方法名称： 葛根芩连微丸-葛根素的测定-高效液相色谱法应用范围： 本方法采用高效液相色谱法测定葛根芩连微丸中葛根素的含量。本方法适用于葛根芩连微丸中葛根素的含量测定。方法原理： 供试品用甲醇超声提取后，过滤，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外检测器检测，记录葛根素的吸收值，计算其含量。试剂：1.甲醇（色谱醇）2.二次重蒸水3.乙腈（色谱醇）4.甲醇仪器设备：1 高效液相色谱仪 色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂。 紫外检测器2 色谱条件 流动相：甲醇 乙腈 水(12：8：80)；流速： ml/min。 检测波长：250nm。 温度：室温。试样制备：1. 对照品溶液的制备精密称取葛根素对照品l0mg，置于25m1棕色量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密吸取1 ml，置10 ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。2. 供试品溶液的制备取葛根芩连微丸6袋(1g/袋)，研细。取其细粉约，置100m1具塞三角烧瓶中，精密加入甲醇50m1，称定，水浴加热回流提取1h，放冷至室温，精密称量下用甲醇补足损失的重量，摇匀，过滤。取续滤液，用μm微孔滤膜过滤，取续滤液作为供试品溶液。注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。操作步骤： 分别精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液各5μL 注入高效液相色谱仪，用紫外检测器测定葛根素的吸收值，计算出其含量。参考文献： 中国实验方剂学杂志，高效液相色谱法测定葛根芩连微丸中葛根素的含量，1999，5(6)，p10。
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