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1 稿件要求：文稿的应具有先进性、逻辑性、可读性和实用性，主题明确，资料可靠，文字精炼、重点突出；数据准确无误，采用有效数字表示，并作统计学处理。文稿请用电脑打印稿，不用稿纸格式，采用A4纸小四号字，1.5倍行距，一式三份，附上光盘或软盘。简化字以国务院1986年10月15日公布的《汉语简化字总表》的规定，通常可参照新版的《新华字典》。投稿时须附上作者和通讯作者简介（内容包括性别、出生年月、职称、毕业学校、学位，学术专长，电话和电邮地址）、全部作者的亲笔签名，单位推荐信。推荐信内容包括保证资料来源和版权的真实性，确保无一稿两投或多投、署名无争议等项。2 注意事项2.1 文 题 文题应简明扼要，反映文章的主题，中文文题一般以20个汉字以内为宜。2.2 作 者作者姓名用揩体，放在文题之下，按序排列，逗号分隔，排序应在投稿时确定，编辑期间不再改动。由多个单位合作撰写的文稿，请在每个作者名的右上角以阿拉伯数字注明；作者单位名称、所在省市（县）及邮政编码以圆括号附于作者序列之后。文题页的左脚注标明收稿日期、基金项目(属国家或部、省级以上基金或重点攻关课题请附证明,本刊优先处理)、第一作者和通讯作者的简介、作者姓名、出生年月、性别、职称、最高学历毕业年份及学校名称、学位、从事专业、联系电话（单位、传真、手机）、电子邮箱等。2.2 文稿字数文题应简明确切，一般不超过20个字。论著、基础研究、综述、专家笔谈、临床病例（病理）讨论全文一般不超过5 000字，病例报告和护理论文不超过1 500字。2.3 摘要和关键词论著和基础研究须附中、英文摘要。短篇论著须附中文摘要。摘要包括目的、方法、结果、结论四部分，采用第三人称撰写；文字精练、准确，包括重要数据，可独立成文。中文摘要限于400字以内，英文摘要须包括文题，所有作者姓名，用汉语拼音书写，姓全部用大写，名第1个字母大写，字间用连接号，如WANG Xiao-er；括号内写明作者单位名称、地址及邮政编码。英文摘要内容可比中文摘要更具体（500个实词以上）。中、英文摘要后另行列关键词。其他文稿在文题下另行列关键词。关键词可标引3～8个。关键词的选择尽量使用美国国立医学图书馆编辑的最新版《Index Medicus》医学主题词表（MeSH）所列的词，若无相应的词，处理方法有：①可选用直接相关的几个主题词进行组配；②可根据树状结构表选用最直接的上位主题词；③必要时，可采用习用的自由词排列于最后。各关键词之间用分号隔开。英文关键词第一个字母大写，勿用缩略语。2.4 医学名词和药名以1989年及其以后由全国自然科学名词审定委员会审定、公布，科学出版社出版的《医学名词》和《英汉?汉英生物学名词》为准，暂未公布者以人民出版社编的《英汉医学词汇》为准。题目及正文中药物名称应使用药典名或国际非专利药名，见《中华人民共和国药典》或中华人民共和国卫生部药典委员会编，化学工业出版社出版的《中国药品通用名称》，一般不用商品名。2.5 图表照片文稿的表图不应重复，按先后排序。线条图应墨绘在白纸上，以计算机制图者须提供激光打印图样和相关文件， 图形文件要求用tif格式 ，扫描图要求在600 线以上。每幅图应冠有图题，另纸打印，并标明在文章插入处。表格要有表题，放在表格上方，表格采用三横线表（顶线、表头线、底线）形式，表下注释中标明所使用的缩略语以及中英文全称。表可放在文章内，一般不必另纸打印。照片必须反差明显，层次清楚，背面用铅笔注明图号和方向。病理照片要求注明染色方法和放大倍数。请附上照片的tif 格式文件。2.6 计量单位计量单位应以1991年中华医学会编辑出版部编辑的《法定计量单位在医学中的应用》为准。单位名称与单位符号不可混合使用；分子分母的计量单位同用中文或者同用符号表示，如次/分或mmol/L。单位符号中表示相除的斜线不能多于一条，如ng/kg/h应改用ng?kg－1?h－1或ng/（kg?/h）的形式。2.7 数 字数字执行GB/T15835－1995《关于出版物上数字用法的规定》。公历世纪、年代、年、月、日、时刻和计数、计量数据均用阿拉伯数字表示。小数点前后超过3位数时，每三位数字一组，组间空1/4个汉字符。百分数的范围和偏差，前一个数字的百分符号不能省略。附有长度单位的数值相乘，书写格式为4 cm×3 cm×5 cm。测量数据须采用有效数字。2.8 统计学符号按GB3358－82《统计学名词及符号》的规定统计学符号全部用斜体书写。如①平均数用英文斜体小写 （中位数仍用M）；②标准差用英文斜体小写s；③标准误用英文斜体小写s ；④t检验用英文小写斜体t；⑤F检验用英大写斜体F;⑥χ2检验用希文小写斜体χ2；⑦相关系数用英文小写斜体r；⑧自由度用希文小写斜体υ；⑨概率用英文斜体大写P（P值前应给出具体检验值，如t值、χ2值、q值等）。2.9 缩略语文稿尽量不用缩略语，必须使用时首次出现处先叙述其中文全称，然后在括号内注出中文缩略语；首次出现的英文缩略语，应在其前写出中文全称，括号内注明英文全称，加逗号后书写英文缩略语。2.10 参考文献以亲自阅读过的近5年主要文献的原文为主，未公开发表的资料请勿引用。按GB7714－87《文后参考文献著录规则》采用顺序编码制，文内引用处的右上角依次列出，其书写格式如下： [期刊] 序号 作者姓名，英文名用大写，first name仅列第1个字母，作者不超过3人者全部写出、第3名以后作者用“等”或“et al”代替。文题. 期刊名（外文期刊以《Index Medicus》格式为准，不加缩写点），年，卷（期）：起页-止页. 例如： [1] 邓春玉，林曙光，钱卫民，等. 葛根素对大鼠心室肌细胞钠通道的影响[J]. 岭南心血管病杂志,2005,11(2):100-105. [2] HEESCHEN C, DIMMELER S, HAMM CW, et al. Pregnancy-associated plasma protein-A levels in patients with acute coronary syndromes: comparison with markers of systemic inflammation, platelet activation, and myocardial necrosis[J]. J Am Coll Cardiol, 2005, 45(2):229-237. [书籍] 序号 作者姓名. 书名. 卷次. 版次（第1版不写）. 出版地：出版单位（国外可用标准缩写，不加缩写点），年. 起页-止页或作者. 文题. 见：编者. 书名. 卷次. 版次. 出版单位，年. 起页-止页. 例如： [1] 冯建章. 当代心脏病学[M]. 广州：广东教育出版社，2000：1-13.3 刊登或退稿根据《著作权法》，本刊有权对来稿对文字进行修改和删节。凡有涉及原意的修改提请作者考虑，作者寄回的修改稿请附论文编号，按规定修回时间尽快寄回。修改稿逾3个月不寄回者，视作自动撤稿。文稿刊用即由本部通知缴交版面费，刊印彩图者另付彩图印刷工本费。本刊发给稿酬（包括光盘电子期刊等其他形式出版的稿酬），出版后即赠当期杂志2册。来稿采用与否，均由本刊编委会最后审定。根据“著作权法”，并结合本刊具体情况，来稿在接到我刊回执后6个月内仍未被采用或未退稿修改，则仍在审阅中。作者如欲投他刊，应事先与本刊联系。逾期6个月未被采用或未接到退稿、修改通知可自行处理，对不用稿件本刊一般仅给予退稿通知，请自留底稿。4 地址:广州东川路96号广东省心血管病研究所二楼233室《岭南心血管病杂志》编辑部，邮政编码510100。
一：专著、论文集、报告 [序号]主要责任者.文献题名[文献类型标识].出版地:出版者,出版年:起止页码(可选).例如：[1]刘国钧,陈绍业.图书馆目录[M].北京:高等教育出版社,1957:15-18.二：期刊文章 [序号]主要责任者.文献题名[J].刊名,年,卷(期):起止页码.例如：[1]何龄修.读南明史[J].中国史研究,1998,(3):167-173. [2]OU J P,SOONG T T,et al.Recent advance in research on applications of passive energy dissipation systems[J].Earthquack Eng,1997,38(3):358-361.三：论文集中的析出文献 [序号]析出文献主要责任者.析出文献题名[A].原文献主要责任者(可选)原文献题名[C].出版地:出版者,出版年:起止页码.例如：[7]钟文发.非线性规划在可燃毒物配置中的应用[A].赵炜.运筹学的理论与应用——中国运筹学会第五届大会论文集[C].西安:西安电子科技大学出版社,1996:468.四：学位论文[序号]主要责任者.文献题名[D].出版地:出版单位,出版年:起止页码(可选).例如：[4]赵天书.诺西肽分阶段补料分批发酵过程优化研究[D].沈阳:东北大学,2013.五：报纸文章[序号]主要责任者.文献题名[N].报纸名,出版日期(版次).例如：[8]谢希德.创造学习的新思路[N].人民日报,1998-12-25(10).六：电子文献 [文献类型/载体类型标识]：[J/OL]网上期刊、[EB/OL]网上电子公告、 [M/CD]光盘图书、[DB/OL]网上数据库、[DB/MT]磁带数据库 [序号]主要责任者.电子文献题名[电子文献及载体类型标识].电子文献的出版或获得地址,发表更新日期/引用日期.例如：[12]王明亮.关于中国学术期刊标准化数据库系统工程的进展[EB/OL],1998-08-16/1998-10-01. [8]万锦.中国大学学报文摘(1983-1993).英文版[DB/CD].北京:中国大百科全书出版社,1996.
写法如下：
一、[序号]期刊作者。题名[J]。刊名。出版年，卷(期):起止页码。
二、[序号]专著作者。书名[M]。版次(第一版可略)。出版地：出版社，出版年∶起止页码。
三、[序号]论文集作者。题名〔C〕。编者。论文集名。出版地∶出版社，出版年∶起止页码。
四、[序号]学位论文作者。题名〔D〕。保存地点：保存单位，年份。
五、[序号]专利所有者。专利文献题名〔P〕。国别：专利号。发布日期。
六、[序号]标准编号，标准名称〔S〕。出版地：出版者，出版年。
七、[序号]报纸作者。题名〔N〕。报纸名，出版日期(版次)。
八、[序号]报告作者。题名〔R〕。报告地：报告会主办单位,年份。
九、[序号]电子文献作者。题名〔电子文献及载体类型标识〕。文献出处，日期。
参考文献的标准格式：
1、专著、论文集、报告
[序号]主要责任者.文献题名[文献类型标识].出版地:出版者,出版年:起止页码(可选).
例如：[1]刘国钧,陈绍业.图书馆目录[M].北京:高等教育出版社,1957:15-18.
2、期刊文章
[序号]主要责任者.文献题名[J].刊名,年,卷(期):起止页码.
例如：[1]何龄修.读南明史[J].中国史研究,1998,(3):167-173.
[2]OU J P,SOONG T T,et al.Recent advance in research on applications of passive energy dissipation systems[J].Earthquack Eng,1997,38(3):358-361.
3、论文集中的析出文献
[序号]析出文献主要责任者.析出文献题名[A].原文献主要责任者(可选)原文献题名[C].出版地:出版者,出版年:起止页码.
例如：[7]钟文发.非线性规划在可燃毒物配置中的应用[A].赵炜.运筹学的理论与应用——中国运筹学会第五届大会论文集[C].西安:西安电子科技大学出版社,1996:468.
4、学位论文
[序号]主要责任者.文献题名[D].出版地:出版单位,出版年:起止页码(可选).
例如：[4]赵天书.诺西肽分阶段补料分批发酵过程优化研究[D].沈阳:东北大学,2013.
5、报纸文章
[序号]主要责任者.文献题名[N].报纸名,出版日期(版次).
例如：[8]谢希德.创造学习的新思路[N].人民日报,1998-12-25(10).
6、电子文献
[文献类型/载体类型标识]：[J/OL]网上期刊、[EB/OL]网上电子公告、
[M/CD]光盘图书、[DB/OL]网上数据库、[DB/MT]磁带数据库
[序号]主要责任者.电子文献题名[电子文献及载体类型标识].电子文献的出版或获得地址,发表更新日期/引用日期.
例如：[12]王明亮.关于中国学术期刊标准化数据库系统工程的进展[EB/OL].1998-08-16/1998-10-01.
[8]万锦.中国大学学报文摘(1983-1993).英文版[DB/CD].北京:中国大百科全书出版社,1996.
扩展资料：
依据ISO 690-2国际标准增加电子文献的著录规则。为了满足知识经济时代电子文献的著录需求，不仅参照ISO 690-2，在“4 著录项目与著录格式”部分为电子文献的著录增加了“4.6 电子文献”。
而且为电子图书和电子期刊分别在“4 . 1专著”、“4.2专著中的析出文献”、“4.3连续出版物”、“4.4连续出版物中的析出文献”、“4.5专利文献”中增设了“引用日期”和“获取和访问路径”2个著录单元。
1、为了便于人们理解本标准，在“3 术语和定义”部分增加了“主要责任者、专著、连续出版物、析出文献、电子文献、顺序编码制、著者-出版年制、合订题名、并列题名”等9 个名词解释。
2、为了便于读者利用文后参考文献查找原文献，在 GB/T 7714-1987著录项目的基础上增设了“文献类型标志”。
3、根据文后参考文献的著录实际需求简化了文献著录规则，删除了GB/T 7714-1987《文后参考文献著录规则》“3.1专著”与“3.2连续出版物”中的“文献数量、丛编项、附注项、文献标准编号”4个供选择的著录项目。
4、在“10参考文献标注法”中解决了多次引用同一著者的同一文献的著录问题，规定了标注方法。明确规定本标准的著录用符号为前置符，规范了标志符号的使用方法。
参考资料来源：百度百科——参考文献标准格式
参考资料来源：百度百科——文后参考文献著录规则
北京大学图书馆、中国科学院文献情报中心、中国科学技术信息研究所、中国社会科学院文献信息中心、南京大学中国社会科学研究评价中心五大核心期刊权威机构的评选结果均没有《岭南心血管病杂志》。《岭南学报》是南大的核心期刊、《岭南学刊》是社科院的核心期刊。
|★―――――党报―――――★★中央报刊★人民日报人民日报海外版光明日报经济日报解放军报★省级党报★北京日报天津日报解放日报重庆日报河北日报山西日报内蒙古日报辽宁日报吉林日报黑龙江日报新华日报浙江日报安徽日报福建日报江西日报大众日报河南日报湖北日报湖南日报南方日报广西日报海南日报四川日报云南日报贵州日报西藏日报陕西日报宁夏日报甘肃日报青海日报新疆日报★市级党报★石家庄日报太原日报沈阳日报大连日报哈尔滨日报南京日报杭州日报宁波日报合肥晚报福州日报厦门日报南昌日报济南日报青岛日报郑州日报长江日报长沙晚报广州日报深圳特区报 南宁日报海口晚报成都日报昆明日报贵阳日报西安日报银川晚报兰州日报乌鲁木齐晚报★党建期刊★中央党�0�2�0�2 建（中央）党建研究（中央）地方前�0�2�0�2�0�2 线（北京）党建文汇（辽宁）党的生活（黑龙江）今日浙江（浙江）福建支部生活(福建)当代江西�0�2（江西）支部生活 (山东) 党员博览（山东）党的生活（河南）党员生活(湖北)学习导报（湖南）南方月刊（广东）岭南学刊（广东）党的建设（四川） 当代党员（重庆）当代贵州（贵州）当代陕西（陕西）共产党人（宁夏）★理论期刊★中央求 是（中央）�0�2人民论坛（中央）�0�2�0�2马克思主义研究（中央）�0�2�0�2中国行政管理（中央）中国发展观察（中央）中国党政干部论坛�0�2（中央）当代中国史研究（中央）理论视野（中央）理论前沿（中央）�0�2�0�2�0�2地方中国特色社会主义研究（北京）新长征（吉林）唯 实（江苏）毛泽东邓小平理论研究(上海) 领导之友（河北）理论探索（山西）政 策（湖北）新湘评论（湖南）特区实践与理论（深圳）桂海论丛（广西）毛泽东思想研究（四川） 中共云南省委党校学报（云南） �0�2理论与当代（贵州）理论导刊（陕西）甘肃理论学刊（甘肃）★党史期刊★中央党的文献（中央）中共党史研究（中央）�0�2百年潮（中央）地方北京党史（北京）党史博采（河北） �0�2�0�2�0�2�0�2党史文汇（山西）内蒙古党史（内蒙古）党史纵横（辽宁）上海党史与党建（上海）世纪风采（江苏）�0�2�0�2�0�2�0�2党史纵览（安徽）福建党史月刊（福建）党史文苑（江西）党史博览（河南）党史天地（湖北）�0�2湘 潮（湖南）传 承（广西）四川党史（四川）红岩春秋（重庆）陕西党史（陕西）看看有没有你需要的，这是所有的党报党刊基层政工当面的，好像包括在里面，如果再具体的就不好搜集了
中国党报党刊有《人民日报》、《光明日报》、《经济日报》、《新华每日电讯》、《解放军报》、《中国日报》、《学习时报》、《求是》、《党建》、《党建研究》、《人民论坛》、《马克思主义研究》、《中国党政干部论坛》、《党的文献》等。具体介绍以下几份党报党刊：
1、《人民日报》
《人民日报》是中国共产党中央委员会机关报。报纸于1948年6月15日在河北省平山县里庄创刊。时由《晋察冀日报》和晋冀鲁豫《人民日报》合并而成，为华北中央局机关报，同时担负党中央机关报职能。
2、《光明日报》
光明日报创刊于1949年6月16日，是中共中央主办，以知识分子为主要读者对象的思想文化大报。
作为党和国家联系广大知识分子的桥梁和纽带，光明日报始终得到中央领导集体的亲切关怀。毛泽东同志为光明日报创刊题词：“团结起来 光明在望 庆祝光明日报出版”。
3、《解放军报》
《解放军报》是解放军报社出版的中央军委机关报，创刊于1956年1月1日。1999年10月1日起，《解放军报》网络版进入国际互联网，2004年10月1日正式定名为“中国军网”。
4、《党建研究》
《党建研究》创刊于1989年3月，是中共中央组织部主管的唯一公开发行的党刊，是一份全国性研究党的建设和组织工作的具有思想性、理论性、学术性、工作指导性的月刊。
5、《中国党政干部论坛》
《中国党政干部论坛》是中共中央党校主办，面向国内外公开发行的综合性思想理论月刊。该刊物以各级党政干部为主要读者对象，反映党政干部在学习和实践中的体会经验。
参考资料来源：百度百科-人民日报
参考资料来源：百度百科-光明日报
参考资料来源：百度百科-解放军报
参考资料来源：百度百科-党建研究
参考资料来源：百度百科-中国党政干部论坛
我先前也是对论文的写作非常非常头大，还好后来找闻闻论文网的老师帮忙才搞定。论文里面的核心部分，分析和数据处理是最难的，包括我身边的一些同学写到一半写不下去了，我都介绍的闻闻论文网给他们，非常专业，有的甚至把整篇都找帮忙的。
论文的参考文献是按照论文引用参考文献的顺序排列的，这一点很重要。因为论文中的引文需要标注，标注的时候需要和参考文献联系起来，所以参考文献一定要按顺序排列，因为如果不标注引文，就会被计入整个论文的重复率，严重影响论文的重复率。参考文献在我们的毕业论文当中是占有相当重要成分的组成部分，它不仅能为我们论文中的论点提供强有力的论据，同时也可以精练文字节约篇幅，增加论文的信息量，而且还具有很高的信息价值。 参考文献的格式是什么样的？论文中的参考文献有一定的格式，但要明确列出序号、作者姓名、期刊名称、出版年份和字号、专著序号等。有些参考文献是论文，有些参考文献是书籍，有些参考文献是期刊。所以对不同格式的参考文献有不同的要求，你需要根据论文写作提纲中参考文献格式设置的要求来设置。参考文献设置好后，此时将整篇论文的引用部分插入到注释中，整篇论文此时完成。最后一步是检查引用部分是否全部插入评论，然后再次检查整篇文章的格式。如果没有问题，那么你的论文就完成了。
论文中参考文献引用的是国家颁布的文件或纲领政策，要用字母S表示。
例如：引用的是国家标准，“汉语拼音正词法基本规则”则，在参考文献中格式为：
GB／T16159－1996，汉语拼音正词法基本规则［S］。
参考标准格式指的是写论文的引用已经发表的文献格式，根据资源的类型可分为这本书［M］，［C］学报》发布会上，报纸文章［N］，［J］，期刊文章论文［D］报告［R］，标准［S］，专利［P］，［一］学报文献、杂志［G］。
电子文献类型：数据库［DB］、计算机［CP］、电子公报［EB］
电子文献载体类型：Internet［OL］、CD［CD］、磁带［MT］、磁盘［DK］。
参考文献按照其在正文中出现的先后以阿拉伯数字连续编码，序号置于方括号内。一种文献被反复引用者，在正文中用同一序号标示。一般来说，引用一次的文献的页码（或页码范围）在文后参考文献中列出。
格式为著作的“出版年”或期刊的“年，卷（期）”等+“：页码（或页码范围）.”。多次引用的文献，每处的页码或页码范围（有的刊物也将能指示引用文献位置的信息视为页码）分别列于每处参考文献的序号标注处，置于方括号后（仅列数字，不加“p”或“页”等前后文字、字符；页码范围中间的连线为半字线）并作上标。
参考文献标点格式和符号用法
论文常用来指进行各个学术领域的研究和描述学术研究成果的文章，简称之为论文。它既是探讨问题进行学术研究的一种手段，又是描述学术研究成果进行学术交流的'一种工具。它包括学年论文、毕业论文、学位论文、科技论文、成果论文等。以下是我为大家整理的参考文献标点格式和符号用法，希望能帮到大家！
不简单的参考文献格式
1、在文章正文中，参考文献作者的名字作为句子一部分时，如果只有两个作者，将两个人的名字都列出来，用and连接; 如果这篇文献有大于两名作者，只列出第一作者的名字，后面接et al、而在et al.之前不要接逗号。不管什么情况下，al之后一定要接一个句号“.”
举例：Bachrach et al、reported that…1
O’Brien and Alenno found that…2
2、当引用一个作者(principal author)的多篇文献时，采用该作者的名字，后面接“and co-workers”或者“ and colleagues”.
举例：Pauling and co-workers10,11
3、应该在句子的合适位置插入参考文献，
举例: recent investigations (cite)
other developments (cite)
was reported (cite) as describedpreviously (cite)
previous results (cite) were demonstrated (cite)
a molecular mechanics study (cite)
Marshall and Levitt’s approach(cite)
4、一篇参考文献，至少要拥有以下信息：
1)期刊:作者名,简写期刊名称,发表年份,卷号起止页码;
2）书:作者或者编者名,书的标题,出版社名称,出版城市以及出版年份；
ACS标准示例：
Author 1; Author 2; Author 3; etc、Title of Article、Journal Abbreviation Year, Volume, Inclusive Pagination.
Author 1; Author 2; Author 3; etc、Journal Abbreviation Year, Volume, Inclusive Pagination.
ACS格式中，发表年份要采用粗体进行标记，卷期名采用斜体，起止页码中间用-相连，不加空格或逗号.
不同期刊，拥有不同的references格式，具体请参照各期刊要求（这里不多介绍，下次介绍Endnote的时候一起跟大家分享）。
5、期刊名缩写，参照Chemical Abstracts Service Source Index (CASSI)进行缩写，并采用斜体来标记。一般情况下，一个单词作为期刊名的期刊不需要缩写，比如Science, Biochemistry, Nature、期刊名简写后，除非最后一个词是全称不是简写，否则都要通过句号”.”作为结尾。
举例：International Journal of Nanoscience简写成Int、J、Nanosci.
Journal of Controlled Release简写成J、Controlled Release (最后一个词不是简写，不加句号)
6、专利：
推荐格式：Patent Owner 1; Patent Owner 2; etc、Title of Patent、Patent Number, Date.
举例：Sheem, S、K、Low-Cost Fiber Optic PressureSensor、U.S、Patent 6,738,537, May 18, 2004.
温馨提示：主要的参考文献管理软件有Endnote, Mendeley, Noteexpress等，各有千秋，个人建议使用Endnote，后面将会采用专题的方式对Endnote软件的使用进行介绍。
标点符号用法选摘
1、et al.之前不接逗号，除非有其他特别原因
举例：Saltzman et al、Saltzman, M、J., et al.
2、日期后接逗号，如果只有月份没有日期，不用逗号;当句子中给出完整的年月日，那么年份后面也要接逗号
举例：June 15, 1996 June 1996
On August18, 1984,an extraordinary person was born.
3、当地理位置作为句子的一个部分，且其中包含逗号时，名称后也要接逗号
举例：Iona College, in New Rochelle, New York, is theCEO’s alma mater.
4、除非引起歧义，否则单位简称后面不要接句号
特例：inch (in.), atom (at.), number (no.)
5、姓名简写要用句号和空格隔开，但是在acknowledgement部分不需要空格
举例：J、E、Lennard-Jones M、S.Newman
R.C.McD.and C.R、thank Dr、Rose Allan for carefully reading the manuscript.
6、机构名的简写后不用加句号
举例：ACS CNRS NASA
参考文献标准格式如下：
一、期刊类[J]
【格式】[序号]作者。篇名[J]。刊名，出版年份，卷号(期号)：起止页码。
【举例1】安心，熊芯，李月娥。70年来我国高等教育的发展历程与特点[J]。当代教育与文化，2020，12(06)：75-80。
【举例2】[2]许竞。我国学历教育分化的证书制度溯源[J]。南京师大学报(社会科学版)，2020(06)：22-29。
二、专著类[M]
【格式】[序号]作者。书名[M]。出版地：出版社，出版年份：起止页码。
【举例1】葛家澍，林志军。现代西方财务会计理论[M]。厦门：厦门大学出版社，2001：42。
三、报纸类[N]
【格式】[序号]作者。篇名[N]。报纸名，出版日期（版次）。
【举例1】[1]葛剑雄，陈鹏。地名、历史和文化[N]。光明日报，2015-09-24(011)。
四、论文集[C]
【格式】[序号]作者。篇名[C]。出版地：出版者，出版年份：起始页码。
【举例】伍蠡甫。西方文论选[C]。上海：上海译文出版社，1979：12-17。
五、学位论文[D]
【格式】[序号]作者。篇名[D]。出版地：保存者，出版年份：起始页码。
【举例】郝桂莲。反思的文学：苏珊·桑塔格小说艺术研究[D]。四川大学，2014。
六、研究报告[R]
【格式】[序号]作者。篇名[R]。出版地：出版者，出版年份：起始页码。
【举例】冯西桥。核反应堆压力管道与压力容器的LBB分析[R]。北京：清华大学核能技术设计研究院，1997：9-10。
七、其他[N]
【格式】[序号]颁布单位。条例名称。发布日期。
写论文怎么找参考文献？分享6种找参考文献途径！
1、百度学术
百度学术蚂亩是一个较大的文献知识库，包含好几个中英文数据库，因而内容会比较宽泛。知网中的文献也会收录在百度学术中，其他包含的数据库还有万方、维普及其一些英文数据库，英文数据库会在下面单独介绍。进入百度搜索百度学术，输入需要的关键词、作者或期刊名称都可以得到你想要的内容。
2. Wiley Online library
这个文献数据库慎物销百度学术中也包含，只是我们常常用百度学术习惯去搜中文文献，因此把它们单独拿出来讲。搜索方法也是进入百度，输入WileyOnlinelibrary就进入下面这个界面，把你想要搜索的关键翻译成英文复制进去就可以了。
3、 Springer
这个数据库和 WileyOnlinelibrary类似，也是英文文献查阅里常用的数据库，
WileyOnlinelibrary和 Springer的特点就是能够下载的文献相对较多。
4、 ScienceDirect
这个数据库简称就是Sci了，虽然百度学术里也有它的数据库，但是它也有自己的官网，搜索方法与上面相同，它里面的内容质量相对好一些，但是下载需要方法，我们下载的方法是使用sci-hub，这个可以帮助你在没有下载权限的情况下下载文宽游章。
5、rsc
这个期刊也是化学期刊中相当不错的，虽然比不上ACS，但是能在这上面发一篇文章已经很好了。
完毕！
分离细胞膜蛋白的方法：1 冰上刮下细胞后将细胞溶于有蛋白酶抑制剂的缓冲液A中，于室温与液氮罐中反复冻融2次。2 5000转4度离心，驱除核及未裂解的细胞。3 取上清12000转4度离心10分钟取沉淀溶于有蛋白酶抑制剂的缓冲液B中。4 12000转4度离心10分钟取沉淀溶于有蛋白酶抑制剂的缓冲液C中提取后测蛋白浓度,SDS-PAGE电泳，分装后-20度保存备用。buffer A : 1mMkcl,5mMNacl,3mM Mgcl2,50mM Hepes,1mM DTT,0.5ug/ml Leupeptin,20uM pmsf(PH=7.4)buffer B : 1mMkcl,5mMNacl,3mM Mgcl2,50mM Hepes,1mM DTT,0.5ug/ml Leupeptin,20uM pmsf(PH=7.4) 1mM EGTAbuffer C : 0.5ug/ml Leupeptin,20uM pmsf,50mMTris-cl(PH=7.0), 分离细胞膜蛋白的方法：1）细胞放在冰上，去除上清，用pH7。4的冷磷酸盐缓冲液洗涤单层细胞两次2）加入1ml2%TritonX溶液冰浴15min3)刮下单层细胞，4度下10 000g 5min离心4）溶液37度水浴 10min以分离水相和去污剂相，然后37度下2 000g离心5min5)收集水相留作分析6）用500ul冰冷的buffer C溶解去污剂相沉淀，冰浴2min后加温，在按步骤6再次离心7）按步骤8再次抽提去污剂相，用buffer C将洗涤后的去污剂相稀释到初始体积8）用等量的buffer A分别稀释水相与去污相，并进行免疫沉淀实验试剂：1）2%tritonX114:2%TritonX114、50mmol/L Tris HCl（pH7。5）、蛋白酶抑制剂2）缓冲液A（含0。5mol/LNaCl的RIPA buffer)3)buffer C10mmol/L Tris HCl(pH7.5)150mmol/L NaCl5mmol/L EDTA(PH7.5)分离细胞膜蛋白的方法：7M urea2M thiourea4%chaps2.5%sb3-101000000个细胞，可用此 buffer 1ml。 冰浴匀浆。冰上置30分钟。4度高速低温离心30min。取上清-20保存。分离组织膜蛋白的方法：1）取组织，加入10ml Buffer A 于冰上充分匀浆。2）J6-HC离心机800rpm，4℃离心10min后，所得上清液转入超速离心管。3）100000g，4℃离心1hr。弃去上清，沉淀用适量的 Buffer B重悬，冰上孵育2hr后分装至EP管， Eppendorf台式离心机10000rpm，4℃离心30min。4）收集所得上清液即为膜组份。Buffer A：0.32M 蔗糖，5mM Tris-HCl（PH 7.5），120mM KCl，1mM EDTA,1mM EDTA, 0.2mM PMSF, 1ug/ml Leupeptin, 1ug/ml Pepstatin A, 1ug/ml Aprotinin。冰上预冷。Buffer B：20mM HEPES（PH 7.5），10%甘油，2% Triton X-100, 1mM EDTA, 1mM EDTA, 0.2mM PMSF, 1ug/ml Leupeptin, 1ug/ml Pepstatin A, 1ug/ml Aprotinin。 冰上预冷。分离组织膜蛋白的方法：RIPA1XPBS1%NP400.5去氧胆酸钠0.1%SDS以下用时加入10mg/ml PMSF异丙醇（终浓度10ul/ml)Aprotinin（30ul/ml)1000mM Sodium Orthovandate（10ul/ml)冰冻组织100mg/细胞1000000个，可用RIPA buffer 1ml。 冰浴匀浆。冰上置30分钟。4度高速离心30min，20000转低温离心最佳。取上清-20保存。分离细菌膜蛋白的方法：① 于20ml 营养肉汤中过夜培养细菌，37℃，200rpm。② 10000g、20min、4℃离心，去上清。③ 20ml预冷的Tris-Mg缓冲液重悬，同样条件离心，再重悬于预冷的Tris-Mg缓冲液。④ 超声波破碎细菌。⑤ 3000g，10min、室温下离心去除未破碎细菌。小心吸取上清（含有胞质成分和细菌外被成分）。⑥ 超速离心I：100,000g，60min，4℃，去除上清（胞质成分），收集细菌外被成分。⑦ 用10ml含2％的SLS的Tris-Mg 缓冲液重悬沉淀物，室温温育20-30min。⑧ 超速离心II：70,000g，60min，室温沉淀收集外膜蛋白，去除上清（含细胞质膜）。重复⑦、⑧两步。⑨ 充分吸除上清，并根据沉淀体积大小用0.1-0.2 ml的ddH2O重悬沉淀物。根据公式：蛋白浓度(mg/ml)=1.450 D280-0.740 D260测定外膜蛋白浓度，调节蛋白浓度至40ug/ul，该蛋白质样品-70℃贮存。试剂① Tris-Mg 缓冲液10mM Tris-Cl5mM MgCl2pH 7.3，4℃保存② 2%(w/v)十二烷基肌氨酸钠 (SLS)如何进行亚细胞结构的分离？亚细胞构造的离心分离一）简介：用简易的差分离心结合各种型式的密度梯度离心可以分离和纯化各种亚细胞器。研究者也可以根据自己的设备情况对实验 参数作一定的改动，也可以更多地利用速率--区带密度梯度离心或等密度离心来简化实验过程和提高分离纯度。二）实验：匀浆制备：鼠肝12克加入0.25M蔗糖与5mM Tris-HCL (PH7.4)共45ml用"概论"中建议的匀浆设备与方法制备成匀浆待用。鼠肝匀浆的差分分离程序该实验流程中沉Ⅰ：细胞核、质膜大片断，重线粒体，少量未破碎细胞及极少量沉Ⅱ→沉Ⅳ的成份沉Ⅱ：重线粒体、质膜片断，及少量沉Ⅲ→沉Ⅳ成份。沉Ⅲ：线粒体、溶酶体，高尔基膜，部分粗内质纲及极少量沉Ⅳ成份沉Ⅳ：所有的细膜质可溶部份。离心Ⅰ：低速冷凝冻离心机，50ml管。离Ⅱ，离Ⅲ为高速冷冻离心机8×50ml角转头。离Ⅳ为超速机或高速机8×50ml角转头。ii)从沉Ⅱ中纯化线粒体：匀浆保持在200mM甘露醇，50mM蔗糖，1mM EDTA, 10mM Hepes-Naoh (PH7.4)中，全部操作均应使匀浆在冰溶中，产生沉Ⅱ后去除上清表面以及离心管壁部的脂肪（这一点很重要）加20ml保持液到沉Ⅱ中稀释到30ml，3000g×10分再次离心并重复以上过程二次以上，最后的沉淀保持在10ML保持液中。iii)从沉Ⅳ中部份纯化光滑微粒体：保持液为0.25M蔗糖，5mM Tris-Hcl (PH7.4)沉淀中光滑微粒体成松软状态位于紧密状态的粗糙微粒体沉淀之上。小心地倒掉上清Ⅳ后，在沉Ⅳ中加入2~3ml保持液，轻摇，大部份光滑微粒体（沉ⅣA）将分散到清液中，而沉Ⅳ（B）（粗糙微粒体，紧密沉淀）仍在沉降中，倒出沉Ⅳ（A），余下的沉Ⅳ B加入2~3ml保持液即完成。iii)从沉Ⅰ中部份纯化质膜：保持液用 1mM NaHCO3鼠肝加25ml保持液在研钵中锺击15次，仍用1mMNaCHO3稀释在100ml，搅拌2分钟并用孔径力75μm的尼龙布过滤。然后离心得到Ⅰ加5ml 1mM NaHCO3到沉Ⅰ中再放入匀浆器，慢速往复2~3次。再用1mM NaHCO3稀释到15ml，用甩平转头10ml玻璃锥形管，1200g离心10分钟，不用制动减速到停车，沉淀很明显由三层组成。轻轻摇动或搅动即可使最上层的线粒体溶入上清液。中间层富含质膜，最下层是细胞核。倒去上清加5ml1mM NaHCO3轻摇使中间层进入溶液，注意要尽可能少地扰动最下层核沉淀。将再次倒出的上清液稀释到15ml并重复以上离心过程即可进一步纯化质膜。iv)从上Ⅲ中分离粗糙和光滑微粒体：从已经去掉线粒体的上Ⅲ中可以比从沉Ⅳ中更有效地分离粗糙及光滑微粒体，配置溶液0.6M蔗糖，5mM Tris-HCL, (PH8.0)15mM CSCL, 1.3M蔗糖，0.25M蔗糖用角式转头，10~13ml厚壁PC（聚碳酸脂）离心管，先注入3ml 1.3M蔗糖-5mM Tris-HCL再注入1.5ml 0.6M蔗糖-5mM Tris-HCL从而形成了一个在离心管下部的阶梯形密度梯度。在梯度上部注入上Ⅲ直至充满离心管。100000g×90分钟。离心后得到二个主要部份：在0.6M蔗糖界面处或稍下一点是光滑微粒体，沉淀是粗糙微粒体。要针筒吸出光滑微粒体。沉淀用三倍空积的5mM Tris-HCL(PH8.0)稀释后再次离心160000g×30分，得到粗糙微粒体沉淀，再用2-3ml的0.25M蔗糖与5mM Tris-HCL(PH8.0)稀释即可。V）从匀浆中纯化细胞核：配制溶液：0.25M蔗糖在TKM（0.05M Tris-HCL,PH7.5）中及2.3M蔗糖在TKM中，25mM KCL, 5mM Mgcl2将鼠肝放在研钵中加0.25M蔗糖-TKM，冲研10~15二次，用纱布过滤后加入二倍容积的2.3M-TKM，这样就使蔗糖的浓度为1.62M（该浓度最好用光折射仪检测确认，20℃时折射率约为1.4115, 5℃时，1.4137）。将此溶液9ml注入PC离心管，在溶液下属注入3~4ml 2.3M蔗糖-TKM。 130000g×30分，5℃，甩平转头。离心后倒去上清液即为核沉淀。它可以根据研究者需要用合适的缓冲剂稀释。vi)从沉Ⅰ中纯化细胞核：取沉Ⅰ，用旋涡混合器分散沉淀并加入等睇容积的60%（W/W）蔗糖--TKM，放入匀浆器上下抽动2~3次，继续加入60%（W/W）蔗糖-TKM直至蔗糖浓度达到56%（W/W），用折射仪检测（5℃折射率1.4356，20℃时，1.4328）。取该溶液9ml移入14ml聚碳酸脂（PC）离心管管下部铺3~4ml60%(W/W)蔗糖液，在甩平转头中120000g 5℃离心30分钟，倒去上清液。余下的核沉淀可用合适的缓冲液稀释。为了消除沉淀中的膜，在制备匀浆时可用0.5% Triton x-100清洗。这种做法既消除了膜，又不影响核的结构。vii)从沉Ⅰ中纯化质膜配制溶液：60%（W/W）蔗糖液，37.2%(w/w)蔗糖液均分别加在5mM Tris-HCL(PH8.0)中将已制备好的沉Ⅰ乘余的缓冲液一起用温旋混合器混合后再加入60%（W/W）蔗糖使蔗糖终浓度为48%，并用折射仪检测（5℃，1.4181; 20℃, 1.4158）。取以上溶液6ml注入14ml PC离心管，上铺6ml 37.2%w/w蔗糖液以1m PH7.4缓冲液。在甩平转头中160000g, 5℃,离心3小时。质膜聚集在37.2%w/w蔗糖液的上部，用注射器吸出，并用三倍容积的5mM Tris-HCL(PH8.0)稀释后再在100000g, 5℃离心40分钟，沉淀即为质膜。viii)从沉淀Ⅰ中纯化重体粒体配制溶液：0.25M蔗糖，10mM Hepes-NaOH(PH7.5), 1mM EDTA, 1mM Mgcl2,2.4M蔗糖，将沉Ⅰ用0.25M蔗糖，10mM Hepes-Naoh (PH7.5)，1mM Mgcl2稀释到15ml。要尽可能避免动及沉淀最底部的红色部份。将已稀释部份倒出，混匀后加入23ml 2.4M蔗糖，10mMHepes-Na(OH)(PH7.5),1mM Mgcl2。所得到的最终蔗糖浓度力1.0M 。用光折射仪测定（5℃，1.3827;20℃,1.3812）如需要，进行调节，将此液体倒入一个50ml PC管，上铺8ml 0.25M蔗糖，10mM Hepes-Naoh(PH7.5)在35000g, 5℃离心10分钟，倒去上清液重擦净沾在离心管壁上的物质。沉淀很清楚有二层，须离心管内壁加入10ml 0.25M蔗糖10mM Hepes-Naoh (PH7.5), 1mM EDTA，轻轻晃动并稀释沉淀的上部褐色重线粒体层。对于其他组织材料的线粒体纯化问题，请参照"Methods in Enzymology)第55卷。Ⅸ）从沉Ⅲ中纯化溶酶体及粒体：配制溶液：0.3M,1.1M,2.1M蔗糖分别溶入1mM EDTA与5mM Tris-HCL (PH7.0)在14mlPC管中制备好二个10ml，1.1M,2.1M蔗糖的线性梯度可以用梯度形成仪做成，也可以用不连续梯度(1.1M,1.4M,1.7M,2.1M，每种2.5ml)在5℃静量12~16小时也会形成连续的1.1~2.1M近线性梯度。在沉Ⅲ中加入10ml,0.3M蔗糖液，轻摇，慢慢地可以看到离心管底部沉积了暗褐色的沉淀（溶酶体）倒去上清，加入4ml 0.3M蔗糖液在匀浆器中磨匀（注意：活塞与器壁要松一些）。取2ml以上匀浆置于线性梯度(1.1M~2.1M蔗糖)之上，轻搅匀浆使其与梯度液之间的界面尽可能减少密度的不连续，在甩平转头中95000g,5℃孙心4小时。离心后，溶酶体区带形成于1.20~1.26 g/cm3密度之间（在离心管下部）而线粒体则形成于1.17~1.21g/cm3密度之间（在离心管中部。溶酶体区带中密度较高的部份相对较纯。用光折射仪测定（5℃，1.3827;20℃ 1.3812）如需要进行调节，将此液体例入一个50ml PC管，上铺8ml 0.25M蔗糖，10mM Hepes-NaOH(PH7.5)在35000g,5℃离心10分钟，倒去上清液重擦净沾在离心管壁上的物质。沉淀很清楚有二层，顺离心管内壁加入10ml 0.25M蔗糖10mM Hepes-NaOH (PH7.5) 1mM EDTA，轻轻晃动并稀释沉淀的上部褐色重线粒体层。对于其他组织材料的线粒体纯化问题，请参照"Methods in Enzymology)第55卷。Ⅸ）从沉Ⅲ中纯化溶酶体及线粒体：配制溶液：0.3M,1.1M,2.1M蔗糖分别溶入1Mm edta与5mM Tris-HCL(PH7.0)在14ml PC管中制备好二个10ml, 1.1M,2.1M蔗糖的线性梯度可以用梯度形成仪做成，也可以用不连续梯度(1.1M,1.4M,1.7M,2.1M,每种2.5ml)在5℃静置12~16小时也会形成连续的1.1~2.1M近线性梯度。在沉Ⅲ中加入10ml,0.3M蔗糖液，轻摇，慢慢地可以看到离心管底部沉积了暗褐色的沉淀（溶酶体）倒去上清，加入4ml 0.3M蔗糖液在匀浆器中磨匀（注意：活塞与器壁要松一些）。取2ml以上匀浆置于线性梯度(1.1M~2.1M蔗糖)之上，轻搅匀浆使其与梯度液之间的界面尽可能减少密度的不连续，在甩平转头中95000g,5℃离心4小时。离心后，溶酶体区带形成于1.20~1.26 g/cm3密度之间（在离心管下部）而线粒体则形成于1.17~1.21g/cm3密度之间（在离心管中部。溶酶体区带中密度较高的部份相对较纯。Ⅹ）从沉Ⅱ及沉Ⅲ中纯化高尔基膜：配置梯度溶液：38.79,36%,33%,29%(w/w)蔗糖液每种均加入5mM Tris-HCL(PH8.0)用上清Ⅰ离心，10000g,5℃ 20分钟待到沉Ⅱ+沉Ⅲ用5ml 0.25M蔗糖，5mM Tris-HCL(PH8.0)稀释沉淀，恒湿搅拌并使溶液的蔗糖浓度上升到43.07%(w/w)，用光折射仪检测（5℃，1.1979;20℃,1.1957）在PC离心管中(13ml)由下往上依次铺设如下层次：3ml样品（蔗糖浓度43%w/w）,4ml 38.7%蔗糖液，2ml 36%蔗糖液，2ml 37%蔗糖液，2ml,29%蔗糖液。在甩平转头中160000g,5℃离心1小时，用注射器收集含有高尔基膜的上部二个区带。我们也可以用这个方法从全匀浆中来分离纯化高尔基膜，匀浆中蔗糖浓度配到43.7%,然后用以上不连续梯度来分离纯化，但是大于大容量匀浆，直接法是不合适的。小结：以上典型实验(1)鼠肝匀浆为原料，以差分离心为主，辅以蔗糖的连续或不连续梯度分离各种亚细胞器，方法简单易行，或本也较低。我们也可以用Ficoll,percoll, Metrizamide,Nycodenz,……等等梯度材料来分离纯化亚细胞器。参考文献：（i）J. Graham "I solation of subcellular organelles and Membranes" IRL press. 1984(ii)W.H.Evans "I solation and characterizationof membranes and cell organelles"Oxford University press.(iii)G.J.Wagner Methods Enzymol, 148,55,1987(iv)Rickwood. D等Anal, Biochem, 187,318,1990(v)余兴明"离心技术"设备与方法1993
基因工程是在分子生物学和分子遗传学综合发展基础上于 20 世纪 70 年代诞生的一门崭新的生物技术科学。下面是由我整理的基因工程学术论文，谢谢你的阅读。 基因工程学术论文篇一 摘 要：基因工程是在分子生物学和分子遗传学综合发展基础上于 20 世纪 70 年代诞生的一门崭新的生物技术科学。基因工程是一项很精密的尖端生物技术。可以把某一生物的基因转殖送入另一种细胞中，甚至可把细菌、动植物的基因互换。当某一基因进入另一种细胞，就会改变这个细胞的某种功能。这项工程创造出原本自然界不存在的重组基因。它不仅为医药界带来新希望，在农业上提高产量改良作物，并且对环境污染、能源危机提供解决之道，甚至可用在犯罪案件的侦查。基因工程的发展现状和前景是怎么样呢，而又有哪些利弊? 关键词：基因工程;发展现状;发展前景;基因工程利弊 一、基因工程 (一)基因工程的概念及发展 1.概念 基因工程又称基因拼接技术和DNA重组技术，是以分子遗传学为理论基础，以分子生物学和微生物学的现代方法为手段，将不同来源的基因按预先设计的蓝图，在体外构建杂种DNA分子，然后导入活细胞，以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品。 2.发展 生物学家于20 世纪50 年代发现了DNA 的双螺旋结构，从微观层面更进一步认识了人类及其他生物遗传的物质载体，这是人类在生物研究方面的一次重大突破。60 年代以后，科学家开始破译生物遗传基因的遗传密码，简单地说，就是将控制生物遗传特征的每一种基因的核苷酸排列顺序弄清楚。在搞清楚某些单个基因的核苷酸排列顺序基础上，进而进行有计划、大规模地对人类、水稻等重要生物体的全部基因图谱进行测序和诠释。 (二)基因工程的发展现状及前景 1.发展现状 (1)基因工程应用于农业方面。运用基因工程方法，把负责特定的基因转入农作物中去，构建转基因植物，有抗病虫害，抗逆，保鲜，高产，高质的优点。 下面列举几个代表性方法。 ①增加农作物产品营养价值如：增加种子、块茎蛋白质含量，改变植物蛋白必需氨基酸比例等。 ②提高农作物抗逆性能如：抗病虫害、抗旱、抗涝、抗除草剂等性能。 ③生物固氮的基因工程。若能把禾谷等非豆科植物转变为能同根瘤菌共生，或具固氮能力，将代替无数个氮肥厂。④增加植物次生代谢产物产率。植物次生代谢产物构成全世界药物原料的 25% ，如治疗疟疾的奎宁、治疗白血病的长春新碱、治疗高血压的东莨菪碱、作为麻醉剂的吗啡等。 ⑤运用转基因动物技术，可培育畜牧业新品种。 二、基因工程应用于医药方面 目前，以基因工程药物为主导的基因工程应用产业已成为全球发展最快产业之一，前景广阔。基因工程药物主要包括细胞因子、抗体、疫苗、激素和寡核甘酸药物等。对预防人类肿瘤、心血管疾病、遗传病、糖尿病、包括艾滋病在内的各种传染病、类风湿疾病等有重要作用。我们最为熟悉的干扰素(IFN)就是一类利用基因工程技术研制成的多功能细胞因子，在临床上已用于治疗白血病、乙肝、丙肝、多发性硬化症和类风湿关节炎等多种疾病。 并且应用基因工程研制的艾滋病疫苗已完成中试，并进入临床验证阶段;专门用于治疗肿瘤的“肿瘤基因导弹”也将在不久完成研制，它可有目的地寻找并杀死肿瘤，将使癌症的治愈成为可能。 三、基因工程应用于环保方面 工业发展以及其它人为因素造成的环境污染已远远超出了自然界微生物的净化能力，基因工程技术可提高微生物净化环境的能力。美国利用DNA 重组技术把降解芳烃、萜烃、多环芳烃、脂肪烃的4 种菌体基因链接，转移到某一菌体中构建出可同时降解4 种有机物的“超级细菌”，用之清除石油污染，在数小时内可将水上浮油中的2/3 烃类降解完，而天然菌株需 1 年之久。90 年代后期问世的DNA 改组技术可以创新基因，并赋予表达产物以新的功能，创造出全新的微生物，如可将降解某一污染物的不同细菌的基因通过PCR 技术全部克隆出来，再利用基因重组技术在体外加工重组，最后导入合适的载体，就有可能产生一种或几种具有非凡降解能力的超级菌株，从而大大地提高降解效率。 (一)发展前景 基因工程应用重组DNA 技术培育具有改良性状的粮食作物的工作已初见成效。重组DNA 技术的一个显著特点是，它注往可以使一个生物获得与之固有性状完全无关的新功能，从而引起生物技术学发生革命性的变革，使人们可以在大量扩增的细胞中生产哺乳动物的蛋白质，其意义无疑是相当重大的。将控制这些药物合成的目的基因克隆出来，转移到大肠杆菌或其它生物体内进行有效的表达，于是就可以方便地提取到大量的有用药物。目前在这个领域中已经取得了许多成功的事例，其中最突出的要数重组胰岛素的生产。 重组DNA 技术还有力地促进了医学科学研究的发展。它的影响所及有疾病的临床诊断、遗传病的基因治疗、新型疫苗的研制以及癌症和艾滋病的研究等诸多科学，并且均已取得了相当的成就。 (二)基因工程的利与弊 1.基因工程的利 遗传疾病乃是由于父或母带有错误的基因。基因筛检法可以快速诊断基因密码的错误;基因治疗法则是用基因工程技术来治疗这类疾病。产前基因筛检可以诊断胎儿是否带有遗传疾病，这种筛检法甚至可以诊断试管内受精的胚胎，早至只有两天大，尚在八个细胞阶段的试管胚胎。做法是将其中之一个细胞取出，抽取DNA，侦测其基因是否正常，再决定是否把此胚胎植入母亲的子宫发育。胎儿性别同时也可测知。 基因筛检并不改变人的遗传组成，但基因治疗则会。目前全世界正重视发展永续性农业，希望农业除了具有经济效益，还要生生不息，不破坏生态环境。基因工程正可帮忙解决这类问题。基因工程可以改良农粮作物的营养成分或增强抗病抗虫特性。可以增加畜禽类的生长速率、牛羊的泌乳量、改良肉质及脂肪含量等。 2.基因工程的弊 广泛的基因筛检将会引起一连串的社会问题。虽然基因筛检可帮助医生更早期更有效地治疗病人，但可能妨碍他的未来生活就业。基因工程会产生“杀虫剂”的作物，也可能对大环境有害，它们或许会杀死不可预期的益虫，影响昆虫生态的平衡。转基因食品不同于相同生物来源之传统食品，遗传性状的改变，将可能影响细胞内之蛋白质组成，进而造成成份浓度变化或新的代谢物生成，其结果可能导致有毒物质产生或引起人的过敏症状，甚至有人怀疑基因会在人体内发生转移，造成难以想象的后果。转基因食品潜在危害包括：食物内所产生的新毒素和过敏原;不自然食物所引起其它损害健康的影响;应用在农作物上的化学药品增加水和食物的污染;抗除草剂的杂草会产生;疾病的散播跨越物种障碍;农作物的生物多样化的损失;生态平衡的干扰。 四、结束语 随着社会科技的进步，基因工程的发展将成为必然。尽管它会给我们带来一些危害但是仍然为我们带来了很多好处。不仅为我们提供了新的能源而且促进了各国的经济的发展，所以在我们发展基因工程的同时应该尽力避免一些危害，而让有利的方面尽可能应用。 参考文献： [1]陈宏.2004.基因工程原理与应用.北京：中国农业 出版社 [2]胡银岗.2006.植物基因工程.杨凌.西北农林科技大学出版社 [3]刘祥林.聂刘旺.2005.基因工程.北京：科学出版社 [4]陆德如.陈永青.2002.基因工程.北京：化学工业出版社 [5]王关林.方宏筠.2002.植物基因工程.北京：科学出版社 基因工程学术论文篇二 基因工程蛋白药物发展概况 【摘要】近些年，随着生物技术的发展，基因工程制药产业突飞猛进，本文就一些相关的重要蛋白药物的市场概况和研究进展作一概述。 【关键词】基因工程 蛋白药物 发展概况 中图分类号：R97 文献标识码：B 文章编号：1005-0515(2011)6-255-03 基因工程制药是随着生物技术革命而发展起来的。1980 年，美国通过Bayh-Dole 法案，授予科学家 Herbert Boyer 和 Stanley Cohen 基因克隆专利，这是现代生物制药产业发展的里程碑。1982 年，第一个生物医药产品在美国上市销售，标志着生物制药业从此走入市场[1]。 生物制药业有不同于传统制药业的特点：首先，生物制药具有“靶向治疗”作用;其次，生物制药有利于突破传统医药的专利保护到期等困境;再次，生物制药具有高技术、高投入、高风险、高收益特性;此外，生物制药具有较长的产业链[1]。生物制药业这一系列的特点决定了其在21世纪国民经济中的重要地位，历版中国药典收录的生物药物品种也是逐渐增多[2](图一)。 当前生物制药业的发展趋势在于不断地改进、完善和创新生物技术，在基因工程药物研发投入逐年增加的基础上，我国生物制药的产值及利润增长迅猛， 2006-2008年三年就实现了利润翻番[2](表一)。随着研究的深入，当前生物药的热点逐渐聚焦到通过新技术大量生产一些对医疗有重要意义且成分确定的蛋白上。研究表明，在我国的基因工程药物中，蛋白质类药物超过50%[3]。而这些源自基因工程菌表达的蛋白，如疫苗、激素、诊断工具、细胞因子等在生物医学领域的应用主要包括4个方面：即疾病或感染的预防;临床疾病的治疗;抗体存在的诊断和新疗法的发现。利用基因工程技术(重组DNA技术)生产蛋白主要有三方面的理由：1.需求性，天然蛋白的供应受限制，随需求的不断增加，数量上难以满足，使它得不到广泛应用;2.安全性，一些天然蛋白质的原料可能受到致病性病毒的污染，且难以消除或钝化;3.特异性，来自天然原料的蛋白往往残留污染，会引起诊断试验所不应有的背景[4]。 以下将介绍一些基因工程产物的市场概况和研究发展。 1 促红细胞生成素 是细胞因子的一种，在骨髓造血微环境下促进红细胞的生成。1985年科学家应用基因重组技术，在实验室获得重组人EPO(rhEPO)，1989年安进(Amgen)公司的第一个基因重组药物Epogen获得FDA的批准，适应症为慢性肾功能衰竭导致的贫血、恶性肿瘤或化疗导致的贫血、失血后贫血等[5,6]。 2001年，EPO的全球销售额达21.1亿美元，2002年达26.8亿美元，2003年全世界EPO的年销售额超过50亿美元。创下生物工程药品单个品种之最，是当今最成功的基因工程药物。用过EPO的大多数病人感觉良好，在治疗期间无明显毒副作用或功能失调。重组体CHO细胞可以放大到生产规模以满足对EPO的需求。 2 胰岛素 自1921 年胰岛素被Banting 等人成功提取并应用于临床以来，已经挽救了无数糖尿病患者的生命。仅2000年，胰岛素在全球范围内就大约延长了5100万名I型糖尿病病人的寿命。20世纪80年代初，人胰岛素又成为了商业现实;80 年代末利用基因重组技术成功生物合成人胰岛素，大肠杆菌和酵母都被用作胰岛素表达的寄主细胞[7]。 国内外可工业化生产人胰岛素的企业只有美国的礼来公司、丹麦的诺和诺德公司、法国的安万特公司和中国北京甘李生物技术有限公司等，胰岛素类似物也仅在上述4个国家生产，且每个公司只能生产艮效或速效类似物巾的个品种，主要原因是要达到生物合成人胰岛素产业化的技术难度特别大，若无高精尖的高密度发酵技术、纯化技术和工业化生产经验是无法实现的[8]。 3 疫苗 在人类历史上，曾经出现过多种造成巨大生命和财产所示的疫症，而在预防和消除这些疫症的过程中疫苗发挥了十分关键的作用。所以疫苗被评为人类历史上最重大的发现之一。 疫苗可分为传统疫苗(t raditional vaccine) 和新型疫苗(new generation vaccine)或高技术疫苗( high2tech vaccine)两类,传统疫苗主要包括减毒活疫苗、灭活疫苗和亚单位疫苗,新型疫苗主要是基因工程疫苗。疫苗的作用也从单纯的预防传染病发展到预防或治疗疾病(包括传染病) 以及防、治兼具[2]。 随着科技的发展，对付艾滋病、癌症、肝炎等多种严重威胁人类生命安全的疫苗开发取得巨大进展，这其中也孕育着巨大的商业机会[9]， 2007年全球疫苗销售额就已达到163亿美元，据美林证券公布的一份研究报告显示，全球疫苗市场正以超过13%的符合增长率增长。而我国是疫苗的新兴市场，国内疫苗市场发展潜力巨大，年增长率超过15%。 在以细胞培养为基础的疫苗、抗体药物生产中，Vero细胞、BHK21细胞、CHO细胞和Marc145细胞是最常用的细胞，这些细胞的反应器大规模培养技术支撑着行业的技术水平[4]。建立细胞培养和蛋白表达技术平台，进一步完善生物反应器背景下的疫苗生产支撑技术是当前国际疫苗产业研究的重点。 4 抗体 从功能上划分，抗体可分为治疗性抗体和诊断性抗体;从结构特点上划分，抗体可分为单克隆抗体和多克隆抗体。抗体可有效地治疗各种疾病，比如自身免疫性疾病、心血管病、传染病、癌症和炎症等[10,11]。抗体药物的一大特点在于其较低甚至几乎可以忽略的毒性。另外一个优势是，抗体本身也许既可被当作一种治疗武器，也可被用作传递药物的一种工具。除了全人源化抗体以外，与小分子药物、毒素或放射性有效载荷有关的结合性抗体也已经在理论上显示出了强大的潜力，尤其是在癌症治疗方面[12]。 治疗性抗体是世界销售额最高的一类生物技术药物,2008 年治疗性抗体销售额超过了300 亿美元,占了整个生物制药市场40%。在美国批准的99 种生物技术药物中,抗体类药物就占了30 种;在633 种处于临床研究的生物技术药物中, 有192 种为抗体药物,而在抗癌及自身免疫性疾病的治疗研究中,治疗性抗体占了一半[2]。截止2007年，美国FDA批准上市的抗体药物见表二[13]。 参考文献 [1] 章江益, 孙瑜, 王康力. 美国生物制药产业发展及启示[J]. 江苏科技信息. 2011, 1(5): 11-14. 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