摘 要：目的：探讨不同方法对于手足口病的检查效果。方法：确诊手足口病患儿120例，分离一份血清，采用散射免疫比浊析法测定cTnI含量；分离一份血清进行荧光RT-PCR分析。结果：cTnI检测的阳性率为81.7%，荧光RT-PCR法检测的阳性率为98.3%，两者比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：荧光RT-PCR法检测手足口病感染病毒的阳性率高，有利于手足口病的确诊，值得在有条件的医院推广应用。
关键词：手足口病；诊断；cTnI；荧光RT-PCR
手足口病（HFMD）是小儿的一种常见传染病，可由多种肠道病毒引起，对小儿的影响极大，也容易造成死亡。同时部分病例可有中枢神经系统并发症，导致残疾或死亡[1]。近年来流行病学和临床研究发现，手足口病能引起患儿多项检验指标异常[2]。文章为此具体探讨了不同方法对于手足口病的检查效果，现报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料：选取2010年4月～2010年11月本院住院的确诊手足口病患儿120例，均符合相关诊断标准，其中男55例，女65例；年龄8个月～6岁，平均（3.2±0.8）岁；体重7.5～21.0 kg，平均（14.2±2.2）kg。＜3岁90例，≥3岁30例。所有患儿常规进行体温测量和体格检查，抽静脉血查血常规，X线胸片检查。
1.2 标本采集：采集小儿血清配对血清双份用于抗体检测。静脉采集3～5 ml全血，置于真空无菌采血管中，自凝后，分离血清，将血清置于－20℃以下冰箱中冷冻保存。
1.3 检查方法：一份血清用来cTnI含量测定，采用散射比浊法分析，试剂盒由北京科美东雅生物技术有限公司提供，操作按说明书，以cTnI＞0.30 ng/ml为阳性。另一份血清进行荧光RT-PCR分析，试剂盒由广州达安基因生物技术有限公司提供。实时荧光定量PCR反应在DA7600 PCR仪上进行PCR扩增，按说明书进行反应混合液的配制和循环参数的设置，同时设置阳性梯度模板和阴性对照。结果判定严格按照DA7600 PCR仪器操作说明书进行。
1.4 统计学处理：所有资料利用Excel 2003和SPSS 19.0软件进行录入、整理和分析，主要分析指标为阳性率，计数资料对比采用χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。
2 结果
cTnI放射免疫法检测的阳性率为81.7%，荧光RT-PCR法检测的阳性率为98.3%，两者比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。
3 讨论
手足口病是一种由EV71和CA16等多种病毒引起的儿童传染病。有研究证实，在历次手足口病流行中，EV71与CA16交替或共同出现，成为手足口病的主要病原体[3]。而EV71感染不仅可引起手足口病和疱疹性咽峡炎，且还可侵犯神经系统，主要表现为急性病毒性脑炎、无菌性脑膜炎等，多发生于3岁以下幼儿，1岁以下婴儿发病率最高[4]。本组120例患儿中，只有10例年龄＞5岁，且以＜3岁为主，与本病的年龄特点相符合。同时，未见有6个月以内的小婴儿受染，这可能与该年龄段的小儿较少外出以及体内胎传抗体未完全消耗有关。
大多数手足口病小儿症状轻微，以发热和手、足、口腔等部位的皮疹或疱疹为主要临床特征。不过手足口病并发神经系统感染患儿可引发循环衰竭、肺出血进而发展为以呼吸衰竭为主的全身多脏器功能障碍综合征甚至多脏器衰竭而死亡[5]。
在手足口病的检查中，cTnI是心肌细胞中的特有蛋白质，心肌细胞受损时，cTnI释放入血，在胸痛发生4～6 h后，血中cTnI水平超过正常上限，12～24 h达到高峰，可持续14 d之久。因此，cTnI在诊断手足口病患儿心肌损伤中具有一定的优势[6-7]。近几年发展起来的以特异性荧光探针为特点的荧光PCR技术，实行完全闭管式操作，不仅能大大减少扩增产物污染的机会，而且较常规RT-PCR技术，无论从敏感性、特异性与速度上都更具有优势。本文结果显示，cTnI放射免疫法检测的阳性率为81.7%，荧光RT-PCR法检测的阳性率为98.3%，两者比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。
总之，荧光RT-PCR法检测手足口病感染病毒的阳性率高，有利于手足口病的确诊，值得在有条件的医院推广应用。
4 参考文献
[1] 农光民,刘艳明.儿童手足口病的临床表现及诊断[J].实用儿科临床杂志,2009,24(22):1706.
[2] 李兰娟.手足口病[M].杭州:浙江科学技术出版社,2008:61.
[3] 薛凤举.中国疾病预防与控制指南[M].北京:华夏出版社,2010:375.
[4] 郭娟如,朱传栖,郭异珍,等.手足口病31例临床及病原学分析[J].实用儿科临床杂志,2008,1(2):17.
[5] 温怀加.瑞安市2006年～2007年手足口病流行病学分析[J].上海预防医学杂志,2008,20(5):217.
[6] 孙永烽.手足口病196例临床诊治分析[J].吉林医学,2011,32(3):523.
[7] 张寿斌,廖 华,黄呈辉,等.应用通用引物建立巢式逆转录聚合酶链反应检测肠道病毒[J].中国现代医学杂志,2004,14(22):33.