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猪圆环病毒2型与猪附红细胞体混合感染的诊断与防治税光伟 韩旭 张成伟 洪洋 魏攀 指导老师：赵光伟西南大学荣昌校区动物医学系，荣昌 402460摘要:随着我国养猪业集约化程度的提高，生猪和种猪跨地域运输越来越频繁，使得猪群传染病的发生越来越复杂。在很多猪场，都同时存在多种病原的混合感染。2009年1月四川隆昌某猪场送检病猪3头。该场中部分猪只陆续发生高热、皮肤发绀、呼吸困难等症状，病程一般持续5～7天，发病猪一般以死亡为转归。不同年龄段的猪群中均有不同程度的发生，临床表现基本相似。通过临床症状和病理剖检，疑似猪蓝耳病病毒（PRRSV）、猪圆环病毒2型（PCV-2）、猪附红细胞体（E.suis）混合感染。据此笔者在西南大学荣昌校区动物疾病快速诊断中心做了确诊实验。关键词:圆环病毒2型 附红细胞体 混合感染 综合防治 Diagnosis and Treatmentof Porcine circovirus type 2 mixed infection Eperythrozoon Shui Guang WeiSouthwest China Normal University of Rongchang campus veterienary medicine department, Rongchang 402460, ChinaAbstract: Along with our country pig-breeding industry intensification degree's enhancement, the live pig and the kind of pig cross region transportation is getting more and more frequent, causes the pig group infectious disease's occurrence to be getting more and more complex. In many pig farms, simultaneously has many kinds of causes of disease the mixed infections. In January, 2009 Sichuan Longchang one pig farm deliver examines the sickness pig 3 heads. This partial pigs only one after another have symptoms and so on high fever, skin cyanosis, scant of breath, the course continue generally for 5~7 days, the morbidity pig take die generally as the extension turn over. In the disparity in age section's pig group has the varying degree occurrence, clinical manifestation basic similar. Split through the clinical symptoms and the pathology examine, I doubt that the sickness pigs mixed infection with PRRSV virus、PCV-2 virus 2 and E.suis. According to this,We decide to finish it in the southwest university of Rongchang campus animal disease fast diagnostic center.Key word: Porcine circovirus type 2 Eperythrozoon Mixed infection Integrated Control1 材料与方法1．1Bio-Rad PCR仪、菲恰尔（GL-16A）离心机、JUNYI紫外灯（JY04S-3C）、苏静安泰超净工作台、Pipet.Lite微量可调移液器等。所有实验均在西南大学荣昌校区动物疾病快速诊断中心进行。1．2猪圆环病毒（PCV）核酸扩增检测试剂盒、猪蓝耳病病毒（PRRSV）核酸扩增检测试剂盒均购自北京索奥生物技术有限公司。2 临床症状2．1病猪体温41～42℃，稽留热、精神沉郁、皮毛粗乱、心跳和呼吸加快、双侧性震颤，耳部、腹下、腹股沟、四肢出现不规则的紫斑，指压不褪色，有较浓的眼屎、眼结膜苍白、厌食或不食、呼吸困难、后躯无力、行走摇摆，病猪初期便秘，呈粪球状，小便深黄色，发病后期下痢和便秘交替出现。3 病料采集 对濒死期的或刚刚死亡的猪进行仔细剖检，无菌操作下分别采集心血、肝、脾、肾等病料，供实验室检测用。4 细菌学检查 4．1血液压片 取抗凝血或鲜血一滴，加3－4倍生理盐水稀释，盖上盖玻片，1000倍油镜下观察，可见大多数红细胞边缘呈锯齿状、星芒状或不规则状，并有微微颤动，即可诊断为附红细胞体感染阳性。判定标准:在油镜下检查20个视野，有25个以下附红细胞体的为感染+，有25－50个附红细胞体的为感染++，有50－70及70以上个附红细胞体的为感染+++。4．2组织涂片 将无菌采取的肝、脾、肾及淋巴结涂片，革兰氏染色镜检。5 PRRSV和PCV－2的PCR检测5．1核酸提取 病料RNA和DNA的提取分别用Trizol reagents(RNA提取液)和核酸提取液B（DNA）提取，按照说明书提供的方法进行。首先将血清稀释，取100ul释出血清加入500ul Trizol reagents（RNA提取液）充分震荡，混匀后室温放置5min。加入100ul氯仿，用力振荡15s，室温静置10min，4℃13，000 rpm离心5min。小心将上层水相转移到干净的离心管，加入等体积的异丙醇，充分混匀，13，000 rpm离心5min。弃上清，加入75％DEPC 乙醇，充分混匀，13，000 rpm离心5min，小心吸去大部分乙醇。将提取管口敞口在室温空气中干燥5min，待乙醇挥发干净，用20ul DEPC H2O溶解沉淀。5．2逆转录 根据标本数取逆转录反应管，取2ul上述获得的RNA并加入7ul PRRSV－SM RT MIX引物进行逆转录。PRRSV 逆转录的反应体系为25ul，反应条件为：30℃5min，42℃45 min后98℃5min灭活转录酶。PCV－2 PCR检测则省去RNA提取与逆转录步骤，直接进行相应的扩增。5．3扩增PCR PRRSV PCR扩增的反应体系为25ul。PRRSV PCR扩增反应条件为：94℃变性2min,93℃→2min，93℃ 30 s→58℃ 30s→72℃ 30s,共35个循环；PCV-2 PCR扩增反应条件为：93℃→2min，后93℃ 30s→58℃ 30s→72℃ 30s,共35个循环。5．4电泳检测 取15ul PCR扩增产物直接用加样枪点样于2％琼脂糖凝胶胶孔中，以5 v/cm电压，1 x TAE中电泳20min后，紫外灯下观察结果。用DL2000 Marker作为参照。PRRSV和PCV－2的阳性扩增带分别为396bp和143bp。6 结果6．1剖检变化 濒死期病猪的典型表现为：病猪尸体消瘦，不同程度的贫血和黄疸，体表皮肤、粘膜黄染，血液稀薄呈水样；皮下水肿，呈黄白色；体表和肠系膜淋巴结充血、出血和水肿；淋巴结肿大4～5倍，切面外翻，尤以腹股沟淋巴结、肠系膜淋巴结、气管和支气管淋巴结明显，切面多汁呈黄色；肺部的病变主要是肿胀、间质增宽，有散在的橡皮样硬块；肝脏变性且有轻微黄疸、肿大，呈黄棕色；脾脏肿大；肾脏水肿，颜色呈灰白色，覆盖有小出血点。部分病猪心肌变软，心包积液。6．2细菌学检查结果 6．2．1血液压片 1000倍油镜下观察，可见大多数红细胞边缘呈锯齿状、星芒状或不规则状,诊断为附红细胞体感染阳性，标记为：+++,结果见图2。6．2．3组织涂片 革兰氏染色镜检，未见细菌。6．3电泳检测结果：猪圆环病毒（PCV－2）为阳性；蓝耳病病毒（PRRSV）检测为阴性。结果见图1。 图1 PCV-2和PRRSV PCR检测结果 图2 血液压片油镜观察M：DL2000 Marker；1：PCV-2 PCR产物；2：PRRSV PCR产物7 防治措施7．1该病目前尚无疫苗预防，改进饲养管理，对发病严重的病猪立即淘汰，发病轻微的猪进行隔离治疗。用2％ ～3％的烧碱对猪舍进行彻底消毒，保持猪舍饲养用具的清洁卫生；切断附红细胞体病的传播途径。给予全价饲料增加机体的抗病能力，减少不良应激的发生。改进饲养管理，减少应激是控制继发感染的关键。特别是仔猪断奶后的3～4周是预防该病最关键最有效的时期，要降低饲养密度，尽量减少猪群的应激因素，做好猪瘟、猪伪狂犬病、猪细小病毒病、猪蓝耳病疫苗的接种工作，做好猪群平时药物预防工作，母猪在产前1周和产后1周在饲料中可添加土霉素等抗菌药物，仔猪在断奶前1周至断奶后1个月在饲料中可添加强力霉素等抗菌药，同时也拌料一些有预防作用的中药，如清温败毒散进行预防，以减少该病在猪群中流行。7．2猪圆环病毒是猪的免疫抑制性疾病，引起和继发感染的疾病已成为世界养猪业的大敌。目前仍无有效防治措施，采取的方法是控制继发感染，特别要加强断奶仔猪的营养和管理，采取药物预防，降低猪群死亡率，减少经济损失。7．3对症治疗 7．3．1治疗圆环病毒病目前尚无特效的治疗药物，应早发现，早确诊，早治疗。对发病不严重的猪只，选用新型的抗病毒剂如干扰素、白细胞介导素、免疫球蛋白、转移因子等进行治疗；同时采用黄芪多糖注射液并配合Vb1、Vb12、Vc肌肉注射，增强猪自身免疫力；另外，也要采用抗菌药物，控制继发感染，如氟苯尼考、阿米卡星、盐酸林可壮观霉素等配合治疗，尽量少用磺胺类药物和地塞米松进行治疗。7．3．2目前对猪附红细胞体病疗效较好的药物有长效土霉素，四环素，贝尼尔等，按说明剂量肌注24h后，可见临床症状改善，连用3～5d。另外，对阳性猪群的贫血猪，可应用铁制剂(右旋糖酐铁)、土霉素、Vb12、VC等对症治疗。8 小结与讨论8．1此次疫病根据流行病学、临床症状和剖检变化及实验室诊断，最后确诊为猪圆环病毒2型与附红细胞体混合感染。8．2猪圆环病毒病是由猪圆环病毒感染所引起的以免疫抑制为特征的一类病毒性传染病。PCV-2感染新生仔猪及断奶仔猪，使仔猪发生先天性震颤和断奶后全身消耗性综合征，是一种慢性消耗性疾病，导致断奶仔猪生长缓慢、发育障碍、机体免疫力下降、易继发其他疾病(附红细胞体病、弓形体病、猪瘟等)而加重病情。要抓住关键时期，减少应激，仔猪断奶后3～4周，是预防圆环病毒的最关键时期，最有效的方法和措施是尽可能减少断奶仔猪的应激。经分析，猪长途贩运，使动物机体产生一定的应激反应，加上抵抗力下降，特别是感染附红体和弓形体病后，进一步降低机体的免疫力，当遇到传染性疾病流行时，特别是遇到猪圆环病毒感染侵袭，就会造成病猪死亡率增高。8．3猪附红细胞体病是由猪附红细胞体引起猪的一种血液病，蚊虫是重要的传播媒介，尤其在多雨季节蚊虫易孳生，加上猪群感染圆环病毒，机体抵抗力下降，而发生猪附红细胞体病。防治该病应消灭蚊虫，切断传播途径，加强器械的消毒，提高管理水平。从现在的季节来看，正是春季，气温时高时低，忽热忽冷，春季又是病菌活动频繁季节，所以加快了疫病流行。另外，老鼠可传播多种疾病，若鼠害控制不力，则易引起疾病的发生，因此，必须控制鼠害。8．4为了减少疾病的发生，规模化养猪场必须坚持自繁自养，做到全进全出，加强平时消毒工作，这样尽可能地避免或减少疫病的传入和流行。8．5附红细胞体病的死亡率很低，但与猪圆环病毒混合感染后，死亡率就会显著上升，可达60％以上，这也是造成病猪死亡率增高的重要原因。采用综合措施后，该猪场的病情基本稳定，得到了有效控制，到2月下旬逐渐恢复正常。参考文献：[1] 马其国,商绍彬,申会刚. 猪圆环病毒2型诊断技术的研究进展[J]. 浙江畜牧兽医, 2008, 33(5): 7-9.[2] 谷训国. 猪附红细胞体病的鉴别诊断与防治[J].2008,(6): 81.[3] 苏双,吕雪峰. 猪附红细胞体病研究进展[J]. 兽医导刊,2008,(8): 25-27.[4] 孙波,王俊珍,窦续鑫. 猪附红细胞体病的诊治[J]. 湖北畜牧兽医,2007,(2): 39-40.[5] 刘殿忠. 猪圆环病毒与附红细胞体混合感染的诊治[J]. 兽医导刊，2008,(3): 43[6] 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西南大学荣昌校区和西南大学的不同如下：
1、西南大学荣昌校区是西南大学的一个分校区；而西南大学是中华人民共和国教育部直属高校，由教育部、农业部与重庆市人民政府共建，是“双一流”世界一流学科建设高校，位列国家211工程、985工程优势学科创新平台。
2、西南大学荣昌校区于2005年西南农业大学与西南师范大学合并，校区更名为西南大学荣昌校区；而西南大学由原教育部直属西南师范大学与原农业部直属西南农业大学于2005年合并而成。
3、西南大学荣昌校区是重庆市园林式单位，形成了“学校一体化管理、校区统筹、两院一部办学”的总体格局；而西南大学入选111计划、2011计划、卓越农林人才教育培养计划、卓越教师培养计划、百校工程、国家建设高水平大学公派研究生项目、国家大学生文化素质教育基地。
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题目：主标题 数据结构课程建设
副标题 ---网络教学平台的设计与实现
关键词：网络教学 asp 网络课程
摘要：本文简要介绍了关于网络教学的意义，以及我国网络教学的模式现状，网络教学平台的设计与实现
目录：
摘要-------------------------------------(300字)
引言-------------------------------------(500字)
一、网络教学(xx字)
1.1.网络教学现状-----------------------------
1.2.网络教学与传统教学的比较分析-------------
1.3.网络教学的优势---------------------------
二、网络课程(xx字)
2.1.教育建设资源规范-------------------------
2.2.我国网络课程模式现状与问题的思考---------
三、网络教学平台设计的理论基础(xx字)---------
四、网络教学平台功能描述(1000字)---------------
公告板--课堂学习--答疑教室--概念检索-------
作业部分--试题部分--算法演示--技术文章-----
--课件推荐--课件下载--资源站点--管理部分
五、网络教学平台的设计与实现(xx字)
5.1.课堂学习-------------------------------
5.2.公告板---------------------------------
5.3.概念检索-------------------------------
5.4.技术文章-------------------------------
六、数据库部分的设计与实现(1000字)-------------
七、用户管理权限部分的设计与实现(1000字)-------
八、结论(500字)
1.课题名称：
钢筋混凝土多层、多跨框架软件开发
2.项目研究背景：
所要编写的结构程序是混凝土的框架结构的设计，建筑指各种房屋及其附属的构筑物。建筑结构是在建筑中，由若干构件，即组成结构的单元如梁、板、柱等，连接而构成的能承受作用(或称荷载)的平面或空间体系。
编写算例使用建设部最新出台的《混凝土结构设计规范》gb50010-xx,该规范与原混凝土结构设计规范gbj10-89相比，新增内容约占15%，有重大修订的内容约占35%，保持和基本保持原规范内容的部分约占50%，规范全面总结了原规范发布实施以来的实践经验，借鉴了国外先进标准技术。
3.项目研究意义：
建筑中，结构是为建筑物提供安全可靠、经久耐用、节能节材、满足建筑功能的一个重要组成部分，它与建筑材料、制品、施工的工业化水平密切相关，对发展新技术。新材料，提高机械化、自动化水平有着重要的促进作用。
由于结构计算牵扯的数学公式较多，并且所涉及的规范和标准很零碎。并且计算量非常之大，近年来，随着经济进一步发展，城市人口集中、用地紧张以及商业竞争的激烈化，更加剧了房屋设计的复杂性，许多多高层建筑不断的被建造。这些建筑无论从时间上还是从劳动量上，都客观的需要计算机程序的`辅助设计。这样，结构软件开发就显得尤为重要。
一栋建筑的结构设计是否合理，主要取决于结构体系、结构布置、构件的截面尺寸、材料强度等级以及主要机构构造是否合理。这些问题已经正确解决，结构计算、施工图的绘制、则是另令人辛苦的具体程序设计工作了，因此原来在学校使用的手算方法，将被运用到具体的程序代码中去，精力就不仅集中在怎样利用所学的结构知识来设计出做法，还要想到如何把这些做法用代码来实现，
4.文献研究概况
在不同类型的结构设计中有些内容是一样的，做框架结构设计时关键是要减少漏项、减少差错，计算机也是如此的。
建筑结构设计统一标准(gbj68-84) 该标准是为了合理地统一各类材料的建筑结构设计的基本原则，是制定工业与民用建筑结构荷载规范、钢结构、薄壁型钢结构、混凝土结构、砌体结构、木结构等设计规范以及地基基础和建筑抗震等设计规范应遵守的准则。
结构，以及组成结构的构件和基础;适用于结构的使用阶段，以及结构构件的制作、运输与安装等施工阶段。本标准引进了现代结构可靠性设计理论，采用以概率理论为基础的极限状态设计方法分析确定，即将各种影响结构可靠性的因素都视为随机变量，使设计的概念和方法都建立在统计数学的基础上，并以主要根据统计分析确定的失效概率来度量结构的可靠性，属于“概率设计法”，这是设计思想上的重要演进。这也是当代国际上工程结构设计方法发展的总趋势，而我国在设计规范(或标准)中采用概率极限状态设计法是迄今为止采用最广泛的国家。
论文提纲怎么写如下：
1.内容要求：
论文提纲是对整个课题研究内容的综合设计与阐述，也是对于课题相关研究内容与研究走向的一个框架性的阐述与设计，所以研究者列出论文提纲，可以总体把控论文的思路。
2.书写技巧：
论文提纲的设计需要按照论文原有的设计思路与逻辑顺序进行整体的设计与书写，其中提纲的逻辑调理与内容设计较为重要，.提纲的书写顺序如下：
（1）先拟标题；
（2）写出总论点；
（3）考虑全篇总的安排：从几个方面，以什么顺序来论述总论点，这是论文结构的骨架；
（4）大的项目安排妥当之后，再逐个考虑每个项目的下位论点，直到段一级，写出段的论点句（即段旨）；
（5）依次考虑各个段的安排，把准备使用的材料按顺序编码，以便写作时使用；
（6）全面检查，作必要的增删。
二、论文写作范文模板样本（参考）
一、绪论
（一）选题背景、目的及意义
（二）系统开发环境介绍
二、系统分析
（一）可行性研究 ---------------------------------------------------必须有
（二）需求分析 ---------------------------------------------------必须有
三、系统总体设计
（一）系统功能模块设计
功能模块图-----------------------------------------------------必须有
（二）数据库设计
概念模型设计（ER图）-----------------------------------------必须有
逻辑模型设计（二维表）---------------------------------------必须有
基础医学临床医学综合报道烧伤研究专栏经验介绍 《南昌大学学报（医学版）》（原江西医学院学报）创刊以来一直定位准确,建设目标明确,有具体质量提高措施和规划，由此，历年来多次被国家和省部级新闻出版部门等评为优秀期刊（详见以下各列项），并被美国《化学文摘》和美国《乌利希期刊指南》以及中国核心期刊（遴选）数据库、万方数据-数字化期刊群、中文科技期刊数据库、中国学术期刊综合评价数据库、中国学术期刊（光盘版）、中国生物医学期刊引文数据库(CMCI)、中国科学技术期刊文摘(CSTA)数据库、中国学术期刊文摘、中国生物学文摘、中国生理学文摘、中国药学文摘、中国医学文摘等收录为刊源。其影响因子、总被引频次逐年提高。1）1989年全国高等学校自然科学学报优秀编辑质量三等奖2）1989年全国高等医药学院校优秀学报二等奖3）1992年全国优秀科技期刊评比三等奖（国家科委、中共中央宣传部、新闻出版署）4）1992年全省首届优秀科技期刊二等奖5）1993年华东地区优秀期刊三等奖6）1995年全国高等学校自然科学学报系统优秀学报一等奖（国家教育委员会科学技术司）7）1995年全省高等学校自然科学学报系统优秀学报二等奖（江西省教育委员会）8）1997年第二届华东地区优秀期刊奖9）1999年全国优秀高校自然科学学报及教育部优秀科技期刊评比三等奖（中华人民共和国教育部）10）1999年江西省高校自然科学学报评比一等奖11）2001年“中国期刊方阵双效期刊”（国家新闻出版署）12）2001年“《CAJ-CD规范》执行优秀奖”13）2004-2012年“中国科技核心期刊”14）2005-2006年中国科学引文数据库来源期刊15）2008年江西省优秀期刊三等奖16）2009年全国高校科技期刊优秀编辑质量奖17)2012年江西省第四届优秀期刊二等奖18）武汉大学RCCSE中国核心学术期刊19)2012年华东地区优秀期刊 主管单位：南昌大学主办单位：南昌大学主编：高国兰ISSN：1000-2294CN：36-1029/R地址：南昌市八一大道461号邮政编码：330006 1.文稿应具有科学性、新颖性和逻辑性，有理论性和指导实践意义。2.文稿要求论点鲜明、数据可靠、资料翔实、分析方法正确，语言精练、书写工整。3.研究类文稿和综述、讲座稿件全文在5000字左右，临床经验交流稿件全文在3000字左右。文章格式请按照科技论文的写作要求（分前言、对象与方法、结果、讨论），研究类文稿应另附150～200字中、英文摘要，3～5个关键词。英文摘要还应包括文题、作者单位、作者姓名、邮政编码。中、英文摘要应采用结构式著录：含目的（Objective ）、方法（Methods）、结果（Results）和结论（Conclusion）。4.文稿（可用复印件）要求打印在16开白纸上，字迹清楚，简化字以国务院1986年10月重新公布的《简化字总表》为准。数字请按国家语言文字工作委员会等七个单位公布的《关于出版物上数字用法的试行规定》书写。计量单位请用国际标准计量单位，外文需打字或用印刷体书写，并注明文种、大小写和正斜体。图请用白纸单面墨绘，尺寸应较计划刊出者大一倍。照片请用光面纸印出，要求清晰、层次分明。图和照片不得折叠和出现划痕，背面请注明图号、作者、文题和上下向。5.文稿中摘编或引用他人作品，请按《著作权法》有关规定指明原作者姓名、作品名称及其来源，在参考文献表中列出。未公开发表的资料请勿列入参考文献，必要时可在文中加注，说明作者、文题和来源。参考文献的著录格式，本刊采用顺序编码制，引用处依出现的先后以阿拉伯数字排序，并用方括号标注。6.来稿请自留底稿，无论刊登与否恕不退稿。收到本刊收稿回执后3个月后未接到本刊采用通知时，作者可自行处理。7.依照《著作权法》有关规定，本刊可以对来稿作文字修改、删节。对内容的修改，应征得作者许可。如作者不允许对内容修改，务请在来稿中注明。8.来稿请第一作者所在单位领导审核并附单位介绍信。来稿请勿一稿两投或多投，如该稿曾在学术会议上宣读或在内部刊物上刊出，或用其他文种发表过，请在投稿时加以说明。9.来稿首页作者单位后请注明单位所在城市名称及邮编。此三项请列于首页正文下方，并用横线隔开。项目资助课题请注明资助单位及编号。为方便联系，请留电话号码或E-mail地址。
你可以上知网上查查看看有没有，如果没有就不是，如果有就是核心期刊
发表SCI论文。南昌大学经济管理学院免盲审要求是发表一篇SCI且影响因子大于5的论文，论文免盲审的条件一般由各学校自己指定，不同的学校条件不同。
对内容看得还是比较细的，但是方法一般不怎么看。盲审首先看内容格式符不符合要求，比如说中英文摘要，目录，绪论等部分有没有呀？其次看主要看摘要写得够不够简洁，主题是否突出。主要内容一般不会有什么问题，也就会提一些格式问题。还有就是参考文献的格式与引用是否正确也是重点看的，基本上就这些内容。如果您对我的回答感到满意，请及时进行采纳，谢谢。