6 YSL对BEL7402荷瘤裸鼠NK细胞杀伤活性的影响[4] 无菌条件下取5中各组小鼠脾脏,用MTT法检测YSL对BEL7402荷瘤裸鼠NK细胞杀伤活性的影响,实验步骤同4。 7 统计学方法 使用SPSS统计软件,各组资料采用方差分析,两两比较采用leastsignificant difference(LSD)检验,以P <05为有显著性差异。 2 结 果 1 YSL对正常小鼠NK细胞杀伤活性的影响 YSL剂量为160μg/(kg·d)及80μg/(kg·d)时能够增强正常小鼠NK细胞杀伤活性,剂量为160μg/(kg·d)时与生理盐水组比较具有显著性差异(P <05),结果见表1。 2 YSL对人肝癌BEL7402裸鼠移植瘤的影响 YSL剂量为160μg/(kg·d)时能够抑制人肝癌BEL7402裸鼠移植瘤的生长,与生理盐水比较具有显著性差异(P <05),肿瘤抑制率为23%。YSL剂量为80μg/(kg·d)时对BEL7402有一定的抑制作用,抑制率为69%,但与生理盐水组比较无显著性差异(P >05),结果见表2。 3 YSL对BEL7402荷瘤裸鼠NK细胞杀伤活性的影响 YSL剂量为160μg/(kg·d)时能够增强人肝癌BEL7402荷瘤裸鼠NK细胞的杀伤活性,与生理盐水组比较有显著性差异(P <05),结果见表3。 3 讨 论 原发性肝胆癌症的发病及致死率很高[5]。大约90%成人原发性肝癌为肝细胞癌[6],故本课题采用BEL7402人肝细胞肝癌细胞株制备裸鼠移植瘤模型展开研究,结果显示YSL可以显著抑制人肝癌BEL7402裸鼠移植瘤的生长,给药剂量为160μg/(kg·d)与80μg/(kg·d)时,抑瘤率分别为23%、69%。目前多肽类药物的抗肿瘤作用,正在引起专家学者们的广泛重视[7],如4个氨基酸的小肽Tuftsin在体情况下可以抑制肝癌、胃癌、黑色素瘤和裸鼠胆管癌的生长[8] ;从肝素结合细胞因子(HGP)中β链区域合成的五肽或六肽,表现出抗肿瘤细胞增殖的作用,在播散早期应用还能抑制肝转移的发生 [9]。YSL是一种新型短肽类抗肿瘤药物,其抗肿瘤作用机制尚不十分清楚。 肿瘤的发生和发展与机体免疫功能具有十分密切的关系。免疫力低下的人群肿瘤发生率高,恶性肿瘤发生后又能产生免疫抑制因子抑制宿主的免疫功能[10,11]。小分子肽类药物可以作用于机体的免疫系统,充分调动机体自身免疫系统的主动性,发挥抗肿瘤作用[12,13]。机体的抗肿瘤免疫学机制十分复杂,其中由T淋巴细胞、NK细胞、巨噬细胞介导的细胞免疫,在抗肿瘤免疫中起主要作用[14]。NK细胞杀伤肿瘤细胞不受MHC限制,也不需预先与抗原接触或显示任何记忆反应。NK细胞对肿瘤的杀伤优势表现为直接溶解和分泌细胞因子两个方面,其杀伤肿瘤既可通过穿孔素又可通过Fas 配基。NK细胞可以产生TNFα、IFNγ和IL1,这些细胞因子在NK细胞抗癌反应中有十分重要地位[15]。本研究证实,YSL可以增强正常小鼠NK细胞对肿瘤细胞的非特异性杀伤活性,抑制人肝癌BEL7402裸鼠移植瘤的生长,同时增强人肝癌BEL7402荷瘤裸鼠NK细胞的杀伤活性。裸鼠是一种先天无胸腺或仅有胸腺残迹或异常上皮的免疫缺陷动物。T细胞不能正常分化,缺乏成熟T细胞的辅助、抑制系杀伤功能,细胞免疫力低下,其体内非依赖T细胞免疫机制如NK及巨噬细胞具有较高活性 [16]。因此,YSL可能是通过增强NK细胞对肿瘤细胞的杀伤能力来抑制肿瘤的增殖。【参考文献】 [1] 傅正, 陆融, 李国立, 等 酪丝亮肽对人肝癌BEL7402细胞钙稳态影响的实验研究[J] 中国科学C辑:生命科学, 2005,35(3)262- [2]邱爽, 陆融, 赵岚, 等 三肽化合物酪丝亮肽抗肿瘤作用及对单核巨噬细胞激活作用机制的研究[J]中国肿瘤生物治疗杂志, 2005,12(2): 129-[3] 徐叔云, 卞如濂, 陈修 药理实验方法学[M]第3版 北京:人民卫生出版社, 1785-[4] 章元沛, 苏怀德 药理学实验[M]第2版 北京:人民卫生出版社, 1998, 137-[5] 韩锐 抗癌药物研究与实验技术[M] 北京:北京医科大 学中国协和医科大学联合出版社, 299-[6]American Cancer S Cancer facts & figures The American Cancer Sociey,s publication [M] USA: American Cancer Society I [7] Janin YL Peptides with anticancer use or potential[J] Amino Acids, 2003,25:1-[8] 雷新, 韩本立 Tuftsin 的合成及对裸鼠胆管癌模型的作用[J] 第三军医大学学报, 2002, 22:75-[9] Fazekas K,Raso E, Zarandi M, et Basic HGFlike peptides inhibit generation of liver metastases in murine and huma tumor models[J] Anticancer Res, 2002, 22:2575-[10] Ma D, Gu MJ Immune effect of tumor infiltrating lym phocytes and its relation to the survival of patients wothovarian malignancies[J] Tongji Med Univ, 1991, 11(4):235-[11] Maehara Y, Tomisaki S, Oda S, et Lymph node metastasis and relation to tumor growth potential and local immune response in advanced gastric cancer[J] Int J Cancer, 1997, 74(2):224-[12] Koji Teramoto, Keiichi Kontani, Yoshitomo Ozaki, et Deoxyribonucleic Acid(DNA) encoding a panmajor histocompatibility complex class Ⅱ peptide analogue augmented antigenspecific cellular immunity and suppressive effects on tumor growth elicited by DNA vaccine immunotherapy[J] Cancer Res, 2003, 63:7920-[13] Matsuzaki A, Sumioe A, Hattori H, et Immunotherapy with autologous dendritic cells and tumorspecific synthetic peptides for synovial sarcoma[J] J Pediatr Hematol Oncol, 2002, 24(3):220-[14] Koh CY, Ortaldo JR, Blazar BR, et NKcell purging of leukemia:superior antitumor effects of NK cells H2 allogeneic to the tumor and augmentation with inhibitory receptor blockade[J] Blood, 2003, 4067-[15] 蒋灿华, 陈万涛, 张志愿 NK细胞抗肿瘤免疫效应机制研究进展[J] 国外医学肿瘤分册, 2004, 31:486-[16] 魏泓 医学实验动物学[M] 成都:四川科学技术出版社,