液体活检在肺癌中的研究进展论文

2016年6月FDA批准了首个EGFR液体活检技术，推进了肺癌精准医疗的进程，也进一步推进了液体活检的商业化。根BCC分析，2020年“液态活检”市场值将达220亿美元，中国也预测会有200亿人民币的市场。液体活检对科研界和企业界都有着很大的吸引力。近日，纪念癌症研究所（Memorial Cancer Institute）医学主任、医学博士 Luis E. Raez在接受采访时以肺癌为例分享了自己对液体活检的一些看法。那么，液体活检到底有多重要呢？未来会面临哪些挑战呢？液体活检到底有多重要？Luis E. Raez, MD目前肺癌的治疗大多数基于标靶，因而研究者们的目标是确定肿瘤的靶点。活检在这个过程中非常重要，但是组织活检并不那么简单，它的侵入性会给人带来伤害。基于血液或尿液的液体活检却不同。在获取相同信息的情况下，液体活检除了具有无创性之外，还具有快速、简便等优势，同时还能避免组织活检样本量缺乏的困扰；另外，研究人员还能通过液体活检来连续性监测疾病。目前医生只能通过CT或PET扫描来判断患者治疗的效应，通过肿瘤尺寸大小来预测患者病情的好转情况。Raez表示，液体活检使得医生可以通过血液中肿瘤的含量来监测治疗效果。简单的说，如果治疗成功了，血液中的肿瘤含量就会减少，如果治疗无效，那么血液中的肿瘤含量就会越来越多。对于病人而言，液体活检可以使他们暴露在较少的辐射中，例如CT或PET扫描会带来大量的辐射，而液体活检能让患者避免这种辐射，使得研究人员能够在伤害最小的情况下追踪肿瘤。Raez表示，如今液体活检技术已获得FDA批准，进入了商业化阶段，医生可以使用这项技术。在血液或尿液中寻找基因突变，这些突变信息或许能让患者避免具有伤害的疗法，取而代之的是更有效的疗法，这也是肿瘤学家为何不断地研究液体活检的原因。接下来液体活检要做什么？随着技术的发展，针对标志物的靶向疗法和免疫疗法给癌症治疗带来了变革。Raez认为，寻找更多的靶点和克服肿瘤耐药性是接下来所面临的挑战。Raez说道，“过去我们只能通过化疗来控制癌症，但这种方法会让患者掉头发，并且有肾脏损伤等副作用。如今靶向疗法可以避免这些危害的发生。但首先我们要确定具体的肿瘤和标志物。对于肺癌，目前我们有5种药物来针对5种靶标。如果标志物是EGFR，我们有3种药物来对付它。这种方法就是以最小的毒性实现杀死肿瘤的目的，它是一种科学的方法。”

靶向治疗在驱动基因阳性的晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者中疗效显著，表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKIs)已经成为NSCLC的常规治疗。随着临床研究的深入，EGFR的突变状态也已发展为全病程多次监控，以应对不断变化的病情。循环肿瘤DNA(ctDNA)是药物伴随诊断、反映疾病实时进展的优秀标志物，但其含量少、背景噪音高，对于检测方法有极高的挑战。数字PCR技术具有极好的灵敏度和特异性，搭配通量更高、位点更全、成本更低的检测试剂，将能更全面更快速的解析ctDNA，未来能更好的服务于临床。 近日，沧州中心医院宋翔教授团队和河北中医学院中西医结合肝肾病证研究省级重点实验室楚立教授团队与艾普拜生物合作，对“数字PCR panel检测”技术的各项性能进行了全面的评估，并用临床样本验证了其在ctDNA疗效监测上的实战效果，相关学术成果于2020年8月12发表在British Journal of Cancer杂志上(IF:5.791)。   研究方法:  本研究使用艾普拜生物研发的“dEGFR39”数字PCR panel检测试剂，可单次检测EGFR的39个突变位点，包括L858R、19Del和T790M等常见突变位点，以及L861Q、S768I、G719X、C797S(cis/trans)和20ins等罕见突变位点。本研究收集了30例NSCLC患者的回顾性FFPE组织和33例NSCLC患者的配对组织、血浆样本进行分析。   研究结果:   ▼“dEGFR39”试剂分析灵敏度达到0.01% “dEGFR39”检测试剂具有极高的灵敏度，远超ARMS-PCR方法。该研究比较了预期突变丰度(0.01%、0.05%、0.1%、1%、10%)与实测丰度的线性关系，R2接近1。 ▼“dEGFR39”试剂具有更高的血浆游离DNA突变检出率 以33例晚期NSCLC患者的组织样本突变检测结果(ARMS-PCR法)为对照，使用“dEGFR39”试剂盒测试配对血浆样本，T790M的检出率提高了60%。 持续采集33例患者血浆样本，同时用dPCR技术和SuperARMS PCR技术进行检测，“dEGFR39”发现8例患者的13份血浆样本为T790M突变，而SuperARMS PCR仅能检出69%(9份)的T790M突变。 ▼“dEGFR39”液体活检指导肺癌个性化治疗，提早数月提示肿瘤进展 在埃克替尼治疗368天的患者P-15血浆中，除了原L858R突变外，dEGFR39已检测到耐药位点T790M的出现，比影像学疾病进展提前121天。类似的，在具有19Del突变的P-25患者身上，也提前影像学43天观测到耐药突变位点的出现。患者P-23中，随着埃克替尼的治疗，dEGFR39检测到的L858R的突变丰度不断下降，CT也显示患者治疗有效。之后发现T790M丰度上升，及时更换治疗方案后患者病情又趋于稳定。   优势:   基于Naica数字PCR技术的“dEGFR39”panel检测方法可靠、灵敏、快速、位点多，在预测EGFR-TKIs治疗后的耐药、治疗监控及临床预后等方面体现了明显的优势。