发布时间：
我读研究生的时候，学校要求学生以第一作者身份公开发表至少一篇论文才能毕业。当时，学校还有一份垃圾期刊目录，罗列了很多以赚钱为目的但质量极差的期刊，学校不允许学生在这些期刊上发表。刚开始时，我对于论文也是完全没概念，不知道该从何处下手，非常担心能否毕业。后来，通过我的导师邬家炜教授和其他一些老师的指导，才让我对论文有了一些理解。 论文通常是科学（包括医学和经济学）、工程学或者人文科学研究成果的展现，研究的问题应该是前人尚未解决的问题，而不是把轮子重新发明一遍的问题，其核心在于创新。对于写好论文，著名物理学家杨振宁先生讲，能在众多论文中迅速找到那些品位高的，是成功的第一步。那么，对于初学者，如何才能快速的找到高品位的论文并写把论文写好？以下是我的导师邬教授从审稿专家视角给出的一种快速判断一篇论文的质量方法。 从结构入手阅读文章是效率最高的，阅读论文也一样。一篇完整的论文的结构一般依次包括：标题、作者（工作单位）、摘要、关键词、正文、参考文献、致谢等。初学者阅读论文，常把注意力集中在论文正文，这也无可厚非。但专家则不然，他们会采用以下方法快速阅读和评价论文。 第一，参考文献。参考文献通常包括作者、文献名称、期刊名称、期刊类型、发表年份等内容。很多人觉得参考文献仅仅作为对给你灵感的作者的致谢。其实不然，参考文献是判断一篇论文水平的重要依据。一是今天的学术研究，99%是N+1的工作，你的工作都是在前人工作的基础上进行的改进，参考文献就是N部分。二是参考文献质量决定了论文的水平，只有站在巨人的肩膀上，才能看得更远，如果一个人阅读的文章的水平很低，那写出的论文也好不到哪去。三是通过参考文献可以看出论文是否严谨，那些没把参考文献标注出来的论文都是不严谨的，水平高不到哪去。因此，邬教授讲，他拿到一篇论文后，首先是看论文的参考文献来初步判断论文水平。具体操作和要求如下： 首先，看发表年份。一般要求参考文献是近3年发表的，这样的文献比较新。当然，如果引用的文献是大师级人物的作品，则可以忽略发表年份。 其次，看期刊类型。期刊类型主要有专著[M]、期刊文章[J]、学位论文[D]、报告[R]、标准[S]等。其中，期刊文章[J]最优，因为期刊文章的专业性和时效性都是最强；学位论文[D]和报告[R]的质量比较难以判定，价值相对弱些；专著[M]的时效性等比较差，参考意义不大，除非是大师级人物的著作。 再则，看期刊名称，即文献的出处。当前，期刊的评价体系比较多，顶级的有《Nature》和《Science》，第二梯队的期刊有SCI、EI等，第三梯队就是国内的各种核心期刊（双核心期刊更佳）。总的来说，在很多领域，英文期刊的质量要优于中文期刊。另一个评价体系是看期刊的影响因子，一般中文期刊的影响因子在以上就算不错，以上算是优秀。 最后，看作者。院士、领域泰斗等大师级人物最优，如果刚好引用了审稿专家的文章也是可以给你的论文加分。 除综述类文章外，普通论文参考文献的质量远比数量重要，有些诺贝尔奖获得者的论文参考文献也就一两篇。综述类文章是就某一时间内，作者针对某一专题，对大量原始研究论文中的数据、资料和主要观点进行归纳整理、分析提炼而写成的论文。所以，综述类文章的参考文献数量会比较多，不过写综述的人一般是某个领域泰斗，普通人一般不会去写。 第二，摘要。很多人非常重视摘要的纂写，或许是希望给人有个好的第一映像，因此常把摘要当引言和综述写，用大段的文字叙述文章背景等内容。实际上，摘要是以提供文献内容梗概为目的，不加评论和补充解释，要求简明、确切地记述文献重要内容。 邬教授讲他看完参考文献后就会浏览一下文章摘要，主要是看文章结构，研究了什么内容，用了什么方法，得出（或提出）了什么结论（或成果），至于研究背景之类的，他基本不看。 第三，正文。正文是论文的核心，一般包括引言、背景及概念简介（综述）、提出问题、分析问题、解决方案、工作展望、结语等内容。评判正文的好坏主观性比较强，与审稿专家的水平能力关系较大，但还是有些套路可以遵循。 一是根据摘要描述的文章结构阅读，重点看文章的解决方案部分，主要看用什么研究方法，得出的结果，与别他人相比有什么优势，有无数据支持，是否符合逻辑。论文对于语法的要求并不太严格，更不要求语言有多生动出彩，只要能把研究的内容表达清楚就行。一篇论文的好坏与否，关键还是在于所提出的观点是否具有创新性和参考价值。 二是要重视论文综述部分，前面说论文99%是N+1的工作，综述就是N部分，是对参考文献内容的归纳。把综述写好，才能让论文的整体结构显得更加严谨，让读者清楚作者研究的来龙去脉。 三是论文评审只是论文生命周期的一环，论文在发表后还要接受同行评议，有不少起初看似水平很高的论文恰是在同行评议阶段被发现问题，甚至撤稿的。因此，写论文务必严谨，切勿做数据造假、抄袭等不道德的事情。 想要做成事，方向很重要，方向对了，步伐慢一点也总能到达目标。记得当年邬教授跟我们讲，通过了解审稿专家是如何审稿的，可以从另一个角度了解论文的写作套路，让我们在写论文的时候方向，少走弯路，把精力集中在创新上。
1 在正文中引用参考文献 一项科学研究取得的新成果通常是在前人成果的基础上的新进展，它体现着科学科技的继承和发展。如，基于已有的理论、方法、思想、实验手段等，使本研究获得了新进展，有了新发现；或是将一个学科中的方法移植到另一学科中并取得成功；或是对已有方法做了改进。当在论文中叙述研究目的、设计思想、建立的模型、与已有结果进行比较的时候，就要涉及到已有的成果。如果在涉及到前人成果的地方再把已有成果的具体内容抄到论文当中，不但占去论文的篇幅，冲淡论文的主题，而且抄写这些已发表过的、读者可以查找到的内容是毫无意义的。所以，在论文涉及到已有成果的地方，不去重抄已有的成果，而是指出登载这个成果文献(出处)，这种做法叫做引用参考文献。�引用了参考文献，就要在涉及前人成果的地方做一个标记，见到这个标记，读者就知道在这里引用了参考文献；按照这个标记在参考文献表中就能找到刊登这个成果的详细内容的文章。在正文中引用参考文献的地方加一个标记，称为参考文献的标注。标注的方法称为标注法。 2 参考文献着录的目的和作用 对于一篇完整的学术论文，参考文献的着录是不可缺少的。归纳起来，参考文献着录的目的与作用主要体现在以下5个方面。 1) 着录参考文献可以反映论文作者的科学态度和论文具有真实、广泛的科学依据，也反映出该论文的起点和深度。科学技术以及科学技术研究工作都有继承性，现时的研究都是在过去研究的基础上进行的，今人的研究成果或研究工作一般都是前人研究成果或研究工作的继续和发展；因此，在论文中涉及研究的背景、理由、目的等的阐述，必然要对过去的工作进行评价，着录参考文献即能表明言之有据，并明白交待出该论文的起点和深度。这在一定程度上为论文审阅者、编者和读者评估论文的价值和水平提供了客观依据。 2) 着录参考文献能方便地把论文作者的成果与前人的成果区别开来。论文报道的研究成果虽然是论文作者自己的，但在阐述和论证过程中免不了要引用前人的成果，包括观点、方法、数据和其它资料，若对引用部分加以标注，则他人的成果将表示得十分清楚。这不仅表明了论文作者对他人劳动的尊重，而且也免除了抄袭、剽窃他人成果的嫌疑。� 3) 着录参考文献能起索引作用。读者通过着录的参考文献，可方便地检索和查找有关图书资料，以对该论文中的引文有更详尽的了解。� 4) 着录参考文献有利于节省论文篇幅。论文中需要表述的某些内容，凡已有文献所载者不必详述，只在相应之处注明见何文献即可。这不仅精练了语言，节省了篇幅，而且避免了一般性表述和资料堆积，使论文容易达到篇幅短、内容精的要求。�5) 着录参考文献有助于科技情报人员进行情报研究和文摘计量学研究。 3 参考文献的着录原则 1) 只着录最必要、最新的文献。着录的文献要精选，仅限于着录作者亲自阅读过并在论文中直接引用的文献，而且，无特殊需要不必罗列众所周知的教科书或某些陈旧史料。� 2) 只着录公开发表的文献。公开发表是指在国内外公开发行的报刊或正式出版的图书上发表。在供内部交流的刊物上发表的文章和内部使用的资料，尤其是不宜公开的资料，均不能作为参考文献引用。� 3) 引用论点必须准确无误，不能断章取义。 4) 采用规范化的着录格式。关于文后参考文献的着录已有国际标准和国家标准，论文作者和期刊编者都应熟练掌握，严格执行。� 5) 参考文献的着录方法。根据GB 7714—87《文后参考文献着录规则》中规定采用“顺序编码制”和“著者�出版年制”两种。其中，顺序编码制为我国科技期刊所普遍采用，所以这里作重点绍。 4 顺序编码制 顺序编码制是指作者在论文中所引用的文献按它们在文中出现的先后顺序，用阿拉伯数字加方括号连续编码，视具体情况把序号作为上角或作为语句的组成部分进行标注，并在文后参考文献表中，各条文献按在论文中出现的文献序号顺序依次排列。� 顺序编码制参考文献着录项目 1) 主要责任者。是指对文献的知识内容负主要责任的个人或团体，包括专著作者、论文集主编，学位申请人、专利申请人、报告撰写人、期刊文章作者、析出文章作者等。多个责任者之间以“，”分隔，责任者超过3人时，只着录前3个责任者，其后加“等”字(英文用 et al )。注意在本项数据中不得出现缩写点“．”。主要责任者只列姓名，其后不加“着”、“编”、“合编”等责任说明文字。外文主要责任者用原著，姓名前后应遵重各国的习惯。作者不明时，此顶可省略。� 2) 文献名及版本(初版省略)。文献名包括书名、论文题名、专利题名、析出题名等。文献名不加书名号“《 》”。� 3) 文献类型及载体类型标识。根据GB 3469—83规定，以英文大写字母方式标识以下各种参考文献类型：专着[M]''论文集[C]''报纸文章[N]''期刊文章[J]''学位论文[D]''报告[R]''标准[S]''专利[P] 对于专着、论文集中的析出文献，其文献类型标识建议采用单字母“A”；对于其它未说明的文章类型，建议采用单字母“Z”。 对于数据库(database)、计算机程序(computer program)及电子公告(electronic bulletin board)等电子文献类型的参考文献，建议下列字母作为标识：数据库[DB]，计算机程序[CP]，电子公告[EB]。 电子文献的载体类型及其标识。对于非纸张型载体的电子文献，当被引用为参考文献时需在参考文献类型标识中同时标明其载体类型。建议采用以下标识：磁带(magnetic)[MT]'' 磁盘(disk)[DK]'' 光盘[CD]'' 联机网络(online)[OL]。 4) 出版事项(出版地、出版者、出版年、卷期号等)。出版地指出版者的城市名，对于同名异地或不为人们所熟悉的城市，可在其名前附加省名、州名、国名等。对于出版者中包含了地名，出版地不能省略，如，“北京：北京大学出版社”，不能写成“北京大学出版社”。�出版者为出版社名，可按来源的形式着录，也可以按公认为的简化形式缩写形式着录。如IRRI(原标识International Rice Research Institute)。出版年采用公元纪年，并用阿拉伯数字着录。如遇其它纪年形式时，可将原有的纪年置于“( )”内，如1705(康熙四十四年)。对于报纸和专利文献，要着录出版日期，其形式为YYYY-MM-DD.对于期刊的出版年份、卷号(期号)着录有以下3种形式：1980''92(2)：年，卷（期）； 1985(4)：年（期）； 1987，5：年，卷 5) 文献出处或电子文献可获得地址。 6) 参考文献起止页码。参考文献的最末一项一般为“页码”，指引文所在的位置编码。应着录引文所在的起始页码或起止页码，如为起止页，则在2个数字之间用“-”号(原来用“～”号)连接。如：10-12。若论文中多次引用同一文献上的多处内容，则应依次着录相应的引文所在。
1 文引用参考文献 项科研究取新通前基础新进展体现着科科技继承发展基于已理论、、思想、实验手段等使本研究获新进展新发现；或科移植另科并取功；或已做改进论文叙述研究目、设计思想、建立模型、与已结进行比较候要涉及已涉及前再已具体内容抄论文占论文篇幅冲淡论文主题且抄写些已发表、读者查找内容毫意义所论文涉及已重抄已指登载文献(处)种做叫做引用参考文献?引用参考文献要涉及前做标记见标记读者知道引用参考文献；按照标记参考文献表能找刊登详细内容文章文引用参考文献加标记称参考文献标注标注称标注 2 参考文献着录目作用 于篇完整术论文参考文献着录缺少归纳起参考文献着录目与作用主要体现5面 1) 着录参考文献反映论文作者科态度论文具真实、广泛科依据反映该论文起点深度科技术及科技术研究工作都继承性现研究都研究基础进行今研究或研究工作般都前研究或研究工作继续发展；论文涉及研究背景、理由、目等阐述必要工作进行评价着录参考文献即能表明言据并明白交待该论文起点深度定程度论文审阅者、编者读者评估论文价值水平提供客观依据 2) 着录参考文献能便论文作者与前区别论文报道研究虽论文作者自阐述论证程免要引用前包括观点、、数据其资料若引用部加标注则表示十清楚仅表明论文作者劳尊重且免除抄袭、剽窃嫌疑? 3) 着录参考文献能起索引作用读者通着录参考文献便检索查找关图书资料该论文引文更详尽解? 4) 着录参考文献利于节省论文篇幅论文需要表述某些内容凡已文献所载者必详述相应处注明见何文献即仅精练语言节省篇幅且避免般性表述资料堆积使论文容易达篇幅短、内容精要求?5) 着录参考文献助于科技情报员进行情报研究文摘计量研究 3 参考文献着录原则 1) 着录必要、新文献着录文献要精选仅限于着录作者亲自阅读并论文直接引用文献且特殊需要必罗列众所周知教科书或某些陈旧史料? 2) 着录公发表文献公发表指内外公发行报刊或式版图书发表供内部交流刊物发表文章内部使用资料尤其宜公资料均能作参考文献引用? 3) 引用论点必须准确误能断章取义 4) 采用规范化着录格式关于文参考文献着录已际标准家标准论文作者期刊编者都应熟练掌握严格执行? 5) 参考文献着录根据GB 7714—87《文参考文献着录规则》规定采用顺序编码制著者?版制两种其顺序编码制我科技期刊所普遍采用所作重点绍 4 顺序编码制 顺序编码制指作者论文所引用文献按文现先顺序用阿拉伯数字加括号连续编码视具体情况序号作角或作语句组部进行标注并文参考文献表各条文献按论文现文献序号顺序依排列? 顺序编码制参考文献着录项目 1) 主要责任者指文献知识内容负主要责任或团体包括专著作者、论文集主编位申请、专利申请、报告撰写、期刊文章作者、析文章作者等责任者间隔责任者超3着录前3责任者其加等字(英文用 et al )注意本项数据现缩写点．主要责任者列姓名其加着、编、合编等责任说明文字外文主要责任者用原著姓名前应遵重各习惯作者明顶省略? 2) 文献名及版本(初版省略)文献名包括书名、论文题名、专利题名、析题名等文献名加书名号《 》? 3) 文献类型及载体类型标识根据GB 3469—83规定英文写字母式标识各种参考文献类型：专着[M]''论文集[C]''报纸文章[N]''期刊文章[J]''位论文[D]''报告[R]''标准[S]''专利[P] 于专着、论文集析文献其文献类型标识建议采用单字母A；于其未说明文章类型建议采用单字母Z 于数据库(database)、计算机程序(computer program)及电公告(electronic bulletin board)等电文献类型参考文献建议列字母作标识：数据库[DB]计算机程序[CP]电公告[EB] 电文献载体类型及其标识于非纸张型载体电文献引用参考文献需参考文献类型标识同标明其载体类型建议采用标识：磁带(magnetic)[MT]'' 磁盘(disk)[DK]'' 光盘[CD]'' 联机网络(online)[OL] 4) 版事项(版、版者、版、卷期号等)版指版者城市名于同名异或所熟悉城市其名前附加省名、州名、名等于版者包含名版能省略北京：北京版社能写北京版社?版者版社名按源形式着录按公认简化形式缩写形式着录IRRI(原标识International Rice Research Institute)版采用公元纪并用阿拉伯数字着录遇其纪形式原纪置于( )内1705(康熙四十四)于报纸专利文献要着录版期其形式YYYY-MM-DD.于期刊版份、卷号(期号)着录3种形式：1980''92(2)：卷（期）； 1985(4)：（期）； 19875：卷 5) 文献处或电文献获址 6) 参考文献起止页码参考文献末项般页码指引文所位置编码应着录引文所起始页码或起止页码起止页则2数字间用-号(原用～号)连接：10-12若论文引用同文献处内容则应依着录相应引文所
.提纲，是一种概括地叙述纲目、要点的公文。它不把全文的所有内容写出来，只把那些主要内容，提纲挈领式地写出来。 提纲使用于汇报工作、传达会议精神和讲话发言。因为有些情况、材料很繁杂，又很具体，而且本人对它也特别熟悉，这些具体材料都装在脑海里，用不着一一写出来，只需把纲目列出，就可把有关材料串联起来。2.参考文献是指在学术研究过程中论文作者对某项著作或论文的整体进行借鉴或参考。它们不仅反映了论文的学术接受度和作者的科学态度和素质，也反映了论文本身的内涵和价值。它们还可以指导读者的进一步研究，避免重复工作，有重要的信息价值和学术价值。①体现研究者研究的基础。参考文献既可以反映论文的真实性与广泛性的研究依据，也可以反映论文的出发点。论文研究工作是在继承前人研究成果的基础上进行的。大部分的研究成果或研究工作都是对前人研究成果或研究成果的延续、深化和发展。所以，在论文中所涉及到的研究背景、原因和目的等进行的阐述，有必要对以往的工作进行评价。为读者评价论文价值和水平提供客观依据。②反应研究的差异。参考文献可以很容易地将本论文的研究成果与前人的研究成果区分开来。虽然论文的研究成果是作者自己写的，但是在解释和论证中引用前人的研究成果是不可避免的，其中包括方法、观点、数据和其他资料，如果将引用部分进行标记，那么其他人的研究成果就会非常清楚。体现了自己的研究能力、创新和价值。③尊重他人的知识成果。参考文献是前人研究成果的一种表现。引用参考文献是论文作者的权利，而记录参考文献是法律义务。引用前人的数据时应列出引用的参考文献。正确引用参考文献不仅表明论文作者尊重他人的劳动成果，也避免了抄袭和剽窃他人的嫌疑。如果引用他人的学术观点、数据、资料、结论等，但是又不真实、准确、规范的标明出处，作者就会被认为缺乏学术道德修养，被认为是剽窃或剽窃。④体现科学态度和索引作用。在撰写论文时引用和借鉴他人的科研成果是正常的，这是任何严谨的科研人员都无法回避的。对参考文献的真实、规范的标注可以说是所有作者都应该具备的素养。这不仅表明作者尊重知识和科学的态度和素质，而且为同一研究方向的人提供了参考信息。方便检索和查找相关书籍和资料。对论文中的引文有较为详细的理解，启发了他们的思维，便于进一步的学术研究。⑤节省论文的篇幅。在论文中，作者引用或借鉴他人的方法和观点来支持他将要展开的论点。如果他把所涉及的所有内容都写下来，有时很容易使论文的内容繁琐，重点不明。正确列出所有引用的参考文献，在论文中所有表述的内容凡是已有文献作者，则不需要详细描述，只需要标注参考文献即可。这不仅精练了语言，缩短了篇幅，还可以避免陈述和材料的堆积，使论文容易满足篇幅短、内容细的要求。⑥为读者推荐一批精选文献。参考文献可以为读者提供一些问题线索，帮助査阅原创文献，进一步研究作者引用的内容，从而验证自己的观点，解决自己的需要。
一篇高水平的论文不仅要有科学的分析论证，独到的学术见解，而且还要做到结构严谨、层次清楚、语句通顺、用词准确，有较高的可读性，才能被相应的期刊杂志所接受，得以尽快发表。科技论文写作的质量不但表明作者的学术水平和表达能力，也直接影响刊登该文的期刊水平。主要内容第一部分 写论文的几个常见问题第二部分 高水平科技论文的写作要点第一部分 写论文的几个常见问题一、什么样的文章令编辑头痛二、什么样的文章易被编辑枪毙三、优秀论文的五个要素四、写作前应思考的几个问题五、为什么要发表科技论文六、如何选题?七、科技论文的结构八、核心期刊问题1什么样的文章令编辑头痛• 文章写作无层次，看起来混乱; 文章写作不流畅，读起来生硬;• 语句错误，用词不当，标点符号乱用;• 篇幅太长，次要事项说得太多，前言过长; 语句罗嗦、文不对题，让人费解;• 参考文献著录不全 。2、什么样的文章易被编辑枪毙• 缺乏创新性，重复别人的工作;• 内容太陈旧，重复常识性内容;• 研究内容没有重要意义，或者过于狭窄;• 内容有明显错误，以偏概全;• 脱离实际，从仿真到虚拟;• 缺乏说服力，难以令人信服 .3优秀论文的五个要素1) 创新性创新性是指在基础研究或应用研究方面具有创造性的，高水平和有重要意义的最新研究成果。一篇论文或一项研究课规模不一定很大，但研究一定要深入，结果一定要深刻，要能反应研究者独到的见解,这样的论文就是高水平的论文。2) 可读性一篇科学论文的可读性是至关重要的，应当引起作者的高度重视。要求结论严谨，内容充实,论述完整,逻辑性强;论述深入浅出，表达清楚，简练;专业术语准确，前后一致，语言要规范生动。3) 信息量当你读完一篇文章后获得的新知识越多，说明它的信息量就越大。比如“多点测量”的信息量要比“6点测量”少得多，前者给出的是模糊的、不确切的信息，而后者则是清楚的，确切的信息。篇幅虽小但包含的信息量未必少，只要内容充实就是好文章。论文不以长短论英雄!
科技论文写作特点在于：文章正文以理论阐述和内容实现为主，文章测试结果最好是能够有实际案例或者实验结果数据作为支撑你论文创新的“证据”。你百度下：普刊学术中心，上面有很多关于这方面论文写作指导资料和学习教程，科技论文写作思路根据具体的切入点不同而不同，不可一概而论
1、性质不同：学士学位论文应能表明作者确已较好地掌握了本门学科的基础理论、专业知识和基本技能，并具有从事科学研究工作或者担负专门技术工作的初步能力，应能体现作者具有提出问题、分析问题和解决问题的能力。科技论文是科学技术人员或其他研究人员在科学实验（或试验）的基础上，对自然科学、工程技术科学、以及人文艺术研究领域的现象（或问题）进行科学分析。
2、特点不同：高等学校和科学研究机构的研究生，或具有研究生毕业同等学力的人员，通过硕士学位的课程考试和论文答辩，成绩合格，达到下述学术水平者，授予硕士学位。科技论文的学术性是科技论文的主要特征，它以学术成果为表述对象，以学术见解为论文核心。
3、分类不同：按照研究方法不同，科技论文可分理论型、实验型、描述型三类。学位论文一般分为学士论文、硕士论文、博士论文三个级别。
扩展资料：
注意事项：
在写论文时，会使用别人的理论、学说或者方法来解决你的问题，在分析和归纳时，也会利用别人的观点和数据来加强你的论证，最终才会得出一系列的结论。所有这些都是允许的。但是必须明白，学位论文说到底是用户的学术观点和学术成果的展示。
很多的学位论文（其实不仅是学位论文），并没有什么引文与标注的概念。其文献标注号就是乱放的。好像是，别人有，我也跟着胡乱地放上几个文献号。这也不能完全责怪学生，即使是中国高校的绝大部分教师都没有受到过引文规范的教育。
参考资料来源：百度百科-科技论文
参考资料来源：百度百科-学位论文
第一，小论文字数及重复率要求在职研究生小论文字数要求不会太高，一般在3000字到5000字左右就可以了，根据学员所学的专业内容以及自己的写作方向，把字数控制在这个区间内是比较好的，因为需要发表到期刊或者报纸杂志，或者其它刊物上，所以对文字量的把握一定要十分准确，因为太长或者太短不利于排版。所以这是要公开发表的，因此对重复率要求也比较高，通常重复率要求在10%左右，如果重复率过高会影响发表。第二，发表投递要注意的事项当学员完成论文写作发表论文投递的时候也要注意以下几个方面，首先就是投递的时机。我们要知道，尤其是研究生这种小论文，大家都是集中发表的，所有毕业生几乎都在同一时间发表论文，这时候大家就要尽早发表，因为越早发表就越容易抢到先机，毕竟大家有这么多人在学习研究生课程，而学的专业是有限的，所以相同专业的学员发表的论文内容可能比较相近，这时候后发的人可能就面临查重的问题，所以先发就能避免很多烦恼。另外要注意的一点就是，一定要把论文写作时候的参考文献标注清楚，以及文中引用的地方都要明确地标注出来，以脚注的方式标注。另外论文写作一定要有严谨的写作风格，避免错别字以及用词不当，因为公开发表要求质量较高。
Cfǎn yìng dàn bái
Creactive protein
CRP是一种急性期反应蛋白，能激活补体、促进吞噬并具有其他的免疫调控作用。测定CRP目前主要用免疫化学法，如单向免疫扩散、火箭免疫电泳和胶乳凝集法、ELISA法等。胶乳凝集试验与速率散射浊度法比较，具有高敏感性（）、特异性（）和准确性（98%），且简易、经济、快速，虽为定性试验、但可用滴度测定进一步得到半定量的结果。此处仅介绍胶乳凝集试验和ELISA测定法。
C反应蛋白
血液生化检查 > 蛋白质测定
乳胶试剂用纯化的抗人CRP抗体致敏，能和病人血清中CRP分子的每一个亚基结合产生凝集。用离心沉淀法1min即可呈现清晰凝集颗粒。阳性结果表示病人血清中CRP含量＞10μg/ml。
（1）CRP试剂（1ml）。
（2）CRP稀释液（50ml）。
试管中加入CRP稀释液，然后加血清1滴（50ul）。混匀，再加CRP试剂10ul，混匀离心（3000转/分）1min，用显微镜观察结果。有清晰凝集者为阳性；不凝集者为阴性。
（1）试剂可放于4～25℃，但不可冰冻，用时摇匀。应严格操作，尽量防止污染。具体可参考试剂盒说明书。
（2）适用于血清、胸、腹水、脑脊液等体液测定，但标本切忌用草酸盐抗凝剂抗凝。
（3）该试剂最大优点是快速、简便，试剂稳定也容易保存，且血清不需灭活，也不受RF干扰。
阴性（正常人血清含量＜10μg/ml）。
CRP是一种急性相蛋白质，正常人血清含量低于10ug/ml。在心肌梗塞、风湿活动、组织损伤、恶性肿瘤、手术创伤及各种急性或慢性感染等情况下，CRP在4～6h后可迅速增高；随着病情的好转，又会迅速下降至正常。C反应蛋白与组织损伤的程度成正相关。且不受其它急性相指标（如血压、呼吸、心率等）因素的影响，也不受常用的抗炎药物或免疫抑制药物的直接影响。故可作为急性炎症、组织损伤程度及治疗效果观察的首选指标之一。被微生物感染的患者血清中C反应蛋白，均有不同程度的升高。而细菌性感染比病毒性感染的病人C反应蛋白升高更明显，故可作为细菌感染或病毒感染疾病的鉴别诊断指标之一。患急性或慢性风湿病，血清中C反应蛋白含量有着明显差别，急性时增高明显。此外，检测C反应蛋白可提供术后有无感染的依据。通常在手术后3～5天C反应蛋白含量恢复正常。若持续不降或再次升高，则表示发生了感染或伴血栓性栓塞症。慢性风湿性关节炎、系统性红斑狼疮等疾病。在活动期C反应蛋白也多见升高，肝硬化和慢性进行性肝炎亦可升高。若肾移植时血清中C反应蛋白显著升高，则说明移植后有排异现象。心肌梗塞者，此蛋白也见升高。恶性肿瘤或转移时，C反应蛋白增高，而良性肿瘤却不增高。白血病C反应蛋白增高者，应考虑并发感染。
（1）试剂可放于4～25℃，但不可冰冻，用时摇匀。应严格操作，尽量防止污染。具体可参考试剂盒说明书。
（2）适用于血清、胸、腹水、脑脊液等体液测定，但标本切忌用草酸盐抗凝剂抗凝。
（3）该试剂最大优点是快速、简便，试剂稳定也容易保存，且血清不需灭活，也不受RF干扰。
投稿须知凡是和生物医学有关或者是生物科学最新研究领域的论文均可投稿，因为我们旨在办一个以生物医学为主的综合性生命科学杂志。我们会在最短时间内对来稿做出录用与否的答复，欢迎从事自然科学领域的各个专业科研人员、研究生踊跃投稿，我们将为广大的研究人员提供相对较高的稿酬。 文稿要求◆基本要求：1.本刊重视论文的原创性、科学性、先进性、实用性，强调新颖性与创新点。2.投稿论文应论点明确，资料可靠，结构完整、逻辑严密、层次清晰、图表规范、描述客观、论据充分、论证严谨、文字精炼。全文字数一般不超过5 000字(包括摘要、图、表和参考文献)。3.来稿一律进行检索查重，正文中连续30个字与已发表文献雷同且未明确注明出处，即视为抄袭；抄袭率超过10%，直接退稿。请在投稿前严格按照本刊《投稿须知与写作模版》整理全文。★文中所有数字、英文字母均须采用TimesNewRoman字体，字号与其所在段落的字体设置保持一致。全文段落采用倍行距，两端对齐（除图、表外）。l论文题目：三号宋体&TimesNewRoman，加粗，应简明确切地反映文章的主题，一般不超过25个字。l作者及单位：采用五号宋体&TimesNewRoman，姓名在文题之下，排好顺序，通讯作者用△（上标）标注。单位写在姓名下方，若各作者为不同单位，则需在姓名右上角以序号表示，工作单位应写全称，注明科室，后加省、城市、邮政编码和国籍。作者姓氏的英文字母需全部大写。英文单位书写格式为：科室/专业，医院/学院，所属高校/部门，城市，省份，邮编，国籍。l摘要和关键词：采用五号宋体&TimesNewRoman，字数不得少于300。关键词一般3-5个，之间用分号（全角）隔开。ABSTRACT要求实词一般不少于300个。l 基金项目：标明基金类别、项目名称及基金编号。作者简介：姓名（出生年-），性别，学历，职称，主要研究方向，电话，E-mail。通讯作者：姓名，性别，学历，职称，主要研究方向，E-mail。l正文格式及层次：全文采用五号宋体&TimesNewRoman字体。一级标题采用四号宋体，加粗；二级标题采用小四号宋体，加粗；三级标题采用五号宋体，加粗（标题最好不多于三级）。一级标题与二级标题后回车，空两格书写正文；三级标题后空三格直接书写正文。各标题下的内容用五号宋体&TimesNewRoman书写，标点符号使用中文全角。l正文中的表格：采用小五号宋体&TimesNewRoman，居中。表格必须为三线表格，表名位于表格上方；注释位于表格下方，左对齐、小五号TimesNewRoman。表名（表文题）需中英文对照，表内文字与表下注释只需显示英文形式（不要出现中文）。“表1”用“Table1”表示。l正文中的图片：采用小五号宋体&TimesNewRoman，居中，图名（图文题）和图序必须提供中英文对照（加粗），图内文字与注释只需显示英文形式（不要出现中文）。“图1”用“”表示。图片应保证良好的清晰度和对比度（像素300以上）。图片应标注缩放标尺。公式需要自行编辑，不得复制图片等格式的公式，且公式后面需用圆括号注明公式编号，示于公式行右端，全文公式统一依前后顺序编号。文中公式、表格、图的编排方式需统一。文中引用时仅需交代为“由或见图、公式、表…”。l符号用法：标点符号遵照国家标准GB/T15834-1995标点符号的用法。量和单位采用国际单位制遵照国家标准GB3100-3102-93。如：统计学符号t检验用小写“t”，F检验用英文大写“F”，卡方检验用希文小写“χ2”，样本相关系数用英文小写“r”，自由度用希文小写“υ”，样本数用英文小写“n”，概率用英文大写“P”（非斜体）等。文中所有计量单位与数字之间必须空一格，如50g，μ，10%。l参考文献：必须以作者亲自阅读的近2-3年发表的学术类论文为准，通常引用与论文观点或数据密切相关的国内外最新研究进展。本刊要求论著参考文献不得少于20条，综述不得少于30条。近5年发表的文献应占70%以上，其中近3年发表的文献比例不低于30%。对于已被某一期刊采用而尚未刊出的文章，可列入参考文献，但必须提供作者姓名、文献标题、期刊名称、年份（如有卷号，也需提供），然后加“[Epubaheadofprint]”。“参考文献（References）”（居中，五号宋体&TimesNewRoman）。本刊要求参考文献均统一采用英文撰写，中文文献必须写出其相应的英文翻译（可在国际、国内检索系统下载原文），标点符号均用英文半角。引文序号须用中括号“[n]”表示（在文中需置于文字的右上角）。引文作者姓名的第一个字母需大写，姓和名之间空一格，少于三位作者的应全部列出，之间用逗号隔开（英文半角）；三位以上作者只列出前三位，其余用“etal.”表示，“etal.”后加引文题目，题目后加文献标识符，标识符后加“.”，然后空一格加期刊名称。例：[1]WangPeng,YuMin,WangJia-jun,–9andSystemicInflammationResponseSyndrome[J].ProgressinModernBiomedicine(现代生物医学进展),2012,12(5):998-1000[2]李友邕,周碧燕,覃李线,等.急性呼吸道感染患儿白细胞计数、内毒素、C反应蛋白水平变化及临床意义[J].现代生物医学进展,2012,12(18):3522-3445LiYou-yong,ZhouBi-yan,QinLi-xian,[J].ProgressinModernBiomedicine,2012,12(18):3522-3445[3]ChapmanPB,HauschildA,RobertC,[J].NEnglJMed,2011,364(26):2507-2516[4]HumphrisJL,JohnsAL,SimpsonSH,[J].Cancer,2014,14.[Epubaheadofprint][5] 徐光, 郭凌晨, 石莎, 等. 治疗阿尔茨海默病的新策略:脑啡肽酶[J]. 现代生物医学进展, 2009, 9(6): 1151-1153Xu Guang, Guo Ling-chen, Shi Sha, et al. New Strategy of Alzheimer’s Disease Treatment: Neprilysin[J]. ProgressinModernBiomedicine, 2009, 9(6): 1151-1153[6] 方玉. 用于增生性疾病的中频微电场/电流治疗技术研发[D]. 北京: 清华大学, 2010Fang Yu. The Development of intermediate Frequency Micro-Electric Fields/ Current Therapy Technique for Proliferative Diseases[D]. Beijing: Tsinghua University, 2010[7] 中华人民共和国国家档案局. 科学技术研究课题档案管理规范(DA/T2-1992)[Z]. 1992-07-20The State Archives Bureau. Scienceand Technology Research Archives Management Practice (DA/T2-1992)[Z].1992-07-20[8] 档案馆建筑设计规范(JGJ25-2010)[S]. 北京: 中国建筑工业出版社, 2010Code for Design of Archives Buildings (JGJ25-2010)[S]. Beijing: China Construction Industry Press, 2010注：中图分类号采用《中国图书馆分类法》(第5版)进行分类。多个主题的文章可标识2个或3个分类号。文献标识码：论著类用“A”，技术方法类用“B”，管理性文章“C”，报道性文章“D”，文件、资料用“E”。
你算找对人了留下扣扣我下载给你
MTBE的反应机理：甲基叔丁醚是以甲醇和混合碳四（含有异丁烯）为原料，在酸性催化剂的作用下合成的，这是一个可逆的放热反应。
MTBE的生产技术：合成MTBE生产工艺主要是醚化工艺，根据醚化反应器的而不同，MTBE合成技术存在以下几种形式：固定床反应技术:固定床技术采用的是下流式固定床反应器，在70到100℃液相，甲醇与异丁烯在强酸阳离子交换树脂的作用下，反应生成MTBE。
该技术采用外循环取热方式来控制，用冷却水在反应器外移走反应热，用分馏塔分离产物MTBE和甲醇以及剩余的碳四馏分。此法用于含异丁烯浓度变化较大的碳四原料。尽管反应器用水冷却，但仍会出现热点，难于消除，且反应速率低，这类技术在近年来已较少采用。
膨胀床反应技术:该技术的主反应器采用上流式膨胀床，在生产过程中，反应原料自下而上经膨胀床反应器催化剂床层。达到一定值后，催化剂床层便开始膨胀，由于催化剂床层受到轻微的扰动，有利于提高催化剂的活性，加快反应床层的传热过程，有利于反应的进行和反应热的扩散，使床层温度分布均匀，不存在局部热点。
此方法投资少，结构简单，催化剂装卸方便，但操作弹性较小。硫酸催化技术:该技术是将一定比例的原料送人第一反应器中，待反应混合物预热至70℃时，与硫酸混合，在一定温度下将混合物送入第二反应器中。
最后反应混合物进入分离器分离有机相和酸相，在分离器中回收得到的硫可循环使用，有机相则进入水洗塔，用NaOH含的循环水中和酸，生成Na2SO4和H2O。
参考文献标准格式如下：
一、期刊类[J]
【格式】[序号]作者。篇名[J]。刊名，出版年份，卷号(期号)：起止页码。
【举例1】安心，熊芯，李月娥。70年来我国高等教育的发展历程与特点[J]。当代教育与文化，2020，12(06)：75-80。
【举例2】[2]许竞。我国学历教育分化的证书制度溯源[J]。南京师大学报(社会科学版)，2020(06)：22-29。
二、专著类[M]
【格式】[序号]作者。书名[M]。出版地：出版社，出版年份：起止页码。
【举例1】葛家澍，林志军。现代西方财务会计理论[M]。厦门：厦门大学出版社，2001：42。
三、报纸类[N]
【格式】[序号]作者。篇名[N]。报纸名，出版日期（版次）。
【举例1】[1]葛剑雄，陈鹏。地名、历史和文化[N]。光明日报，2015-09-24(011)。
四、论文集[C]
【格式】[序号]作者。篇名[C]。出版地：出版者，出版年份：起始页码。
【举例】伍蠡甫。西方文论选[C]。上海：上海译文出版社，1979：12-17。
五、学位论文[D]
【格式】[序号]作者。篇名[D]。出版地：保存者，出版年份：起始页码。
【举例】郝桂莲。反思的文学：苏珊·桑塔格小说艺术研究[D]。四川大学，2014。
六、研究报告[R]
【格式】[序号]作者。篇名[R]。出版地：出版者，出版年份：起始页码。
【举例】冯西桥。核反应堆压力管道与压力容器的LBB分析[R]。北京：清华大学核能技术设计研究院，1997：9-10。
七、其他[N]
【格式】[序号]颁布单位。条例名称。发布日期。
毕业论文的参考文献应该怎么写 什么是论文的参考文献呢?论文的参考文献是在学术研究过程中,对某一著作或论文的整体的参考或借鉴.征引过的文献在注释中已注明,不再出现于文后参考文献中.那论文的参考文献应该怎么写呢?下面我们介绍几种论文的参考文献的写法和参考范文：1.专著、论文集、学位论文、报告 (论文的参考文献) [序号]主要责任者.文献题名[文献类型标识].出版地：出版者，出版年.起止页码(任选). [1] 刘国钧，陈绍业，王凤 翥 .图书馆目录[M].北京：高等教育出版社，. [2] 辛希孟.信息技术与信息服务国际研讨会论文集：A集[C].北京：中国社会科学出版社，1994. [3] 张筑生.微分半动力系统的.不变集[D].北京：北京大学数学系数学研究所，1983. [4] 冯西桥.核反应堆压力管道与压力容器的LBB分析[R].北京：清华大学核能技术设计研究院，1997. 2.期刊文章 [序号]主要责任者.文献题名[J].刊名，年，卷(期)：起止页码. [5] 何龄修.读顾城《南明史》[J].中国史研究，1998，(3)：167-173. [6] 金显贺，王昌长，王忠东，等.一种用于在线检测局部放电的数字滤波技术[J].清华大学学报(自然科学版)，1993，33(4)：62-67. 3.论文集中的析出文献 [序号]析出文献主要责任者.析出文献题名[A].原文献主要责任者(任选).原文献题名[C].出版地：出版者，出版年.析出文献起止页码. [7] 钟文发.非线性规划在可燃毒物配置中的应用[A].赵玮.运筹学的理论与应用——中国运筹学会第五届大会论文集[C].西安：西安电子科技大学出版社，. ;
凯瑞化工股份有限公司的MTBE工艺技术、选择性加氢、丁烯-1（工艺包）已成功应用于宁夏石化、沧州石化、神华包头煤化工、呼炼、中化MTBE项目、大庆石化12万吨MTBE等等.........
现在，生物技术的发展更是突飞猛进，这必将促成生物检测方法的不断补充和完善。 下面是我为大家整理的食品生物技术论文，希望你们喜欢。
食品检测中的生物技术分析
摘要：近年来，食品安全问题得到了全社会的关注，食品检测技术得到了更多的重视，生物技术等新兴的食品检测技术也因此而得到了广泛的应用。文章在简要介绍生物技术的基础上，详细阐述了生物技术在食品检测中的应用，以期为生物技术的发展与应用提供新的思路。
关键词：食品检测生物技术应用
食品安全问题是由于食品中含有毒、有害物质，对人体健康产生危害而造成的公共卫生问题。近年来，食品安全问题已成为人们普遍关注的社会热点问题，引起了政府和公众的广泛重视。目前，国内的食品安全问题的产生既有政府监管不严、制度体系不完全的原因，也有食品检测技术不够科学先进的原因。随着食品工业的快速发展，对食品检测技术提出了更高的要求，传统分析方法难以满足当前食品检测的需要，灵敏度高、特异性强、简便快捷的生物技术逐渐在食品检测领域大放异彩，文章将对此进行详细论述。
一、生物技术概述
生物技术是利用生物有机体及其组成部分，或是利用其组织、细胞、酶来合成、转化、降解，从而实现生产产品等目的的技术。生物技术在食品领域的应用已经有几百年的历史，从最初的面包、酱油生产，如今已延伸到食品领域的各个方面，得到了长足的发展和不断的完善。现代生物技术是建立在细胞生物学等学科基础之上的高科技技术，包括细胞工程、酶工程、基因工程、发酵工程等诸多类技术。细胞工程是以动物、植物细胞及细胞融合技术为基础的一类生物技术，主要用于食品生产;酶工程是通过特定细胞酶来控制食品生产过程中的物质转化;基因工程是通过重组基因来改造食品生物特性，起到生产特殊产品的作用;食品发酵技术如今已发展为发酵工程学，用于预定食品及成分的生产。
二、生物技术在食品检测中的应用
生物技术在食品检测中的应用，表现在食品中微生物、转基因成分等对人体有毒有害物质的检测。例如借助细菌学、血清学方法可以检测食品中是否含有致病菌，但是这些传统生物技术方法操作繁琐，耗时较长，目前应用更多的是操作简便、快捷且精准的生物芯片、胶体金免疫层技术、PCR技术、酶联免疫吸附法、基因探针等生物技术。
1.生物芯片的应用
生物芯片技术是建立在现代生物化学、物理化学、计算机科学等诸多学科交叉的基础上的，检测原理是利用生物分子间的抗原、抗体等亲和反应或碱基对互补杂交，检测、分析样品中的成分。由于生物芯片技术可在小面积内对多种生物分子进行并行检测分析，分析量很大，因而检测效率较高，检测结果具有很好的可比性。
生物芯片包括基因芯片和蛋白质芯片。基因芯片是将基因探针固化在检测工具表面，利用软件分析检测工具与样品间发生的基因杂交信息，从而检测出遗传信息。基因芯片可同时进行定性定量检测，能够快速检测分析大量序列的杂交信息。蛋白质芯片的原理则是利用生物分子间的特异性结合来测定样品成分，具体操作与基因芯片技术类似。基于基因芯片和蛋白质芯片的原理及特点，生物芯片技术通常用于转基因食品、原料、病原微生物的检测。
2.胶体金免疫层技术的应用
一直以来，胶体金免疫层技术在医学领域得到了广泛的应用，近年来逐渐应用于食品检测领域。胶体金免疫层技术具有操作简单、耗时较短等优势，一般需要定性分析或半定量分析，主要用于有害微生物、药物残留、违禁药物的检测。该技术用于有害微生物的检测较多，例如检测食品中是否含有大肠杆菌、沙门氏菌、霍乱弧菌等致病菌，较为常见的检测方法是双抗体夹心法;用于药物残留的检测是通过制得的抗体抗原与药物残留反应来分析食品中是否含有黄曲霉毒素、磺胺类药物、氯霉素等残留;用于违禁药物的检测一般是利用竞争免疫层析法来分析食品中是否含有罂粟碱、吗啡等物质。目前国内应用胶体金免疫层技术仍处于初级阶段，尚未投入广泛的应用，还有待新型免疫层析产品的开发、研制。
技术的应用
PCR技术是上世纪八十年代产生的一种技术，借助体外扩增DNA来实现转基因食品以及病原微生物的检测。传统PCR技术早于1992年便用于病原菌的检测，但直到近年来才得到广泛应用，目前可用于检测沙门氏菌、肠出血性大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等。但在实际应用中，传统技术存在一些缺陷，无法定量检测，而且存在死细菌的环境下检测结果不准确，难以检测微生物毒素，因此在传统技术的基础上经过一系列改进和技术融合产生了多种改进的PCR技术，包括实时定量的PCR技术、PCR―DGGE技术、巢式及半巢式PCR技术等。定时定量的PCR技术是在传统技术中加荧光基团来实现实时检测，能够做定量分析，主要应用于检测外源基因污染、病原微生物、掺假量等，例如检测葡萄中的曲霉菌、肉骨粉中的牛羊源成分。PCR―DGGE技术在传统PCR技术基础上结合变性梯度凝胶电泳技术，不仅特异性强，而且敏感度高。巢式及半巢式PCR技术通过设计两对或1对半引物来降低假阳性结果的产生，使检测下限大幅度下降，检测结果通常无需其他方法再验证。
4.酶联免疫吸附法的应用
酶联免疫吸附法是利用免疫或酶促反应来进行食品检测，具有操作简便、特异性强、耗时短、灵活、可批量检测的优势。酶联免疫吸附法用于有毒有害物质的检测比常规培养法耗时少三至四天，而且无需特殊设备支持，结果易于观察辨别，样品易于保存，例如有研究用该法检测牛奶中的沙门氏菌敏感性100%、特异性，检测时间不超过3天，因而广泛应用在黄曲霉毒素等毒素检测、残留药物检测、过敏原检测、生理活性物质检测、转基因食品检测等领域。
探针技术的应用
DNA探针技术利用碱基对结合原理制成DNA探针，能够检测样品中的碱基序列，从而判定样品基因序列。由于该技术操作简便，而且检测结果精确度高，应用十分广泛，通常用于大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等检测。DNA探针技术主要有异相杂交和同相杂交两种技术，其关键在于针对检测目标构建相应的DNA探针，只有DNA探针的基因序列具有针对性和特异性，方能取得理想的检测结果。
三、结语
近年来，随着生物技术的发展和进步，其在食品安全领域发挥了越来越重要的作用，在食品检测的各个方面得到了广泛的应用。然而虽然生物技术普遍具有成本低、操作简便、效率高、特异性高等优势，但是在实际应用中各种生物检测技术均存在自身的局限性，需要结合实际需要灵活选择、搭配。为了更好的提高食品检测水平，解决食品安全问题，还需要开发新的生物检测技术和方法，对现有技术方法不断进行优化，这需要相关领域的专家学者持续不懈的努力
参考文献
[1]谢修志.生物技术在食品检测方面的应用[J].生物技术通报.2010(1).
[2]唐亚丽.生物芯片技术及其在食品营养与安全检测中的应用[J].食品与机械，2010(5).
[3]刘彦辉.浅议生物技术在食品检测方面的应用[J].黑龙江科技信息，2011(16).
[4]胡朝晖.生物传感技术在食品生物安全检测中的应用[J].现代生物医学进展，2009(17).
[5]吴彤.现代生物技术在食品检测领域中的应用[J].大众标准化，201l(S1).
[6]张奇志.DNA探针和PCR技术在食品检测中的应用[J].广东农工商职业技术学院学报.2007(23).
[7]刘辉，杨利平，张滨.PCR及其改进技术在食品检测中的应用[J].食品与机械.2008(4).
[8J水小溪，蔡乐，赵宝华.ELISA技术在食品安全检测中的应用[J].生命科学仪器，
点击下页还有更多>>>食品生物技术论文
PCR技术是一种体外酶促合成、扩增特定DNA片段的方法。下面是我整理的关于pcr技术论文，希望你能从中得到感悟!
技术的研究进展
摘要 PCR技术是一种体外酶促合成、扩增特定DNA片段的方法。因其高强的特异性和灵敏度以及检测速度快、准确性好等优点，已被广泛地应用于水产、微生物检测等许多领域。该文从PCR技术的原理及应用方面进行了综述，并对其发展做出了展望。
关键词 PCR技术;研究进展;应用
中图分类号 Q819 文献标识码 A 文章编号 1007-5739(2012)10-0047-02
PCR(polymerase chain reaction，PCR)即聚合酶链式反应，它是一种体外酶促合成，扩增特定DNA片段的方法。1985年，美国Karray等学者首创了PCR技术，并由美国Cetus公司开发研制[1]。随着科学技术的发展和突破，PCR技术已在多个领域得到广泛地应用，如微生物检测、兽医学、水产养殖等方面。由于该技术具有较强的灵敏度、准确度和特异性，又能快速进行检测，因而其应用领域也在不断延伸[2-3]。随着PCR技术的不断发展，在常规PCR技术的基础上又衍生出了许多技术，如多重PCR(mutiplex PCR)技术[4]、实时荧光定量PCR(real-time fluorescent quantitative PCR，FQ-PCR)技术[5]、单分子PCR技术[6]。
1 PCR技术原理
PCR技术是根据待扩增的已知DNA片段序列、人工合成与该DNA 2条链末端互补的2段寡核苷酸引物，在体外将待检DNA序列(模板)在酶促作用下进行扩增。PCR的整个技术过程经若干个循环组成，一个循环包括连续的3个步骤：第1步是高温条件下的DNA模板变性，即模板DNA在93~94 ℃的条件下变性解链;第2步是退火，即人工合成的2个寡核苷酸引物与模板DNA链3’端经降温至55 ℃退火;第3步是延伸，即在4种dNTP底物同时存在的情况下，借助TaqDNA聚合酶的作用，引物链将沿着5’-3’方向延伸与模板互补的新链[7]。经过这个循环后，合成了新链，可将其作为DNA模板继续反应，由此循环进行。循环进程中，扩增产物的量以指数级方式增加，一般单一拷贝的基因循环25~30次，DNA可扩增l00万~200万倍[1]。PCR反应的步骤很简单，但是具体的操作是复杂的，如退火温度的确定、延伸时间的长短以及循环数等。因此，不同的反应体系应该确定适当的反应条件，以避免假阴性或假阳性等情况的产生。
2 PCR技术的分类
在传统PCR技术的基础上，根据人们的需要以及各个领域的应用要求，又衍生出很多种类的PCR技术。新技术在各领域广泛应用并逐渐改进，为进一步的研究提供了基础。
实时荧光定量PCR技术
1996年，学者经过研究，在传统PCR技术的基础上，首创了实时荧光定量PCR技术，新技术已经应用至医学领域、分子生物学和其他基础研究领域。实时荧光定量PCR技术基于传统技术的优势，还具有实时性、准确性、无污染，实现了自动化操作和多重反应，是PCR技术研究史上从定性到定量的飞跃[8]。
荧光定量PCR技术最大的特点是能将荧光基团加入到PCR反应体系中，借助于荧光信号，累积实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析[9]。实时监测这一特点是常规PCR技术所不具有的，因为其对扩增反应不能进行随时的检测。常规PCR技术的扩增终产物需要在凝胶电泳等条件下才能进行，无法对起始模板进行准确的定量，而荧光定量PCR技术的反应进程可以根据荧光信号的变化做出准确的判断[10-11]。一个PCR循环反应结束之后，定量PCR仪可以收集1个荧光强度信号，荧光信号强度的变化可以反映产物量的变化情况，这样就可以得到1条荧光扩增曲线[12]。荧光信号在指数扩增阶段，PCR产物荧光信号的对数值与起始模板量之间存在线性对应关系，然后进行定量分析[13]。
多重PCR技术
多重PCR(mutiplex PCR)技术是PCR技术的一种，为同一管中加入多对特异性引物，与PCR管内的多个模板反应，在一个PCR管中同时检测多个目标DNA分子。多重PCR技术可以扩增一个物种的一个片段，也可以同时扩增多个物种的不同片段[14]。
在同一反应体系中，多重PCR技术进行多个位点的特异性扩增时，引物间的配对、引物间的竞争性扩增等会对扩增效果产生重要影响。一方面，如果能选择适宜的反应体系和反应条件，可极大地提高多重PCR的扩增效果[15]。主要包括退火温度、退火及延伸时间、PCR缓冲液成分、dNTP的用量、引物及模板的量等。另一方面，DNA的抽提质量也影响多重PCR扩增效率，如DNA抽提不干净或降解都将影响PCR扩增效果[16]。
单分子PCR技术(SM-PCR)
单分子PCR技术是在传统PCR技术的基础上发展的，基本循环过程相同，但在反应条件、模板数量、DNA 聚合酶选择、引物设计方面具有不同点。该技术是以少量或单个DNA分子为模板进行的PCR[17]。
单分子PCR技术反应中，DNA 模板浓度极低，这就要求模板有较高的质量。因为这是试验成败的决定性因素。在设计引物时，应该严格控制GC的含量和Tm值，同时尽量避免引物间存在可配对序列。在反应混合物模板数极低的情况下，若引物之间存在少量配对序列，扩增时极易形成二聚体，使反应无法进行，得不到所需要的产物[18]。由于单分子PCR技术反应的变性温度(96~98 ℃)大多比常规PCR技术(94 ℃)略高，因而对DNA 聚合酶热稳定性的要求也更加严格，需要有较好的热稳定性，以防止温度过高而使其失活。其变性时间(5~15 s)、退火时间及延伸时间也短于常规PCR技术[17]。
3 PCR技术的应用
PCR技术在水产上的应用
基因表达是检测某个基因在不同发育期或不同组织中的表达量变化，或受到某种试验处理过程中的影响而出现表达量变化的情况。有学者应用real-time PCR技术研究碳水化合物含量对翘嘴红鲴糖代谢酶G6Pase、GK以及PEPCK表达量的影响[19-21]，研究结果可为翘嘴红鲴饲料配方中的最合适糖含量提供理论依据。孙淑娜等[22]研究叶酸拮抗剂对斑马鱼心脏发育相关基因BMP2b及HAS2表达的影响，表明叶酸拮抗剂对早期胚胎的心脏发育影响较大，可导致斑马鱼心脏发育延迟及心脏形态异常，并下调斑马鱼心脏发育相关基因BMP2b及HAS2的表达，这可能是叶酸生物学活性受抑后导致心脏发育异常的机制之一。Sawyer et al[23]以斑马鱼的未受精卵、胚胎、仔鱼和成鱼为研究材料，采用实时荧光定量PCR技术，检测了P450aromA和P450aromB在不同组织的表达量，表明在各组织中均有2种基因的表达，但表达量显著不同，呈现组织特异性。
PCR技术在微生物检测上的应用
1990年，Bej et al[24]在利用多重PCR的方法检测了Leg-ionella类菌种和大肠类细菌，其结果是通过点对点方法固定的多聚dT尾捕捉探针和生物素标记的扩增DNA进行杂交来检测的。张志东等检测口蹄疫病毒(FMDV)持续性感染的带毒动物，表明实时荧光定量PCR技术具有快速检测、准确、客观等优势，较优于传统的检测方法[25-26]。Metzger-Boddien et al[27]对PCR-ELISA的方法进行了评价，结果显示，样品中沙门氏菌的检出率可以达到98%。
4 展望
传统PCR技术以及衍生出来的新型PCR技术自面世以来，已被广泛应用到生命科学的各个领域。随着技术方法的不断改进与完善，荧光定量PCR技术将会逐渐完善并广泛应用。多重PCR技术在食品病原微生物、非致病微生物及环境微生物检测中具有重要作用;未来的研究主要集中在去除食品抑制因子干扰、改进样品前处理技术等方面，其次是整合应用多重PCR与其他技术，必将在未来食品微生物检测中有非常好的应用前景。
5 参考文献
[1] 常世敏.PCR在食品微生物检测中的应用[J].邯郸农业高等专科学校学报，2004，21(4)：23-25.
[2] 唐永凯，俞菊华，徐跑，等.实时荧光定量PCR技术及其在水产上的应用[J].中国农学通报，2010(21)：422-426.
[3] 吴学贵.LPS刺激点带石斑鱼免疫相关基因的克隆与组织表达差异性分析[D].海口：海南大学，2011.
[4] 侯立华，黄新，朱水芳，等.双色荧光多重PCR技术及在禽流感病毒检测中的应用[J].生物技术通报，2010(1)：168-172.
[5] 查锡良.生物化学[M].7版.北京：人民卫生出版社，2009：483-485.
[6] 张杰道.生物化学实验技术PCR技术及应用[M].北京：科学出版社，2005：12-18.
[7] 谢海燕.黑线仓鼠LHR部分序列克隆及组织器官的表达差异[D].曲阜：曲阜师范大学，2011.
[8] KUBISTA M，ANDRADE J M，BENGTSSON M，et real-time pol-ymerase chain reaction[J].MoLecular Aspects of Medicine，2006，27(2-3)：95-125.
[9] AGINDOTAN B O，SHIEL P J，BERGER P detection of potato viruses，PLRV，PVA，PVX and PVY from dormant potato tubers by TaqMan real-timeRT-PCR[J].J Virol Methods，2007，142(1-2)：l-9.
[10] 李丽平.小麦慢锈品种叶片受条锈菌侵入后的木质素合成及调控研究[D].雅安：四川农业大学，2009.
[11] 薛霜，独军政，高闪电，等.实时荧光定量PCR技术研究进展及其在兽医学中的应用[J].中国农学通报，2010(7)：11-15.
[12] SCHUBERT J，FOMITCHEVA V，SZTANGRET-WISNIEWSKA J. Dif-ferentiation of Potato virus Y strains using improvedsets of diagnostic-PCR-primers [J].J Virol Methods，2007，140(1-2)：66-74.
[13] 袁继红.实时荧光定量PCR技术的实验研究[J].现代农业科技，2010(13)：20-22.
[14] 朱善元.生物检测技术PCR及其在兽医微生物检测中的应用[J].黑龙江畜牧兽医，1999(11)：21-22.
[15] 黄银花，胡晓湘，李宁，等.影响多重PCR扩增效果的因素[J].遗传，2003，25(1)：65-68.
[16] 陈诺，唐善虎，岑璐伽，等.多重PCR技术在食品微生物检测中的应用进展[J].生物技术，2010，37(10)：72-75.
[17] 刘连生.常规PCR技术与单分子PCR技术[J].医学信息，2010，23(11)：4379-4380.
[18] 顾超颖.汗孔角化病的临床分析，SSH1、ARPC3基因突变检测和表达谱分析[D].上海：复旦大学，2008.
[19] 唐永凯，俞菊华，刘波，等.翘嘴红鲌肝脏G6Pase催化亚基的克隆以及摄食和饲料中碳水化合物对其表达的影响[J].水产学报，2007，31(1)：45-53.
[20] 刘波，谢骏，苏永腾，等.高碳水化合物日粮对翘嘴红鲌生长、GK及GK mRNA表达的影响[J].水生生物学报，2008，32(1)：47-53.
[21] 俞菊华，戈贤平，唐永凯，等.碳水化合物、脂肪对翘嘴红鲌PEPCK基因表达的影响[J].水产学报，2007，31(3)：369-373.
[22] 孙淑娜，桂永浩，宋后燕，等.叶酸拮抗剂甲氨喋呤导致斑马鱼心脏发育异常及BMP2bHAS2表达下调[J].中国当代儿科杂志，2007，9(2)：159-163.
[23] SAWYER S J，GERSTNER K A，CALLARD PCR analysis of cytochrome P450 aromatase expression in zebrafish：gene specific tissue disyribution，sex differences，developmental programming，and estrogen regulation[J].General and comparative endocrinology，2006，147(2)：108-117.
[24] BEJ A K，MAHBUBANI M H，MILLER R，et PCR amplif-ication and immobilized capture probes for detection of bacterial patho-gens and indicators in water[J].Mol Cell Probes，1990，4(5)：353-365.
[25] ZHANG Z D，ALEXANDERSEN of carrier cattle and sheep persistently infected with foot-and-mouth disease virus by a rapid real-time RT-PCR assay[J].Journal of Virological Methods，2003，111(2)：95-100.
[26] ZHANG Z D，BASHIRUDDIN J analysis of foot-and-mouth disease virus RNA duration in tissues of experimentally infected pigs[J].TheVeterinary Journal，2009，180(1)：130-132.
[27] METZGER-BODDIEN C，BOSTEL A，KEHLE for analysis of food samples[J].J Food Prot，2004，67(8)：1585-1590.
点击下页还有更多>>>关于pcr技术论文
哈哈， 我写完了。 很容易的，抄你实习日志北。
跨细胞主动吸收过程 主要包含三个步骤：由刷 状缘进入细胞，由分子结构名为CaT1的通道介导；细胞内扩散，主要由胞质内维生素D依赖性 calbindin D 9k （钙结合蛋白，CaBP）介导；由细胞内排出，主要由CaATP酶介导，其中Na/Ca交换 在这一过程中发挥一定作用，尽管有研究显示细胞排出可以经维生素D上调，但该过程并不是钙吸 收的限速过程。 钙经刷状缘侧进入十二指肠细胞，这一过程由称为CaT1介导。