达数年。人冠状病毒对热较敏感，但随着温度升高，病毒的抵抗力下降，如229E型冠状病毒于56℃ 下10分钟或者37℃下数小时即可丧失感染性，萨斯病毒于37℃可存活4天，56℃加热90分钟（在这一个小方面，萨斯病毒比新冠病毒更顽固）、75℃加热30分钟能够灭活病毒。在酸碱方面，冠状病毒不耐酸不耐碱，对有机溶剂和消毒剂敏感，比较容易被杀灭。75%酒精、乙醚、氯仿、甲醛、含氯消毒剂、过氧乙酸和紫外线均可灭活病毒。冠状病毒当中的萨斯病毒可于室温24℃条件下，在尿液里至少存活10天，在肺炎患者的痰液中，在腹泻患者的粪便里能存活5天以上，在血液中可存活约15天。冠状病毒在塑料、玻璃、马赛克、金属等多种物体表面均可存活2～7天。在布料等透气的棉织物上可存活几分钟至1小时。复印纸表面上可存活2-3天。专家们目前认为，新冠病毒其与萨斯（SARS）病毒有极大的相似度，很多地方可以类比。这是目前对它的了解，预计我们对它的认识会快速更新。

在迎战新型冠状病毒肺炎疫情的过程中，体外诊断企业扮演了重要的角色。根据网络数据，2018年国内体外诊断产业市场约为600亿，体外诊断产业被纳入广州市发展IAB产业的重点领域。广州市黄埔区、广州开发区是广州生物产业发展的核心区。目前全区聚集超过600家生物医药企业，生物医药产业规模占广州市60%以上，体外诊断是其中一项核心产业。据悉，区内企业达安基因、万孚倍特、华银医药、和信健康、微远基因、赛默飞世尔等在1月25日前已经研发出新型冠状病毒检测试剂盒。广州金域医学检验中心、云康广州达安临床检验中心、华银医学检验中心及凯普医学检验所等为承担广东省重点人群排查的核酸检测工作的第三方检测机构。近日，南都记者就针对病毒的核酸检测产品的特点、紧急时期产品审批过程、第三方检测机构的检验流程等邀请企业的多位专家揭秘。顶级医学杂志《柳叶刀》(The Lancet)公布的新型冠状病毒(2019-nCoV)彩色照片。每日检测5000到1万份样本筛查是疫情防控中重要的一环，及时找出传播者，切断传播源，检测机构在其中承担着重要的责任。“我们安排检验人员三班倒工作，保证仪器24小时不停机。”金域医学感染性疾病学科负责人刘勇表示，隔天早上，各家医院和患者就能收到检验中心的反馈结果。作为全国最大的第三方医检机构，金域医学此前调动了200多名PCR检验员、3000人的医疗冷链物流团队积极投入疫情防控工作。早在2018年，金域医学便在广州呼吸健康研究院专家团队的指导下，按照P2+实验室建设标准建设了“临床呼吸道病毒诊断与转化中心”。作为广东省“三个必查”的主力军，从1月30日起，金域医学采用国家批准的新试剂和新检验方法，把筛查速度提升至原来的5倍，把日检测样本能力提升到1万人份。云康广州达安临床检验中心参与了广州市3个行政区与广东省7个地市的发热门诊筛查工作，春节前后，达安临检实验室迅速布局扩大PCR检测实验场所，组织200余人的技术团队，承担起每日1万例的样本筛查任务，样本量超出往常日产能数倍之多。华银医学检验中心也启动了14台PCR扩增仪和相关配套仪器，每日可检测5000份样本。短期研发成功在于过往的积累据了解，早在1月13日，达安基因在获得新型冠状病毒的基因序列数据后，迅速开展研发，第一时间研制出《新型冠状病毒（2019）核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）》，成为首批全国发布研制针对性检测试剂盒的两个厂家之一，同时也是广东省内首家。在该区广州科学城的华银医药，在1月13日就研发出《新型冠状病毒2019-nCoV核酸检测试剂盒（荧光PCR法）》，剂型可选常规液体或全组份冻干。微远基因用5天时间即研制成功《新型冠状病毒（2019-nCoV）核酸检测试剂盒（恒温CRISPR法）》。万孚生物子公司万孚倍特在1月20日宣布成功研发出新型冠状病毒呼吸道病原体多重核酸检测卡，打造出全自动全封闭的新型冠状病毒呼吸道病原体多重核酸检测模式。华银医药的研发总监蒋军解释说，之所以能在这么短时间内研发出来，在于以往的积累。“冠状病毒常见的几个亚型我们都有扎实的技术储备，我们获得第一条新型冠状病毒序列时，就马上启动新项目研发，在基因序列差异最大的区域设置检测靶点，并对新设计的实验方案进行验证，以最快的速度推出第一代产品。随着后续各种相关信息的增加，不断进行优化与评估。”而紧急情况下，试剂产品的审批程序也缩短了。“常规的话，要先将报告送到临检所检测，产品性能达到后要找3家医院做临床验证，再通过省级报到国家批准，”凯普生物只使用了9天的时间开发出试剂产品，目前他们的试剂产品还在等待答辩。谢龙旭介绍说，应急审批流程目前省略了中间伦理审批环节（临床试验方案及附件是否合乎道德），“特殊时期，在中科院武汉病毒所，广东疾控中心的样本检测结果都可以当成临床数据来上报。”实时荧光RT-PCR技术特异性强、灵敏度高检测病毒的方法有哪些？为什么荧光RT-PCR技术成为首选？目前主要的根据国家发布的《新型冠状病毒感染的肺炎诊疗方案（试行第五版）》，目前在鼻咽拭子、痰、下呼吸道分泌物、血液、粪便等标本中可检测出新型冠状病毒核酸。疑似病例具有呼吸道标本或血液标本实时荧光RT-PCR检测新型冠状病毒核酸阳性，或呼吸道标本或血液标本病毒基因测序，与已知的新型冠状病毒高度同源。云康集团中心实验室主任尹杰介绍说，“实时荧光PCR技术，是利用荧光探针在病毒核酸存在时通过酶的外切水解作用释放荧光，由PCR仪实时记录荧光强度，通过荧光强度分析判断是否有病毒核酸的存在。”蒋军表示，目前检测新型冠状病毒的方法除了实时荧光RT-PCR鉴定，还有基因测序和胶体金免疫层析法等，“目前的检测手段是PCR方法学，优点是特异性强、灵敏度高、快速、准确，可以实现一管多检。胶体金免疫层析法的灵敏度不够，在病毒浓度低的时候，会导致漏检。基因测序比较慢，价格也比较昂贵，适合科学研究但不适合作为筛查手段。”金域医学呼吸道疾病学科带头人、金域医学新型冠状病毒肺炎疫情防控转项小组检验组专家陈敬贤博士表示，还可以通过检查病人呼吸道标本中有无病毒的抗原成分。但是这个方法研发周期比较长，目前最好的就是核酸检测。加入内标保证检测质量一般来说，试剂产品检测靶点能覆盖1-3个病毒基因靶点。如由达安基因研发的检测试剂盒包含单基因、双基因、三基因检测，产品检测样本类型包括咽拭子、肺泡灌洗液和痰液，配合全自动提取设备，实验全程自动化处理。华银医药的产品覆盖冠状病毒3个靶点（ORF1a/b基因、N基因、S基因）及1个内源性内标RNase P基因。中山大学达安基因股份有限公司生产的新型冠状病毒2019-nCoV核酸检测试剂盒（荧光PCR法）检测可同时检测新冠病毒的（ORF1a/b基因、N基因）。企业在开发产品中还会加入内标，作为参照对比，保证检测质量。凯普生物科技股份有限公司首席科学家、副总经理谢龙旭博士介绍说,“凯普生物目前已经开发了两个平台，荧光PCR法和基因测序作为对比筛查。”PCR检测体系包含有内标引物，即人RNA B2M基因，来监测样本采集、提取过程，避免假阴性结果；另外设置防污染措施（加入一种酶），将可能存在的PCR产物污染充分降解，避免引起的假阳性结果。“荧光PCR法用于初筛，测出阳性，我们使用基因测序进行再确认。”华银医药应临床机构的要求，则在产品中加入人源性内参基因RNase P的检测，满足临床对样本质量控制的需要，降低假阴性率。新产品正在研制中，最快30分钟出结果早发现、早隔离是阻断新型冠状病毒传播的最关键、最有效的途径。定量检测、快速检测和快速确诊，同时满足常温运输、保存及使用，成为研发机构的重点攻克方向。尹杰向记者介绍了检测的流程：一次检测从样本处理到检测完成大约需要小时。过程大概包括2部分，一是核酸提取，通过自动化设备完成核酸提取，减少试验人员与样本的接触时间，大约30-40分钟；二是核酸检测，将提取的核酸加入到PCR反应液中放入PCR仪中完成扩增检测，此过程大约110分钟。”近日，为了研发新型冠状病毒常温快速检测试剂盒，位于广州科学城的广纳信捷与国家纳米中心的研发人员从年前开始，研发团队对引物和探针进行了理论设计和实验优化，使用迄今为止最高效的转录酶和扩增体系，不仅提高了扩增效率，而且大大降低了假阳性率。广纳信捷董事长马万顺介绍，该技术可以从新型冠状病毒感染的肺炎疑似病例、疑似聚集性病例患者的血液、尿液、呼吸道分泌物等样本中，即可确诊新型冠状病毒ORF1a/b基因和N基因、E基因，最快30分钟可出结果。据悉，广州国际生物岛的广州再生医学与健康广东省实验室也正在加快开发一种可以实现即时检测的方法，使用咽拭子，该技术只需要简易仪器即可在30分钟确定测试对象是否感染了新型冠状病毒，对检测环境的要求大幅降低。核酸检测是直接区别新型冠状病毒感染的直接证据近日，有媒体报道称多地出现感染者在确诊为阳性之前，多次核酸检测为阴性。如2月7日，新京报报道一位武汉到北京的发热肺炎患者三次咽拭子核酸检测为阴性，通过肺泡灌洗检测才发现新冠病毒核酸阳性。“如果标本采集不当、标本存放时间过长（病毒及核酸发生降解）等都会造成PCR检测结果出现假阴性。”蒋军表示，“任何一种检测手段都有该方法学的检测极限浓度，低于这个浓度的检测结果可靠性就会降低，甚至检测不到。目前的技术水平来说，RT-PCR的分子检测已经是检测极限浓度最低、适合筛查的方法学。”尹杰也表示，标本采集与标本保存时间不合适造成的假阴性情况比较多见。此外，他提出，有研究显示少数患者的感染部位仅限下呼吸道，而不在鼻咽部，所以咽拭子反复检测都是阴性，而CT显示症状不断加重的情况是存在的，对于这种特殊患者建议取下呼吸道的肺泡灌洗液用来做冠状病毒核酸检测。多位企业专家均表示，CT无法区别患者感染了哪种病毒，而核酸检测能直接甄别出是新型冠状病毒还是其它微生物感染，是直接的确诊证据。一号楼工作室出品采写：南都记者 张伊欣

目前，新型冠状病毒肺炎（COVID-19）的潜伏期最长基本是在两周左右。越来越多的人关心病毒在离开人体后在外环境中能存活多长时间。2月初的时候，广州首次在确诊患者的门把手上检测出新型冠状病毒核酸。近日，一项发表在《Hospital Infection》上的研究为我们提供了参考。该研究表明，如果新冠状病毒SARS-CoV-2与其家族成员有相似之处，那么它可能会在无生命物体上存活一周以上。根据美国疾病控制和预防中心(CDC)的说法，“目前还不清楚一个人是否可以通过接触带有病毒的物体表面，然后触摸自己的口、鼻或眼睛，从而感染病毒。”该研究团队表示，目前关于SARS-CoV-2病毒所知甚少，因此转向其它冠状病毒家族成员来寻找答案。冠状病毒是一大类可以感染人和动物的病毒，像果子狸、蝙蝠、竹鼠、獾等是冠状病毒的常见宿主。动物冠状病毒很少会感染人，如果病毒发生变异，就获得了感染人的能力。已知的人类冠状病毒有七种，其中四种 (229E、NL63、OC43和KHU1) 很常见，会引起轻到中度的呼吸道感染，例如普通感冒；还可引起儿童中耳炎。这些疾病都可以通过休息和非处方药治疗来应对。另外三种冠状病毒——中东呼吸综合症（MERS）、SARS以及现在的SARS-CoV-2会引起严重的症状，甚至会夺去人的生命。在这项研究中，德国格赖夫斯瓦尔德大学领导的研究团队回顾了关于冠状病毒家族中所有可用的人类和动物病毒文献，涵盖了22项研究。他们发现，人类病原体可以在物体表面持续存在，并在室温下保持传染性长达9天。但在30℃以上的温度下，持续时间较短。冠状病毒（除SARS-CoV-2外）在不同类型物体表面上的活性。数据来源：《Hospital Infection》当然，这是冠状病毒寿命的上限。但研究人员表示，平均而言，这种病毒可以在 铝、木材、纸张、塑料和玻璃等多种材料上存活4至5天。一些动物冠状病毒甚至可以存活超过28天。研究第一作者、格赖夫斯瓦尔德大学医院内科医生Gunter Kampf说：“ 低温和空气湿度高会进一步延长它们的寿命。”为了在总体上减少冠状病毒的传播，作者建议医院用次氯酸钠、过氧化氢或乙醇制成的各种溶液仔细消毒物体表面，并表示世界卫生组织对SARS和中东呼吸综合征（MERS）的建议非常有效。这些研究结果原本是为将来的教科书所定制的，但在这种情况下，作者认为最好提前公开这项研究发现。他们认为该研究结果也可能扩展到SARS-CoV-2病毒。汉诺威莱布尼茨大学的病毒学家Eike Steinmann说：“对不同的冠状病毒进行分析，结果都是相似的。”然而，这项研究所分析的冠状病毒中没有SARS-CoV-2。该团队表示他们没有关于COVID-19患者接触被污染表面后被传染的数据。该研究显示，MERS不像其他冠状病毒那样容易在人际间传播，但SARS的感染者打喷嚏或咳嗽时，传播就会相当有效。如果黏液落在表面，随后就会污染接触的人，即使接触是在初次暴露后几天发生的。考虑到SARS-CoV-2的威胁，出门戴口罩、勤洗手并确保公共区域消毒仍然是有效的防护措施。Kampf解释说：“例如，在医院，这些可以是门把手，也可以是呼叫按钮、床头柜、床架和附近的其他物体，通常是金属或塑料制成的。”参考文献：Persistence of coronaviruses on inanimate surfaces and its inactivation with biocidal agentsdoi: 中国生物技术网诚邀生物领域科学家在我们的平台上，发表和介绍国内外原创的科研成果。

现在石家庄的疫情已经没有了，控制住了。所以超市里带有石家庄产地的食品是安全的。放心吃吧，没事儿的。石家庄所有地方都已经解封，已经不存在疫情的问题，所以不要对此有所顾虑了。石家庄有什么好食品呢，我还不知道。总觉得石家庄没什么好吃的。是什么带包装的小产品之类的吧。

此次活动通过食品安全图片展和实地参观的形式，向消费者介绍了超市供应商管理、配送中心管理、收货检验过程、食品储存与加工、食品陈列展示、自由品牌管理和食品安全科普等内容。据超市工作人员介绍，无论在鲜食配送中心或门店，超市针对不同品类的生鲜商品的存储都有着严格要求，冷藏食品需要保持在0-5℃，冷冻食品保存在-18℃以下，其他生鲜商品保存在恒温环境。到达鲜食配送中心的生鲜产品测温合格后，需要在30分钟内进入各自的温度分区。每个生鲜配送中心都设有专业的快速检测实验室，对蔬菜、水果产品集中进行农药残留检测，避免不合格产品进入门店。 有不少消费者关心在超市购买的生鲜、散装食品来自何处，经历了哪些中间环节。对此，石家庄市食品安全办副主任、市食药监局副局长杜爱朝介绍说，新修订的《食品安全法》明确规定，国家建立食品安全全程追溯制度，“食品生产经营者有义务建立食品安全追溯体系，采用二维码等信息化手段采集、留存生产经营信息，保证食品可全程追溯，让消费者买得明白，吃得放心。”

新型冠状病毒的传播途径有哪些？

专家表示，病毒从人体出来后很快沉降，不会在空气中漂浮。从这个意义讲，空气中不会有病毒。但飞沫可以沉降，病毒可以落在物体表面，人可以通过手来接触到病毒。病毒在光滑的物体表面可以存活数小时，温度湿度合适的环境能存活一天，有发现可达到5天。病毒能够在人体之外存活多久？据英国国民保健制度（NHS）网站介绍，病毒离开人体后的存活时间取决于其所依附物体的表面情况，以及温度、湿度等环境状况。总体来说：病毒在不锈钢、塑料等非渗透性（防水）表面存活时间相对较长；在纤维织物、纸巾等渗透性表面存活时间相对较短。不同种类病毒存活时间也有差异，一些病毒可以在室内物体表面存活超过7天，不过其致病能力会在24小时内显著下降。例如，流感病毒能以飞沫形式在空气中存活数小时，低温会增加其存活能力。而在手上，流感病毒存活时间很短，大约5分钟手上的病毒数量就会降到很低水平。甲型H1N1流感病毒在木质表面上可持续48小时保持感染能力，在不锈钢、塑料表面上一般存活24小时左右，而在织物表面存活时间最短，病毒活性在8小时内会迅速下降为零。另外，对于部分病毒，在粪便中存活时间较长，可达数天至一周以上。如同属冠状病毒的 SARS 病毒，在腹泻病人的粪便中可以存活 5 天以上。目前，新型冠状病毒的生物学特性缺乏了解，有待进一步研究。参照SARS病毒的生物学特性作推测：其在塑料、玻璃、马赛克、金属、布料、复印纸等多种物体表面均可存活2~3天。在室温24℃条件下在尿液里至少可存活10天。存活不代表具有感染性1月28日，中国疾病预防控制中心主任、中国科学院院士高福接受央视采访时称，新型冠状病毒是一种囊膜性病毒，对体外环境很不适应，不到半小时就死掉，可以说环境耐力很差，但是环境里面会有一些活体细胞，病毒在活体细胞中存活时间会变长。但是，如果病毒附着在物体表面，自己的手触摸到被污染的物体表面后进食、揉眼睛等动作，通过接触传播则可能会导致感染。因此，科学研究的不断深入再次提醒我们要做好防护。戴口罩、勤洗手、做好家中物品的日常清洁，保持卫生间清洁，尤其是消毒马桶。这样不仅对新型冠状病毒有良好的预防作用，还能防其他病毒细菌趁虚而入！