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CD64在早产儿细菌性感染中的应用

2015-07-03 12:27 来源:学术参考网 作者:未知

【摘要】 目的:探讨中性粒细胞表面标志物cd64在早产儿感染中的诊断价值。方法:对新生儿科(包括nicu)109例患儿于流式细胞仪进行cd64水平的测定,并与c反应蛋白(crp)(免疫比浊法检测)及il6(双抗体夹心elisa法检测)进行比较,分早产儿感染组30例﹑足月儿感染组28例、早产儿非感染组25例和足月儿非感染组26例4组进行分析。结果:早产儿感染组cd64为(5 010.95±3 318.01)分子数/细胞;足月儿感染组cd64为(5 193.07±3 207.32)分子数/细胞;早产儿非感染组cd64为(2 277.80±914.56)分子数/细胞;足月儿非感染组为(2 174.34±836.00)。早产儿感染组与早产儿非感染组、足月儿感染组与足月儿非感染组比较cd64水平差异非常显著(p<0.001),早产儿感染组与足月儿感染组、早产儿非感染组与足月儿非感染组cd64水平无统计学差异;cd64诊断早产儿感染的敏感度、特异度均较高(敏感度76.7%、特异度88%),优于crp(敏感度56.7%、特异度62%)及il6(敏感度64.3%、特异度84%)。结论:新生儿感染时cd64水平明显升高,特别对早产儿感染诊断的敏感性和特异性均高于crp、il6,可以作为诊断早产儿感染有力的实验室依据。

【关键词】 cd64 早产儿 感染 c反应蛋白 白介素6

  the evaluation of cd64 detection in diagnosing premature bacterial infection

  xu qianqian,chen lingzhi,xu haibin,zhang yu,bao manhua.

  department of pediatrics,wenzhou the second people’s hospital,wenzhou 325000, china

  [abstract] objective:to evaluate the application of analyzing neutrophil cell surface marker cd64 in diagnosis of premature infants infection.methods:109 infants inpatient in neonatal department(including nicu) were enrolled in the study. cd64 was measured by fcm, which was compared with creactive protein(crp) and il6.results:there was a statistically significant difference in quantitation of cd64 on neutrophil cells(p<0.001) among the infected premature infants(5 010.95±3 318.01 molecules/cell), infected fullterm infants(5 193.07±3 207.32), noninfected premature infants(2 277.80±914.56) as well as fullterm infants(2 174.34±836.00). the sensitivity, specificity, predictive values between positive and negative individuals for cd64 detection were very high, better than that for crp, il6.conclusion:cd64 levels are significantly elevated in newborns infected, compared with crp, il6 assays, the sensitivity and specificity are all higher, particularly for the diagnosis of infection in premature infants. it can be used for laboratory diagnosis of neonatal infection effectively.

  [key words] cd64;premature infants;infection;crp;il6

  近年来,早产儿已成为新生儿病房的主要问题。www.133229.COm早产儿感染性疾病发展快、死亡率高,而临床症状表现为不典型性和多样性,使得早期诊治成为改善患儿预后的关键。但由于免疫未成熟等原因,对早产儿感染的早期临床诊断仍缺乏一种可靠准确的检测手段。为进一步提高早产儿感染的早期诊断率,探讨一种快速可靠的方法,我们对临床疑似早产儿感染的患儿进行cd64水平、c反应蛋白(crp)及il6的测定,并与足月儿感染病例及早产儿非感染病例进行比较分析。现将结果报道如下。

  1 材料与方法

  1.1 对象 2004年10月~2005年10月本院新生儿科住院的早产儿和足月儿共109例,其中男性63例,女性46例,平均日龄10.55天(0~28天)。109例患儿最后按出院诊断分为4组:早产儿感染组30例,胎龄(32.80±3.90)周,体重(1 915±426)g,日龄(9.55±6.28);早产儿非感染组25例,胎龄(33.20±2.10)周,体重(1 967±315)g,日龄(8.63±5.72);足月儿感染组28例,胎龄(38.87±1.72)周,体重(3 221±521)g,日龄(16.23±7.82);足月儿非感染组26例,胎龄(39.62±1.59)周,体重(3 358±415)g,日龄(14.88±5.29)。感染病例 (均为细菌感染)包括败血症、 感染性肺炎、化脓性脑膜脑炎、肠道感染以及尿路感染等;非感染病例包括单纯早产儿、abo溶血病、新生儿湿肺、生理性黄疸及缺氧缺血性脑病等。败血症诊断参考2003年昆明会议《新生儿败血症诊疗方案》[1];其他感染如新生儿肺炎、化脓性脑膜脑炎、细菌性肠炎、尿路感染等以及非感染性疾病诊断标准参考第3版《实用新生儿学》。

  1.2 方法 患儿入院48小时内股静脉处采血进行cd64﹑crp、il6和血常规检查,并按病情留取血培养、痰培养、脐部分泌物培养等。cd64的检测方法:全血50 μl+20 μl cd64pe/cd45percp抗体(美国bd公司产品)混匀,暗处放置1小时后加facs溶血剂2 ml,暗处放置20分钟上流式细胞仪(bd公司facs calibur)检测。crp采用免疫比浊法(beckmancoulter公司生产的immage仪),结果为定量指标,crp≥8 mg/l为阳性,crp<8 mg/l为阴性;il6采用双抗体夹心elisa法,试剂盒为美国mr公司产品,临界值为9.7 pg/ml。

  1.3 统计学分析 cd64计量资料采用方差分析,数据处理采用spss 10.0统计分析软件包。其他数据(敏感度、特异度和预测值)的统计处理参考医学科研方法学[2]。

  2 结果

  2.1 各组cd64检测结果 见表1。早产儿感染组患儿cd64为(5 010.95±3 318.01)分子数/细胞;足月儿感染组cd64为(5 193.07±3 207.32)分子数/细胞;早产儿非感染组cd64为(2 277.80±914.56)分子数/细胞;足月儿非感染组cd64为(2 174.34±836.00)分子数/细胞。统计分析示早产儿感染组与早产儿非感染组、足月儿感染组与足月儿非感染组比较差异非常显著(f=15.954,f=17.184,p<0.001);早产儿感染组与足月儿感染组、早产儿非感染组与足月儿非感染组比较无显著差异(p>0.05)。

  2.2 各组crp及il6检测结果 见表2。

  2.3 cd64、crp及il6诊断新生儿感染的敏感性和特异性 本组资料中以roc曲线计算得出cd64诊断新生儿感染的最佳临界值为2 587分子数/细胞。cd64、crp及il6在诊断早产儿感染及足月儿感染中的敏感度(se)、特异度(sp)、阳性预测值(pv+)和阴性预测值(pv-)见表3。

  表1 cd64检测结果(略)

  tab.1 the plasma levels of cd64

  note:compared between the level of cd64 in terms with infection and in terms without infection.the level of cd64 in preterms without infection and in preterms with infection,p<0.001;compared between the level of cd64 in terms with infection and in preterms with infection,terms without infection and preterms without infection,p>0.05.

  表2 crp(mg/l)和il6(pg/ml)检测结果(略)

  tab.2 the plasma levels of crp(mg/l) and il6(pg/ml)

  表3 cd64、crp及il6在诊断早产儿、足月儿感染敏感性和特异性的统计学数据(略)

  tab.3 the comparison of sensitivity and specificity among cd64,crp and il6

  3 讨论

  中性粒细胞是机体抵抗感染的主要防御细胞,在其作用机制中,它须通过细胞膜上特殊的受体(如补体受体,fcγr)与抗体或补体结合发挥功效。目前发现中性粒细胞和单核细胞表面可表达3种fcγr : fcγrⅰ(cd64)、fcγrⅱ(cd32)、fcγrⅲ(cd16)。cd64是igg的fc段受体,是一个高亲和力的受体。cd64能识别免疫球蛋白的fc片段,其表达受细胞因子的调节,起到了连接体液免疫和细胞免疫的桥梁作用[3]。cd64在外周血中主要分布于单核细胞、巨噬细胞及树突细胞表面,而在中性粒细胞表面低水平表达。当受到细菌细胞壁的脂多糖(lps)和粒细胞集落刺激因子(gcsf)、γ干扰素(ifnγ)等因子刺激时,可使cd64在中性粒细胞表面大量表达,不仅增加受体数目,而且能提高氧化新陈代谢和脱颗粒[4]。fjaertft等[5]研究了足月儿、早产儿、年长儿及成人急性细菌感染的早期阶段中性粒细胞cd64的表达,结果发现,新生儿细菌感染组明显高于非感染组,而且早产儿细菌感染组中性粒细胞cd64表达的程度与足月儿、年长儿及成人之间无差异,健康的早产儿和足月儿中性粒细胞表达cd64明显高于健康成人。有文献报道,cd64的表达与胎龄无关,早产儿和足月儿非感染状态cd64表达无差异,但在感染时cd64均可明显增加,说明cd64的表达是新生儿,尤其是早产儿细菌感染的一个标志[6]。本研究结果也显示,早产儿感染组cd64水平明显高于早产儿非感染组,足月儿感染组的cd64表达明显高于足月儿非感染组。与其他感染指标比较,cd64的敏感性和特异性均较高。ng等[7]的研究结果表明,cd64有很高的敏感性(87%~97%)和特异性(88%~90%),他们观察到, cd64的表达水平在败血症发生后0~24小时均保持明显升高,说明了cd64在败血症早期的敏感程度。而且allen等[8]认为,非感染性的炎症反应和病毒感染均不会引起cd64在中性粒细胞的表达增加,从而说明,cd64的表达升高在新生儿细菌感染中具有很高的特异性。

  本组研究显示cd64在诊断早产儿感染的敏感度为76.7%﹑特异度为88.0%、阳性预测值为88.4%、阴性预测值为75.8%,与足月儿相似,说明cd64是一种高敏感性和高特异性的细菌感染标志物,可作为早产儿感染的早期检测指标,判定患儿是否存在感染。

  crp作为感染检测手段目前已较广泛应用于临床,对协助诊断新生儿感染有一定意义,但crp作为一种急性期时相蛋白在体内受影响因素较多,其敏感性和特异性均较低[9]。本组资料显示,crp诊断早产儿感染和足月儿感染的敏感度、特异度明显低于cd64。

  il6是诱导b细胞分泌免疫球蛋白和t细胞激活增殖的主要细胞因子,在新生儿抗细胞感染中起重要作用。早产儿t细胞产生il6等细胞因子的能力明显低于足月新生儿,而且il6在感染刺激后早期达到高峰,在循环中消失很快[10]。有研究显示il6在新生儿败血症达到高峰浓度为3小时,在血循环中消失的时间为6小时。因此,il6的诊断价值受血标本采集时间所限制[11]。本组资料显示,il6诊断早产儿感染的敏感度、阴性预测值分别仅为56.7%和63.6%,低于足月儿感染组,并且明显低于cd64诊断早产儿感染的敏感度和阴性预测值。

  综上所述,crp与il6对诊断新生儿感染有一定帮助,但cd64水平的测定优越性更明显,尤其对早产儿感染诊断更有价值。所以,对入住新生儿病区的早产儿主张用cd64水平来判断是否存在细菌感染,以便尽早应用抗生素,提高早产儿的治愈率和生存质量。

【参考文献】
  1 中华医学会儿科学分会新生儿学组. 新生儿败血症诊疗方案 [j]. 中华儿科杂志,2003;41(12):897899.

  2 梁万年. 医学科研方法学 [m]. 北京:人民卫生出版社,2002:287297.

  3 郝 玲,李艳芝. cd64和新生儿感染 [j]. 国外医学·儿科学分册,2005;32(3):176178.

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  5 fjaertoft g, hakansson l, ewald u et al. neutrophils from term and pretern newborn infants express the high affinity fcgammareceptor ⅰ(cd64) during bacterial infections [j]. pediatr res,1999; 45(6):871876.

  6 张金萍, 陈 超, 杨 毅. 新生儿感染时分子变化及临床意义 [j]. 中国实用儿科杂志,2005;20(7):415417.

  7 ng p c, li k, wong r p et al. neutrophils cd64 expression:a sensitive diagnostic marker for lateonset nosocomial infection in very low birthweight infants [j]. pediatr res, 2002; 51(3):296303.

  8 allen e, bakke a c, purtzer m z et al. neutrophils cd64 expression: distinguishing acute inflammatory autoimmune disease from systemic infection [j]. ann rheum dis, 2002; 61(6):522525.

  9 enguix a, rey c, concha a et al. conmparison of procalcition with creaction protein and serum a myloid for the earlydiagnosis of bacterial sepsis in critically ill neonates and children [j]. int care med, 2001;27:211215.

  10 张秋业,董增义,魏书珍. 早产儿辅助t细胞亚群功能特点的初步观察 [j]. 中国儿童保健杂志,2002;10(1):5051.

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