一般说糖母就是汤姆(Tom)杀菌性/通透性增加蛋白模拟肽与LPS/Lipid A的亲合力测定AFFINITIES OF PEPTIDE (BNEP) MIMICKING BACTERICIDALITY/PERMEABILITY-INCREASING PROTEIN FOR LIPOPOLYSACCHARIDE AND Lipid A BY BIOSENSOR TECHNOLIGY郑江 龚小云 吕根法 卫国 周红摘 要:为测定杀菌性/通透性增加蛋白(BPI)模拟肽BNEP与LPS/Lipid A结合的亲合力,以探索BNEP中和LPS/Lipid A的作用机制,应用光学生物传感器技术测定BNEP与LPS/Lipid A结合的亲合力;采用定量鲎基质显色法测定BNEP体外中和LPS的能力.结果发现,BNEP与LPS和Lipid A均具有高亲合力结合的能力,与LPS结合的Kd值为~,与Lipid A者为~;体外中和LPS的结果显示,8μg/ml的BNEP可完全中和2ng/ml的LPS.说明BNEP与LPS和Lipid A均具有高亲合力的结合,结合位点为LPS的活性中心Lipid A亲水的二糖母核骨架,BNEP对LPS的结合作用与其发挥对LPS的中和作用是一致的.关键词:BPI模拟肽;脂多糖类;亲合力分类号: 文献标识码:A基金项目:国家新药研究基金资助课题(编号96-901-226)作者简介:郑江,医学博士,副研究员.主要从事感染性炎症方面的研究.已发表论文20余篇.作者单位:郑江(400038,重庆,第三军医大学西南医院综合实验研究中心)龚小云(400038,重庆,第三军医大学西南医院综合实验研究中心)吕根法(400038,重庆,第三军医大学西南医院综合实验研究中心)卫国(400038,重庆,第三军医大学西南医院综合实验研究中心)周红(第三军医大学基础部药理学教研室)参考文献:〔1〕Tobias PS, Mathison JC, Ulevitch RJ. A family of lipopolysaccharide binding proteins involved in responses to gram-negative sepsis. J Biol Chem, 1988, 263(27):13479〔2〕郑江,周红,鲁永玲等.杀菌性/通透性增加蛋白(BPI)模拟肽中和内毒素作用的研究.中华烧伤杂志,2002,18(2):95〔3〕郑江,周红,秦孝建等.杀菌性/通透性增加蛋白(BPI)模拟肽对绿脓杆菌形态学的影响.中国抗生素杂志,2002,7(8):474〔4〕Heumann D, Roger T. Initial responses to endotoxins and Gram-negative bacteria. Clin Chim Acta, 2002, 323(1-2):59〔5〕Hoshino K, Takeuchi O, Kawai T et al. Cutting edge: Toll-like receptor 4 (TLR4)-deficient mice are hyporesponsive to lipopolysaccharide: evidence for TLR4 as the LPS gene product. J Immunol, 1999, 162(7):3749〔6〕Gazzano-Santoro H, Meszaros K, Birr C et al. Competition between rBPI23, a recombinant fragment of bactericidal/permeability-increasing protein, and lipopolysaccharide (LPS)-binding protein for binding to LPS and gram-negative bacteria. Infect Immun, 1994,62(4) :1185〔7〕de Haas CJ, Haas PJ, van Kessel KP et al. Affinities of different proteins and peptides for lipopolysaccharide as determined by biosensor technology. Biochem Biophys Res Commun, 1998,252(2):492