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In this paper, the Orange had the advantage of the research, design a more reasonable process line, from the Orange have been extracted pectin. The use of orthogonal, the extraction of pectin and the pectin precipitation test conditions, come to the best of conditions. The results show that immobilized the most appropriate response to the PH value of 3.5, the optimum temperature to 60 ℃, while the original enzyme were PH 4.0 and 55 ℃; The results also showed that the immobilized enzyme on the PH, temperature stability Than the original enzyme increased. This is immobilized to repeat the recovery of the use and storage of more favorable. Gelatin as a vector of fixed-pectinase study compared the amount of the vector, enzymes, produced by PH, the results show that under the conditions of PH 3.5 Preparation of immobilized pectinase, to repeat the use of recovery after the 5th, activity may also retain more than 80%, immobilized pectinase is a better way.
2.1 材料与仪器TG16高速离心机(19310 g，长沙英泰仪器有限公司);UV?2000紫外可见分光光度计(尤尼柯上海仪器厂); vertex 70型红外光谱仪(德国Bruker公司);AM?3250B型磁力搅拌恒温器(天津奥特赛恩斯仪器有限公司)。介孔分子筛SBA?15的合成利用表面活性剂Pouronic P123(EO20PO70EO20, 美国Aldrich公司)为模板剂，以浓HCl( 35%～37%)为催化剂，通过对正硅酸乙酯(Si(OC2H5)4, TEOS, 95.0%，日本Junsei Chemical公司)的分解和硅缩聚反应后而得到。编号Lu001和LLSD1的介孔分子筛合成方法基本相同，原料量略有不同，二者的BET比表面积762 m2/g，孔容0.87 cm3/g，孔径7.18 nm，壁厚3.55 nm。柱状假丝酵母脂肪酶(candida rogusa lipase, CRL)购自日本Amano酶技术公司;BCA蛋白定量试剂盒购自美国Pierce公司。实验用水为二次蒸馏水。2.2 傅立叶变换红外(FT?IR)测试样品和KBr在115 ℃下抽真空烘干10 h。将300 mg KBr和2.2 mg样品在研钵中混合研磨成细粉后压片，干燥后立刻置于红外光谱仪的石英原位池中测试。仪器分辨率为2 cm-1，扫描波数范围4000～400 cm-1，扫描128次。2.3 CRL在SBA?15上的固定化将CRL磷酸盐缓冲溶液(pH 7.0)以3000 r/min离心15 min，收集上清液，得原酶溶液。将适量SBA?15放入原酶溶液中，在15 ℃水浴和150～200 r/min下搅拌吸附21 h，再以10000 r/min下离心15 min，收集上清液为吸余液。用磷酸盐缓冲溶液清洗分子筛4次以洗脱疏松附着的酶，洗脱液再以10000 r/min离心15 min，取出上清液为清洗液。测定原酶溶液、吸余液和清洗液的酶蛋白含量，根据物料衡计算得出酶蛋白固定量(immobilized amount of enzyme protein, mg)，取单位质量分子筛的酶蛋白固定量为载酶量(enzyme loading, mg/g)。2.4 固定化CRL的泄漏将上述载酶SBA?15移入70 mL磷酸盐缓冲溶液中，在15 ℃水浴、以150～200 r/min搅拌并定时取样，样品再以10000 r/min离心15 min，分析上清液中的酶蛋白泄漏量。2.5 蛋白质定量方法分别用单波长紫外分光光度法、双波长紫外分光光度法和BCA法测定样品蛋白质含量。单波长紫外法公式为：C(protein)(g/L) =F×A280×D/d，式中A280为280 nm波长处吸光度，D为溶液稀释倍数，d为石英比色皿厚度(cm)，F为校正因子。双波长紫外法Warburg?Christian公式为：C(protein)(g/L)=1.55A280-0.76A260; Lowry?Kalckar公式为：C(protein)(g/L)=1.45A280-0.74A260，式中A260和A280分别为260 和280 nm紫外波长下的吸光度。BCA法参照美国Pierce公司蛋白定量方法测定。 分 析 化 学第37卷第8期尚 雁等：介孔分子筛SBA?15的脂肪酶固定量分析测定 3.1 蛋白质定量方法对比图1表明不同浓度CRL溶液在260～280 nm均有一个较强的吸收峰，该吸收峰为蛋白质芳香族氨基酸的特征峰，用于蛋白质含量测定。将粗酶浓度为6 g/L的CRL溶液进行不同倍数稀释，得到一系列相对浓度已知的酶溶液，分别用单波长和双波长紫外法以及BCA法测定酶浓度，验证所测浓度比例关系是否符合其相对浓度，由此得出各检测方法的准确度。图2结果说明BCA法测定结果与样品稀释后的相对浓度最接近，双波长紫外法测定值与BCA法接近，单波长法测定结果远高于BCA法和双波长紫外法。由表1中的相对浓度计算结果可知，BCA法的相对误差最小，单波长和双波长紫外法的相对误差较大。这是因为BCA法的原理是以工作试剂CuSO4中的Cu2+螯合蛋白质分子，发生显色反应测试吸光度，因此抗干扰能力较强，准确度较高。紫外分光光度法操作步骤少，简单快捷，不用显色试剂，不消耗样品。但是，直接检测光密度值受溶液中杂质干扰影响较大，误差较大。为考察介孔分子筛对吸光度的影响，分别在3 mL蒸馏水中加入0.1, 0.6和0.9 mg SBA?15(编号Lu001)，以蒸馏水为参比样，测定其吸光度，并计算出可能对蛋白质测定产生的浓度值偏差。表2说明SBA?15有明显紫外吸收。为此，本实验的样品溶液以10000 r/min离心，以消除介孔分子筛对吸光度的干扰。表1 不同方法测定蛋白质浓度的结果表2 SBA?15对吸光度的影响 表3为不同定量方法测定的 SBA?15(编号为Lu001)对CRL的固定量，3次平行实验的初始粗酶浓度均为6 g/L，SBA?15载体用量均为0.36 g，双波长紫外法测定结果略高于BCA法; 单波长紫外法测定结果远高于双波长法和BCA法。表3还说明BCA法的精密度高于单波长与双波长紫外法，这是因为BCA法靠显色反应测试吸光度，灵敏度较高，且介孔分子筛不参与显色反应，抗干扰能力较强，重现性好，更适合介孔分子筛载体的酶固定量和酶泄露量的测试;紫外分光光度法受溶液中杂质和残留介孔分表3 SBA?15上的CRL固定量及载酶量◆: 固定量(amount of immobilized protein); ◇: 载酶量(enzyme loading).子筛干扰较大。由于双波长紫外法测定的酶固定量结果与BCA法较接近，若实验条件有限或者为了不消耗样品且干扰因素较少，可使用双波长紫外法来代替BCA法测定酶固定量，每个样品中的介孔分子筛干扰可通过物料衡算而抵消。3.2 不同初始酶浓度时BSA?15载体上的酶固定量利用BCA法测定不同初始酶浓度条件下LLSD1对CRL的固定量，图3表明当酶浓度较低时，SBA?15载体对CRL的固定量和载酶量随酶浓度的增加而线性增加，但是当酶蛋白浓度达到约0.29 g/L(粗酶浓度约1 g/L)时固定量和载酶量达到平稳，最大载酶量为114.2 mg/g。3.3 两种SBA?15载体的酶固定量在初始酶浓度均为2 g/L、分子筛用量均为0.12 g相同条件下，LLSD1和Lu001对CRL的固定图4 LLSD1(a)和Lu001(b)的SEM电镜照片Fig.4 SEM images of LLSD1(a) and Lu001(b)量分别为13.70和2.00 mg;载酶量分别为114.2和16.6 mg/g。可见，LLSD1的固定量及载酶量远大于Lu001。图4为LLSD1和Lu001的SEM电镜照片，可见二者外观形状基本相同，均属于SBA?15的传统形状[9]，二者大小也无明显区别。图5是LLSD1和Lu001的FT?IR谱图，从图中可看出LLSD1表面上的羟基基团数量大于Lu001。由于酶的吸附是酶和介孔材料表面上的羟基通过氢键作用完成的，介孔分子筛表面上的羟基通过氢键作用可以促进对酶的吸附[10]。因此， 图5 Lu001(1)和LLSD1(2)的FT?IR谱图Fig.5 FT?IR spectra of Lu001(1) and LLSD1(2)两种介孔分子筛对酶固定量差异很可能与介孔分子筛的羟基含量有关，具有较高羟基含量有利于固定更多的CRL。3.4 SBA?15固定化酶的泄漏量固定化酶容易“脱落”到水相中成为游离酶，即“泄漏”[11]。图6表明Lu001固定化CRL在缓冲溶液中100 h后的泄漏率为0.56%，LLSD1的泄漏率为0.53%，泄露量均较低，说明SBA?15是良好的酶固定化载体。泄露率较低可能与SBA?15孔径大小有关。研究[3,12]表明, 当介孔材料的孔径与酶分子大小相适应时，固定化酶的稳定性较好。Lu001和LLSD1的孔径均为7.18 nm，假丝酵母脂肪酶的动力学直径约为5 nm，二者大小较匹配，使酶分子恰好固定于孔内而不易发生泄露。◆，■，▲，● 为泄露量(leakage); ◇，口，△，○为泄露率(leakage rate)，其中◆， ◇ ： 0.12 g LLSD1， 载酶量(enzyme loading) 114.2 mg/g; ■,口： 0.24 g LLSD1， 载酶量(enzyme loading) 111.3 mg/g;▲, △： 0.36 g Lu001， 载酶量(enzyme loading) 14.2 mg/g;●,○： 0.36 g Lu001， 载酶量(enzyme loading) 16.6 mg/g。 1 Lei C, Shin Y, Liu J, Ackerman E J. Journal of the American Chemical Society, 2002, 124: 11242～112432 Lei J, Fan J, Yu C Z, Zhang L Y, Jiang S Y, Tu B, Zhao D Y. Microporous and Mesoporous Materials, 2004, 73: 121～1283 Essa H, Magner E, Cooney J, Hodnett B K. Journal of Molecular Catalysis B: Enzymatic, 2007, 49: 61～684 Rosales?Herńandez M C, Mendieta?Wejebe J E, Correa?Basurto J, Vázquez?Alcantara J I, Terres?Rojas E, Trujillo?Ferrara J. International Journal of Biological Macromolecules, 2007, 40: 444～4485 Gao Bo(高 波), Zhu Guang?Shan(朱广山), Fu Xue?Qi(付学奇), Xin Ming?Hong(辛明红), Chen Jing(陈 静), Wang Chun?Lei(王春雷), Qiu Shi?Lun(裘式纶). Chem. J. Chinese Universities(高等学校化学学报), 2005, 26(10): 1852～18546 Humphrey H P Y, Wright P A, Botting N P. Microporous and Mesoporous Materials. 2001, 44?45: 763～7687 He J, Xu Y, Ma H. Journal of Colloid and Interface Science, 2006, 298: 780～7868 Xu Jian(徐 坚), Yang Li?Ming(杨立明), Wang Yu?Jun(王玉军), Luo Guang?Sheng(骆广生), Dai You?Yuan(戴猷元). 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中小学校固定资产管理问题及对策论文
摘要: 近年来，我国对基础教育的重视程度越来越高，为了促进基础教育的发展，国家不断增加对基础教育的投入。在这种背景下，我国中小学办学条件有了很大程度地提高，学校固定资产数量也得到了快速增加，为教育工作有序开展提供了保障，但目前中小学校固定资产的管理工作中仍存在一些问题，影响了资产效能的充分发挥。本文阐述了新时期中小学校固定资产管理中存在的问题，并有针对性地探讨了解决对策。
关键词: 中小学校;固定资产;管理问题;对策
中小学校的固定资产为其教育教学工作的顺利开展提供了物质保障。近年来，随着国家对基础教育投入的增加，中小学校固定资产数量不断增加，这也对中小学校固定资产管理提出了新要求。而目前，中小学校固定资产管理中仍存在一些问题，导致固定资产管理过程中极易出现资产流失的现象，对固定资产的使用效率产生了极大的负面影响。面对这种状况，中小学校要加强对固定资产管理的重视程度，采取科学的措施对固定资产进行管理。
一、中小学校固定资产管理中存在的问题
(一)管理制度不完善
固定资产是中小学校扩大办学规模、开展教学科研活动的重要保障。而很多中小学校由于内部管理制度不健全，加上学校主要以教学工作为主，不以追求经济效益为目标，对财务管理重视不够，在购置固定资产后，疏于后续管理，使固定资产采购和管理之间存在着脱钩关系。主要表现在：在固定资产购置时重视资金投入，但是在购置后不能对其进行科学管理，有时造成固定资产管理中存在账实不符的现象。同时，中小学校在固定资产管理上没有制订有效的责任制度，使固定资产的管理存在不少问题，严重影响了资产的使用效率。
(二)采购过程不够民主
中小学校在固定资产采购中的问题主要是固定资产的采购缺乏民主决策，主要表现在:学校采购固定资产过程中一些采购项目没有经过领导班子的民主决策，采购前也未对设备的功能进行认真调研，导致决策存在失误的现象。比如，某小学为了实现现代化教学，增加了幻影灯和投影项目的资金投入，但是在投影设备采购之前没有经过学校行政集体的民主商议，使此次采购在过程上违背了内部控制的原则。
(三)财务制度不统一
在现阶段，中小学校财会制度主要有两种，一是1997年1月1日执行的《中小学校财务制度》，还有是1998年财政部、教育部制定的《中小学校会计制度（试行）》制度。这两种制度中对固定资产的定义不同。根据前者的规定，中小学校的.固定资产主要包括:单位价值在500元以上，使用期限在一年以上的一般设备；单位价值在800元以上，使用期限在一年以上的专用设备；单位价值虽然未达到规定标准，但使用期限一年以上的大批同类物资（如课桌、图书），也作为固定资产管理。根据后者规定，中小学校的固定资产应该满足两个条件，一是使用期限在一年以上；二是单位价值在规定标准以上。而我国2012年4月1日起施行的《事业单位财务通则》明确使用期限超过一年，单位价值在1000元以上（专用设备1500元以上）的资产作为固定资产管理。三者的不统一，给财务人员在实际工作中带来了职业判断，影响了中小学校纳入固定资产核算管理范畴。
二、加强中小学校固定资产管理的对策
(一)加强制度管理
目前，中小学固定资产管理存在的主要问题在于管理制度不够健全。为了加强固定资产的管理，中小学校应该真正认识到加强固定资产管理的重要性，建立健全固定资产管理制度，为固定资产的管理工作提供制度保障。在固定资产管理制度执行过程中，学校要加强爱护固定资产的宣传，同时还要在管理制度中明确管理责任和盘点清查制度的具体落实，使固定资产的使用率得到提升。在固定资产管理过程中，学校还应该执行落实管理制度，责任到具体的部门和岗位，避免固定资产管理制度流于形式，不能发挥其应有的作用。
(二)树立固定资产管理的责任意识
在中小学校固定资产的管理过程中，学校领导对管理工作的重视程度会对管理质量产生直接影响。现阶段中小学校固定资产管理中之所以会存在诸多问题，在很大程度上是因为学校领导不够重视固定资产的管理工作，导致管理人员在工作中没有树立起足够的管理意识和责任意识。为了加强对固定资产的管理，学校领导就必须重视固定资产的管理工作，带领全校师生树立固定资产管理的责任意识。此外，为了加强管理人员的责任意识，学校还应该组织管理人员进行培训学习，使其能够明白各自的职责所在。
(三)改进财务制度
中小学校现阶段执行的财会制度的主要问题是没有对固定资产进行科学的划分。在改进财会制度时，应该重视原财会制度中评判标准不明确的地方，对其做出进一步统一。为了解决财会制度给中小学校固定资产管理带来的不良影响，财政部门和教育部门应该结合实际情况，为不同学校的固定资产管理制定不同的参考数值。比如，城市和农村的教育发展状况不相同，财政部门和教育部门可以根据城市和农村的具体情况制定符合其实际的固定资产数额标准，这样可以使中小学校的固定资产管理能够实现量化管理。此外，在新的财会制度中，还要对专用的设备和一般的设备进行区别，避免因为其随意划分给固定资产管理带来不便。
三、结束语
中小学校的固定资产是其教学的物资保障，它的管理对学校教育教学工作的顺利开展有着直接的影响。目前，我国中小学固定资产管理中还存在着不少问题，使固定资产管理的效果没有达到令人满意的程度。我们要根据固定资产管理中存在的现实问题，制定针对性的措施，着力解决问题，才能提高中小学校的固定资产管理工作质量，从而保障中小学校固定资产的作用能够得到充分地发挥。
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企业固定资产管理问题分析论文
摘要 ：固定资产是企业生产运行的物质基础和重要资源，在企业的经营活动中占据的地位越来越重要。虽然很多企业都制定了固定资产管理工作的相关条例，但是受多种因素影响，企业固定资产管理过程中还存在问题。本文主要基于现有的会计理论和相关的法律法规，列出了固定资产问题的表现，具体分析了产生问题的原因。为此提出了一系列针对性的对策。期望这些对策能够帮助问题企业改善固定资产管理，提升市场竞争力，进而保证企业的经济效益。
关键词： 企业；固定资产；管理
一、固定资产管理对企业发展的重要意义
（一）遵循固定资产的基本原则，能提升市场竞争力
1.充分使用固定资产，提高利用效率
不少企业因为缺乏一整套的固定资产管理流程，造成执行人员的管理方法模糊，固定资产闲置情况严重，不能做到物尽其用，长安福特在固定资产管理方面就有其优势，长安福特公司固定资产管理人员按程序办事，一方面盘点旧的固定资产，另一方面根据企业发展状况对新增固定资产部署好投入生产经营的准备工作，充分使用固定资产。时时关注企业下一时期的发展，从而做好固定资产的准备工作。管理人员明确按照程序执行工作任务，提高了固定资产的使用效率，提升了企业的市场竞争力。
2.执行实物负责条例，管理工作更流畅
固定资产管理制度上要明确规定实物管理按哪个部门使用，就有哪个部门管理的原则进行分工，保管员及时报告物资存储情况，入库固定资产必须按照类别，按固定位置摆放。每个工作日结束后，出入库单记账联及时交给财务部，便于财务部及时调整固定资产的会计账簿。工作过程中将固定资产按本身的分类口径和具体内容以及分布特点，依照企业的组织结构和职能部门的具体划分，随时按照固定资产的变化实行分级管理和归口管理。
3.及时更新固定资产，保证企业正常经营
任何固定资产都有使用年限的规定，但不是所有的固定资产都能使用到最后，固定资产会存在减值、损毁、报废等情况。如果企业更新了生产技术，但现有设备落后或陈旧，就要更新固定资产，不然就会造成企业经济利益的直接损失。又或者固定资产在某一时期的使用效果和效率的降低，也要更新固定资产。总而言之，在固定资产的黄金时期要能为企业创造经济效益，而到了规定的使用年限要及时更新。
（二）固定资产能提高企业的经济效益，提升企业形象
随着企业的良性发展，固定资产的总量会逐步上升。固定资产在财务报表的列示中，它的价值反映了企业偿债能力的大小。而后众多的投资、合并都与固定资产有着密不可分的联系。固定资产的本身价值是另一方衡量企业经营状况的一个因素，到底适不适合投资或兼并我方企业？一旦成功，固定资产为企业创造新的收益。由此可见，固定资产管理水平的提升为企业增加了获得更多经济收益的可能性，进而提升了企业形象。
二、企业固定资产管理存在的问题及原因分析
（一）企业管理者对固定资产管理意识淡薄
很多企业对其自身的固定资产管理意识都不是很强，对固定资产的管理缺乏相应的重视与了解。有些企业虽然制定了固定资产管理的相关条例，但仍存在实际的管理过程中，做出具有主观色彩的管理决策，使之前制定的条例失去了相应的效果。管理层制定决策会以一段时期内的销售报告单作为直接材料，而并不关注与之相辅的其他材料。因为销售业绩能够直接反映经济效益的好坏，主观上能够直接做出判断。而固定资产管理的好坏，对成本费用的影响需要专业的财会人员客观分析得出，对经济效益的影响是间接的，就造成了管理层对固定资产管理的忽视。
（二）企业固定资产管理中存在账目与实物不符的问题
在固定资产管理中，账、卡、物三者相符是最基本的原则。但实际工作中经常会出现账目与实物不相符的情况，例如，实物已经支出，会计处理仍然保持原样，导致资产存量不清这就是有实无账。对拆迁、报废、调出的资产未核销就是有账无物的表现。一些企业的账面只反映固定资产的账面价值，没有记载实物资产数量及其价值明细是账实不对应的表现。这些表现产生的`原因如下归纳分析。
1.固定资产信息共享性程度不高
最大的源头在于职能部门之间不衔接的工作，不仅存在着管理上的断裂带，还存在着多部门之间共同管理同一实物的现象。各职能部门之间各自为政的现象严重，尤以资产使用部门，资产管理部门以及财务部门问题突出，这就容易造成开展固定资产管理工作缺乏衔接性，信息不能及时更新，更容易出现问题发生后相互推诿的现象，结果使账目与实物不符的问题出现在固定资产管理当中。
2.管理人员的管理范围混乱
企业使用固定资产的过程分为计划、采购、验收、使用、修理、维护、保管、处置、报废。这一系列过程是基于固定资产的生命周期管理理论。有的企业中计划，采购，验收是同属于采购部门，没有专门设立验收部门，这就容易造成固定资产从购置环节的流失与闲置。然而使用、修理、维护、保管、处置、报废又都属于资产管理部门，不设立资产使用部门。这就容易造成企业财务部门信息滞后，不能及时反映固定资产的账务情况。最终固定资产不仅不能给企业带来价值，而且会吞噬企业的经济效益。
3.企业的固定资产清查工作不及时
原本企业设立清查制度是为了发现固定资产日常管理中的问题，分为定期清查和不定期清查。一方面有的企业的管理人员拘泥于传统的定期清查，出现了“到时再查，不到不查”的现象，一旦企业的固定资产出现经济损失，相关的监管工作人员逃避责任，导致账目与实物有所出入。另一方面有的企业的定期清查制度形同虚设，更有甚者就算检查过后也没有及时向财务部门上报，导致信息不同步更新，当然会出现实物与账目不符。
（三）企业固定资产的不正常流失
固定资产的不正常流失有多种表现形式，企业人员对固定资产的考评不真实，虚增企业的运营成本，还有一些企业员工利用职务便利，转售固定资产，使企业财务审计不合格，造成固定资产的不正常流失。在企业的固定资产的日常维护与管理阶段的工作并不到位。一些固定资产“带病”工作，增加了企业的维修成本，从而使固定资产不能及时实现应有的价值，固定资产人为流失事件频发。于是分析得出是以下原因造成固定资产不正常流失。
1.企业固定资产的管理制度不健全
企业固定资产的全过程包括计划、采购、验收、使用、修理、维护、保管、处置、报废这九个环节。然而有的环节企业没有做出明确的管理制度，导致企业的固定资产管理不在掌控范围内。再加上由于企业规模的限制和自身经费的问题，没有设立监督固定资产管理人员的专门部门，管理制度也因此缺失这一方面的制定，于是就造成固定资产闲置或者流失问题严重。
2.不能合理配置人员，岗位责任划分不具体
固定资产一旦投入使用，也是管理人员工作最难的一部分，不少企业在这个环节出现问题。在这个环节第一要求是企业合理配置人员。但有些企业的后勤部门定期维护与检修固定资产人员少，不可能记住每一台设备检修时间，使用部门不能及时处理，造成机器无法正常运转。财务部门人员只能进行财务核算，不深入对机器进行了解，已经计提过折旧了，还是按照原有的公允价值计价，导致企业成本升高。管理部门不止要管理固定资产，还有其他方面的管理工作，部门人员会因为事务繁杂做不到定期盘点与清查，造成了固定资产流失严重。
三、改进企业固定资产管理的对策
（一）提高管理人员素养，加强企业文化建设
1.引入奖惩机制，提高管理人员素养
企业要强化对固定资产管理人员的培养，增强管理意识，提高业务水平与道德素质。根据各部门在固定资产管理中分工不同，要有针对性地培训管理人员。以明确规范的制度落实固定资产的管理工作，要求每位管理者从思想上高度重视企业的固定资产管理。对固定资产的购置，管理，退出制定统一标准，确保固定资产的安全完整。从行动上，拟定固定资产管理工作规范化考核办法，组织专门小组监督工作任务完成情况，确认为工作任务完成优秀，给予物质奖励。对违反规定者或没有完成工作任务者，给予相应的批评和教育，直至改正。
2.加强企业管理文化建设
文化是一个企业的灵魂，管理文化是固定资产管理工作开展的基本前提。管理层要形成自己的核心理念，才能促进企业员工更好地工作，固定资产管理工作才能顺利的展开，有效避免有些问题的发生。所以管理人员要结合社会文化，企业实际制定企业管理文化，形成一种独有的企业管理文化氛围，更好地开展固定资产管理。
（二）依靠现代信息技术，实施动态监控固定资产
1.部门之间利用现代信息技术进行数据连接，实现信息共享
建立以先进，科学的企业管理观念作为依据，形成高度整合化的信息系统。使该系统实现对固定资产的全过程管理，达到信息共享的效果。使它主要对固定资产实行“身份证”管理，做到一物一卡，帮助企业实现对固定资产的分类管理，同时财务部门能够进行固定资产核算，并与实物信息进行电算化比对，帮助管理人员对固定资产做出正确决策，实现全方位监控。
2.划分管理层的管理范围，建立有效的固定资产管理体系
固定资产管理工作复杂烦琐，需要清楚的划分管理范围，下设多个部门，这就需要建立有效的固定资产管理体系。那么建立体系的三字经：“进，出，用”。“进”指固定资产的采购要严格，全方位控制年度预算，每年的预算要慎重考虑，细致审批。“出”指固定资产的处置，无论是固定资产的报废还是转售，都必须有严格的程序处理与文档资料。“用”最重要的点在于每一项固定资产都要有相应的管理责任者。
3.监督部门要及时监督清查工作，并进行评分考核
清查工作要及时完整，需要清查人员与监督人员的共同协作，对于报废，损坏，查明不清的固定资产做出详细的记录，两部门之间需要比对记录材料，以防数量不符，造成以后账目的问题。监督部门要给清查人员在清查工作中的表现打分，分为认真程度，材料填写是否规范，实物数量是否正确，自我评价程度是否符合实际四个部分。
（三）从管理制度的健全和人员配置方面改善固定资产的不正常流失
1.完善企业固定资产管理制度，使之更加规范化
改善固定资产管理制度，使企业固定资产的管理制度得以完整落实到实际工作中。需要改善固定的资产盘点制度，划分盘点人员、盘点方式、盘点地点、盘点时间及盘点记录人员。将任务分配给各个部门，各个部门明确划分给各个岗位，做到人尽其责，物尽其用。企业固定资产应严格核算，合理选取折旧方法，使固定资产账目与实物紧密联系。此外，对于先进的管理方法也要渗透到固定资产管理制度上。
2.合理配置人员，具体划分岗位职责
企业需要合理配置管理人员，对于管理人员要求有相应的职责。在管理规范上具体写出岗位需要在固定资产管理中哪一时间段做哪一个工作，这样严格按照规范会减少固定资产的人为流失。将固定资产的日常检修与保养部门人数加多，延长固定资产的使用寿命，减少了固定资产购置成本，也就降低了固定资产闲置与流失的频率，也优化了固定资产日常管理环节的工作。
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浅析固定资产折旧内容提要：本文从三个方面谈了固定资产折旧的问题。第一部分，简述《企业会计制度》对固定资产折旧的有关规定;第二部分，对现行制度中固定资产折旧用原始价值计算的弊端分析;第三部分，实际工作中固定资产折旧核算方面存在的问题及原因。固定资产是企业资产的重要组成部分，大多数生产企业固定资产占整个企业资产总额的一半以上，而且固定资产的单位价值也较高。固定资产的价值损耗是通过计提折旧的形式进行补偿的，计提的折旧计入企业的成本、费用，是成本费用的重要组成部分，如何合理、正确地进行固定资产折旧的核算，关系到企业经营成果的真实性和合理性，因此，固定资产折旧问题是固定资产管理的重要问题。下面通过对《企业会计制度》中固定资产有关问题的学习，并结合固定资产管理的实践工作，对固定资产折旧谈点粗浅体会。一、《企业会计制度》对固定资产折旧问题的有关规定固定资产折旧是对固定资产由于磨损和损耗而转移到产品中去的那一部分价值的补偿。这种磨损和损耗包括有形损耗和无形损耗，有形损耗指由于物质磨损、时间侵蚀、外部事故、破坏因素等原因形成的。无形损耗指由于技术进步造成的固定资产使用效能下降，主要从经济角度来考虑。固定资产折旧是一种费用，只是这种费用没有在计提时发生实际的货币资金支出，属非付现成本。这部分费用计提进入产品生产成本、期间费用等，在企业的生产经营过程中逐渐得到补偿，为企业的固定资产更新，维持和扩大生产经营规模做好资金积累。固定资产折旧计提数额受以下四个方面因素的影响;1、计提折旧基数，计提折旧基数是固定资产的原始价值或帐面价值。制度规定，一般以固定资产的原价作为计提依据，但选用双倍余额递减法计提折旧的企业，以固定资产的帐面净值作为计提依据;2、折旧年限，折旧年限的长短直接关系到折旧率的高低，是影响折旧额的关键因素;3、折旧方法，固定资产折旧方法包括年限平均法、工作量法、年数总和法和双倍余额递减法。企业应根据固定资产所包含的经济利益预期实现方式选择折旧方法，折旧方法一经选定，不提随意变更;4、净残值，是指预计固定资产清理报废时可收回的残值扣除清理费用后的数额。企业应根据固定资产的性质和使用方式，合理估计固定资产的净残值。企业应定期对固定资产的使用寿命，折旧方法进行复核。如果固定资产使用寿命的预期数与原先的估计数有重大差异，则应相应调整折旧年限;如果固定资产包含的经济利益的预期实现方式有重大改变，则应相应改变折旧方法。制度规定，企业应合理确定固定资产的使用寿命和预计净残值，并根据科技发展，环境及其他因素，选择合理的折旧方法，按照管理权恨，经股东大会或董事会，或经理(厂长)会议或类似机构批准，作为计提折旧的依据。同时，按照法律、行政法规的规定报送有关各方备案，同时，备置于企业所在地，以供股东等有关各方查阅。企业已经确定并对报送的固定资产预计使用寿命、预计净残值、折旧方法等，一经确定不得随意变更，如果发生上述情况需变更，仍应按有关程序，经批准后报送有关各方备案，关在会计报表附注中予以说明。制度规定，固定资产应按月计提折旧，并根据用途分别计入相关资产的成本或当期费用。实际计提时，当月增加的固定资产，当月不提折旧，从下月起计提;当月减少的固定资产，当月仍提折旧，从下月起停止计提。除下列情形外，企业应对所有固定资产计提折旧：(1)已提足折旧仍继续使用的固定资产;(2)按规定单独作价作为固定资产入帐的土地。另外，已达到预定可使用状态的固定资产，如果尚未办理竣工决算的，应当按照估计价值暂估入帐，并计提折旧;待办理了竣工决算手续后，再按照实际成本调整原来的暂估价值，同时调整计提的折旧额。对已计提减值准备的固定资产，应按该固定资产计提减值准备以后的帐面价值以及尚可使用年限重新计算确定折旧率和折旧额，对以前计提的折旧不作调整。如果已全额计提减值准备的固定资产，不再计提折旧。当企业提取及转回固定资产减值准备时，固定资产帐面价值就需要在资产净值的基础上，考虑减值准备进行调整计算净额。应视为取得新的固定资产，重新确定该固定资产的原值，重新估计尚可使用年限，确定新的折旧率和折旧额，开始新一轮的折旧计算。二、固定资产折旧以原始价值计算的弊端《企业会计制度》规定，一般以原始价值作为计提固定资产折旧的基数，随着经济社会的发展，现代企业制度的建立，我们关注一个企业，更多的是看它的现实价值及预期获利能力，因此，从发展的眼光看，固定资产折旧以原始价值计算有一些弊端。折旧是对简单再生产资金的补偿，现行制度以原始价值作为折旧计提基数，这样，在固定资产的有效使用年限所计提的折旧额，只能做到帐面价值上的补偿。对固定资产计提减值准备只考虑了资产价值发生减损的情形，在固定资产重置价值升高的情况下，所计提的折旧额并不能做到实物更新上的资金补偿，难以达到实物资本的保全，就不能维持实物规模上的简单再生产。如：一台设备帐面价值原值20万元，重置价值30万元，以帐面原值计提折旧收回的资金为20万元，更新设备时需30万元，用计提的折旧资产更新设备尚有10万元资金缺口。目前，很多企业均存在这样的问题，由于没有按重置成本计提折旧，使维持简单再生产的资金被消耗到其他方面，或者变成虚假利润而分解掉。这样就造成，一方面更新固定资产的资金短缺，另一方面又用虚假利润去上新项目、铺新摊子，项目还没上马，就面临资金短缺问题。设备更新和上新项目的资金都没能落实，反而加重企业负担，使我们看似宠大的企业日益空壳化，形成企业虚盈实亏，无法维持企业简单再生产。我认为，对重置价值发生变化较大的固定资产，应按重置价值及尚可使用年限重新确定固定资产折旧的计提数额。这样，将会给我们的财务人员增加繁重的工作量，同时也应得到企业管理人员的重视，以及实物资产管理部门的密切配合，才能做好这项工作。企业应当定期或者至少于每年年度终了对各项固定资产进行全面检查，按重置价值来逐项分析、计算，重新确定部分资产的折旧额。另外，改变折旧计提基数以后，对固定资产以历史成本计价的问题也应随之而改变，按现行成本(重置成本)计价，就要对固定资产的原价进行调整，以便与计提折旧基数一致。这样，还可解决购买使用时间较长的固定资产其原始价值与市场价值相背离的问题，使固定资产的实物资本得以保全，达到费用与收入真正配比，在物价上涨时期，不至于发生由于计提折旧额问题而导致的虚盈实亏现象。三、实际工作中固定资产折旧核算方面存在的问题除以上弊端外，在实际工作中，由于受主客观因素的影响，在进行固定资产折旧核算过程中还存在一些问题，具体表现在以下方面：1、固定资产的价值管理和实物管理相脱节，造成固定资产折旧核算不完全，或多计提折旧，影响企业的经营成果。主要由于在实际工作中，资产的价值管理和实物管理分属不同部门。如果对固定资产不进行及时核对，就造成该入帐资产不及时入帐，或该清理报废资产未及时核减，造成固定资产价值不真实，从而导致折旧核算上的不真实、不准确，影响企业各项成本费用及利润核算的真实性。2、未按规定范筹计提折旧，任意扩大或缩小计提固定资产折旧的范围，以增加或减少折旧费用，最终达到控制、操纵利润的目的。3、未按规定选用折旧方法，主要表现为以下几种情形：(1)不属于国家允许选用加速折旧方法计提折旧的企业，却选用加速折旧方法;(2)有些企业将国家不允许采用加速折旧方法的某类固定资产选用加速折旧方法;(3)某些属于技术进步型的企业，应采用加速折旧方法，却选用了平均年限法或工作量法，显然不符合固定资产更新的特点。4、未按规定确定折旧年限，导致折旧额在整个固定资产有效使用年限内的不合理，影响经营成果的准确性。5、折旧方法和折旧年限随意变更，却未按规定办理相关报批手续，变相地任意调整利润(或亏损)，造成经营决策上的失误。6、固定资产净残值预计不合理，造成在固定资产有效使用年限折旧核算不正确，也影响企业财务成果的真实性和合理性。以上问题的发生，有的是企业经营者的需要，为完成上级或主管部门下达的利润指标，不按财务会计制度规定进行会计核算，任意少提或多提固定资产折旧，从而达到操纵利润的目的，财务人员不得以而为之。如美国废品管理公司财务舞弊案中，其舞弊手法之一就是随意改变折旧年限和折旧方法，蓄意少计折旧费用，截止到1996年，该公司通过这些方法，累计少计提的车辆、船队、设备和容器器具折旧费用达5.09亿美元。但多数情况是由于部分财务人员的专业知识不强，业务水平偏低，工作经验不足所造成的计算折旧额的错误。因此，作为市场经济迅猛发展时期的财务人员应以诚信为本，严格遵守《会计法》和会计制度的规定，抵制各种违规违纪行为的发生，不断加强相关专业知识的学习，提高自己的专业素养和职业道德。另外，还要熟悉了解各类固定资产的特点，并结合企业生产经营实际情况，确定合理的折旧计提基数、计提范围，合理预计净残值，选择合理的折旧方法、折旧年限，科学、合理地进行固定资产折旧核算，为企业经营决策提供准确的会计信息。来源：中顾法律网
折旧计算的方法 从上讲，在选择折旧方法时应考虑以上因素，但实际操作中，在多数情况下，仅是一个或少数因素起决定作用，作用小的其他因素则可以略而不计。通常在普遍使用的几种折旧方法中假若某种方法一般来看是合理的，或是符合所得税法要求的，就可选用这种方法。折旧的方法是经国家确认的企业计提固定资产折旧所应遵循的规则，通常固定资产折旧的方法分为两类，一类是直线法，一类是加速折旧法。财政部结合我国企业现状和实际要求，改革了单一的折旧方法，增加了加速折旧法，允许企业多种折旧方法并存。企业可采用的折旧方法一般有平均年限法、工作量法、行驶里程法、加速折旧法等。加速折旧法包括余额递减法、双倍余额递减法、年数总和法、平均年限法、工作量法、年率递减法、年金法和偿债基金法等。考虑我国实际情况，财政部规定企业可选择的折旧方法一般有4种，即平均年限法、工作量法、双倍余额递减法、年数总和法。根据企业的现状及国家的财政承受能力，我国对实行加速折旧方法的范围也作了限定，对在国民经济中具有重要地位、技术进步快的生产企业、船舶企业、生产“母机”的机械企业、飞机和汽车制造企业、化工和医药生产企业以及其他经财政部批准的行业企业，其机器设备可以用双倍余额递减法或者年数总和法加速计提折旧。 2.2 对几种常见折旧法的探讨 虽然折旧的方法有很多，但我国允许企业选用的折旧方法只有以下4种：直线法、工作量法、双倍余额递减法、年数总和法。折旧方法一经确定，不得随意变更，如要变更需在财务报表的附注中加以说明〔4〕。近年来，人们对加速折旧法表示强烈的兴趣，笔者也认为此方法相对其他方法更加切合实际，覆盖问题更全面，下面对4种方法进行叙述和比较。 2.2.1 直线法 直线法即平均年限法，它假定折旧是由于时间的推移而不是使用的关系，认为服务潜力降低的决定因素是随时间推移所造成的陈旧和破坏，而不是使用所造成的有形磨损。因而假定资产的服务潜力在各个会计期间所使用的服务总成本是相同的，而不管其实际使用程度如何。 由于直线法模式简单，只有在以下各项条件之下才是正确的：（1）利息因素可以略而不计，或投资成本假定为零；（2）修理和维修费用在整个资产使用年限内是固定不变的；（3）最后一年资产的效率与最初一年是相同的；（4）使用资产所取得的收入（或现金流量）在整个使用年限内是固定不变的；（5）各种必要的估计（包括预期使用年限）都是可予以相当确定的预计的。 由于以上各项因素的不确定性，要使任何折旧方法对所有各种因素都考虑到是有困难的。如果有些因素可以适当抵消，通常都认为直线法最为适宜。例如：操作效率的降低及修理和维修费用的增加，恰好为收入的增加及保险费和财产税的减少所抵消。此外，由于直线法通俗易懂，核算简便，同时根据这种方法计算出来的固定资产有效使用期内各年度或月份提取的折旧额相等，使企业产品成本稳定并具有较强的可比性。 但同时直线法也存在着一些缺点，它忽略了折现因素，按直线法计算的净利，会给人们以投入资本总额的收入率在不断提高的假象。 2.2.2 工作量法 工作量法是按照期内固定资产的预计完成的工作量来计提折旧的一种。实质上，工作量法是平均年限法的补充和延伸。根据规定，专业车队的客、货运汽车、大型设备以及大型建筑施工机械可采用工作量法计提折旧。由于各种专业设备具有不同的工作量指标，因而，工作量法又有行驶里程折旧法和工作小时折旧法之分。工作量法假定折旧是一项变动的，而不是固定的费用，即假定资产价值的降低不是由于时间的推移，而是由于使用的缘故。 对于许多种资产来讲，工作量法这一假定是合理的，特别是在有形磨损比折旧更为重要。 因而，如果某项资产在年度内没有使用，就不应计列折旧费用，因为资产的服务价值并没有降低。即使折旧是确定资产预期使用年限的一个重要因素，如其折旧是可以预见的，并且，资产的大概使用状况是可以估计的，就可以使用以经营活动为依据的折旧方法，使用这种折旧方法的主要目的是按每个服务单位分配投入价值，对服务价值降低的计量则是次要的。 尽管在资产的服务价值随使用而降低的情况下，工作量法看来还是十分理想，但在使用中它往往存在一些严重缺点：（1）即使每年的折旧费用是变动的，工作量法仍然类似于直线法。因为它假定每一服务单位分配等量的折旧费，但是，假定每一服务单位的成本相等是没有根据的。而且，由于在后期有些服务单位尚有待于日后使用，整个服务价值的降低事实上并不是均匀的，除非假定利率为零；（2）工作量法未能考虑到修理和维修费用的递增，以及操作效率或收入的递减等因素。 2.2.3 加速折旧法 双倍余额递减法和年数总和法都是加速折旧法的一种。主张采用加速折旧法的各项条件是：（1）在不考虑资本的利息或成本的情况下递减每年的服务贡献；（2）操作效率的降低会导致其他业务费用的增加；（3）资产价值早期降低很多，后期降低较少；（4）即使早期和后期耗用的服务价值相同，其折现价值也不同，因而早期服务价值成本要比后期大；（5）修理和维修费用的递增；（6）现金收入逐年降低；（7）由于存在着折旧的可能性所造成的以后年度收入的不确定性。 主张采用加速折旧法的一个主要论据是资产净收入贡献的递减与操作效率是相互关联的，并对各期应负担的折旧费具有同样的。资产净收入的减少可能是由于资产在后期需要更多的修理时间和修理费用，或过度使用易于发生事故，因而减少使用，也可能是由于操作效率降低而产量减少。操作效率降低还会造成燃料成本和人工成本的升高，或者在原料使用方面造成较大的浪费。所有这些均说明资产的净收入在后期要少于早期，因而，即使不计利息成本，资产净收入的减少也证明使用加速折旧法是合理的。 预期现金收入的递减也是采用加速折旧法的一个理由，可以认为，资产的原始成本在早期获取收入过程中所耗用的要比后期大，因此早期折旧费应大于后期。 修理和维修费是逐年递增的，为了补偿递增的修理和维修费，应采用加速折旧法。修理和维修费用与折旧是相关的，应该包括在服务的总成本或净收入的计算中。 折旧费分配中最难处理的一个因素是不确定性。预期使用年限、预期净收入和未来的修理和维修费用，均具有不确定性。在大多数情况下，不确定性可根据风险选择所调整的期望值，将不确定数值转化为单一的确定数值。收入的不确定性为加速折旧法提供了一定的依据。因为早期收入比晚期收入更有把握，在开始指定投资决策时，对晚期收入所打的折扣应当更大些，所以，应将大部分资产成本分配于早期。虽然这些不确定因素不足以证明加速折旧法就是合理的，但相对其他方法而言，加速折旧是最趋于现金收支的一种方法。
1923年5月17日（中华民国十二年），邹承鲁出生于山东省青岛市，父亲邹东湖是铁路职员。由于父亲的工作性质，邹承鲁常随家搬迁，小学期间在沈阳度过。九一八事变后，全家迁回关内，到达武汉，读中学。1938年（中华民国二十七年）武汉沦陷，又搬到重庆。1941年（中华民国三十年），毕业于南开中学高中部；同年，考入设在昆明的由北京大学、清华大学、南开大学三校联合组成的西南联合大学，就读于化学系， 1945年（中华民国三十四年）西南联大化学系毕业。1946（中华民国三十五年）年，邹承鲁在招考英庚款公费出国留学生的考试中，以第一名的优异成绩被录取。赴英后，师从英国剑桥大学著名生物化学家D 基林（Keilin）教授 ，从事呼吸链还原酶研究。研究生期间，邹承鲁在国际上最早用蛋白水解酶部分水解方法研究蛋白质结构与功能的关系，单独署名的论文在英国《自然》杂志发表。并发现细胞色素c纯化后与线粒体结合时在性质上发生变化，证明细胞色素b与琥珀酸脱氢酶不是同一物质。1951年，邹承鲁获英国剑桥大学生物化学博士学位。 1948年（中华民国三十七年），邹承鲁与李四光的女儿李林在英国伯恩茂斯海边举行婚礼。 1951年回国，邹承鲁与王应睐及汪静英合作纯化了琥珀酸脱氢酶，并发现其辅基为与蛋白部分共价结合的FAD，这是一个被发现与蛋白质共价结合的FAD辅基。此外，他们对呼吸链及其他酶系也进行了一系列工作，为中国酶学及呼吸链的研究奠定了良好基础。 历任中国科学院生物化学研究所、生物物理研究所副研究员，研究员，室主任，生物物理所副所长，生物大分子国家重点实验室主任等职。1958年，邹承鲁参加发起人工合成胰岛素工作，并负责胰岛素A和B链的拆合。这项工作的完成确定了胰岛素全合成的路线，为胰岛素的人工合成做出了重要贡献。胰岛素人工合成工作集体获1978年国家自然科学奖一等奖和1997年求是奖。 1979年，邹承鲁发现甘油醛-3-磷酸脱氢酶在活性部位形成荧光衍生物的工作在英国Nature杂志发表，这是“文革”后中国科学家在Nature发表的第一篇论文，研究成果获中国科学院科技进步奖一等奖。1980年，当选为中国科学院院士（学部委员） 1981年，邹承鲁首次在科学界提出“科研道德”问题。“科学研究来不得半点虚假，可是有的人却弄虚作假，用以追逐名利。个别人甚至不择手段剽窃他人成果，就更令人不能容忍。” 2001年，在“核酸风波”中，邹承鲁提出核酸营养没有任何科学依据，并还公开指责生化学会一位副秘书长为核酸营养品作商业宣传。 2003年，邹承鲁在中国科协年会总结了中国科学工作者违背学术道德的七宗罪：伪造学历、工作经历；伪造或窜改原始实验数据；抄袭、剽窃他人成果；贬低前人成果，自我夸张宣传；一稿两投甚至多投；在自己并无贡献的论文上署名；为商业广告作不符合实际的宣传。 2006年11月23日，邹承鲁因病医治无效在京逝世，享年83岁。
本来国际上的规定是上报的得奖人数不得超过3人，可是中国当时的社会一定要搞团结集体主义，还有上级领导的压力，最后报了四个人（因为不让谁上都不好），还想象着可以给个面子破例一次，但评委会（应该就是这类组织吧）一怒之下就不给奖了，因为中国人无视人家定的规则，所以我们自主研发的成果就这样与诺贝尔奖擦肩而过……这是我们生物老师给讲的，而且正史一般都是说好听的，蒙蔽真相吧，我们老师是从那个时候过来的呢。
今年是中国科学家人工合成结晶牛胰岛素44周年。1965年9月17日，中国科学院生物化学研究所等单位经过6年多的艰苦工作，第一次用人工方法合成了一种具有生物活力的蛋白质———结晶牛胰岛素，作为中国人的骄傲，许多人认为，这是中国科学家与诺贝尔奖距离最近的一次。它和“两弹一星”研究一样，也是中国人在科学领域的面子———不但证明了 中国人是聪明的，增强了中华民族的自信心，还证明了中国在科研领域可以和西方发达国家相竞争，甚至在一穷二白的基础上做出世界一流的成果。 40年来，围绕这项工作，已经出现过数以千计的各种形式的报道。但是，在这个为期六七年的研究中，还有一些鲜为人知的故事，其中，被探究得最少的可能是1960年前后的“大兵团作战”。 以科学家为中心 人工合成胰岛素课题于1958年12月底正式启动。由于工作非常艰难、工作量非常大，而自己既缺乏有机合成经验，人手又不够，所以刚一开始，课题的首倡者中国科学院生物化学研究所就先后请求与中国科学院有机化学研究所、北京大学化学系有机教研室合作。有机所不肯加入，而北京大学很快就同意了。经过几轮磋商，1959年3月，生化所和北大化学系签定了合作协议。刚刚于1958年由生化所协助建立的复旦大学生物系生化教研室也想参加胰岛素合成工作。生化所不太愿意，只同意让它参与做一点天然胰岛素的制备工作，没把它列为正式的协作单位。 北京大学的相关工作由有机教研室主任邢其毅教授、研究组组长张滂教授领导。他们和陆德培等4位青年教师、季爱雪等4位研究生一道，带领有机专业的十多名应届毕业生以毕业论文的方式开展合成研究。而生化所则建立了由邹承鲁、钮经义、曹天钦、沈昭文等人分别负责的5个研究小组，他们各带了一批年轻的科研人员，分头探路———因探路成功而一直延续下来了的只有由邹承鲁负责的天然胰岛素拆、合小组和由钮经义负责的胰岛素肽链有机合成小组。 经过一年的探索，到1959年底时，他们虽然未能像早期计划的那样完成胰岛素工作，但也已获得拆、合天然胰岛素等几项重要的成果。这不但基本解决了合成工作大的路径问题，还给一些领导干部造成了该研究只剩了“堆肽”技术活的印象。 北京大学开展群众运动 就在这时，“反右倾”运动迎面扑了过来。就像“大跃进”运动导致了胰岛素人工合成课题的提出一样，1959年的“反右倾”运动也影响了胰岛素工作的研究方式。作为直接的导火索，它给胰岛素工作带来了一种富有时代特点的科研方式———“大兵团作战”。 很多年以来，北京大学一直处于时代的漩涡中心，这一次，又率先响应了上级的号召，最早开展了轰轰烈烈的群众运动。1959年底，在新调来的系党总支书记的领导下，化学系的学生对自己的老师展开了猛烈的批判，批判他们信心不足、固步自封、按部就班、有名利思想、走白专道路、奉行“爬行主义”、小团体主义和本位主义，在科学研究方面搞神秘论，把科研工作进行得“沉沉闷闷”、“冷冷清清”，等等。 批判结果之一是胰岛素合成工作的领导班子被彻底改组：原来的领导人中，张滂被开除出胰岛素合成队伍，留下来的邢其毅也因为“对合成胰岛素不积极”而不再对这项工作具备发言权。改由1958年才毕业留校的一位青年教师负责业务工作；1960年4月时，又有十多位同学提前3个月毕业，作为“会战组”党支部委员加入了领导班子；新来的系党总支书记直接领导他们。在这些缺乏科研经验的新班子的指挥下，北大化学系及少量生物系“革命师生”共约300人“参加了这场科研大战”，一大批“连氨基酸符号还不认识”的青年教员和三、四、五年级学生成了胰岛素研究的“尖兵”，成了“科研的主力军”。他们“从无到有，从不会到会”，“不懂就学，遇到困难就学毛主席著作”。 在这些人看来，合成多肽是一件非常简单的事：“把两段多肽倒到一起，就叫合成了一个新的多肽———也没问是否发生了反应，具体产物是什么东西。”邢其毅等“老”科学家和原来那些比较“右”的青年教师当然不太认同那些做法，但他们不敢说，只能根据组长、小组长等人的指示执行属于自己的工作。于是，北京大学的进展奇快，“仅用两个星期就完成了4、7、5、5四个肽段”；再花两个星期，到1960年2月17日，就“用两种方法同时合成了胰岛素A链上的12肽”；随后，于“4月22日合成了A链”。 受北大化学系群众运动的激发，1960年1月下旬，“在整风反右倾的基础上”，生化所也开始大量抽调工作人员支援原有的两个研究小组。经过几次“苦战十昼夜”，他们也在4月20日前“合成了B链30肽”。 复旦大学加入竞争 正当北大化学系和生化所的科研“竞赛”进行得如火如荼的时候，复旦大学生物系横空杀了进来。1960年1月30日，在上海市委、上海市科委和复旦大学党委的支持下，复旦大学生物系某党支部委员组织了六七十位师生(其中2／3是一至三年级的学生)，开始另起炉灶，单独筹划胰岛素人工合成工作。3月25日，“为了迎接市工业会议的召开”，他们“进一步大搞群众运动”，组织了120名师生——包括复旦大学生物系生化专业四个年级所有的大约80名学生——“边干边学”，热火朝天、不分昼夜地进行胰岛素合成。其方法和北京大学化学系的学生所做的类似，都不对中间产物作分离和鉴定，只是拼命往后赶。当时的生物系生化教研室主任沈仁权副教授比较内行，但她被搁到了一边，对这项工作没有发言权。于是，复旦大学所报出来的进度也非常快，“在4月22日完成了B链30肽”。 1960年4月19-26日，以稳定基础研究工作为重要主题的中国科学院第三次学部会议在上海举行。在这个会议上，由中科院生化所、北京大学化学系、复旦大学生物系三个单位所主演的胰岛素合成戏剧达到了高潮：它们先后向学部大会献了礼，分别宣布自己初步合成了人工胰岛素B链、A链以及B、A二链！北大的代表还乘飞机把自己合成的A链带了过来。听到这些振奋人心的消息，聂荣臻、郭沫若等领导兴奋异常，他们不但发表了热情洋溢的讲话，还于当天晚上在中苏友好大厦为全体相关人员举行了盛大的庆功宴，只留了拆、合小组的杜雨苍和张友尚在实验室里进行人工胰岛素A链和人工胰岛素B链的全合成工作。聂荣臻和大家一道都在那儿等着，要求他们一出成果，马上敲锣打鼓过去报喜。新华社也已经写好了报道稿———标题为“揭开生命现象的神秘面纱我国对人工合成蛋白质已建功勋”。一切都只等他们的好消息。但直到宴会结束，垂涎欲滴的他们也没有离开实验室。 4天之后，拆、合小组仍没能合成人工胰岛素。这时，复旦大学又爆出喜讯：他们首次得到了具有生物活性的人工胰岛素！上海市长随即在人民广场宣布了这件大喜事。消息刺激了北京市委，他们给北大发指示，说：咱们搞北京牌的胰岛素；中国那么大，搞两个胰岛素也不算多；可以互相验证。要求北大也进行B链合成，也单独合成胰岛素。于是，北京大学只好于1960年5月1日“又开辟了第二个战场”，成立了新的B链组，大搞B链的合成。 科学院开展“特大兵团作战” 上海市委和北京市委的竞争也给中国科学院党组带来了很大压力。为了在竞赛中胜过高等教育部，在院党组正、副书记张劲夫、杜润生的亲自督促下，1960年5月4日，中国科学院上海分院党委书记王仲良决定亲自挂帅任总指挥，组织了由有机所党总支书记边伯明任副总指挥，生化所所长王应睐、有机所代所长汪猷、生化所副所长曹天钦任正副参谋长，生化所青年科技工作者李载平任具体指挥，生化所党支部书记王芷涯负责后勤保障工作的指挥部，指挥生物化学所、有机化学所、药物所、细胞生物学所、生理研究所等五个研究所进行“特大兵团作战”。在当晚举行的“第一次司令部会议”上，生化所党支部提出，“要以20天时间完成人工全合成”。王仲良要求抢时间，在“半个月内完成全合成”。最初不肯参加这项工作的汪猷接着表态：“既然分院党委决定，我们立即上马……半个月太长，要在一个星期内完成。”就这样，在有关领导“这是一个重大的政治任务”、“拿不下来就摘牌子”的敦促下，科学院上海分院开始了风风火火的群众运动。 5月5日，相关研究所共派出344人参加这项工作。他们打破了原有的所、室、组的正常建制，组成了一个混合编队，下属多个“战斗组”，统一安排。战斗组组长一律由青年人担任，原来担任组长的研究员改当组员；生化所一个肽组的组长甚至是一位连多肽都未见过、新近从中国科学院山西分院过去的进修生。他们“采取了一日二班制的办法”，建立了工作流水线。虽然有很多人并不愿意放下自己手头原有的研究转到这项工作中来，但既然党的领导干部在亲自指挥这项工作，他们也普遍表现得很积极。很多人“每天除了几小时的睡眠，其他的时间都在试验台旁度过”；“有人甚至把铺盖搬进实验室”，根本不怕有毒的药品，根本不顾及自己的身体健康。还有些工作骨干“甚至两天不睡”，以至于领导下决定“必须……安排骨干分子的休息睡眠”。 可胰岛素人工合成毕竟是基础科学研究，和军事斗争、工农业生产有一定区别。在这里，“一个人卅天的工作等于卅个人一天的工作”并不成立。这么多人忙了7天、15天、20天、一个月，依然没有实现最初的目标。50天后，人工合成的A、B链终于“正式进行会师”，可非常令人遗憾，“总的情况是人A人B(编者注：人工合成胰岛素A链、B链)全合成没有出现活力”。不但如此，在随后的20天内，“合成A链进行三次人A天B(编者注：人工合成胰岛素A链、天然胰岛素B链)测定，结果均无活力”。 王应睐一直心怀整个国家的生化事业，对这种费钱、费力而不讨好的研究方式急在心上，早就想将其停下来。1960年7月底，他终于鼓起勇气向中国科学院党组的领导反映了自己的想法，强调人太多没有好处，专业不对口的在里面起不到什么作用，还是应该减少一点，让队伍精干一点，都是熟悉业务的人，这样进展会更快。张劲夫和杜润生与科学工作者是比较贴心的，发动大兵团作战一段时间后，见效果不明显，就认真考虑了王应睐的建议。 于是，“1960年7月，杜润生同志指示说，大兵团作战，搞长了不行，应精干队伍”。随后，“经过三天大会，总结辩论，生理、实生、药物三个所下马，留下生化、有机两个所”。剩下两所的参与人数也逐渐减少，到年底时，生化所只剩了“精干队伍近20人”，“有机所……只剩下7人”。 在交了上百万元的昂贵学费后，科学院的大兵团作战就这样偃旗息鼓。 1960年，北京大学化学系、生物系参加胰岛素工作的学生没有正常的暑假，直到10月份他们还在继续工作。终于又合成了三批人工合成A链，自己测试有活力，于是把它们送到生化所。但到那儿之后，它们又失活了！10月下旬，生化所决定派杜雨苍和张友尚过去“学习”。果然不出所料，北京大学所用的测试方法是不规范的！谁也不知道他们“合成”的究竟是什么，惟一可以肯定的是那不是胰岛素A链！60万元的巨额经费已经用尽，结果又如此不如人意，而且人员伤病还相当严重———其中，有3个学生被严重烧伤；有60多个学生得了肺结核———工作当然无法进行下去了。连总结都没做，北京大学化学系的大兵团作战就这样鸣金收兵。 复旦大学生物系的情况与北京大学的类似，也是因为经费等问题而于1960年下半年停止。 “大兵团作战”阶段所获得的产物，除有机所还留了一点用于继续提纯和分析，后来还陆续整理出了几篇论文外，其他单位七八百位科技工作者和学生轰轰烈烈、辛辛苦苦忙了好几个月，所收获的恐怕就是失败的教训了。 作为那个时代所独有的科研方式，“大兵团作战”本身是很值得关注的。轻视原本就非常少的专家，由领导干部直接指挥不懂行的群众用搞运动方式做研究，这是中国人在科研方式上的独特创造，也确实实践了当时一些领导所设想的“无产阶级的科学道路”。但遗憾的是，在胰岛素工作中，这条研究道路行不通。 脚踏实地终获成功 “大兵团夹击胰岛素”遇挫之后，国家也已进入调整时期。在“调整、充实、巩固、提高”八字方针的指导下，开始允许科研人员和教师做自己感兴趣的工作。于是，有机所的一些研究人员表示要再次“敲锣打鼓”把这个课题“送还生化所”，而生化所的绝大部分参与者也心灰意懒，希望下马这个课题。北京大学化学系的情况也类似。但聂荣臻、王仲良、张龙翔、汪猷等多级领导人坚决不同意这样做。在他们的要求和命令下，中科院和北京大学的胰岛素工作分别持续了下来，只是把队伍精干到了总共20多人——北大最少的时候只剩两个人，而中科院方面也只剩了一二十人，他们大部分都为早期的参与者——工作方式也恢复到了以前冷清、缓慢而脚踏实地的状态。 在国家科委的撮合下，1963年底，北京大学化学系和中科院有机所、生化所又开始重新合作———北京大学化学系主要负责合成胰岛素A链前9肽。又经过两年时间，到1965年9月17日，他们取得了人工胰岛素结晶，终于完成了胰岛素的人工合成。换句话说，在研究人员和研究方法都基本恢复到了先前走所谓“资产阶级的科学工作道路”时的状态后，他们成功了。
1.最先分离出耐高温DNA聚合酶的科学家：中国科学家钱嘉韵。来源：水生耐热细菌Taq（Taq细菌）2.参考文献（1）人教版高中生物选修1生物技术实践第21页：科学家是从水生耐热细菌Taq中分离到耐高温的TaqDNA聚合酶的。Taq细菌是美国微生物学家布鲁克于1966年在美国黄石国家公园的一个热泉中发现的。（2）人教版高中生物选修3现代生物科技专题第16页：将PCR变成真正成熟技术的“临门一脚”，则是中国科学家钱嘉韵完成的，是她发现并分离了耐高温的DNA聚合酶。钱嘉韵是我国台湾的科学家，她是第一个报道分离耐高温DNA聚合酶工作的。1973年，钱嘉韵就读于美国俄亥俄州辛辛那提大学生物系，她的导师对黄石公园里热泉中发现的嗜热菌十分好奇，他让钱嘉韵以该细菌作为研究主题。钱嘉韵不负师望，从该细菌中成功地分离了耐高温的DNA聚合酶，并于1976年在《细菌学杂志》上以第一作者身份发表了论文。这篇论文在科学界被广泛引用。
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正常腰椎间盘是由纤维环、髓核及软骨板构成。人体椎间盘髓核是一个高度含水的组织，水分占80%～90%；干性成分中，蛋白多糖占65%，胶原约占25%，胶原纤维无定向排列成一疏松的立体网络。纤维环中水分占60%～70%；干性成分中，蛋白多糖占20%，胶原占60%。椎间盘内主要含有Ⅰ型和Ⅱ型胶原分子，从纤维环的外层到内层，胶原构成由Ⅰ型逐渐变为Ⅱ型。Ⅰ型胶原提供纤维环的张力强度，Ⅱ型胶原提供承受压力强度。当腰椎间盘突出时，髓核中的水分含量下降，胶原含量可达60%或更高。Bromley等〔5〕用狗进行的实验认为：胶原酶注入盘内剂量达400u～500u时，有纤维环内缘的轻微溶解，超过这个剂量溶解作用将增加，但也只是纤维环内缘的溶解，注入胶原酶2w之后溶解程度不再增加。孙磊等〔6〕将胶原酶注入兔椎间盘内后观察到：胶原酶注入盘内24h，可见髓核结构破坏；1w后髓核浓缩，纤维组织增生；2w时椎间盘髓核结构界线不清；4w时椎间隙狭窄，髓核结构消失。被纤维软骨替代，但纤维环的外层胶原纤维结构无变化。Sussman(1968)〔4〕首先提出并证明胶原酶可以溶解术中切取的人体椎间盘组织，证明胶原酶能迅速地、选择性地溶解髓核和纤维环中的胶原纤维。Sussman(1975)〔7〕进行的毒性试验表明：胶原酶行盘内、静脉内、腹腔内、脊柱旁及硬膜外注射有相当大的安全范围，胶原酶对透明软骨、骨及成熟的纤维组织如前、后纵韧带作用极小，对硬脊膜、马尾神经等接触也不会造成损害，腰神经根等神经实质对胶原酶不敏感，但认为胶原酶鞘内注射可引起严重的并发症。3 胶原酶用于腰椎间盘突出症治疗中的若干问题3.1 胶原酶治疗机理 胶原蛋白水解酶(collagenase，简称胶原酶)，其化学本质是蛋白质，是一种有催化作用的高度特异性生物催化剂，是唯一能作用于胶原组织螺旋结构的酶，能在生理pH值及温度条件下水解天然胶原纤维。人体内源性胶原酶与胶原分子在细胞内共同合成，以酶原的方式处于潜伏状态〔8〕。当椎间盘内环境改变或受到机械作用时，椎间盘纤维细胞崩解，酶激活物进入基质激活处于酶原状态的胶原酶，使其具有生物活性，胶原纤维出现降解。降解的结果引起椎间盘本身出现自溶，使纤维环强度下降，出现裂隙或破裂，并引起相应的临床症状。当外源性胶原酶以酶原的形式大量注入病变的椎间盘，便被其中的酶激活物激活。胶原酶被激活后作用于胶原分子的全部3条α-链，距氨基酸端的3/4处，将胶原分子水解为3/4和1/4两个片段，使之溶解度增加，易解链变性被其他 蛋白酶水解〔9〕，最终降解为相关的氨基酸，被血浆中和吸收。由于椎间盘的总体积明显缩小，从而使突出物减小或消失，对神经组织的压迫得以缓解或消除，临床症状得以改善或消失。3.2 胶原酶治疗对象选择 对胶原酶治疗对象的选择至今仍缺乏统一认识，国内外至今尚无统一标准，如何选择病例，提高治疗效果，是有待进一步探索和研究的课题。有作者〔10〕提出对椎间盘向侧后方突出大于10mm，椎间盘突出伴钙化、伴侧隐窝狭窄等均可列为适应症。目前国内多数学者比较一致认定的是：单侧腰腿痛有明显神经根压迫症状；经系统保守治疗无效者。凡伴有过敏体质、马尾综合征、代谢性疾病、椎间盘炎或椎间盘感染、心理变态、腰椎管狭窄或脊椎滑脱、非椎间盘源性腿腰痛、孕妇及14岁以下儿童、突出物游离于腰椎管内及突出物已钙化或骨化者均不宜列为治疗选择。适应症的选择恰当与否，直接关系治疗效果，故此笔者认为对治疗对象应慎重选择，不宜过宽。3.3 胶原酶治疗方法 目前临床上主要有以下5种方法：(1)经皮斜刺或侧方直刺椎间盘(盘内)注射法。此法是经典注射法，适用于各种类型的椎间盘突出，尤其适用于椎间盘膨出、中央型突出或偏斜不重者。其穿刺途径安全，定位客观，精确可靠，效果确实，但操作要求准确。笔者主要采用此法，我们认为此法具有针对性强，直接溶解胶原纤维的作用。(2)经皮椎间孔硬膜外侧隐窝突出物局部(盘外)注射法。此法适于突出物偏向一侧，而且突向神经根管，临床有神经根刺激症状者。此法针对突出物，准确性要求高，术中需造影确定，效果可靠。(3)经椎板外切迹或小关节内缘行硬膜外侧隐窝穿刺法。此法系盘外注射的改进法，由宋文阁等〔11〕提出并应用于临床。此法进路骨性标志清楚，定点明确，进针角度和方向固定，可变范围小，但其应用时间较短，目前临床报道较少。(4)经皮棘突旁硬膜外注射法。它是经椎板间隙利用硬膜外套管注射法。适用于多间隙突出或老年体弱有明显骨质增生并有骨桥形成者。在操作时需在最高位间隙穿刺插管，并将硬膜外导管送到最低突出间隙，边退管边向突出区域注药。此法简单、安全，但效果不如其他方法 。(5)经皮切吸与胶原酶注射联合法。此法是先将椎间盘髓核组织吸出，使椎间盘内压力降低并有一定空隙，再注入胶原酶，使药液均匀地渗透到纤维环部，髓核及纤维环得到充分溶解。但其操作复杂，外套管针较粗，创伤相对较大。目前国外均采用盘内法注射，国内盘内、盘外均有使用。3.4 胶原酶临床疗效及与手术疗效对比 目前国内报道胶原酶治疗优良率在60%～84%，有效率在83%～96%。笔者治疗25例，优良率为74%，有效率为92%，基本上报道一致。经过比较，盘内法与盘外法治疗疗效并无明显差异。Weinstein(1986)〔12〕将胶原酶注射与手术组进行了详细比较，其结果为：化学溶核组治疗后近期疼痛缓解者为51%，手术组为41%；3个月后疼痛缓解者化学溶核组为75%，手术组为70%；1年后化学溶核组为86%，手术组为80%；2年以上无需其他治疗者分别为86%与88%。治疗后第一年度复发率化学溶核组12%，手术组18%；10年后化学溶核组为32%，手术组为39%，需再次手术。治疗后短期感觉良好，恢复工作者化学溶核组为90%，手术组87%。根据比较，化学溶核组的有效率高于手术组，而复发率却低于手术组。化学溶核术显得更为优越。3.5 胶原酶治疗的副反应与并发症3.5.1 副反应 ①疼痛反应。一般在治疗后3～10天疼痛可比治疗前加重，但笔者体会往往多在注药后1～2h后即开始出现疼痛加重。其原因是胶原酶的注入增加了盘内容积，同时胶原纤维在胶原酶作用下出现降解。导致椎间盘内容物增加，使盘内压升高及降解过程中的化学刺激反应，窦椎神经受到激惹后出现的〔13〕。 ②尿潴留和肠麻痹。是由于盘内压力增高后窦椎神经受到激惹引起植物神经功能紊乱所致〔13〕。 ③脊柱失稳性腰背痛。椎间盘溶解后椎间隙变窄，小关节将出现重叠，对窦返神经的刺激，出现反射性腰背部不适和疼痛。3.5.2 并发症 ①过敏反应。胶原酶作为一种生物制剂，存在过敏反应的可能。杨述华等〔14〕报道1例二次注射发生过敏反应；谢国华等〔15〕报道1例于注射后8h出现过敏性休克。 ②椎间隙感染。主要表现为腰肌痉挛，腰痛加剧，有深压痛，白细胞计数和分类可正常或升高，血沉增快。高翔等〔16〕报道1例椎间隙感染。 ③神经损伤。多为穿刺针刺伤脊神经根或穿刺过程中误伤脊膜或神经外膜，高浓度胶原酶使神经根发生脱水、变性，一旦误入蛛网膜下腔，轻者出现化学性脑膜炎，重者可发生截瘫。高翔等〔16〕报道2例神经损伤致腓骨长、短肌瘫疾，经治疗后一个月恢复。汤华丰等〔17〕报道全麻下2例产生腰神经根症状，半年后随访尚未完全恢复。鞠作金等〔18〕报道1例出现化学性脑膜炎及严重的神经根损伤，术后1年随访肌力仍未完全恢复。 ④继发性腰椎管狭窄。3.6 尚未解决的问题3.6.1 胶原酶用量问题 目前报道盘外注射胶原酶用量基本一致，都为1200u；但盘内注射用量尚未完全统一，各家报道有400u、600u、1200u三种规格。另外，椎间盘病变程度与所用胶原酶剂量问题尚未达成统一标准。3.6.2 有关造影剂使用问题 目前盘外注射一致使用造影剂进行定位，而盘内注射定位时是否非要使用造影剂问题并未达成一致，各家观点不一。临床上有单纯靠腰椎正、侧位定位的，也有在此基础上注射造影剂行椎间盘造影定位。另外，造影剂是否对胶原酶的溶解作用产生影响这一问题仍未见有系统研究报道。3.6.3 副作用和并发症问题 如何有效地预防和治疗胶原酶注射产生的副反应及并发症，目前尚未达成一致的方案。另外，对所有治疗的病例进行系统、完整的CT及X线复查结果方面，仍未见有完整、准确的临床报道。 综上所述，只要严格掌握适应症以及正确熟练的操作方法，胶原酶注射溶解术不失为一种有效的治疗方法。且疗效与手术治疗无明显差异。它住院时间短、操作较简单、并发症少、痛苦小、病人负担较轻且安全有效，即使失败也不影响再次手术，为腰椎间盘突出症增加了一种可供选择的治疗方法。相信随着胶原酶基础研究的不断深入及临床应用的进一步开展，胶原酶注射法必将成为继传统保守治疗之后首选的治疗方法，值得临床推广应用。参考文献1 Mixter WJ,Barr JS.Rupture of the intervertebral disc with involvement of the spinal canal.New Eng J Med,1934,211:2102 Hirsh C.Studies on the pathology of low back pain.J Bone Joint Surg,1959,41B:2373 Smith L.Enzyme dissolution of the nucleus pulposus in human.JAMA,1964,187(2):1374 Sussman BJ.Intervertebral clisolysis with collagenase.J Natal Med Assoc 60(may),1968:1845 Bromely JW,Varma AO.Santoro AJ,et al.Double-blind evaluation of collagenase injection for herniated lumbar disc.Spine,1984,22:1326 孙 磊，宁志杰，王培杰，等.胶原酶椎间盘内注射后的形态观察.中国矫形外科杂志，1997，4(5)：3947 Sussman BJ.J NeuroSurg,1975,42:389～3958 张昌疑.主编.生物化学.第2版.人民卫生出版社，1984：85～1169 Smith EL.Connectiro tissue.In:Principles of biochemistry.New York:Mc Graw-Hill,1983:22310 王执民，王义清，吴智群，等.注射胶原酶治疗腰椎间盘突出症的临床应用研究.实用放射学杂志，1997，13(8)：458～46011 宋文阁，傅志俭，马 玲，等.硬膜外腔侧隐窝穿刺的研究.中华麻科学杂志，1998，18(4)：25012 Weinstein JN,Lehman TR,Hejna W.Chemonucleolysis versus open discectomy-a ten year follow-up study.Clin Orthop,1986,206:5013 刘 伟，杨 华，雷云坤，等.注射用胶原酶治疗腰椎间盘脱出症疗效及影像学分析.云南医药，1999，20(1)：29～3014 杨述华，杜靖远，罗怀灿，等.化学溶核术治疗椎间盘突出症的临床研究.中华骨科杂志，1996，16(7)：415～41715 谢国华，蒋慧娟.胶原酶盘内注射治疗腰椎间盘突出症.江苏中医，1999，20(2)：3216 高 翔，李加坤.胶原酶注射治疗腰椎间盘突出症.中国厂矿医学，1999，1：7～817 汤华丰.丁鑫昌.髓核化学溶解(胶原酶)治疗腰椎间盘突出症30例近期随访报道.中华骨科杂志，1989，9(2)：88～9018 鞠作金，吴旭东，赵勇进.胶原酶溶解术治疗腰椎间盘突出症严重并发症1例.骨与关节损伤杂志.1997，12(6)：325
生化酶类项目室内及室间质控评价与分析目前，随着《医疗事故处理条例》举证颠倒的需要，医学检验质量控制工作显得尤其重要，检验质量的科学治理受到广泛重视。我科在做好室内质控的同时，参加了历年来生化室间质控活动。本文主要对我科生化酶类项目室内、室间质控结果进行了评价和分析。1 材料、方法及项目1．1 质控血清 室内进口液体质控血清BackmanLevel 1(L1)和Level 3(L3)两个浓度水平，由金坛试剂站提供。室间质控血清由省临检中心提供。1．2 试剂、仪器及方法学分类 使用上海复旦张江公司的酶类生化试剂，并在岛津CL-7200全自动生化分析仪上按使用说明优化编程测定。1．3 测定时间、方式 2个批号的室内质控血清天天上午随机顺序上机丈量，天天丈量一次。室间质控血清按临床中心要求进行。酶类项目反应温度是37℃ ，每月均对结果进行统计处理，并在每季度28日前寄回省临床中心。我室对22项进行了测定评价，其中酶类项目7项，分别是ALT、AST、ALP、GGT 、CK 、LDH—L、AM Y。1．4 评价方式 靶值；标准差(S)；变异系数(CV)；均匀误差；组内室间质评靶值，标准差，变异系数。2 结果7种酶类项Et室内质控评价结果见表1，室间质控评价见表2，均匀误差见表3。室内质评7种酶类项目S、RCV均小于组内相同条件实验室均匀水平，室间质评按PT评价方案均符合，各项得分均为100分。3 讨论近年来，随着省临检中心同一订购室内质控品，我科完善了室内质量控制制度，并对工作职员进行了质控专题培训，为进步生化检验质量建立了良好的基础。采用了室内质控CV和室间质控cV同步评价方式，及时了解和把握了我科结果正确与否以及在全省质量控制活动中出现的题目，查找和分析结果出现误差的原因，寻求解决的方法，进步了我科生化质量治理水平。室内质控两个批号血清的均匀值，从表3统计来看，我室ALT、AST、ALP、CK、AMY 质控血清L1均匀误差为0.25，GGT均匀误差为0.50，室间质控各项结果在0.02-- 0.09之间。分析原因可能由于仪器试剂冷躲室故障使试剂质量受到影响，同时省中心质控尚有特殊对待可能。通过使用“同一”浓度质控物做室内质控，使得各参评单位有了一个相对恒定的“标准”，可利用“中心”的反馈信息，经常性校对本实验室的测定结果，以求得与其他实验室结果的一致。可见使用全省相同浓度的质控血清且认真测定，按时回报室内质控结果，对进步室间质评成绩的意义很大。
改良碱性磷酸酶染色法[日期：2008-08-11] 来源： 作者：乔海兵，邢开宇 【关键词】 碱性磷酸酶染色法 1939年Gomori首次提出碱性磷酸酶组织化学染色法用于哺乳动物神经系统血管内皮，1951年Gomori修改了自已的 方法 ，并称为“钙钴法”。1984年Bell在Gomori碱性磷酸酶染色法的基础上进行了改良，用于人脑海马和距状裂区的毛细血管取得成功〔1〕。本文以Bell法为基础，对其法的某些步骤进行了简化和改良， 应用 于脑微血管的 研究 ，同时可以显示出脑微动脉、微静脉。现将此法介绍如下。 1 原理 此方法为金属阳离子沉淀法。以β甘油磷酸钠为底物，在酶的作用下，产生磷酸离子与钙离子形成磷酸钙为第一反应产物。经硝酸铅处理变为磷酸铅沉淀，为第二反应产物。两种反应产物均易解离，进一步用稀硫化铵处理，形成稳定的硫化铅颗粒，沉淀于微血管内皮中，光镜下呈黑色〔2〕。 2 方法 2.1 取材 标本在24 h内取出,切成2 cm×2 cm×2 cm的组织块，放入4 ℃冰箱中保存。尽快放入固定液中固定24 h以上。 新鲜固定液的配制：无水氯化钙 5 g；巴比妥纳 2.5 g；纯甲醛液 5 ml；蒸馏水 488 ml。 2.2 脱水 组织固定好之后，移入70％的酒精24 h，依次移入85％酒精4 h，无水酒精，丙酮(1∶1)溶液4 h，无水酒精,乙醚(1∶1)溶液中4 h。 2.3 包埋 将脱水之后的组织块修整，移入5％的火棉胶溶液中浸泡包埋，放入4 ℃冰箱中，1周后可成块。 2.4 切片 切片厚度在60 μm左右，置入75％酒精中。 2.5 孵化 将切片放入孵化液中，在37 ℃恒温箱内孵化2 h～4 h。孵化液的配制：β甘油磷酸钠1.2 g;无水氯化钙1.96 g;巴比妥钠1 g;蒸馏水200 ml。 2.6 染色 将孵化好的切片快速更换3次蒸馏水，马上置入1.5％硝酸铅溶液中5 min，快速更换3次蒸馏水，然后放入2％硫化铵溶液中3 min，再快速更换3次蒸馏水。 2.7 裱片、脱水、封片 裱片后脱水，二甲苯透明封片。 3 改良措施 取材要新鲜，以免降低血管内皮碱性磷酸酶的活性。固定液和孵化液配好之后，可不调其pH值，只需用pH试纸测试固定液呈弱酸性，孵化液呈弱酸性即可。包埋过程中 应用 梯度包埋法，火棉胶浓度最高不能超过10％。先将组织块放入5％的火棉胶溶液中，留一小开口，置入4 ℃冰箱中，以利于酒精挥发，每天给容器加满火棉胶。2 d～3 d后改换10％的火棉胶，直至包埋好为止。包埋好的组织块应硬度适宜，用手指轻按可留有指纹，但不易碎。孵化过程适当延长，以利于内皮细胞碱性磷酸酶与孵化液充分反应。在裱片过程中由于切片较厚，切片很容易脱落。可采用先透明后封片的办法，既不 影响 切片的透明度，片子也不容易脱落。 4 讨论 碱性磷酸酶染色属于组化呈色法，由于此法对微血管显色均匀、充分，并可较好的反映正常微血管的 自然 扩张状态，有效地避免了血管灌注法的种种缺憾，而且此法经多次改良，使操作 方法 更为简单，呈色时间缩短，因而成为 目前 较为流行的一种微血管形态学的 研究 方法〔3〕。但Hunzlker等认为，由于小静脉内皮细胞碱性磷酸酶分布不集中，活性较低，因而微静脉难以显示。我们在研究过程中对碱性磷酸酶法进一步改良之后，可显示大量的带有三角形膨大的血管(见图1)，而这一特点正是微静脉所特有的，所以我们认为，并非微静脉用此法不能显示，而是在实验过程中pH值、温度掌握不准所致。 参考 文献 ： 〔1〕王有伟，陈以慈.碱性磷酸酶染色法(钙铅法)在研究人脑和心脏微血管方面的应用〔J〕.解剖学杂志，9(3)：227. 〔2〕杜卓民．实用组织学技术〔M〕.北京：人民卫生版社，1982：309. 〔3〕张为龙.脑血管研究近况〔J〕.临床解剖学杂志，1986，4：118.