本文介绍一种仪器设备要求不高,测定较容易的电阻法来测定TCO2。
1 测定原理
AFT-TCO2分析仪(深圳康立公司生产)是利用热导传感器来完成TCO2的测定,其原理如下:在正常空气条件下,热导传感器负载电阻上的电压用Vo表示,在标准定值浓度气体(TCO2)条件下,测定的热导传感器的电压稳定值用VAS表示,称为标准定值气体中电压。VAS、VAO标准定值气体(TCO2)浓度存在着下例线性关系:
VAS-VAO=KCAS (1)
该式中K为热导传感器的灵敏度(又称转换系数),CA为标准气体的浓度。当使用两种不同浓度定值气体(CO2)进行测量时,又称两点定位法,就能通过运算得该仪器的转换系数K。即:
BS-VBO=K (2)
由(2)-(1)得: (3)
该系数的物理意义是指单位被测气体浓度发生变化时,所能引起的电压变化值。当需要测定某种浓度的样品(用CXO表示)时:
KCXO=VX-VO (4)
式中VX、VO可以测定获得,K可以从(3)中求得(已知),则CX就被计算出来,上述CX浓度值、定值由仪器微机软件完成。
2 材料与方法
2.1 仪器 深圳康立公司生产AFT-TCO2分析仪。
2.2 试剂 由深圳康立公司生产提供,质控血清由上海生研所提供。
2.3 方法 严格按照仪器操作说明书进行,其基本操作流程:开机,仪器自动清洗,定A标,定B标,标本测定。
3 评价实验
CONAROL公司利用热导传感器(电阻法)来测定血液中TCO2。本文对仪器使用后作以下性能评价。
3.1 精密度评价 任取混合血清14份,由14各本科室不同职称的工作人员(包括进修生和实习生)进行重复测定10次,测定结果平均总CV=2.31%。
3.2 准确度评价 采用5个不同浓度的HCO-3,进行TCO2测定,经统计分析r=0.999 7,P<0.001。
3.3 携带血互染率评价 随机取高值标本1份,重复测定3次,随机取低值标本1份,重复测定3次,按下式计算:
3.4 回收率评价 在同一标本中,分别加经稀释后的定值NaHCO3,测得其回收率为98.9%~101.2%。
4 讨论
4.1 TCO2是指在血液中所有各种形式存在的CO2的总含量,其中大部分是HCO-3,占95%,少量物理溶解的CO2-3仅占5%。人体血液中TCO2的正常范围是23~29 mmol/L。测定血液中的TCO2可以用血清或肝素抗凝血浆做标本,不可使用其它抗凝剂。在TCO2测定中主要误差与样品处理有关,样品应完全厌氧处理,在37 °C离心,分析前要盖紧瓶塞,一经以红细胞分离血清或血浆加塞放于4 °C冰箱内。
4.2 以往在普通实验室中,由于受仪器设备条件的限制,我们常用的滴定法测定CO2-CP结合力替代TCO2测定,该法十分粗略,受试剂(HCl、NaOH、指示剂)、试管清洁度、滴定手法、终点颜色观察误差、标本暴露于空气中丢失CO2以及操作者呼吸等诸多因素的影响,造成结果偏差。
4.3 通过对AFT-TCO2分析仪精密度、准确度、携带血互染率、回收率等评价实验的性能分析,认为该仪器测定TCO2精密度高、准确性高、用血量少、操作简便、测试速度快(1 min出结果),价格较廉,适宜基层医院开展应用。
4.4 对AFT-TCO2分析仪几点建议:①该仪器应增加测试结果的贮存、打印、统计功能软件。②仪器制作工艺应精制一些。
张宁(内江市第二医院检验科 四川 641003)
袁平宗(内江市第二医院检验科 四川 641003)
刘渝霞(内江市第二医院检验科 四川 641003)
参考文献
1,林其燧,文庆成 et al.临床化学诊断方法大全.第1版.北京:北京大学出版社,1990:
2,叶应妩,王毓三主编.临床检验操作规程.第2版.南京:东南大学出版社,1997:
3,深圳康立公司AFT-TCO2分析仪使用说明书。