组培本科毕业论文

植物组织培养及其应用研究概况在世界各国科学家的不断努力下，近几十年来，植物组织培养技术迅速发展。利用组织培养，不仅可以大量生产优良无性系，获得人类需要的多种代谢物质，还可获得单倍体、三倍体、多倍体及非整倍体。通过细胞融合可以打破种属间的界限，克服远缘杂交不亲合性，在植物新品种的培育和种性的改良中发挥了巨大作用。组织培养的植物细胞是在细胞水平上分析研究的理想材料，从植物快繁、花药培养发展到细胞器培养、原生质融合以及DNA重组技术等，植物组织培养技术广泛应用于植物科学的各个领域及农业、林业、工业、医药等多种行业，已经成为当代生物科学中最有生命力的一门学科。1 植物组织培养的基本概念、原理和试验步骤1．1概念植物组织培养是在无菌条件下，将离体的植物器官(根尖、茎尖等)、组织(形成层、花药组织等)、细胞(体细胞、生殖细胞等)、胚胎(成熟或未成熟的胚)、原生质体等在人工配制的培养基上培养，给予适宜的培养条件，诱发其产生愈伤组织或潜伏芽或长成完整的植株的技术。1．2原理 植物组织培养的依据是植物细胞的“全能性”及植物的“再生作用”。1902年，德国著名植物学家 G．Haberlandt根据细胞学理论提出了一个观点，“高等植物的器官和组织可以不断分割，直至单个细胞，即植物体细胞，体细胞在适当的条件下具有不断分裂、繁殖并发育成完整植株的潜力”。1943年，美国人White在烟草愈伤组织中偶然发现形成一个芽，证实了G．Haberlandt的论点。 不同植物所需要的生长条件不同，所用的培养基也有所不同。较常用的基础培养基有MT、MS、 SH、N6、White等。在组织培养中，愈伤组织和胚状体能否形成是培育出新植株的关键。通过在基础培养基里添加一定浓度的外源激素，可以诱导出愈伤组织、胚状体、不定芽、根等器官，最终获得再生植株或次生物质。 用于植物组织培养的材料称为外植体，其主要形式有器官、胚胎、单细胞、原生质体等。根据外植体的不同，所需要的培养基种类、培养条件、外源激素的种类及比例等均不同。植物组织培养中，影响培养力的因素是多方面的，诱导愈伤组织成败的关键在于培养条件，植物激素是诱导愈伤组织和绿苗分化的关键因素。最常用的诱导愈伤组织的生长素是IAA、NAA和2，4一D，所需浓度为O．01～10 mg／L。最常用的细胞分裂素是KT和ABA，使用浓度为O．1～10 mg／L。KT的主要作用是促进细胞分裂和愈伤组织分化。ABA对植物体细胞胚的发生与发育具有重要作用。各类植物激素的生理作用虽有相对专一性，但是植物的各种生理效应是不同种类激素之间相互作用的综合表现。1．3试验步骤1．3．1选择和配制培养基 培养基是植物组织培养中的“血液”，血液的成分及其供应状况直接关系到培养物的生长与分化，因此了解培养基的成分、特点及其配制至关重要。1．3．2灭茵灭菌是组织培养中的重要工作之一，通常采用物理的或化学的灭菌方法。培养基用常压或高压蒸煮等湿热灭菌、器械采用灼烧灭菌、玻璃器皿及耐热用具采用干热灭菌、不耐热的物质采用过滤灭菌、植物材料表面用消毒剂灭菌、物体表面用药剂喷雾灭菌、接种室等空间采用紫外线或熏蒸灭菌。1．3．3接种将已消毒好的根、茎、叶等离体器官，经切割或剪裁成小段或小块放入培养基，整个接种过程要在无菌条件下进行。 ．4培养把培养材料放在有一定光照和温度等条件的培养室里，使之生长、分裂和分化，形成愈伤组织或进一步分化成再生植株。1．3．5试管苗驯化移栽 试管苗是在特殊环境条件下生长的幼苗，与自然生长的幼苗有很大差异，只有通过驯化，使之适应自然环境后才能移栽。2 植物组织培养的应用2．1植物快速繁殖和无病毒种苗生产植物快速繁殖技术始于20世纪60年代，法国的Morel用茎尖培养的方法大量繁殖兰花获得成功，从此揭开了植物快速繁殖技术研究和应用的序幕。目前，通过离体培养获得小植株并且具有快速繁殖潜力的植物已有100多科1 000种以上，有的已经发展成为工业化生产的商品。世界上80％～85％的兰花是通过组织培养进行脱毒和快速繁殖的。培养的植物种类也由观赏植物逐渐发展到园艺植物、大田作物、经济植物和药用植物等。在我国，同类的研究始于20世纪70年代。马铃薯无毒种薯和甘蔗种苗已在生产上大面积种植，30余种植物已进行规模化生产或中间试验。利用组织培养进行植物快速繁殖及无病毒种苗生产，不仅能够挽救珍惜濒危物种，而且能够解决植物野生资源缺乏的问题。2．2植物花药培养和单倍体育种 将植物花药培养成单倍体植株，再经过染色体加倍，能很快得到纯合的二倍体，这样将大大缩短育种年限。到目前为止，世界上通过花粉和花药培养已获得了几百种植物的单倍体植株。印度科学家应用这种方法培育的水稻品系，比对照产量提高15％～49％。韩国先后育成了5个优质、抗病、抗倒伏的水稻品种。我国自20世纪70年代开始该领域的研究，已经培育了40余种由花粉或花药发育成的单倍体植株，其中有10余种为我国首创。玉米获得了100多个纯合的自交系；橡胶获得了二倍体和三倍体植株。仅“九五”期间就育成高产、优质、抗逆、抗病的农作物新品种44个，种植面积超过660万 hm2。2．3植物胚胎培养杂交育种中，杂种胚常常败育，因此将早期生长的胚取出，应用组织培养方法，就有可能培育出杂交植物。已经有100篇以上幼胚培养成为植株的报道。国内外科学家应用植物胚胎培养技术获得了多种远缘杂交的重组体、栽培种和杂交品种。2．4植物愈伤组织或细胞悬浮培养利用植物愈伤组织或细胞悬浮培养可以生产用于预防和治疗疾病的植物次生代谢产物。近年来，这一领域的发展极为迅速，已经研究了400多种植物，从培养细胞中分离到600多种次级代谢产物，其中60多种在含量上超过或等于原植物，20种以上干重超过原植物的1 9，6。例如，从薯芋愈伤组织和悬浮细胞生产的diosgenin用于合成甾体药物。最近抗癌药物紫杉醇一红豆杉细胞培养物，可用75t发酵罐培养，已达到商业化生产水平。另外，达到商品化水平的还有紫草、人参、黄连、老鹳草等；长春花、毛地黄、烟草等已实现工业化生产；牙签草、红花等20多种植物正在向商品化过渡。2．5细胞融合与原生质体培养自1960年英国学者Cocking首次利用纤维素酶从番茄幼苗的根分离原生质体获得成功以来，到1990年已有100种以上植物的原生质体能再生植株。我国获得了30余个品种的原生质体再生植株，其中包括难度较大的重要粮食作物和经济作物，如大豆、水稻、玉米、小麦、谷子、高梁、棉花等。在木本植物、药用植物、蔬菜和真菌原生质体培养方面的进展也十分迅速。国外已先后获得了种内及种间的体细胞杂种植株。植物原生质体培养还可应用于外源基因转移、无性系变异及突变体筛选等研究，因而越来越受到人们的重视。2．6植物细胞突变体筛选植物细胞突变体的筛选最早始于1959年，G． Melchers在金鱼草悬浮细胞培养中获得了温度突变体。1970年，P．S．Carlson，H．Binding和Y．M． Heimer等分别分离出烟草营养缺陷型细胞、矮牵牛抗链霉素细胞系及烟草抗苏氨酸细胞系。迄今为止，已经在不少于15个科45个种的植物细胞培养中筛选出100个以上的植物细胞突变体或变异体。其中包括抗病细胞突变体，如玉米抗小斑病突变体和小麦抗赤霉病、根腐病突变体；抗氨基酸及其类似物细胞突变体，如甘蓝型油菜抗HYP突变体[263；抗逆境胁迫细胞突变体，如水稻耐盐突变体和小麦抗盐突变体；抗除草剂细胞突变体及营养缺陷型细胞突变体，如玉米抗除草剂变异体；株高突变体的筛选，如水稻矮秆变异体。2．7植物体细胞胚胎和人工种子1958年，Reinert在胡萝卜的组织培养中最先发现了体细胞胚胎(胚状体)。据不完全统计，能大量产生胚状体的植物有43科92属100多种。一些重要作物如水稻、小麦、玉米、珍珠谷等，也能通过离体培养产生胚状体。这些胚状体用褐藻酸钠等包埋，再加上人工种皮，就形成了人工种子。人工种子的优点是：繁殖快速，成苗率极高；不受气候影响，四季皆可工厂化生产。上世纪80年代初，美、日、法等国家相继开展了人工种子的研究，我国也于“七五”期间开展了此项研究，并于1987年列入了国家“863”高技术研究发展计划。2．8 植物组织细胞培养物的超低温保存与种质库建立植物细胞全能性的发现和证实，为植物种质资源的长期保存开辟了一条新途径。采用液氮超低温保存技术，能保持很高的存活率，并且能再生出新植株和保持原来的遗传特性。如建立茎尖分生组织培养物的超低温保存种质库，不仅可以防止种质的遗传变异和退化，而且可以长期保存无病毒的原种。2．9 植物组织培养与转基因技术的应用 我国第一个T—DNA插入突变体库的构建和研究为我国水稻功能基因组学研究奠定了良好的技术和材料基础，为确保我国拥有一批有自主知识产权的基因资源做出了积极贡献。由中国水稻研究所农业部水稻生物学重点开放实验室和中科院上海植物生理研究所合作，通过建立大规模、高效的农杆菌介导的转基因技术体系，将玉米转座子Ac—Ds等外源基因导入水稻未成熟胚和种子诱导的愈伤组织，获得了1．2万个独立的T—DNA插入株系，并构建了水稻突变体的数据库。 3 展望植物组织培养研究与应用是20世纪科技进步的重大成果之一，为研究植物生长发育、抗性生理、激素及器官发生与胚胎发生等提供了许多良好的实验材料和有效途径。植物组织培养方法不断提高的同时，也相应拓宽了其应用范围。由于组织培养在人工控制的条件下进行，容易掌握花芽分化和开花成因；通过胚胎培养，能够得到杂种或自交种；通过分离单倍体细胞，能培育纯合的二倍体优良品系；提高育种多样性的同时缩短了育种时间；通过突变体筛选，提高植物的品质，增强抗逆境胁迫能力，扩大植物的生长范围；将体细胞冷藏在低温下，建立基因库，达到保存物种的目的；获得药用价值高和工业生产所需要的次生产物，加快药物生产的时间并且减少了单纯依靠天然植物的被动性。植物组织培养技术已经渗透到科研、生产和生活各个领域，必将日臻完善。黑龙江农业科学2006，(3)

一、 毕业论文（设计）材料的排列顺序（一） 封面：包括论文（设计）题目、指导教师（包括职称）、学生姓名、学号、二级学院名称、专业、年级、论文总成绩、时间等。论文封面由学校统一印制。（二） 封二：指导教师评阅表。（三） 论文。（四） 封三:交叉评阅表。（五） 封四:答辩记录表。二、 毕业论文的打印和装订毕业论文（设计）一般用计算机打印，采用A4纸型，双面打印。（一） 页面设置毕业论文（设计）纵向打印，页边距要求：上（T）：。下（B）： cm。左（L）：。右（R）：。装订线（T）：。装订线位置(T)：左。其余采用系统默认设置。（二） 版式与用字文字图形一律从左至右横写横排。文字一律通栏编辑。论文采用宋体字，除特殊原因，一般不使用繁体字。外文一般用Times New Roman字体。（三） 段落设置行距设置值为倍行距。其余采用系统默认设置。（四） 页眉、页脚设置不设置页眉。页脚设置页码，页码采用小5号黑体字，加粗，居中放置：格式如：1，2，3，……页。三、 毕业论文（设计）撰写的内容、结构与要求论文由前置部分和正文组成。（一）前置部分：题名、作者、摘要、关键词1、题名，即论文标题。不超过20个汉字，外文不超过10个实词。居中，黑体三号字。2、作者姓名与单位。作者姓名与题目间隔一行，居中，宋体小四号字。单位另起一行，居中，宋体五号字。单位表述：(湛江师范学院××学院 湛江 524048)。3、中文摘要。中文摘要是论文内容不加注释和评论的简短陈述，具有独立性和指令性，即不用阅读论文（设计）全文，就能获得必要的信息，主要是描述论文（设计）的观点或结论。不能有主观的评论，不能含有“笔者”、“我”等字句，300字以内。摘要与单位名称之间间隔一行，起行空两格，转行顶格，仿宋五号字，“摘要”两字后用冒号起领，加粗。4、关键词。关键词是为了文献标引工作从论文中选取出来，用以表达全文主题内容信息、款目的单词或术语。每篇论文一般选取3-5个词作为关键词。关键词另起一行排摘要之后，仿宋五号字，起行空两格，“关键词”后用冒号与关键词隔开，加粗。各关键词之间用分号隔开。 5、英文题目、作者姓名、单位、摘要、关键词，与中文部分对应。英文用Times New Roman字体。（二）主体部分：正文、注释、参考文献、附录1、正文正文一般使用小四号宋体字，重点文句可加粗。英文、阿拉伯数字用Times New Roman字体。（1）标题层次理工科：各级标题用阿拉伯数字连续写；不同标题层次间用“”隔开（圆点放在数字的右下角），末位数字后不加圆点；如“1”、“”、“”等，编号要在左起顶格写。编号后若有标题，先写编号，再写标题，两者之间空一格；然后另起一行自左至右缩进两格写具体内容；编号后若没有标题，则在编号后空一格接写具体内容。文科：各级标题空两格左起。一级标题为“一、二、三……”，二级标题为“（一）（二）（三）……”，三级标题为“1、2、3、……”，四级标题为“（1）（2）（3）……”，五级标题为“①②③……”。若以一级标题作小标题，可以将一级标题居中，加粗，与前后段落间隔一行。（2）计量单位各种计量单位均采用国家标准GB3100-GB3102-93。非物理量的单位可用汉字与符号构成组合形式的单位。（3）标点符号标点符号应按照国家新闻出版署公布的“标点符号使用方法”的统一规定正确使用。中文用全角标点符号；英文用半角标点。（4）名词、名称科学技术名词术语采用全国自然科学技术名词审定委员会公布的规范词或国家标准、部标准中规定的名词，尚未统一规定或叫法有争议的名词术语，可采用惯用名称。名词术语的简称必须是规范化的简称，论文中第一次出现应用全称。（5）数字文中的数字，除部分结构层次序数和词、词组、惯用语、缩略语、具有修辞色彩语句种作为词素的数字必须使用汉字外，应当使用阿拉伯数字，同一文中数字表示方法应前后一致。数字不能分开转行。（6）公式公式一般居中放置。有编号的公式顶格放置，编号需加圆括号标在右边，公式与编号之间不加虚线。公式有说明时，应在顶格处标明“注”。公式转行应在加、减、乘、除等符号处。（7）外文字母外文字母采用我国规定和国际通用的有关标准写法。要分清正斜体、大小写和上下脚码。（8）表格和插图每个表格应有表序和表名。表内内容应对齐，表内数字、文字连续重复时不可使用“同上”等字样或符号代替。表内有文字时，起行处空一格，回行顶格，文末不用标点符号。一般采用三线表。每幅图应有图序和图名。一般要求用计算机制图。文中图表须在表的上方、图的下方排印表序、表名、表注或图序、图名、图注。有国家标准的按照国家标准执行。2、注释注释置于正文的末尾；注释序号用①、②……表示。“注释”单独一行，空两格，加冒号，用五号宋体字，加粗。每条注释单独起行，空两格，用五号宋体字，转行顶格。注释及参考文献书写格式应按国家规定，以字母方式标识：专著M，论文集C，报纸文章N，期刊文章J，学位论文D，标准S，专利P，研究报告R，专著、论文集中析出文献A，联机网上数据库DB/OL，磁带数据库DB/MT，光盘数据库DB/CD，光盘图书M/CD，光盘软件CP/CD，磁盘软件CP/DK，网上期刊J/OL，网上电子公告EB/OL。具体格式见如下示例：☆专著：序号 主要作者.书名[M].出版地：出版社，出版年.起止页码.例如：① [美].亨特著,安荻译.文化战争[M].北京：中国社会科学出版社,.☆期刊文章：序号 主要作者.题目[J].刊名，年，卷（期）：起止页码.出版年.例如：① 田长霖.21世纪高等教育的趋势与展望[J].高教研究与探索,2000,(3):6-7.☆论文集中的文章：序号 文章的主要作者.文章题目[A].论文集主要作者. 论文集名称[C].出版地：出版社，出版年.文章起止页码.例如：① 季平.1999年中国高等教育发展分析[A].袁振国.中国教育政策评论集[C].北京:教育科学出版社,.☆报纸文章：序号 主要作者.文章题目[N].报纸名，出版日期（版次）.例如：① 刘微.流动人口子女到哪儿去读书?[N].中国教育报,1998-5-24.☆国际、国家标准：序号 标准编号，标准名称 [S]例如：①.GB/T 16159-1996, 汉语拼音正词法基本规则[S]☆专利：序号 专利所有者.专利题名[P].专利国别：专利号,出版日期例如：①姜锡洲.一种温热外敷药制备方案[P].中国专利: 881056073,1989-07-26.☆电子文献：序号 主要责任者. 电子文献题名[电子文献及载体类型标识].电子文献的出处或可获得地址,发表或更新日期/引用日期例如：① 王明亮.关于中国学术期刊标准化数据库系统工程的进展[EB/OL]. . ① 万锦.中国大学学报论文文摘（1983-1993）.英文版 [DB/CD].北京:中国大百科全书出版社,1996.☆各种未定义类型的文献：序号 主要责任者.文献题名[Z].出版地:出版者,出版年3、参考文献参考文献置于正文的末尾；参考文献序号用[1]、[2] ……表示,参考文献著录格式与注释格式基本相同，只是序号标法用中括号。当既有注释,又有参考文献时,注释在前,参考文献在后。具体示例：☆专著：序号 主要作者.书名[M].出版地：出版社，出版年.起止页码。例如：[1] 许国梁.中学物理教学法[M].北京：高等教育出版社,—20.☆期刊文章：序号 主要作者.题目[J].刊名，年，卷（期）：起止页码.出版年.例如: [1] 顾海兵.高等教育仍是集权式管理[J].改革内参,1998,(19):24-26.☆论文集中的文章：序号 文章的主要作者.文章题目[A].论文集主要作者. 论文集名称[C].出版地：出版社，出版年.文章起止页码.例如: [1] 季平.1999年中国高等教育发展分析[A].袁振国.中国教育政策评论集[C].北京:教育科学出版社,.。☆ 报纸文章：序号 主要作者.文章题目[N].报纸名，出版日期（版次）.例如: [1] 刘微.流动人口子女到哪儿去读书?[N].中国教育报,、附录附录不与参考文献连接，另占一页。“附录”置顶，空两格，加冒号，三号黑体字。另起一行空两格，用小四号字体标注附录序号和题名，编排样式与正文相同

毕业论文格式1、论文题目：要求准确、简练、醒目、新颖。2、目录：目录是论文中主要段落的简表。（短篇论文不必列目录）3、提要：是文章主要内容的摘录，要求短、精、完整。字数少可几十字，多不超过三百字为宜。4、关键词或主题词：关键词是从论文的题名、提要和正文中选取出来的，是对表述论文的中心内容有实质意义的词汇。关键词是用作机系统标引论文内容特征的词语，便于信息系统汇集，以供读者检索。每篇论文一般选取3-8个词汇作为关键词，另起一行，排在“提要”的左下方。主题词是经过规范化的词，在确定主题词时，要对论文进行主题，依照标引和组配规则转换成主题词表中的规范词语。5、论文正文：（1）引言：引言又称前言、序言和导言，用在论文的开头。引言一般要概括地写出作者意图，说明选题的目的和意义, 并指出论文写作的范围。引言要短小精悍、紧扣主题。〈2）论文正文：正文是论文的主体，正文应包括论点、论据、论证过程和结论。主体部分包括以下内容：a.提出-论点；b.分析问题-论据和论证；c.解决问题-论证与步骤；d.结论。6、一篇论文的参考文献是将论文在和写作中可参考或引证的主要文献资料，列于论文的末尾。参考文献应另起一页，标注方式按《GB7714-87文后参考文献著录规则》进行。中文：标题--作者--出版物信息（版地、版者、版期）：作者--标题--出版物信息所列参考文献的要求是：（1）所列参考文献应是正式出版物，以便读者考证。（2）所列举的参考文献要标明序号、著作或文章的标题、作者、出版物信息。