摘 要：目的：评价细胞DNA定量分析系统在宫颈癌及癌前病变的诊断及预测作用。方法：通过对8 670名妇女妇科筛查，对其中351例结果异常的患者给予阴道镜检查和病理组织学检查，比较细胞DNA定量分析结果和组织学检查结果，计算细胞DNA定量分析结果对宫颈病变的阳性预测值。结果：TBS分级ASCUS以上、DNA定量分析可见或可见大量DNA倍体异常细胞。对CIN Ⅱ/Ⅲ级以上病变的敏感性、特异性及预测值：ASCUS以上者70例，敏感性26.70%，特异性74.71%，阳性预测值27.38%；可见大量DNA异倍体细胞84例，敏感性81.05%，特异性18.42%，阳性预测值87.56%；细胞学结合DNA定量分析的敏感性、特异性及阳性预测值分别为92.45%、7.47%、93.05%。结论：细胞DNA定量分析方法对CIN Ⅱ、CIN Ⅲ以上的宫颈病变有较高的敏感性，有利于宫颈癌和癌前病变的早期诊断和预测。
关键词：细胞DNA定量分析；宫颈癌；病理学诊断
宫颈细胞学的检查技术和方法不断地提高和发展，使宫颈癌阳性检出率明显提高[1-2]。因此，宫颈癌及癌前病变早期筛查的方法受到学者的广泛关注。因此，本研究旨在探讨采用全自动DNA倍体分析方法诊断宫颈癌及癌前病变的预测作用，以期为临床诊断和评估宫颈癌预后提供依据。
1 资料与方法
1.1 一般资料：2008年1月～2009年6月，在我院就诊的8 670名妇女进行宫颈癌筛查，年龄20～65岁，平均（32.4±5.8）岁，将其中351例结果异常的患者作为研究对象。
1.2 方法：标本采集：检查前3 d不做阴道冲洗及用药，在阴道扩张器直视下，用宫颈刷在患者宫颈管鳞柱交界部位顺时针或逆时针旋转3～5周，随后拔脱刷头，浸泡在样本收集管固定液内，震荡并保存。制片与染色：参见文献[3]。宫颈细胞学诊断：采用TBS（The Bethesda System）分类法将细胞分为[3]：①良性细胞学改变（Within normal limits，WNL）；②鳞状上皮异常：包括ASCUS、LSIL、HSIL和ISCC；③腺上皮异常：包括不典型腺上皮细胞（Atypical glandular cells of undetermined signification，AGUS）、腺原位癌（AIS）和腺癌（Adenocarcinoma）。细胞DNA定量分析：根据AcCell系统诊断软件的标准，将细胞核DNA指数＞2.5的细胞定义为DNA异倍体细胞，分析结果有4种[4]：①未见DNA倍体异常细胞；②可见少量（扫描结果有3个以下的异倍体细胞）；③可见（扫描结果有3～9个异倍体细胞）；④可见大量（扫描结果有10个以上异倍体细胞）。统计学处理采用SPSS11.0 进行统计分析。
2 结果
2.1 筛查结果：8 670例的宫颈样本中，常规细胞学检查发现NLM 8 087例（86.6%），异常583例（6.7%），包括ASCUS 390例（4.5%），LSIL 124例（1.4%），HSIL 69例（0.8%）；DNA倍体分析系统筛查未见及可见少量异倍体细胞7 801例（89.8%），可见及可见大量异倍体细胞869例（10.2%）；390例ASCUS中，104例可见异倍体细胞，在124例LSIL中，95例可见异倍体细胞，在102例H ISL中均可见异倍体细胞，无宫颈腺上皮异常或腺癌患者。
2.2 病理学诊断结果：常规细胞学和DNA倍体分析后要求作活检妇女351例。经阴道镜及病理诊断证实NLM 219例（62.3%），CIN Ⅰ 37例（11.5%），CIN Ⅱ51例（15.2%），CIN Ⅲ/CIS 29例（8.20%），ISCC 15例（4.60%），见表1。
表1 常规细胞学诊断与细胞DNA定量分析系统诊断结果的比较（例）
病理诊断 | 例数 | 常规细胞学 | 细胞DNA定量分析 |
|
NLM | ASCUS | LSIL | HSIL | 未见或可见少量 | 可见 | 可见大量 |
宫颈炎 | 219 | 208 | 6 | 5 | 0 | 191 | 28 | 0 |
CINⅠ | 37 | 25 | 8 | 3 | 1 | 18 | 16 | 3 |
CINⅡ | 51 | 22 | 18 | 7 | 4 | 6 | 24 | 21 |
CINⅢ/CIS | 29 | 5 | 9 | 8 | 7 | 3 | 8 | 18 |
ISCC | 15 | 0 | 4 | 8 | 3 | 2 | 3 | 10 |
合计 | 351 | 260 | 45 | 31 | 15 | 220 | 79 | 52 |
2.3 DNA倍体分析的预测作用：在病理活检的351例中诊断为CINⅡ/Ⅲ以上者95例，TBS分级为ASCUS以上者70例，敏感性26.70%，特异性74.71%，阳性预测值27.38%；若以可见大量DNA异倍体细胞84例，敏感性81.05%，特异性18.42%，阳性预测值87.56%，细胞学结合DNA定量分析对CINⅡ/Ⅲ以上病变诊断的敏感性、特异性及阳性预测值分别为92.45%、7.47%、93.05%。
3 讨论
细胞DNA定量分析系统进行宫颈癌及癌前病变的诊断在国内外已有大量报道，利用细胞DNA定量分析系统提高宫颈病变的阳性检出率，可能与监测细胞核DNA含量的改变有关[5-9]。本研究结果表明，若以ASCUS作为活检标准而发现CINⅡ/Ⅲ以上病变的敏感性为26.7%，若以可见大量DNA异倍体细胞作为活检标准的敏感性为92.45%，建议把细胞学检查和DNA定量分析方法结合起来，可以同时提高对宫颈癌早期诊断的敏感性和特异性，更适合于宫颈癌的早期诊断。
Gafe等的研究表明，ASCUS妇女大约10%～20%为CINⅡ或CINⅢ。因此，ASCUS患者易发展为宫颈癌的可能性很大，本研究结果表明，诊断为ASCUS患者中，有30.50%的患者通过阴道镜定位活检，被发现存在宫颈病变
[5]。提示ASCUS患者有必要进一步行阴道镜检查，以及早发现宫颈病变。同时，ASCUS诊断CINⅡ/Ⅲ以上病变中，有67.43%可见或可见大量DNA倍体异常细胞，对于ASCUS伴有DNA倍体异常细胞者，一经发现，就要进行临床处理。
细胞DNA定量分析系统对宫颈癌和癌前病变有较高的预测值，通过预测宫颈疾病的发展趋向，对临床诊断和预后评估提供帮助
[10]。本研究结果表明：细胞DNA定量分析系统对LSIL的阳性预测值分别为75.86%，对HSIL和ISCC的阳性预测值更达到100%和100%，表明该分析系统对高级别的宫颈癌前病变和宫颈癌宫颈病变的诊断具有较高的敏感性。
研究资料表明，宫颈癌是妇科高发的恶性肿瘤之一，选择合适的诊断方法是早期发现宫颈癌和癌前病变的重要问题。本研究显示，筛查方法的联合运用可以提高宫颈病变阳性检出率，同时，通过定期检测细胞DNA含量的改变，对于术后患者的病变性质及发展趋势作出客观估计，有利于最大限度地降低宫颈癌对妇女生命和健康的威胁。
4 参考文献
[1] Kohlberger PD,Stani J,Gitsch G,et al.Comparative evaluation of seven cell collection devices for cervical smears[J].Act Citole,1999,43(9):1023.
[2] Jarvis K.Cervix brush versus vaginal-cervical-end cervical(VCE)triple smear techniques in cervical sampling[J].Cytopathology,1997,8(1):282.
[3] 孙小蓉,李玉兰,车东媛,等.用细胞DNA定量分析方法进行宫颈癌普查的临床研究[J].诊断病理学杂志,2005,1(1):12.
[4] Voids GP.End cervical brush device[J].Lancet,1989,1(1):
784.
[5] Gage JC,Hanson VW,Abbey K,et al.Number of cervical biopsies and sensitivity of colposcopy [J].Obstet Gynecol,2006,108(1):264.
[6] Bucking A,Adler CP,Common HD,et al.Algorithm for DNA cytophotometric diagnosis and grading of malignancy[J].Anal Quant Citole Pistol,1984,6(1):1.
[7] Bucking A,Hogarth M,Auffermann W,et al.DNA-cytometric diagnosis of prospective malignancy in borderline lesions of the uterine cervix[J].Acta Cytol,1986,30(2):608.
[8] Bollmann R,Bocking A.Prognostic validity of DNA-imaging-cytometry in cervical dysplasia[J].Verh Dtsch Ges Path,1996,80(2):557.
[9] Herring B,Horn LC,Nanning H,et al.Predictive value of DNA cytometry in CIN 1 and 2:Image analysis of 193 cases[J].Anal Quant Citole Pistol,2000,22(2):333.
[10] Chatelain R,Schunck T,Schindler EM,et al.Diagnosis of prospective malignancy in koilocytic dysplasia of the cervix with DNA cytometry[J].J Report Med,1989,34(2):505.
