现在不允许的了
毕竟目标蛋白和内参蛋白在同一张膜上,就可以避免上面数据造假的情况发生。
知己知彼、百战不殆
对于靶蛋白,你要尽可能的了解它,就像了解晚饭吃了什么一样清楚。
① 蛋白丰度:比如要用人的血浆检测白蛋白,由于白蛋白的丰度是非常高的,如果直接检测,背景就会非常高,因此在对样品进行相应稀释后,得出的条带就会非常单一,相反,蛋白丰度低时,就需要适当增加上样量或者增加抗体浓度。
② 表达条件:有些蛋白需要药物或外界刺激才能检测到条带。
③ 蛋白表达的时效性:某些蛋白被刺激后,在某个时间段是有表达的,其他则不表达,so~ 要确定好时间,不然就要重做了。
④ 分子量的大小与实验难度息息相关,太大太小都不利于做 WB 实验: